黔藿1號(hào)適宜采收期研究

雷 榮,邱 煉,劉紅昌,3*,王紫賢,陳文夫,游 雪,趙 剛,汪永平

（1.畢節(jié)市中藥材技術(shù)服務(wù)站，貴州 畢節(jié) 551799；2.貴州大學(xué) 農(nóng)學(xué)院，貴州 貴陽 550025；3.貴州省藥用植物繁育與種植重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴州 貴陽 550025；4.貴州貴基生物醫(yī)藥有限公司，貴州 從江 557400）

箭葉淫羊藿Epimediumsagittatum（Sieb.et Zucc.）Maxim.為小檗科（Berberidaceae）淫羊藿屬EpimediumL.植物［1］，是淫羊藿藥材的基原植物之一，以干燥葉入藥，性溫，味辛、甘，歸肝、腎經(jīng)，具有補(bǔ)腎陽，強(qiáng)筋骨，祛風(fēng)濕的功效，常用于治療腎陽虛衰，陽痿遺精，筋骨痿軟，風(fēng)濕痹痛，麻木拘攣等病癥［2］，生長于100～760 m 的疏林或竹林下、灌叢中或水溝邊［3］，是淫羊藿屬分布較廣的種，在我國安徽、江西、湖南、浙江、福建、湖北、廣東、貴州、廣西、陜西、四川、河南和重慶均有分布［4］。目前，箭葉淫羊藿藥材野生資源遭到掠奪式采挖，野生資源瀕臨枯竭［5］，致使藥農(nóng)開始使用淫羊藿有性繁殖苗或無性繁殖苗進(jìn)行林下種植［6］、仿野生栽培［7］和人工栽培［8］。人工栽培的淫羊藿藥材由于產(chǎn)地［9-11］、栽培方式［12］和采收期［13-14］不統(tǒng)一，導(dǎo)致其藥材質(zhì)量參差不齊；其栽培密度［15］、施肥量［16］、遮陰度［17］和采收期等不同，也會(huì)造成其產(chǎn)量和質(zhì)量有差異。目前，鮮見關(guān)于淫羊藿同一品種不同種苗移栽后，不同采收時(shí)間的藥材產(chǎn)量和質(zhì)量變化報(bào)道。為此，對(duì)箭葉淫羊藿優(yōu)良品種黔藿1號(hào)不同種苗（分株苗、根莖苗、實(shí)生苗）移栽，比較不同采收時(shí)間的藥材產(chǎn)量及質(zhì)量變化，旨在為生產(chǎn)中確定其適宜采收期提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地位于貴州省從江縣往洞鎮(zhèn)高傳村，為連續(xù)多年種植水稻的水稻田，屬亞熱帶季風(fēng)性氣候，平均海拔670 m，年均溫15.5 ℃，年均降雨量1 230 mm 左右，年日照時(shí)數(shù)1 080～1 249 h，無霜期280 d以上，土壤為沙壤土。

1.2 試驗(yàn)材料

材料為貴州貴基生物醫(yī)藥有限公司自選箭葉淫羊藿優(yōu)良品種黔藿1號(hào)，藥材基源經(jīng)貴州大學(xué)植物鑒定中心鑒定為小檗科（Berberidaceae）淫羊藿屬（Epimedium）植物箭葉淫羊藿（Epimediumsagittatum）。

儀器：高效液相色譜儀（Agilent 1260 infinity）、紫外可見分光光度計(jì)（T6 新世紀(jì)）、數(shù)顯恒溫水浴鍋（HH-6）、箱式電阻爐（SX-5-12 型）、電子天平（AR224CN）、超聲波清洗機(jī)（SB-5200DT）等。

試劑：淫羊藿苷對(duì)照品（批號(hào)：110737-201516，質(zhì)量分?jǐn)?shù)94.2%，購自中國食品藥品檢定研究院）；色譜級(jí)甲醇、乙腈（質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99.9%）；AR級(jí)甲醇、AR級(jí)乙醇等。

1.3 試驗(yàn)方法

于2019 年12 月分別采用無損傷、無病蟲害且規(guī)格一致的實(shí)生苗、根莖苗和分株苗進(jìn)行起廂栽培，廂寬1.5 m，廂距40 cm，廂高20 cm，種植株行距20 cm×30 cm。自2020年4 月初開始對(duì)移栽后長勢(shì)大體一致的實(shí)生苗、根莖苗和分株苗進(jìn)行定株掛牌，每次采樣以15株為1個(gè)重復(fù)，重復(fù)3次。每隔15 d取樣1 次，共采樣16 次。采收后于105 ℃下殺青15 min，55 ℃烘干至恒重，粉碎，過三號(hào)篩，置于干燥器中保存，備用。參照2020版《中國藥典》一部和四部測(cè)定鮮重、干重、水分、總灰分、浸出物、總黃酮和總黃酮醇苷等指標(biāo)［18］。利用不同種苗移栽后干重產(chǎn)量與總黃酮醇苷含量計(jì)算總黃酮醇苷產(chǎn)量進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，即總黃酮醇苷產(chǎn)量=干重產(chǎn)量×總黃酮醇苷含量。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用 Microsoft Excel 2010 和DPS 9.01進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同種苗不同采收時(shí)間的藥材產(chǎn)量

2.1.1 分株苗不同采收時(shí)間的鮮重、干重及折干率 隨著植株生長發(fā)育時(shí)間的延長，移栽后藥材的鮮重和干重呈M 形變化，在8 月8日和10 月23 日有2 個(gè)明顯的高峰期。4—6月，分株苗植株正處于萌芽展葉期，其鮮重和干重均較低，隨著生育期后移，鮮重和干重均逐漸上升，8 月8 日前后到達(dá)第1 個(gè)高峰期，而后有所下降，其原因與此階段雨水偏少和天氣干旱有關(guān)，從而導(dǎo)致土壤墑情較差，10月23日前后達(dá)到第2 個(gè)高峰期，鮮重、干重產(chǎn)量分別為48.19 kg/667m2、21.84 kg/667m2，比8 月8 日分別上升15.54%、26.17%（圖1）。折干率隨著生育時(shí)間的延長，總體呈逐漸升高的趨勢(shì)，在10 月23 日達(dá)到最大值（45%）（圖1）。

圖1 黔藿1號(hào)分株苗不同采收時(shí)間的鮮重、干重和折干率變化

2.1.2 根莖苗不同采收時(shí)間的鮮重、干重及折干率 4—6 月，根莖苗植株正處于萌芽展葉期，其鮮重和干重產(chǎn)量均較低，基本呈直線增長。7—11 月呈現(xiàn)波動(dòng)上升趨勢(shì)，8 月8 日有明顯的下降趨勢(shì)，這可能與此階段的降雨少有關(guān)，10 月23 日后藥材的鮮重和干重均達(dá)最大值，其產(chǎn)量分別為38.20 kg/667m2、17.36 kg/667m2（圖2）。折干率隨著生育期的后移，呈現(xiàn)先升后降的趨勢(shì)，4 月初葉片折干率最低，為0.23%；11 月上旬折干率最高，為0.51%。

圖2 黔藿1號(hào)根莖苗不同采收時(shí)間的鮮重、干重和折干率

2.1.3 實(shí)生苗不同采收時(shí)間的鮮重、干重及折干率 隨著生育時(shí)間的延長，實(shí)生苗植株的鮮重和干重呈上升趨勢(shì)，4—5月鮮重和干重增幅較大，6—10月趨于平緩，11月8日鮮重和干重增加且出現(xiàn)峰值，11月下旬開始下降。移栽后在4 月6 日采收的藥材鮮重和干重最低，為5.12 kg/667m2和1.46 kg/667m2；6—10月的鮮重和干重為16.57～24.32 kg/667m2和7.59～10.41 kg/667m2；11月8日鮮重和干重分別為33.10 kg/667m2、12.28 kg/667m2，分別是4月6日的6.5倍和8.4倍（圖3）；藥材的折干率在4—5 月較低，為0.27%～0.36%；6—11月折干率較高，為0.41%～0.47%，其中10月23日最高，是4月6日的1.47倍（圖3）。

圖3 黔藿1號(hào)實(shí)生苗不同采收時(shí)間的鮮重、干重和折干率

2.2 不同種苗不同采收時(shí)間的藥材質(zhì)量

2.2.1 分株苗不同采收時(shí)間的藥材質(zhì)量

2020 版《中國藥典》一部規(guī)定，淫羊藿藥材水分不得超過12.0%，總灰分不超過8.0%，浸出物不少于15.0%，總黃酮大于5.0%，總黃酮醇苷大于1.5%。從表1 可知，分株苗不同采收時(shí)間黔藿1 號(hào)的水分含量為2.46%～5.31%，4 月6 日采收的水分含量最低，10 月23日采收的水分含量最高，各采收時(shí)間黔藿1號(hào)的水分含量均合格；總灰分含量為4.59%～7.93%，4 月6 日采收的總灰分含量最低，11 月23 日采收的總灰分含量最高，各采收時(shí)間黔藿1號(hào)的總灰分含量均合格；浸出物含量為25.56%～39.50%，8 月23 日采收的浸出物含量最高，是2020 版《中國藥典》一部規(guī)定的2.6倍，其余各采收時(shí)間浸出物含量也高于2020 版《中國藥典》一部的規(guī)定值，各采收時(shí)間黔藿1號(hào)的浸出物含量均合格；總黃酮含量為8.73%～16.87%，5 月23 日采收的總黃酮含量最高，是2020 版《中國藥典》一部規(guī)定的3.37倍，5月23日和6月8日采收的總黃酮含量顯著高于其余采收時(shí)間的總黃酮含量，其余各采收時(shí)間的總黃酮含量也高于2020 版《中國藥典》一部的規(guī)定值，各采收時(shí)間黔藿1號(hào)的總黃酮含量均合格；總黃酮醇苷含量為6.99%～13.30%，各采收時(shí)間黔藿1號(hào)的總黃酮醇苷含量均合格。4—6 月黔藿1號(hào)的總黃酮醇苷含量逐漸升高，在6 月8 日達(dá)到最高，與其余采收時(shí)間存在顯著差異，之后總黃酮醇苷含量開始降低。綜上所述，分株苗移栽后各采收時(shí)間黔藿1 號(hào)的水分、總灰分、浸出物、總黃酮及總黃酮醇苷含量均合格，符合2020版《中國藥典》一部規(guī)定。

表1 分株苗不同采收時(shí)間黔藿1號(hào)的質(zhì)量成分含量%

2.2.2 根莖苗不同采收時(shí)間的藥材質(zhì)量

根莖苗不同采收時(shí)間黔藿1號(hào)的水分含量、總灰分含量、浸出物含量、總黃酮含量、總黃酮醇苷含量分別為2.29%～3.83%、4.61%～7.86%、26.65%～35.11%、9.54%～14.83%、7.33%～12.05%，各采收時(shí)間黔藿1號(hào)的水分、總灰分、浸出物、總黃酮、總黃酮醇苷含量均合格，其中8 月23 日采收黔藿1 號(hào)的浸出物含量最高，為35.11%，是2020 版《中國藥典》一部規(guī)定的2.34倍，其余各采收時(shí)間浸出物含量也高于2020版《中國藥典》一部的規(guī)定值；5月8日采收黔藿1號(hào)的總黃酮含量最高，為14.83%，是2020版《中國藥典》一部規(guī)定的2.97倍，其余各采收時(shí)間總黃酮含量也高于2020版《中國藥典》一部的規(guī)定值；4—6月采收黔藿1號(hào)的總黃酮醇苷含量逐漸升高，在6月23日達(dá)到最高，為12.05%，與7月8日無顯著差異，與其余采收時(shí)間存在顯著差異，之后總黃酮醇苷含量開始降低，8月6日又開始上升，8月23日達(dá)到第二個(gè)高峰，為9.85%，之后又開始下降，最終趨于平緩（表2）。

表2 根莖苗不同采收時(shí)間黔藿1號(hào)的質(zhì)量成分含量%

2.2.3 實(shí)生苗不同采收時(shí)間的藥材質(zhì)量

實(shí)生苗不同采收時(shí)間黔藿1號(hào)的水分含量、總灰分含量、浸出物含量、總黃酮含量、總黃酮醇苷含量分別為2.68%～4.60%、4.78%～7.92%、27.88%～37.26%、8.57%～15.14%、6.94%～11.06%，表明不同采收時(shí)間黔藿1號(hào)的水分、總灰分、浸出物、總黃酮、總黃酮醇苷含量均合格，其中4—6月黔藿1號(hào)的總黃酮醇苷含量逐漸升高，在6月8日達(dá)到最高，為11.06%，與6月23日、7月8日兩個(gè)采收時(shí)間無顯著差異，與其余采收時(shí)間存在顯著差異，之后總黃酮醇苷含量開始降低（表3）。

2.3 不同種苗不同采收時(shí)間黔藿1號(hào)的總黃酮醇苷產(chǎn)量

分株苗移栽后不同采收時(shí)間黔藿1 號(hào)的總黃酮醇苷產(chǎn)量為0.18～1.57 kg/667m2，平均為1.11 kg/667m2，不同采收時(shí)間的總黃酮醇苷產(chǎn)量從大到小依次為7 月8 日＞10月23 日＞8 月8 日＞9 月23 日＞6 月23 日=7月23 日＞6 月8 日＞11 月8 日＞8 月23 日＞9月8 日＞10 月8 日＞11 月23 日＞5 月23 日＞5 月8 日＞4 月23 日＞4 月6 日，7 月8 日采收的總黃酮醇苷產(chǎn)量最高，為1.57 kg/667m2。根莖苗移栽后不同采收時(shí)間黔藿1 號(hào)的總黃酮醇苷產(chǎn)量為0.12～1.44 kg/667m2，平均為0.91 kg/667m2，不同采收時(shí)間的總黃酮醇苷產(chǎn)量從大到小依次為10 月23 日＞9 月8日＞11 月23 日＞9 月23 日＞6 月23 日=11月8 日=10 月8 日＞8 月23 日＞7 月23 日＞7月8日＞6月8日＞8月8日＞5月23 日＞5月8 日＞4 月23 日＞4 月6 日，10 月23 日采收的總黃酮醇苷產(chǎn)量最高，為1.44 kg/667m2。實(shí)生苗移栽后不同采收時(shí)間黔藿1 號(hào)的總黃酮醇苷產(chǎn)量為0.14～0.92 kg/667m2，平均為0.70 kg/667m2，總黃酮醇苷產(chǎn)量從大到小依次為6 月23 日＞9 月8 日＞6 月8 日＞9月23 日＞11 月8 日=8 月23 日＞8 月8 日＞10月23日＞11月23日=7月8日＞10月8日＞7月23 日＞5 月23 日＞5 月8 日＞4 月23 日＞4月6 日，6 月23 日采收的總黃酮醇苷產(chǎn)量最高，為0.92 kg/667m2（表4）。

表4 不同種苗不同采收時(shí)間黔藿1號(hào)的總黃酮醇苷產(chǎn)量kg/667m2

2.4 不同種苗不同采收時(shí)間黔藿1號(hào)的產(chǎn)值

從表5可知，不同采收時(shí)間黔藿1號(hào)的產(chǎn)值存在差異，總體上分株苗＞根莖苗＞實(shí)生苗。分株苗、根莖苗和實(shí)生苗產(chǎn)值分別為172.80～1 746.94 元/667m2、110.14～1 389.06 元/667m2和117.06～982.40元/667m2，分株苗和根莖苗在10 月23 日采收時(shí)均達(dá)到最高產(chǎn)值（1 746.94元/667m2、1 389.06元/667m2），分別比4月6日采收時(shí)提高1 574.14元/667m2和1 278.92元/667m2；實(shí)生苗在11月8日采收時(shí)達(dá)到最高產(chǎn)值，為982.40元/667m2，比4月6日采收時(shí)提高865.34元/667m2（表5）。

表5 不同種苗不同采收時(shí)間黔藿1號(hào)的產(chǎn)值元/667m2

3 討論與結(jié)論

箭葉淫羊藿優(yōu)良品種黔藿1 號(hào)不同種苗移栽后不同采收時(shí)間的產(chǎn)質(zhì)量差異較大，分株苗和根莖苗移栽后的藥材產(chǎn)量較高，實(shí)生苗移栽后的藥材產(chǎn)量較低。分株苗、根莖苗及實(shí)生苗移栽后的藥材產(chǎn)量（產(chǎn)值）最高峰與質(zhì)量最高峰不重合，通過任飛龍等［19］的方法，根據(jù)移栽后藥材干重產(chǎn)量與總黃酮醇苷含量計(jì)算總黃酮醇苷產(chǎn)量進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，得出黔藿1 號(hào)分株苗、根莖苗及實(shí)生苗藥材分別在7 月8 日、10 月23 日、6 月23 日采收可使總黃酮醇苷產(chǎn)量達(dá)到最大值（1.57 kg/667m2、1.44 kg/667m2和0.92 kg/667m2），但此時(shí)分株苗和實(shí)生苗的產(chǎn)值較低，在實(shí)際生產(chǎn)中藥農(nóng)認(rèn)可度低，難以推廣使用。通過比較分株苗、根莖苗及實(shí)生苗移栽后的藥材產(chǎn)值，得出移栽后的分株苗和根莖苗在10 月23 日采收時(shí)藥材產(chǎn)值最高，實(shí)生苗移栽后在11 月8日采收時(shí)的藥材產(chǎn)值最高，且分株苗、根莖苗及實(shí)生苗移栽后在10 月下旬至11 月上旬采收時(shí)藥材質(zhì)量均符合2020 版《中國藥典》規(guī)定，故認(rèn)為黔藿1 號(hào)的適宜采收期為10 月下旬至11月上旬。

箭葉淫羊藿不同采收期黃酮類成分含量大多出現(xiàn)2個(gè)高峰，即生長初期或花期［4］。任飛龍等［19］認(rèn)為2個(gè)含量高峰期分別是3月和5—6月。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)黔藿1號(hào)在6—7月出現(xiàn)總黃酮醇苷含量高峰，這與任飛龍等的觀點(diǎn)基本一致；黔藿1號(hào)在10月下旬至11月上旬出現(xiàn)葉片干重的高峰，而任飛龍等認(rèn)為高峰在8月31日，這可能是由于試驗(yàn)材料的品種、種植年限及試驗(yàn)地的生境等不同導(dǎo)致。本試驗(yàn)各采收時(shí)間的葉片鮮重和干重隨著生育時(shí)間的延長呈M形，這可能是某一采樣時(shí)期的采樣植株偏大或偏小導(dǎo)致，但總體上仍呈上升趨勢(shì)。目前，箭葉淫羊藿主要采用分株苗、根莖苗和實(shí)生苗進(jìn)行栽培，試驗(yàn)探究黔藿1號(hào)不同種苗在不同采收時(shí)間藥材產(chǎn)量和質(zhì)量的變化特性，采用干重產(chǎn)量和質(zhì)量進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，黔藿1號(hào)分株苗、根莖苗和實(shí)生苗在10月23日和11月8日的干重分別為16.94～21.84 kg/667m2、10.41～12.28 kg/667m2、14.66～17.36 kg/667m2，產(chǎn)值分別為1 354.94～1 746.94 元/667m2、1 172.54～1 389.06 元/667m2、832.54～982.40 元/667m2，總黃酮醇苷產(chǎn)量分別為1.25～1.53 kg/667m2、1.15～1.44 kg/667m2、0.78～0.85 kg/667m2，確定黔藿1號(hào)分株苗、根莖苗和實(shí)生苗的適宜采收期為10月下旬至11月上旬，可為黔藿1號(hào)藥材的合理采收提供指導(dǎo)。