• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    NH3和H2S降解功能菌的分離鑒定及降解特性研究

    2023-10-25 05:05:42江海溶崔若琪王玥白淼張明露任連海
    生物技術(shù)通報(bào) 2023年9期
    關(guān)鍵詞:廚余硫酸鹽氮源

    江海溶 崔若琪 王玥 白淼 張明露 任連海

    (北京工商大學(xué)生態(tài)環(huán)境學(xué)院國(guó)家環(huán)境保護(hù)食品鏈污染防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100048)

    2019年起,我國(guó)地級(jí)及以上城市全面開(kāi)展垃圾分類工作,其中將廚余垃圾單獨(dú)收集成為生活垃圾分類收集的重點(diǎn)工作[1]。廚余垃圾具有含水率高、有機(jī)質(zhì)高、含鹽量高、含油量高和易腐爛等特點(diǎn),若處理不及時(shí)易產(chǎn)生惡臭,并會(huì)滋生病原微生物,引發(fā)環(huán)境污染問(wèn)題[2-3]。廚余垃圾所產(chǎn)生的惡臭不僅刺激人的嗅覺(jué)器官,而且很多組分是有毒有害氣體,對(duì)人體及動(dòng)植物造成危害[4]。惡臭氣體種類有很多,包括:H2S、SO2、NH3、CH4和二惡英等,雖然不同地區(qū)產(chǎn)生的廚余垃圾主要成分有所區(qū)別,但其中NH3和H2S是較為典型的惡臭氣體[5-6]。

    目前對(duì)控制惡臭氣體的研究工作主要集中在化學(xué)除臭、物理除臭和生物除臭三方面。生物除臭以除臭效率高、無(wú)二次污染、操作簡(jiǎn)單、成本低廉,成為治理惡臭環(huán)境的一個(gè)重要研究方向[7]。近年來(lái),研究工作多集中在高效除臭優(yōu)勢(shì)菌株的選育,推廣應(yīng)用的研究多采用外國(guó)進(jìn)口的微生物制劑,以韓國(guó)的鈕咳厲惡、德國(guó)的潔博士、日本的EM菌劑為主[8-10]。目前國(guó)內(nèi)選育和復(fù)配的微生物除臭劑研究起步較晚,菌株除臭效果相對(duì)國(guó)外進(jìn)口的微生物菌劑存在一定的差距[11-12]。

    本研究通過(guò)多種除臭微生物菌種的篩選,以NH3和H2S的降解率為除臭篩選指標(biāo),優(yōu)選降解效率最高的菌株,確定其最佳培養(yǎng)條件和混合比例,最終混合成微生物除臭劑,應(yīng)用于廚余垃圾臭氣的降解。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 樣品來(lái)源 用無(wú)菌桶從北京工商大學(xué)東區(qū)學(xué)校食堂收集約1 kg廚余垃圾至化工樓實(shí)驗(yàn)室,用小型破碎機(jī)破碎后備用。取10 g廚余垃圾進(jìn)行實(shí)驗(yàn)使用,剩余樣品在4℃冰箱保存。

    1.1.2 培養(yǎng)基 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基配方如下:

    NH3降解菌篩選培養(yǎng)基[13]:蔗糖50.0 g,KH2PO42.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,F(xiàn)eSO4·7H2O 0.1 g,1% ZnSO45 mL,NaCl 2.0 g,氨水10.0 mL,加蒸餾水至1 000 mL,121℃滅菌20 min,氨水過(guò)濾除菌后加入;

    H2S降解菌篩選培養(yǎng)基[14]:蛋白胨10.0 g,牛肉膏2.0 g,NaCl 5.0 g,Na2S 2.0 g,加蒸餾水至1 000 mL,121℃滅菌20 min;

    異養(yǎng)硝化培養(yǎng)基[15]:C6H5Na3O75.0 g,(NH4)2SO40.45 g,K2HPO40.25 g,F(xiàn)eSO40.0025 g,NaCl 0.125 g,MgSO40.06 g,MnSO40.001 g,瓊脂粉15.0 g,加蒸餾水至1 000 mL,pH=7.0,121℃滅菌20 min;牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基:稱取牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基33 g,加蒸餾水至1 000 mL,121℃滅菌20 min。

    1.2 方法

    1.2.1 NH3和H2S降解菌的富集與純化 經(jīng)20 000 r/min離心處理后的廚余垃圾,取100 μL上清液分別接入NH3和H2S選擇性培養(yǎng)基,進(jìn)行富集馴化[16]。將特征不同的菌落劃線純化至單菌后,分別吸取200 μL菌液于相應(yīng)的斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)后,保存?zhèn)溆茫羧》蛛x后的菌株接種于相應(yīng)的液體培養(yǎng)基上,30℃、130 r/min,搖床擴(kuò)大培養(yǎng)72 h。

    1.2.2 NH3和H2S降解菌的初篩 將分離純化獲得的菌株制作成5 mL菌液,接入裝有50 g新鮮廚余垃圾的1 000 mL廣口瓶中,混勻,同時(shí)以接種5 mL無(wú)菌水的廚余垃圾樣品作為對(duì)照,雙層塑料膜密封,置于30℃,130 r/min恒溫?fù)u床中發(fā)酵。發(fā)酵24 h后采用感官法對(duì)惡臭氣體強(qiáng)度進(jìn)行評(píng)定,實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次,將除臭能力明顯的菌株進(jìn)行復(fù)篩試驗(yàn)[17]。

    1.2.3 NH3和H2S降解菌的復(fù)篩 選擇初篩中具有較好除臭效果的菌株進(jìn)行復(fù)篩試驗(yàn),以10% 接種量將菌株接種至相應(yīng)的NH3和H2S降解菌培養(yǎng)基,培養(yǎng)成菌液,置于30℃,130 r/min恒溫?fù)u床中培養(yǎng)48 h。每個(gè)菌株做3組平行,同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組與空白組進(jìn)行差異顯著性分析,計(jì)算NH3與H2S的降解率,確定NH3與H2S降解率較高的菌株。

    1.2.4 最佳NH3和H2S降解菌的篩選 將復(fù)篩菌株的菌液接種于對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基中,置于30℃,130 r/min恒溫?fù)u床中培養(yǎng),設(shè)置空白對(duì)照組,每個(gè)菌株做3組平行。培養(yǎng)24 h后取出菌液,計(jì)算出氨氮濃度和硫酸鹽濃度[18-19],最終得出最佳NH3降解菌株和H2S降解菌株。

    1.2.5 菌株的鑒定 采用革蘭氏染色法對(duì)分離得到的菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,分子生物學(xué)鑒定由北京開(kāi)泰明鏡基因科技有限公司進(jìn)行16S rDNA測(cè)序鑒定。16S rDNA基因擴(kuò)增的PCR引物為細(xì)菌通用引物,上游引物(341F)5′-CCTACGGGNGGCWGCAG-3′,下游引物(785R)5′-GACTACHVGGGTATCTAATCC-3′。擴(kuò)增反應(yīng)體系為25 μL,其中,上、下游引物各0.25 μL、模板DNA 2 μL,2×Mastermix 12.5 μL,ddH2O 10 μL。擴(kuò)增反應(yīng)條件為95℃使DNA預(yù)變性3 min;95℃使DNA變性30 s,55℃引物退火30 s,72℃延伸30 s,25個(gè)循環(huán);最后72℃延伸5 min將PCR產(chǎn)物純化后加入到 Illumina Novaseq 6000 測(cè)序平臺(tái)進(jìn)行高通量測(cè)序,得到測(cè)序結(jié)果后通過(guò)BLAST程序與NCBI GenBank中核酸數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì)分析,查找與各菌株相似性最高的菌株序列[20]。

    1.2.6 菌株培養(yǎng)條件優(yōu)化 將分離得到的兩株細(xì)菌分別制作液體培養(yǎng)物,溫度梯度設(shè)置為25℃、30℃、35℃、40℃,培養(yǎng)48 h,每隔4 h取樣測(cè)量OD600值,根據(jù)生長(zhǎng)曲線變化情況,選擇最佳培養(yǎng)溫度。在最佳培養(yǎng)溫度下依次設(shè)置不同梯度的接種量、pH、C/N、碳源、氮源,130 r/min條件下?lián)u床振蕩培養(yǎng)48 h后測(cè)定菌株的降解率,每組試驗(yàn)做3組平行,最終取平均值(表1)。

    表1 除臭條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)Table 1 Experiment design of optimal deodorizing conditions

    1.2.7 混合培養(yǎng)對(duì)臭氣的降解效果 將獲得的兩株菌株在牛肉膏平板培養(yǎng)基上進(jìn)行交叉劃線,觀察交叉點(diǎn)是否有菌株生長(zhǎng)情況,兩者能生長(zhǎng)為不拮抗,一株或兩株都不能生長(zhǎng)為拮抗。若兩株菌株不產(chǎn)生拮抗,將其分別制作液體培養(yǎng)物,在最佳培養(yǎng)條件下,混合比例依次設(shè)置為1∶1、1∶2、2∶3、3∶2、2∶1,130 r/min的搖床震蕩培養(yǎng)48 h,每隔4 h取出菌液,測(cè)量pH變化情況和吸光度,繪制濃度曲線,選擇最佳混合比例。在最佳混合比例下,培養(yǎng)72 h,每隔4 h取樣,檢測(cè)氨氮和硫酸鹽離子濃度變化情況,計(jì)算氨氮降解率和硫酸鹽生成率。每組試驗(yàn)做3組平行,最終取平均值。

    1.2.8 分析方法 復(fù)篩降NH3試驗(yàn):硼酸吸收凱氏定氮法[21];復(fù)篩降H2S試驗(yàn):鋅銨絡(luò)鹽比色法[22];NH3降解效率的測(cè)定:納氏試劑分光光度法[23];H2S降解效率的測(cè)定:采用鉻酸鋇分光光度法[24]。

    1.2.9 數(shù)據(jù)處理 采用 Microsoft Office Excel 2022進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,Origin Pro 2021bS R2進(jìn)行作圖。

    2 結(jié)果

    2.1 降解菌株的篩選

    利用選擇性培養(yǎng)基共篩選到菌株40株,其中NH3降解菌株中細(xì)菌(CN)10株、真菌(PN)5株、乳酸菌(MN)5株,H2S降解菌株中細(xì)菌(CS)10株、真菌(PS)5株、乳酸菌(MS)5株。將氣味評(píng)判等級(jí)4、5的16株菌株去除,剩余24株菌株進(jìn)入復(fù)篩階段。

    復(fù)篩采用降NH3和降H2S實(shí)驗(yàn),計(jì)算培養(yǎng)液中NH3和H2S含量,與空白中的含量進(jìn)行對(duì)比,最終得出菌種所對(duì)應(yīng)的NH3或H2S的去除效率,選取去除率達(dá)到60%以上的菌株進(jìn)行NH3和H2S的高效降解菌的篩選。根據(jù)表2可知,共有8株菌株可進(jìn)入復(fù)篩,其中可降解NH3的編號(hào)為:CN5、CN10、PN1、PN3,可降解H2S的編號(hào)為:CS2、CS4、CS6、CS7。

    表2 篩選結(jié)果及其降解率Table 2 Screening results and degradation rates

    2.2 最佳NH3和H2S降解菌的篩選及鑒定

    由圖1-A可知,最佳NH3降解菌株編號(hào)為CN5,24 h后CN5菌液中氨氮含量最低為103.5 mg/L,NH3去除率為83.1%。由圖1-B可知,最佳H2S降解菌株編號(hào)為CS2,24 h后CS2菌液中硫酸鹽生成含量最多為304.2 mg/L,H2S去除率為87.2%。如圖2-A所示CN5菌為革蘭氏陽(yáng)性菌,顯微鏡下呈現(xiàn)璉球狀,菌落大,黃色不透明,邊緣清晰,較濕潤(rùn)容易挑取,單菌培養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)速度較慢。如圖2-B所示CS2菌為革蘭氏陰性菌,顯微鏡下呈現(xiàn)長(zhǎng)卵狀,菌落細(xì)小,白色通透,邊緣清晰,濕潤(rùn)容易挑取,單菌培養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)速度快。對(duì)菌株的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增及16S rDNA基因鑒定后,系統(tǒng)發(fā)育樹如圖3所示,根據(jù)BLAST結(jié)果,菌株CN5與Enterococcuss casseliflavus NCIMB 11449的相似性為99%,菌株CS2和Pseudomonas geniculata ATCC 19374的相似性為99.78%,說(shuō)明分離菌株CN5屬于腸球菌屬(Enterococcus sp.),菌株CS2屬于假單胞菌屬(Pseudomonas sp.)。

    圖1 菌株對(duì)氨氮(A)和硫酸鹽(B)的轉(zhuǎn)化情況Fig.1 Transformation of ammonia nitrogen(A)and sulfate(B)by strains

    圖3 菌株CN5和CS2的系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹Fig.3 Phylogenetic tree derived from 16S rDNA sequences of the CN5 and CS2 strains

    2.3 NH3和H2S降解菌培養(yǎng)條件優(yōu)化

    由圖4可知,菌株CN5和CS2的OD600均在35℃溫度下達(dá)到最大值,說(shuō)明35℃條件下菌株生長(zhǎng)最旺盛。如圖5-A所示,接種量為10%時(shí)菌株對(duì)NH3和H2S的降解率最高,分別為83%和86.3%。菌株CN5更適合在堿性條件下生長(zhǎng),在初始pH為7-8.5時(shí),降解效果較好,降解率接近85%;菌株CS2更適合在酸性條件下生長(zhǎng),在初始pH為6-7.5時(shí),降解效果較好,降解率均在85%以上(圖5-B)。以原始培養(yǎng)基中碳源氮源為基底,初始碳氮比為25∶1時(shí),兩株菌株對(duì)兩種氣體的降解效果均最佳,降解率可達(dá)84.7%和88.9%(圖5-C)。當(dāng)以蔗糖和氯化銨作為唯一碳源和氮源時(shí),兩菌株均能達(dá)到最佳降解效果,NH3降解率均接近85%,H2S降解率均在85%以上(圖5-D,5-E)。綜上兩菌株培養(yǎng)的最優(yōu)條件:接種量為10%,培養(yǎng)溫度為35℃,初始pH為7,碳氮比25∶1,碳源為蔗糖,氮源為氯化銨。

    圖4 菌株在不同溫度培養(yǎng)時(shí)的OD600值Fig.4 OD600 value of strains cultured at different temperatures

    圖5 菌株CN5和菌株CS2在不同培養(yǎng)條件下降解率的變化Fig.5 Changes in degradation rates of strain CN5 and strain CS2 under different culture conditions

    2.4 最佳混合比例的確定

    在平板上將菌株交叉十字劃線,兩菌株交叉點(diǎn)生長(zhǎng)良好,說(shuō)明菌株彼此之間沒(méi)有拮抗作用,可以進(jìn)一步進(jìn)行最佳除臭組合的篩選。由圖6可知,菌株CN5和CS2以2∶3的比例接入時(shí),OD600值最大,菌株生長(zhǎng)最旺盛。由圖7可知,菌株CN5和CS2以2:3的比例接入時(shí),pH值在7左右保持穩(wěn)定。在上述單因素優(yōu)化條件得出的最佳培養(yǎng)條件下,混合菌劑對(duì)NH3的降解率達(dá)到86.3%,對(duì)H2S的降解率達(dá)到91.2%。相較于圖5中單個(gè)菌株對(duì)NH3和H2S的降解率分別為84.7%和88.9%,兩菌在混合狀態(tài)下產(chǎn)生的協(xié)同作用,能進(jìn)一步提高NH3和H2S的降解率。

    圖6 兩菌株不同混合比例下OD600的變化Fig.6 Changes of OD600 under different mixing ratios of two strains

    圖7 兩菌株不同混合比例下pH的變化Fig.7 Changes of pH under different mixing ratios of two strains

    2.5 氨氮含量和硫酸鹽含量測(cè)定

    通過(guò)氨氮含量和硫酸鹽含量測(cè)定實(shí)驗(yàn),進(jìn)一步確認(rèn)兩株菌的降解能力,由圖8可知,在0-24 h內(nèi),氨氮濃度呈現(xiàn)指數(shù)下降趨勢(shì),硫酸鹽濃度呈現(xiàn)指數(shù)上升趨勢(shì),兩者變化幅度均較大。在24-72 h,氨氮和硫酸鹽離子濃達(dá)到飽和后基本保持不變。最終氨氮濃度穩(wěn)定在50.5 mg/L,氨氮降解率為85.3%,相較于圖1-A中未優(yōu)化條件下氨氮降解率83.1%,優(yōu)化條件下氨氮降解率提高了2.2%。硫酸鹽濃度穩(wěn)定在302.7 mg/L,硫酸鹽生成率為89.2%,相較于圖1-B中未優(yōu)化條件下硫酸鹽生成率87.2%,優(yōu)化條件下硫酸鹽生成率提高了2.0%。

    圖8 兩株菌混合條件下氨氮和硫酸鹽離子濃度變化曲線Fig.8 Variation curve of ammonium nitrogen and sulfate ion concentration under mixed conditions of two strains

    3 討論

    微生物對(duì)臭氣的降解率與接種量、pH有密切關(guān)系,接種量過(guò)低降解效果不明顯,接種量過(guò)高導(dǎo)致菌種繁殖過(guò)于旺盛產(chǎn)生多余的代謝物質(zhì),影響降解效率。本研究中接種量為10%時(shí)菌株生長(zhǎng)最旺盛,對(duì)NH3和H2S的降解率最高。pH值是影響微生物活性的重要因子之一,其值太小或太大都會(huì)影響菌劑除臭效果,一般適宜微生物生長(zhǎng)的pH值環(huán)境是中性左右,本研究中最適宜兩株菌生長(zhǎng)的pH為7,與現(xiàn)有研究一致。張紅玉等[25]研究表明碳氮比為25∶1時(shí),是微生物生長(zhǎng)繁殖以及分解有機(jī)物的最佳條件,能夠保證能量和氮素來(lái)源都不會(huì)受到限制。本研究中最佳碳氮比為25∶1與現(xiàn)有參考文獻(xiàn)一致,碳氮比過(guò)高和過(guò)低都不利于細(xì)胞生長(zhǎng)和外源蛋白表達(dá)和積累,過(guò)低導(dǎo)致菌體提早自溶;過(guò)高導(dǎo)致細(xì)菌代謝不平衡,最終不利于產(chǎn)物的積累[26]。蔣敏[27]在對(duì)廚余垃圾好氧堆肥高效菌劑的研發(fā)中發(fā)現(xiàn)葡萄糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖和淀粉均是容易被微生物利用的碳源,其中添加蔗糖作為碳源可在實(shí)驗(yàn)前期加快細(xì)胞增殖。本研究中蔗糖為提高NH3和H2S降解率的最佳碳源。同時(shí),氮源也是影響菌劑除臭效果的重要因素,一定的氮源能夠促進(jìn)微生物菌劑對(duì)惡臭氣體的分解,加快反應(yīng)時(shí)間和效率。夏遠(yuǎn)艦等[28]對(duì)異養(yǎng)硝化-好氧反硝化菌最佳氮源的研究中發(fā)現(xiàn),由于氯化銨中含有可促進(jìn)菌劑代謝的氨氮離子,因此添加氯化銨作為唯一氮源時(shí)菌株作用效果最佳,本研究中最佳氮源也為氯化銨,對(duì)NH3和H2S降解率均可達(dá)到85%。

    在菌株混合培養(yǎng)方面,Van Ransbeeck等[29]研究表明,臭氣成分復(fù)雜,每一種臭氣都需要特定的微生物來(lái)降解,單一菌株除臭效果低于多種微生物共同作用的效果,兩株菌接種于同一體系中互利共生,聯(lián)合作用,可在一定程度上提高生長(zhǎng)繁殖能力。史鉆紅等[30]研究表明廚余垃圾的pH一般為中性偏酸性,因此兩株菌混合,偏向于酸性條件的菌株CS2添加相對(duì)比例高時(shí),除臭效果更明顯。腸球菌已有多個(gè)研究表明具有除臭作用[31-33],對(duì)NH3降解效果可達(dá)70%以上,同時(shí)對(duì)CH4、甲醛、二惡英等惡臭氣體也有一定的降解作用。假單胞菌也有研究表明具有較好的除臭效果[34-36],常常應(yīng)用于污水處理廠污泥臭氣降解,對(duì)H2S降解效果最佳,最高達(dá)到95.1%,同時(shí)對(duì)甲硫醇、甲硫醚、NH3等惡臭氣體也有一定的降解效果。本研究中兩菌混合對(duì)NH3和H2S的降解效果明顯優(yōu)于單菌的降解效果,產(chǎn)生協(xié)同作用促進(jìn)NH3和H2S的降解,最終對(duì)NH3的降解率達(dá)到86.3%,對(duì)H2S的降解率達(dá)到91.2%,明顯高于單個(gè)菌株對(duì)NH3和H2S的降解率。

    有研究表明[37-38],垃圾中含有大量的NH4+和S2-,是NH3和H2S的主要產(chǎn)生來(lái)源。處于旺盛生長(zhǎng)的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌種活性高,因此會(huì)大量消耗NH4+,生成硝酸鹽和亞硝酸鹽,同時(shí)大量分解S2-,產(chǎn)生硫酸鹽,SO42-離子濃度增加。待細(xì)菌逐漸達(dá)到衰亡期后,各離子濃度平穩(wěn)。目前篩選除臭菌株一般都是在48 h之后才能獲得最佳除臭效果,曾蘇等[39]研究的菌株生長(zhǎng)的變化在60 h后才趨于穩(wěn)定,最大值氨氮和硫酸鹽的離子濃度變化為80.05%和65.03%,在72 h后降解效果下降。張鉥孟等[40]研究的一株脫氮硫桿菌中,菌株在48 h后趨于穩(wěn)定,最大值氨氮和硫酸鹽的離子濃度變化為67.18%和63.85%,低于本研究中兩株菌株的混合效果。本研究篩選的兩株菌在40 h左右趨于穩(wěn)定,在72 h仍有明顯降解效果。相對(duì)其他研究,該混合菌株氨氮降解率和硫酸鹽離子轉(zhuǎn)化率更高,持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng),因此具有更佳除臭效果。

    4 結(jié)論

    從廚余垃圾中分離出能夠高效降解NH3和H2S的菌株各1株,鑒定菌株CN5屬于腸球菌屬(Enterococcuss sp.),為革蘭氏陽(yáng)性菌;CS2屬于假單胞菌屬(Pseudomonas sp.),為革蘭氏陰性菌。菌株最佳除臭條件為:接種量為10%,培養(yǎng)溫度為35℃,初始pH為7,碳氮比25∶1,碳源為蔗糖,氮源為氯化銨。在混合比例為2∶3時(shí),對(duì)NH3和H2S的去除效果最佳,且pH值穩(wěn)定在中性偏酸性,NH3降解率為86.3%,H2S降解率為91.2%。在72 h內(nèi),最終氨氮濃度穩(wěn)定在50.5 mg/L,氨氮降解率為85.3%;硫酸鹽濃度穩(wěn)定在302.7 mg/L,硫酸鹽生成率為89.2%。

    猜你喜歡
    廚余硫酸鹽氮源
    鐵/過(guò)硫酸鹽高級(jí)氧化體系強(qiáng)化方法的研究進(jìn)展
    云南化工(2021年5期)2021-12-21 07:41:16
    廚余垃圾特性及預(yù)分選處理技術(shù)
    廈門科技(2021年4期)2021-11-05 06:50:30
    廚余垃圾變廢為寶 有機(jī)肥市場(chǎng)方興未艾
    紫外光分解銀硫代硫酸鹽絡(luò)合物的研究
    四川冶金(2019年5期)2019-12-23 09:04:48
    ICP-OES法測(cè)定硫酸鹽類鉛鋅礦石中的鉛量
    不同廚余垃圾發(fā)酵效果比較
    無(wú)機(jī)氮源對(duì)紅曲霉調(diào)控初探
    硫酸鹽測(cè)定能力驗(yàn)證結(jié)果分析
    中藥渣生產(chǎn)蛋白飼料的氮源優(yōu)化研究
    響應(yīng)面分析法和氮源改進(jìn)優(yōu)化L-賴氨酸發(fā)酵工藝
    黑人欧美特级aaaaaa片| 国产精品久久久av美女十八| 日本av手机在线免费观看| 91久久精品国产一区二区三区| 最近最新中文字幕免费大全7| 一区二区av电影网| 五月开心婷婷网| 亚洲人成网站在线观看播放| 咕卡用的链子| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 午夜福利乱码中文字幕| 最近2019中文字幕mv第一页| 天堂8中文在线网| 欧美国产精品一级二级三级| av福利片在线| 成人国产麻豆网| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 成人国产av品久久久| 国产淫语在线视频| 免费黄频网站在线观看国产| 国产一区有黄有色的免费视频| 国产成人精品一,二区| 亚洲人成网站在线观看播放| 成人亚洲精品一区在线观看| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产97色在线日韩免费| 欧美人与性动交α欧美软件| 涩涩av久久男人的天堂| 国产熟女欧美一区二区| 久久久久国产一级毛片高清牌| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产一区二区激情短视频 | 久久精品国产a三级三级三级| 亚洲精品美女久久av网站| 91国产中文字幕| 国产精品一区二区在线不卡| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲视频免费观看视频| 青草久久国产| 亚洲国产精品一区三区| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产高清不卡午夜福利| 十分钟在线观看高清视频www| 嫩草影院入口| 亚洲图色成人| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 最新中文字幕久久久久| 亚洲欧美一区二区三区久久| 日本91视频免费播放| 国产男女超爽视频在线观看| 99久久中文字幕三级久久日本| 午夜日韩欧美国产| 国产成人精品一,二区| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 日日撸夜夜添| 一区二区三区乱码不卡18| 中文字幕制服av| 黄色一级大片看看| 久久久久久伊人网av| 高清不卡的av网站| 韩国av在线不卡| www.自偷自拍.com| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲欧美精品综合一区二区三区 | 亚洲欧美色中文字幕在线| 日韩电影二区| 亚洲第一青青草原| videosex国产| 国产成人精品久久二区二区91 | 国产精品一区二区在线观看99| 国产熟女欧美一区二区| 婷婷色麻豆天堂久久| 少妇人妻 视频| 91久久精品国产一区二区三区| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲伊人色综图| 大陆偷拍与自拍| 亚洲av男天堂| 嫩草影院入口| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 午夜av观看不卡| 成人国产麻豆网| 欧美少妇被猛烈插入视频| 国精品久久久久久国模美| av女优亚洲男人天堂| 男女午夜视频在线观看| 久久av网站| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 日韩制服丝袜自拍偷拍| 午夜精品国产一区二区电影| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产在线视频一区二区| 男女啪啪激烈高潮av片| 哪个播放器可以免费观看大片| xxx大片免费视频| 90打野战视频偷拍视频| 久久精品亚洲av国产电影网| 多毛熟女@视频| 人妻少妇偷人精品九色| 十八禁高潮呻吟视频| 国产伦理片在线播放av一区| 伊人亚洲综合成人网| 亚洲综合色惰| 国产精品女同一区二区软件| 我要看黄色一级片免费的| 国产精品熟女久久久久浪| 18禁动态无遮挡网站| 免费看av在线观看网站| 成人手机av| 久久精品亚洲av国产电影网| 欧美日韩精品成人综合77777| 亚洲综合色网址| 丰满迷人的少妇在线观看| 午夜老司机福利剧场| 狂野欧美激情性bbbbbb| 18禁观看日本| 久久这里有精品视频免费| 亚洲成色77777| 这个男人来自地球电影免费观看 | 亚洲欧洲国产日韩| 中文字幕最新亚洲高清| 国产精品久久久久久精品电影小说| 极品少妇高潮喷水抽搐| 男女边摸边吃奶| 黑人欧美特级aaaaaa片| tube8黄色片| a级毛片在线看网站| 亚洲国产精品一区三区| 久久人人97超碰香蕉20202| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 婷婷色综合www| 亚洲欧美色中文字幕在线| 亚洲精品自拍成人| 毛片一级片免费看久久久久| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 亚洲精品中文字幕在线视频| 国产熟女欧美一区二区| www.精华液| 蜜桃国产av成人99| videosex国产| 国产亚洲欧美精品永久| 久久人人爽人人片av| 久久久久国产网址| 高清av免费在线| 国产精品国产三级国产专区5o| 国产欧美亚洲国产| 亚洲精品国产一区二区精华液| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 伦理电影大哥的女人| 日韩大片免费观看网站| 一二三四在线观看免费中文在| 国产日韩欧美在线精品| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 久久热在线av| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 香蕉丝袜av| 日本色播在线视频| av国产久精品久网站免费入址| 久久久久久久国产电影| 女性生殖器流出的白浆| xxx大片免费视频| 国产精品一二三区在线看| 五月开心婷婷网| 亚洲国产欧美在线一区| 久久人人爽人人片av| 90打野战视频偷拍视频| 国产男女内射视频| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 免费人妻精品一区二区三区视频| 99久国产av精品国产电影| 日韩在线高清观看一区二区三区| 久久久久久伊人网av| 一级a爱视频在线免费观看| 国产欧美亚洲国产| 亚洲精品国产色婷婷电影| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 中文天堂在线官网| 最近中文字幕高清免费大全6| 新久久久久国产一级毛片| 母亲3免费完整高清在线观看 | 日韩在线高清观看一区二区三区| 各种免费的搞黄视频| 国产黄色视频一区二区在线观看| 久热这里只有精品99| 黄片小视频在线播放| 一级a爱视频在线免费观看| 国产乱人偷精品视频| 两个人免费观看高清视频| 国产成人精品无人区| 在线观看三级黄色| 咕卡用的链子| 久久久久久人妻| 尾随美女入室| 精品福利永久在线观看| av福利片在线| 黑人欧美特级aaaaaa片| 一级黄片播放器| 赤兔流量卡办理| 伊人亚洲综合成人网| 久久精品国产a三级三级三级| 黄色一级大片看看| 久久精品国产自在天天线| 一区二区三区四区激情视频| 蜜桃国产av成人99| 捣出白浆h1v1| 中文字幕人妻熟女乱码| 色视频在线一区二区三区| 婷婷色av中文字幕| 国产男人的电影天堂91| 999久久久国产精品视频| 久久99一区二区三区| 天美传媒精品一区二区| 久久这里有精品视频免费| 又大又黄又爽视频免费| 久久人人爽人人片av| 国产精品av久久久久免费| 久久热在线av| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 欧美精品一区二区免费开放| 日韩 亚洲 欧美在线| 成人免费观看视频高清| 国产综合精华液| 久久久久久久亚洲中文字幕| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 热99国产精品久久久久久7| 在线精品无人区一区二区三| 黄片无遮挡物在线观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产不卡av网站在线观看| 捣出白浆h1v1| 超色免费av| 97在线视频观看| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产不卡av网站在线观看| 91aial.com中文字幕在线观看| 午夜免费鲁丝| 美女视频免费永久观看网站| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 亚洲伊人色综图| 叶爱在线成人免费视频播放| 成人国语在线视频| 超碰成人久久| 日韩精品免费视频一区二区三区| 美女大奶头黄色视频| 观看美女的网站| 国产精品久久久av美女十八| 久久久久精品久久久久真实原创| 成人二区视频| 男女边摸边吃奶| 日韩免费高清中文字幕av| 深夜精品福利| 一边亲一边摸免费视频| 涩涩av久久男人的天堂| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 亚洲视频免费观看视频| 国产一区亚洲一区在线观看| 熟妇人妻不卡中文字幕| 欧美日韩精品成人综合77777| 一级a爱视频在线免费观看| 熟女电影av网| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲,欧美精品.| 777米奇影视久久| 纯流量卡能插随身wifi吗| 丝袜人妻中文字幕| 国产精品99久久99久久久不卡 | 各种免费的搞黄视频| 午夜精品国产一区二区电影| 一区二区三区精品91| 亚洲av免费高清在线观看| 看十八女毛片水多多多| 精品少妇久久久久久888优播| 午夜福利乱码中文字幕| 亚洲综合色网址| 国产在线一区二区三区精| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 亚洲国产色片| 最近中文字幕2019免费版| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产成人午夜福利电影在线观看| 欧美少妇被猛烈插入视频| 久久久久久久亚洲中文字幕| 日韩大片免费观看网站| 精品人妻一区二区三区麻豆| 极品人妻少妇av视频| 黄色 视频免费看| 日韩av在线免费看完整版不卡| 最近手机中文字幕大全| 国产高清不卡午夜福利| 久久韩国三级中文字幕| 国产精品.久久久| 午夜免费鲁丝| 亚洲国产精品999| 国产激情久久老熟女| 精品亚洲成国产av| 性少妇av在线| 亚洲精品国产av蜜桃| 亚洲人成电影观看| 人妻系列 视频| 久久久久久久久久久久大奶| 欧美国产精品va在线观看不卡| 黑丝袜美女国产一区| 日本爱情动作片www.在线观看| 欧美变态另类bdsm刘玥| 激情五月婷婷亚洲| 少妇被粗大的猛进出69影院| 久久久精品94久久精品| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久久久久伊人网av| 熟妇人妻不卡中文字幕| 精品国产一区二区久久| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 观看av在线不卡| 久久精品久久久久久久性| 日韩av在线免费看完整版不卡| 美女国产高潮福利片在线看| 亚洲精品aⅴ在线观看| 我要看黄色一级片免费的| 老司机影院毛片| 亚洲国产精品一区三区| 高清在线视频一区二区三区| 午夜日本视频在线| 亚洲av.av天堂| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 在线观看www视频免费| av网站免费在线观看视频| 亚洲成人手机| 80岁老熟妇乱子伦牲交| av免费观看日本| 91精品国产国语对白视频| 午夜福利乱码中文字幕| 亚洲国产av新网站| 欧美成人午夜精品| 在线天堂中文资源库| 国产精品一区二区在线观看99| 一边亲一边摸免费视频| 国产深夜福利视频在线观看| 国产黄色免费在线视频| 婷婷色综合www| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 性少妇av在线| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产不卡av网站在线观看| 性少妇av在线| 下体分泌物呈黄色| 一二三四中文在线观看免费高清| 热99国产精品久久久久久7| 秋霞伦理黄片| 免费人妻精品一区二区三区视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产成人aa在线观看| 丝袜美腿诱惑在线| 最近中文字幕高清免费大全6| 一区福利在线观看| 亚洲av成人精品一二三区| 少妇人妻精品综合一区二区| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲精品久久午夜乱码| 久久久a久久爽久久v久久| 欧美日韩视频精品一区| 国产精品嫩草影院av在线观看| 亚洲国产日韩一区二区| 大码成人一级视频| 久久久久精品性色| 成人亚洲精品一区在线观看| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 国产一区二区在线观看av| 一二三四在线观看免费中文在| 性高湖久久久久久久久免费观看| 成人国产av品久久久| 男女免费视频国产| 国产成人av激情在线播放| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 1024视频免费在线观看| 成人影院久久| 久久久久久伊人网av| 下体分泌物呈黄色| 精品少妇黑人巨大在线播放| 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 国产精品亚洲av一区麻豆 | 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲av中文av极速乱| 欧美人与性动交α欧美软件| 成人免费观看视频高清| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产午夜精品一二区理论片| 啦啦啦在线观看免费高清www| 日日啪夜夜爽| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 97精品久久久久久久久久精品| 最近中文字幕2019免费版| 国产1区2区3区精品| 日韩在线高清观看一区二区三区| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 乱人伦中国视频| 久久精品亚洲av国产电影网| 曰老女人黄片| 欧美日韩综合久久久久久| 卡戴珊不雅视频在线播放| 午夜福利,免费看| 欧美国产精品一级二级三级| 一个人免费看片子| 最新中文字幕久久久久| 不卡av一区二区三区| 欧美97在线视频| 看非洲黑人一级黄片| 一二三四在线观看免费中文在| 国产男女超爽视频在线观看| 国产高清国产精品国产三级| 在线观看人妻少妇| 国产精品 国内视频| 人妻人人澡人人爽人人| 伦精品一区二区三区| 国产成人精品婷婷| 韩国精品一区二区三区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 黄片播放在线免费| 精品国产一区二区三区四区第35| 91aial.com中文字幕在线观看| a级毛片黄视频| 黑丝袜美女国产一区| 日日爽夜夜爽网站| 国产熟女欧美一区二区| 日韩 亚洲 欧美在线| 大香蕉久久成人网| www.自偷自拍.com| 啦啦啦在线观看免费高清www| 亚洲人成网站在线观看播放| 欧美xxⅹ黑人| 最近中文字幕高清免费大全6| 欧美变态另类bdsm刘玥| 国产男人的电影天堂91| tube8黄色片| 日本wwww免费看| 国产乱来视频区| 国产一区二区激情短视频 | 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 男女无遮挡免费网站观看| 丝袜人妻中文字幕| 日日爽夜夜爽网站| 欧美在线黄色| 中文欧美无线码| av在线播放精品| 新久久久久国产一级毛片| 美女大奶头黄色视频| 久久热在线av| 老女人水多毛片| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产精品久久久久久av不卡| 精品一品国产午夜福利视频| 99热网站在线观看| 久久久久久人人人人人| 青草久久国产| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 看十八女毛片水多多多| av在线播放精品| 国产毛片在线视频| 国产男女内射视频| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 欧美日韩精品成人综合77777| 欧美 日韩 精品 国产| 26uuu在线亚洲综合色| 久久久久久人人人人人| 哪个播放器可以免费观看大片| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产极品天堂在线| 97精品久久久久久久久久精品| 欧美精品人与动牲交sv欧美| www日本在线高清视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 日韩中文字幕视频在线看片| 男女高潮啪啪啪动态图| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 老汉色av国产亚洲站长工具| 欧美日韩一级在线毛片| 久久国内精品自在自线图片| 人妻 亚洲 视频| 国产黄频视频在线观看| 制服人妻中文乱码| 男人舔女人的私密视频| 国产免费福利视频在线观看| 久久热在线av| 高清在线视频一区二区三区| 香蕉丝袜av| 天美传媒精品一区二区| 天天影视国产精品| 中文欧美无线码| 国产在视频线精品| kizo精华| 视频区图区小说| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 午夜免费观看性视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 亚洲国产欧美网| 国产淫语在线视频| 日本色播在线视频| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 黄片小视频在线播放| 日日撸夜夜添| 成人二区视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 亚洲成人手机| 国产毛片在线视频| 777米奇影视久久| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 1024视频免费在线观看| 亚洲成人手机| 久热这里只有精品99| 性少妇av在线| 美女视频免费永久观看网站| 精品福利永久在线观看| 亚洲在久久综合| 国产精品不卡视频一区二区| 大香蕉久久网| 视频区图区小说| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| av不卡在线播放| 人妻一区二区av| 91aial.com中文字幕在线观看| 久久精品国产综合久久久| 久久婷婷青草| 各种免费的搞黄视频| 亚洲精品在线美女| 精品国产露脸久久av麻豆| 多毛熟女@视频| 熟妇人妻不卡中文字幕| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲色图综合在线观看| 一区福利在线观看| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 超碰成人久久| 免费大片黄手机在线观看| 2018国产大陆天天弄谢| 久热久热在线精品观看| 伊人亚洲综合成人网| 99久久综合免费| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产97色在线日韩免费| 国产乱来视频区| 久久99一区二区三区| 看免费av毛片| 日韩视频在线欧美| 最新中文字幕久久久久| 久久久精品区二区三区| 伦理电影免费视频| 国产亚洲一区二区精品| 男女边摸边吃奶| 一本久久精品| 亚洲精品美女久久av网站| 女人精品久久久久毛片| 欧美亚洲日本最大视频资源| 一级片免费观看大全| 毛片一级片免费看久久久久| 午夜福利乱码中文字幕| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 热re99久久精品国产66热6| 国产av精品麻豆| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 高清在线视频一区二区三区| 成人黄色视频免费在线看| 久久久久精品性色| 老司机影院毛片| 久久久久人妻精品一区果冻| 日本欧美视频一区| 亚洲伊人久久精品综合| 青春草国产在线视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 丝袜美足系列| 精品少妇黑人巨大在线播放| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产乱人偷精品视频| 国产精品成人在线| 国产精品99久久99久久久不卡 | av福利片在线| 久久久久精品性色| 国产av精品麻豆| 免费观看无遮挡的男女| 伦精品一区二区三区| 97在线视频观看| 日韩电影二区| 久久久久久伊人网av| 晚上一个人看的免费电影| 伊人亚洲综合成人网| 春色校园在线视频观看| 看十八女毛片水多多多| 久久99热这里只频精品6学生| 亚洲第一青青草原| 欧美中文综合在线视频| 一个人免费看片子| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 青春草国产在线视频| 1024视频免费在线观看| 欧美日韩精品网址| 中文天堂在线官网| 在现免费观看毛片| 国产熟女欧美一区二区| 丰满少妇做爰视频| 国产男女超爽视频在线观看| 91精品伊人久久大香线蕉| 久久久久久久久久久免费av| 国产精品女同一区二区软件| 熟女av电影| 国产片内射在线| 国产又色又爽无遮挡免| 97在线视频观看|