大范圍疫情中新型冠狀病毒抗體免疫城市墻形成的現(xiàn)狀調(diào)研

陳志芳，曹文玲，邢紅娜，劉宏濤，榮 策，楊紅云，汪朝暉，康熙雄,

（1.北京愛康國賓白石門診部檢驗科，北京 100038；2.北京中檢體外診斷工程技術(shù)研究中心檢驗科，北京 100084；3.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院檢驗科，北京 100070）

新型冠狀病毒感染自2023 年1 月起，由“乙類甲管”調(diào)整為“乙類乙管”，這是我國新型冠狀肺炎疫情防控政策的一次重大調(diào)整。北京疫情已過感染高峰期，整體人群在免疫能力方面已構(gòu)建新的能力。近日，臨床對于新型冠狀病毒康復(fù)者體內(nèi)是否含有大量中和抗體極其關(guān)注，北京愛康國賓白石門診部體檢推出了感染新型冠狀病毒康復(fù)者體檢套餐，套餐中包括了總抗體、免疫球蛋白M（IgM）抗體、免疫球蛋白G（IgG）抗體。本文以2022 年12 月至2023 年2 月在愛康國賓接受感染新型冠狀病毒康復(fù)者體檢套餐的體檢者為研究對象，并對該人群體內(nèi)抗體情況進行梳理，以分析大范圍疫情中新型冠狀病毒抗體免疫城市墻形成的現(xiàn)狀，現(xiàn)將研究結(jié)果詳細報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2022 年12 月至2023 年2 月石家莊、貴陽、北京、煙臺、濰坊、海口、銀川、南京、西安、深圳、鎮(zhèn)江、廣州、上海、青島等37 個城市接受感染新型冠狀病毒康復(fù)者體檢套餐中新型冠狀病毒特異性抗體3 項檢測的體檢者，共61 804 例的體檢結(jié)果，進行回顧性分析。其中男性34 883 例，女性26 921 例；年齡12～86 歲，平均（39.19±11.54）歲。診斷標準：參照《新型冠狀病毒肺炎防控方案（試行第十版）》[1]中新型冠狀病毒感染的診斷標準。納入標準：體檢時自述癥狀，出現(xiàn)發(fā)熱、咳嗽乏力等，其中90%以上在家自測抗原為陽性。排除標準：無相關(guān)臨床癥狀且近期未行抗原自測。本研究全部為脫敏數(shù)據(jù)，已經(jīng)愛康集團倫理委員會申請倫理審批通過，批準編號：20230420。

1.2 方法61 804 例受檢者均進行IgG 抗體檢測，其中21 830 例受檢者進行IgM 抗體檢測；12 463 例北京地區(qū)受檢者進行新型冠狀病毒特異性總抗體檢測，并對3 種新型冠狀病毒特異性抗體檢測結(jié)果COI 值進行定量資料統(tǒng)計分析。3 種抗體的檢測均使用全自動化學(xué)方法免疫分析儀（廈門萬泰凱瑞生物技術(shù)有限公司，型號：Caris200），IgM 抗體（捕獲法方法），IgG 抗體（間接法方法），總抗體（雙抗原夾心法），所用試劑為專用儀器配套的試劑盒，結(jié)果以S/CO 比值表示，單位為COI，其中S 值為化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（廈門萬泰凱瑞生物技術(shù)有限公司，型號：Caris200）測量血清樣本產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)信號檢測值，CO 值為儀器通過校準品發(fā)光值計算出的臨界值，即Cut-Off 值。S/CO＜1 COI 為陰性，S/CO ≥ 1 COI 為陽性。

3 種抗體檢測試劑為定性試劑，校準品和質(zhì)控品為企業(yè)參考品，因此，3 種抗體檢測結(jié)果的S/CO（COI）值無比例關(guān)系。①總抗體S/CO（COI）：通過發(fā)光儀對校準品1 和校準品2 行3 次檢測，取相對發(fā)光值（RLU）的平均值，計算CO 值。CO 值=校準品1 的平均RLU 值×1+校準品2 的平均值RLU 值×0.3，總抗體的S/CO（COI）=RLU/CO。②IgM、IgG 抗體S/CO（COI）：通過發(fā)光儀對陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品行3 次檢測，取RLU 的平均值，計算CO 值。CO=陰性質(zhì)控品的RLU 平均值+陽性質(zhì)控品的RLU 平均值×校準系數(shù)（置于試劑二維碼中，加載試劑時，儀器會自動掃描二維碼并獲取校準信息，得到校準系數(shù)值），IgM、IgG 抗體S/CO（COI）=RLU/CO。

1.3 觀察指標①分析3 種新型冠狀病毒特異性抗體陽性檢出情況。②分析3 種抗體在不同性別受檢者中的陽性檢出情況。③分析3 種新型冠狀病毒特異性抗體在不同年齡受檢者中的陽性檢出情況。④分析北京地區(qū)12 463 例體檢者新型冠狀病毒特異性總抗體S/CO 值隨感染時間推移的變化情況。⑤分析北京地區(qū)12 463 例體檢者3 種新型冠狀病毒特異性抗體COI 值檢測結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法使用Excel 錄入數(shù)據(jù)，用SPSS 27.0 統(tǒng)計學(xué)軟件分析，正態(tài)分布及近似正態(tài)分布的計量資料以(±s)表示，組間比較采用t檢驗；非正態(tài)分布計量資料采用[M（P25， P75）]表示；計數(shù)資料（陽性率）采用[ 例(%)]表示，兩組間比較行χ2檢驗，多組間比較采用χ2趨勢分析。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3 種新型冠狀病毒特異性抗體陽性檢出情況總抗體的陽性率為97.91%，IgG 抗體的陽性率為95.97%，IgM 抗體的陽性率為11.97%，見表1。

表1 3 種新型冠狀病毒特異性抗體陽性檢出情況

2.2 3 種新型冠狀病毒特異性抗體在不同性別受檢者中的陽性檢出情況3 種抗體陽性率比較，男性均顯著高于女性，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2 3 種新型冠狀病毒特異性抗體在不同性別受檢者中的陽性檢出情況

2.3 3 種新型冠狀病毒特異性抗體在不同年齡受檢者中的陽性檢出情況總抗體陽性率隨年齡升高而略有降低，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），IgG 抗體的陽性率隨年齡升高而降低，但IgM 陽性率則隨年齡升高而升高，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表3。

表3 新型冠狀病毒特異性3 種抗體在不同年齡分組中的變化(%)

2.4 北京地區(qū)12 463 例體檢者新型冠狀病毒特異性總抗體S/CO 值隨感染時間推移的變化情況從國家疾控官方網(wǎng)站查找北京地區(qū)每日新發(fā)病例數(shù)（2022 年12 月3 日至12 月15 日），結(jié)果顯示，北京地區(qū)新型冠狀病毒特異性總抗體S/CO 值在感染的1 個月后（2023 年1 月3 日至1 月15 日北京愛康國賓白石門診部北京區(qū)域一共檢測新型冠狀抗體12 463 例）均維持在1 000 COI 以上，且波動不明顯，基本可維持較高的水平，見表4、圖1。

圖1 北京地區(qū)12 463 例體檢者新型冠狀病毒特異性總抗體S/CO 值隨感染時間推移的變化情況

表4 北京地區(qū)12 463 例體檢者新型冠狀病毒特異性總抗體S/CO 值隨感染時間推移的變化情況

2.5 北京地區(qū)12 463 例體檢者3 種新型冠狀病毒特異性抗體研究值檢測結(jié)果總抗體S/CO 為（1 367.88±533.63） COI；IgG 抗體S/CO 為（18.96±6.42） COI；IgM抗體S/CO 為[0.19（0.1，0.45）]COI；其中總抗體S/CO（COI） ≥ 320 的受檢者占比為90.62%， ≥ 1 000 的受檢者占比為82.90%；IgG 抗體S/CO（COI） ≥ 10 的受檢者占比為89.84%，IgM 抗體S/CO（COI） ≥ 1 的受檢者占比為12.90%，見表5。

表5 北京地區(qū)12 463 例體檢者3 種新型冠狀病毒特異性抗體S/CO 值檢測結(jié)果

3 討論

2022 年6 月，頒布的《新型冠狀病毒肺炎防控方案（第九版）》[2]中：新型冠狀病毒血清抗體檢測可對核酸檢測進行有益補充，降低核酸漏檢概率，也可對接種疫苗的有效性進行判斷。感染或接種新型冠狀病毒疫苗后，機體產(chǎn)生相關(guān)抗體：IgM 抗體多在感染3～5 d 后出現(xiàn)陽性；IgG 抗體多在感染10～15 d 時產(chǎn)生，可長時間存在?！缎鹿诓《靖腥驹\療方案（試行第十版）》中指出：新型冠狀病毒感染者血清學(xué)檢測中，IgM、IgG 抗體陽性。

《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第九版）》中曾對IgM 和IgG 抗體的檢測方法學(xué)作出描述：由于試劑本身陽性判斷值原因，或體內(nèi)存在干擾物質(zhì)，抗體檢測可能會出現(xiàn)假陽性。為更準確反映感染新型冠狀病毒康復(fù)者人群體內(nèi)抗體的真實水平，本研究增加了總抗體檢測?？偪贵w檢測采用雙抗原夾心方法，其相較于捕獲法和間接法有如下優(yōu)勢：①可同時檢測包括IgM、IgG、免疫球蛋白A（IgA）等抗體[3]；②抗原抗體雙側(cè)特異性反應(yīng)，減少因特異性結(jié)合引起的假陽性；③由于反應(yīng)抗干擾性強，可使用更高濃度的包被抗原和標記抗原，加上提高加樣量至50 μL，進而提高靈敏度。此外，疫苗相關(guān)研究顯示，總抗體檢測采用刺突蛋白S-RBD 抗原原料，可反映疫苗接種后身體全部抗體情況[4]?！缎滦凸跔畈《緦嶒炇覚z測專家共識》[5]中也提出：多種類型的抗體聯(lián)合檢測可提高檢出率。既往國內(nèi)外研究中也顯示總抗體檢測靈敏度和特異性較高[6-7]，其可反映體內(nèi)接觸新型冠狀病毒后全部抗體的情況，所以將總抗體檢測也納入研究。

《新冠肺炎康復(fù)者恢復(fù)期血漿臨床治療方案（試行第三版）》中，新型冠狀病毒血清/血漿總抗體定性檢測呈陽性且320 倍稀釋后按照試劑說明書要求檢測仍為陽性反應(yīng)，才滿足捐獻血漿條件?？刹捎妹嘎?lián)免疫吸附實驗或化學(xué)發(fā)光法檢測?；瘜W(xué)發(fā)光平臺檢測的總抗體采用夾心法（S/CO ≥ 1 COI 為陽性），靈敏度更高，S/CO 檢測結(jié)果可能與體內(nèi)抗體水平相關(guān)性更佳[8]。

本研究中61 804 例體檢人群（多數(shù)為感染新型冠狀病毒康復(fù)者人群）的樣本，結(jié)果顯示：①總抗體的陽性率為97.91%，IgG 抗體的陽性率為95.97%，可能說明感染新型冠狀病毒康復(fù)后人群體內(nèi)基本上都產(chǎn)生了抗體?？偪贵w檢測陽性率高于IgG 抗體，且其S/CO（COI）檢測結(jié)果會隨著體內(nèi)抗體水平的升高而升高，反映體內(nèi)抗體產(chǎn)生的情況，具有極大的參考價值。②分析不同性別人群3 種抗體的檢測情況發(fā)現(xiàn)：男性體檢人群的總抗體、IgG 抗、IgM 抗體陽性率均顯著高于女性，提示在接觸新型冠狀病毒后，男性人群的身體的免疫反應(yīng)可能高于女性。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，新型冠狀病毒感染對免疫系統(tǒng)的影響與個人的性別有關(guān)，感染恢復(fù)后的男性通常比感染恢復(fù)后的女性表現(xiàn)出更強的免疫反應(yīng)[9-10]。③分析不同年齡人群3種抗體的檢測情況發(fā)現(xiàn)：總抗體陽性率隨年齡升高而略有降低，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義，IgG 抗體的陽性率隨年齡升高而降低，但是IgM 抗體則隨年齡升高IgM 陽性率升高，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。對于如上結(jié)果，可能是由于，一方面，因機體免疫功能隨年齡增長而降低；另一方面可能是由于老年人群外出活動或者社交沒有年輕人活躍，感染或者接觸到病毒較年輕人晚，所以抗體產(chǎn)生也晚于年輕人。④根據(jù)國家疾控官網(wǎng)上查找的2022 年12 月3 日至12 月5 日的北京地區(qū)新型冠狀發(fā)病例數(shù)，結(jié)合2023 年1 月3 日至1 月15 日在北京愛康國賓白石門診部體檢者的總抗體檢測平均值的變化發(fā)現(xiàn)，新型冠狀病毒感染1 個月后，感染新型冠狀病毒康復(fù)者人群基本上體內(nèi)維持著較高水平的抗體。國家疾控官網(wǎng)1 月25 日通報新型冠狀疫情全國核酸陽性和抗原陽性峰值在12 月22 日，北京的第一高峰在12 月上旬。北京地區(qū)這一樣品采樣的時間段正好吻合在北京疫情12 月上旬第一高峰后的3～4 周，反映了該病毒株具有很強的免疫原性，以及本次受檢人群具有很強的抗體免疫的反應(yīng)力。

本研究通過檢測3 種新型冠狀病毒特異性抗體，真實準確地顯現(xiàn)了接觸新型冠狀病毒后身體內(nèi)抗體產(chǎn)生的情況。由于北京地區(qū)納入研究的12 463 例體檢者有具體的S/CO（COI）數(shù)值結(jié)果，因此僅對北京地區(qū)新型冠狀病毒特異性總抗體、IgG 及IgM 抗體的S/CO 值檢測結(jié)果進行分析，結(jié)果顯示，總抗體S/CO 為（1 367.88±533.63）COI；IgG 抗體S/CO 為（18.96±6.42）COI；IgM 抗體S/CO 為[0.19 （0.1，0.45）]COI ；其中總抗體S/CO ≥ 320 COI的受檢者占比為90.62%，≥ 1 000 COI 的受檢者占比為82.90% ；IgG 抗體S/CO ≥ 10 COI 的受檢者占比為89.84%，IgM 抗體S/CO ≥ 1 COI 的受檢者占比為12.90%，由此可見，新型冠狀病毒感染1 個月后，總抗體及IgG 抗體均為較高水平，對新型冠狀病毒有一定的抵抗力，IgM 抗體陽性率為12.90%，說明仍存在一定數(shù)量的人群正在經(jīng)歷新型冠狀病毒感染。

綜上，對于2022 年12 月至2023 年2 月期間體檢人群，多數(shù)為感染新型冠狀病毒康復(fù)者人群，3 種新型冠狀病毒特異性抗體的檢測可以更清晰、準確地顯示體內(nèi)抗體產(chǎn)生的情況，95%以上的受檢者體內(nèi)產(chǎn)生了抗體；其中北京地區(qū)抗體檢測結(jié)果顯示大多數(shù)為高水平抗體指數(shù)，提示北京地區(qū)受檢者對本次疫情相關(guān)病毒株區(qū)域性高強度體液免疫墻已形成，也反映了女性及老年人群免疫反應(yīng)力相對較低的特征。后續(xù)如能做動態(tài)連續(xù)觀察，可能對抗體的變化情況會有更深入的了解，更利于采取個性化方案來防控感染。