基于痰瘀生風(fēng)理論探討動(dòng)脈粥樣硬化與線粒體自噬的相關(guān)性*

肖福龍，宮麗鴻，趙 帥

（1．遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，遼寧 沈陽 110032；2．遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽 110847）

動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是冠心病、腦卒中等血管疾病的主要致病因素，在此基礎(chǔ)上形成的血栓是人類死亡的主要原因，其患病率在我國逐年升高。關(guān)于AS的發(fā)病機(jī)制尚未研究清楚。近年來研究表明細(xì)胞線粒體自噬可抑制AS斑塊形成，穩(wěn)定斑塊。其可通過緩解血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、抑制巨噬細(xì)胞凋亡和核苷酸寡聚化結(jié)構(gòu)域（NOD）樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3（NLRP3）炎癥小體活化等發(fā)揮重要作用。線粒體自噬是一種選擇性清除多余或受損線粒體的自噬過程，在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)線粒體數(shù)量和維持線粒體正常功能等方面發(fā)揮重要作用。線粒體自噬的作用與中醫(yī)搜風(fēng)祛痰的治法相符。筆者認(rèn)為若脾失健運(yùn)，產(chǎn)生痰濁沉積于脈道，瘀血阻滯，痰瘀互結(jié)，日久成風(fēng)，最終導(dǎo)致AS。線粒體自噬參與的抗AS進(jìn)程可能與中醫(yī)的痰瘀生風(fēng)理論密切相關(guān)。本文將著眼于從痰瘀生風(fēng)探討線粒體自噬在AS中的作用，以助開拓中西醫(yī)結(jié)合防治AS的新思路。

1 痰瘀生風(fēng)理論與AS

AS是主要危害人類健康的常見病之一。中醫(yī)有關(guān)AS論述首見于《金匱要略》，主流學(xué)者認(rèn)為AS病因病機(jī)多為“陽微陰弦”“脾腎不足”等，治法上以溫陽散寒、補(bǔ)益脾腎為主，但療效欠佳[1]。因此，進(jìn)一步研究探討AS的病因病機(jī)及療效具有重要意義?，F(xiàn)代人運(yùn)動(dòng)量減少，飲食多膏粱厚味致使脾虛生痰。百病皆由痰作祟，痰濁內(nèi)生，阻塞血脈，停滯為瘀。痰瘀蘊(yùn)結(jié)不解而生內(nèi)癰毒熱，熱極生內(nèi)風(fēng)，風(fēng)性善行而數(shù)變，可挾痰入絡(luò)。痰風(fēng)內(nèi)動(dòng)，筋脈失養(yǎng)，攣急剛勁，痹阻心脈?！端貑枴り庩枒?yīng)象大論篇》云：“風(fēng)勝則動(dòng)?！盵2]即風(fēng)邪太過，則會(huì)發(fā)生痙攣動(dòng)搖。運(yùn)用取類比象法，類似于AS不穩(wěn)定斑塊的多樣臨床表現(xiàn)。故AS具有本虛標(biāo)實(shí)特點(diǎn)，“虛”為發(fā)病基礎(chǔ)，“痰瘀”為致病條件，形成“風(fēng)”似AS斑塊的“不穩(wěn)定性”?？梢?，AS的病因病機(jī)不局限于陽虛寒凝、脾腎不足，還應(yīng)包括痰瘀生風(fēng)[3]?！端貑枴り庩枒?yīng)象大論篇》論述：“血實(shí)宜決之，氣虛宜掣引之。”[4]故治療AS時(shí)應(yīng)使用祛風(fēng)藥物，予以搜風(fēng)祛痰，祛瘀通絡(luò)治法，自擬搜風(fēng)祛痰中藥復(fù)方。方中全蝎、蜈蚣息風(fēng)止痙，攻毒散結(jié)，通絡(luò)止痛；地龍清熱息風(fēng)，通絡(luò)，利尿，共為君藥。陳皮、半夏、白術(shù)合用，既能燥濕健脾，又能化痰散結(jié)，為臣藥。水蛭具有破血逐瘀而不傷新血特點(diǎn)，為佐藥。AS的痰瘀生風(fēng)理論豐富了中醫(yī)理論基礎(chǔ)。臨床研究表明搜風(fēng)祛痰中藥復(fù)方能顯著降低急性冠脈綜合征（ACS）患者的雌激素受體基因的甲基化率，并能升高基質(zhì)金屬蛋白酶-9基因的甲基化率，提示搜風(fēng)祛痰中藥復(fù)方可用于治療ACS患者[5]。實(shí)驗(yàn)研究[6-13]表明搜風(fēng)祛痰中藥復(fù)方可下調(diào)巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞及ApoE基因敲除小鼠不穩(wěn)定斑塊中B細(xì)胞淋巴瘤/白血病2關(guān)聯(lián)X（Bax）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）蛋白表達(dá)，上調(diào)B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）蛋白表達(dá)，抑制細(xì)胞凋亡；升高自噬體數(shù)量，上調(diào)自噬效應(yīng)蛋白1（Beclin1）、微管相關(guān)蛋白1輕鏈3（LC3）蛋白表達(dá)，下調(diào)哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）蛋白表達(dá)，增強(qiáng)細(xì)胞自噬；減少誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）、內(nèi)皮素-1（ET-1）、氧化低密度脂蛋白的內(nèi)皮受體（LOX-1）mRNA表達(dá)，抑制血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）導(dǎo)致的人臍靜脈血管內(nèi)皮損傷，改善血管內(nèi)皮功能；還可抑制ApoE基因敲除小鼠NLRP3炎癥小體活化，穩(wěn)定AS斑塊，抑制AS進(jìn)展。

2 痰瘀生風(fēng)理論與線粒體自噬的關(guān)系

在活性氧（ROS）的作用下，線粒體自噬以細(xì)胞內(nèi)線粒體功能障礙和去極化損傷為特征，進(jìn)一步被特異性包裹于自噬小體中，與溶酶體融合降解，從而維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)[14-16]。線粒體自噬在AS的治療中起著重要作用，線粒體自噬可通過清除受損的線粒體、促進(jìn)線粒體更新及限制ROS大量堆積而發(fā)揮抗AS作用。線粒體功能障礙，其產(chǎn)生的有害物質(zhì)屬于中醫(yī)“痰瘀生風(fēng)”理論范疇，而負(fù)責(zé)清除損傷線粒體及受損的細(xì)胞器的線粒體自噬類似中醫(yī)方面搜風(fēng)祛痰治法[17]。嗜食肥甘厚味等導(dǎo)致脾失健運(yùn)，水濕津液停滯則生痰濁。氣血運(yùn)行不暢，瘀血內(nèi)生，進(jìn)而生內(nèi)癰毒熱，日久生風(fēng)。風(fēng)性善行數(shù)變，風(fēng)性主動(dòng)，風(fēng)為百病之長，與心腦血管疾病之間的關(guān)系最為密切，是心腦血管疾病發(fā)病的重要因素，與線粒體自噬過程不謀而合[18-20]。這種內(nèi)生的風(fēng)痰之邪可通過線粒體自噬方式及時(shí)清除，維持細(xì)胞內(nèi)的穩(wěn)態(tài)，使陰陽處于一個(gè)平衡狀態(tài)中[21]。

3 線粒體自噬與AS的關(guān)系

線粒體自噬參與到包括心血管疾病的許多疾病的發(fā)病機(jī)制當(dāng)中[22-23]。多種因素?fù)p害線粒體，ROS含量大幅升高，進(jìn)一步加重線粒體結(jié)構(gòu)紊亂和功能障礙，引起氧化應(yīng)激損傷，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞功能發(fā)生障礙。研究[24-25]表明，在人和小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化模型中p62與LC3-Ⅱ水平降低，與穩(wěn)定斑塊相比，不穩(wěn)定斑塊中p62與LC3-Ⅱ的表達(dá)顯著降低。在以血管平滑肌細(xì)胞為研究對(duì)象的動(dòng)脈粥樣硬化模型中線粒體自噬水平降低，對(duì)功能障礙的線粒體清除減少，造成細(xì)胞供能減少，細(xì)胞凋亡增加，提示可以通過抑制PTEN-PINK1/Parkin介導(dǎo)的線粒體自噬促進(jìn)細(xì)胞凋亡[25-26]。研究發(fā)現(xiàn)通過抑制NIX介導(dǎo)的線粒體自噬加速巨噬細(xì)胞的凋亡，會(huì)增強(qiáng)巨噬細(xì)胞線粒體自噬[25]；真核起始因子2α通過抑制Parkin誘導(dǎo)的線粒體自噬途徑加重了高脂血癥引起的AS炎癥[25，27]；在主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞中，ox-LDL可以導(dǎo)致核受體NR4A1過表達(dá)，引起Parkin介導(dǎo)的線粒體自噬過度激活，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞因線粒體數(shù)量過度減少、細(xì)胞能量供給不足而凋亡，從而加重AS[28]。MA S等[29]在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)褪黑素誘導(dǎo)Sirt3/FOXO3/parkin介導(dǎo)的線粒體自噬，減緩線粒體ROS的產(chǎn)生，從而減少巨噬細(xì)胞NLRP3炎性小體的激活去抑制動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展。HE L等[26]實(shí)驗(yàn)表明AMPK增強(qiáng)APJ內(nèi)源性配體誘導(dǎo)的PINK1/Parkin途徑的線粒體自噬，導(dǎo)致人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞增殖及ApoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化病變。還有研究[30]發(fā)現(xiàn)，由NIX介導(dǎo)的線粒體自噬可抑制ox-LDL誘導(dǎo)的AS巨噬細(xì)胞焦亡。綜上，在AS的發(fā)病進(jìn)程中，線粒體自噬居于重要地位，可通過調(diào)節(jié)線粒體自噬來延緩及逆轉(zhuǎn)AS的發(fā)病進(jìn)展。

4 中醫(yī)藥對(duì)線粒體自噬的干預(yù)與AS的防治

中醫(yī)學(xué)具有整體觀念、辨證論治的特點(diǎn)，近年來中醫(yī)學(xué)在AS防治方面的研究越來越受到關(guān)注。根據(jù)AS病理生理與中醫(yī)病因病機(jī)相結(jié)合，學(xué)者認(rèn)為AS的治療主要采用活血法、補(bǔ)氣活血法、益氣養(yǎng)陰法、祛痰化瘀法、清熱解毒法、解毒活血法、搜風(fēng)通絡(luò)法等。關(guān)于線粒體自噬的調(diào)控機(jī)制是錯(cuò)綜復(fù)雜的，現(xiàn)明確的信號(hào)調(diào)控通路主要包含Pink1/Parkin、AMPK介導(dǎo)自噬、FUNDC1介導(dǎo)自噬等[30]，中醫(yī)藥可通過調(diào)控上述通路干預(yù)AS過程?；鲮钐捣絒31]主要由黨參、黃芪、絞股藍(lán)、丹參、茯苓、半夏、石菖蒲等組成，具有補(bǔ)氣健脾、化痰祛瘀功效。陳絲等[32]研究發(fā)現(xiàn)此方治療AS家兔可下調(diào)血清TC、TG、LDL-C含量，上調(diào)HDL-C含量，下調(diào)肝組織中線粒體自噬相關(guān)蛋白LC3、FUNDC1表達(dá)水平，上調(diào)P62表達(dá)水平。結(jié)果提示化瘀祛痰方可調(diào)控線粒體自噬相關(guān)蛋白，減輕AS家兔肝組織脂質(zhì)沉積，延緩動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展。王梓良[33]研究發(fā)現(xiàn)芹黃素可通過抑制TGF-β/SMAD信號(hào)通路，有效抑制心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧導(dǎo)致的心肌細(xì)胞凋亡，緩解心肌細(xì)胞的損傷，并可通過抑制miR-103水平上調(diào)，提升Parkin表達(dá)來誘導(dǎo)線粒體自噬，降低細(xì)胞凋亡，降低小鼠心肌梗死面積。黃芪甲苷Ⅳ可降低ApoE基因敲除小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞中的自噬水平，并抑制DUSP5的表達(dá)，減輕心肌細(xì)胞損傷[34]。紅景天注射液可通過調(diào)節(jié)AKT/Beclin-1介導(dǎo)的線粒體自噬，激活A(yù)KT和ERK/mTOR通路，有效減少心肌梗死動(dòng)物模型中心肌梗死面積[35]。楊紅星[36]亦發(fā)現(xiàn)通心絡(luò)可改善心肌缺血再灌注損傷，其機(jī)制可能與調(diào)控Pink1/Parkin通路介導(dǎo)的線粒體自噬密切相關(guān)。

5 結(jié) 語

線粒體自噬可清掃體內(nèi)廢物，保持體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。這與中醫(yī)搜風(fēng)祛痰的治法相符。嗜食肥甘厚味等影響脾胃運(yùn)化，脾失健運(yùn)，水濕津液停滯則會(huì)聚生痰濁，進(jìn)一步引發(fā)氣血運(yùn)行不暢，瘀血內(nèi)生，阻滯心脈，痰瘀蘊(yùn)結(jié)生內(nèi)癰毒熱，日久生風(fēng)。從痰瘀生風(fēng)理論論治可祛除體內(nèi)的風(fēng)痰之邪，減慢AS發(fā)展過程，其機(jī)制也許與線粒體自噬有關(guān)系。脾失健運(yùn)，線粒體自噬乏力，炎癥反應(yīng)增加，細(xì)胞凋亡，從而影響血管內(nèi)皮的功能，導(dǎo)致AS相關(guān)疾病的出現(xiàn)。中醫(yī)藥對(duì)AS相關(guān)細(xì)胞的線粒體自噬有較好的調(diào)控作用，但基于痰瘀生風(fēng)理論的搜風(fēng)祛痰法在AS中的作用與其調(diào)控相關(guān)細(xì)胞的線粒體自噬是否有關(guān)，還未得到證實(shí)。深入探究線粒體自噬的有關(guān)機(jī)制，有望在今后研究中揭示基于痰瘀生風(fēng)論治AS相關(guān)疾病的本象。