外周血CC家族趨化因子配體21、CXC趨化因子受體7與陣發(fā)性房顫射頻消融術(shù)后早期復(fù)發(fā)的相關(guān)性分析

朱小山，周漢云，楊峰，張紅申，馬可忠

作者單位：湖北文理學(xué)院附屬醫(yī)院、襄陽市中心醫(yī)院心血管內(nèi)科，湖北 襄陽441021

心房顫動（房顫）是臨床常見的心律失常，會造成病人血管栓塞、心功能不全等，增加病人死亡率［1］。盡管射頻消融術(shù)是一種可有效減少房顫發(fā)生的治療方法，但臨床數(shù)據(jù)［2-3］顯示，射頻消融術(shù)后1～5年復(fù)發(fā)率為11%～29%，我國射頻消融術(shù)后總復(fù)發(fā)率約為22.9%。因此，尋找影響房顫射頻消融術(shù)后早期復(fù)發(fā)的因素有助于病人長期獲益。近年來研究［4］顯示，炎性因子不僅促進(jìn)房顫的發(fā)生、發(fā)展，還影響房顫結(jié)構(gòu)重構(gòu)過程。CC家族趨化因子配體21（C-C chemokine ligand 21，CCL21）是CC類趨化因子，能夠趨化免疫細(xì)胞定向移動到炎癥部位。Caidahl等［5］研究顯示，CCL21在急性冠狀動脈綜合征病人血清中水平上調(diào)，高水平CCL21急性冠狀動脈綜合征病人主要不良心血管事件風(fēng)險較高。CXC趨化因子受體7（CXC chemokine receptor type 7，CXCR7）可參與免疫反應(yīng)。Zhang等［6］報道，CXCR7激活通過促進(jìn)血管生成和減少心肌細(xì)胞凋亡來緩解心肌梗死后的心功能不全。基于此，現(xiàn)探討CCL21、CXCR7對陣發(fā)性房顫射頻消融術(shù)后早期復(fù)發(fā)評估價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 前瞻性分析2018年6月至2021年1月襄陽市中心醫(yī)院收治的122例接受射頻消融術(shù)治療陣發(fā)性房顫病人，房顫持續(xù)時間≤7 d。其中男82例，女40例，年齡范圍為35～64歲，年齡（50.74±8.19）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合指南中射頻消融術(shù)適應(yīng)證的陣發(fā)性房顫［7-8］；（2）首次行射頻消融術(shù)；（3）左心房無血栓；（4）病人或其近親屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并嚴(yán)重心臟瓣膜病；（2）肝腎功能嚴(yán)重不全、心功能分級Ⅲ～Ⅵ；（3）有心肌梗死史；（4）左心室射血分?jǐn)?shù)（left ventricular ejection fraction，LVEF）＜40%，左心房直徑（left atrial diameter，LAD）＞50 mm。本研究經(jīng)襄陽市中心醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)同意（批號2018-0419）。

1.2 方法

1.2.1 樣品采集 陣發(fā)性房顫組病人術(shù)后取靜脈血5 mL，然后4 ℃，3 000 r/min條件下，離心25 min，結(jié)束后收集上層血清，保存于-80 ℃條件下，待測。

1.2.2 檢測血清CCL21、CXCR7水平 采用酶聯(lián)免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法檢測血清中CCL21、CXCR7水平，操作步驟嚴(yán)格依據(jù)CCL21 ELISA試劑盒（貨號7338-50，臨沂艾澤拉斯生物科技有限公司）、CXCR7 ELISA試劑盒（貨號XG-E990018，上海西格生物科技有限公司）進(jìn)行。

1.3 收集病人一般資料 入院后，收集房顫病人基線水平臨床資料，包括性別、年齡、病程、冠心病史、糖尿病史、高血壓病史及超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、血紅蛋白（Hb）、血小板計數(shù)（PLT）、白細(xì)胞計數(shù)（WBC）、膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）水平。用超聲心動圖測量病人左心室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、左心房直徑（LAD）。

1.4 射頻消融術(shù)后隨訪 所有病人術(shù)后均服用抗心律失常藥（包括美托洛爾、索他洛爾、鹽酸普羅帕酮及胺碘酮），房性心動過速（房速）復(fù)發(fā)則停用抗心律失常藥。在房顫病人出院后，對其隨訪3個月，術(shù)后2～3個月均進(jìn)行心電圖檢查以評價房顫是否復(fù)發(fā)，判斷病人是否存在術(shù)后早期復(fù)發(fā)，將病人分為早期復(fù)發(fā)組（19例）和未早期復(fù)發(fā)組（103例）。早期復(fù)發(fā)定義：12導(dǎo)聯(lián)心電圖或動態(tài)心電圖捕捉到出現(xiàn)≥30 s的房顫或心房撲動、房性心動過速表現(xiàn)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用軟件SPSS 25.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計數(shù)資料用例（%）表示，采用χ2檢驗。符合正態(tài)分布的計量資料以表示，采用t檢驗。ROC法分析血清hs-CRP、TNF-α、CCL21、CXCR7及二者聯(lián)合檢測對陣發(fā)性房顫射頻消融術(shù)后早期復(fù)發(fā)的預(yù)測價值。logistic回歸分析影響陣發(fā)性房顫射頻消融術(shù)后早期復(fù)發(fā)的危險因素。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 陣發(fā)性房顫病人臨床基本資料 早期復(fù)發(fā)組、未早期復(fù)發(fā)組性別、年齡、病程、冠心病、糖尿病、高血壓比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），與未早期復(fù)發(fā)組相比，早期復(fù)發(fā)組病人LAD及血清CCL21、hs-CRP、TNF-α水平較高（P＜0.05），LVEF及血清CXCR7水平較低（P＜0.05）。見表1。

表1 射頻消融術(shù)治療的陣發(fā)性房顫122例一般資料比較

2.2 血清hs-CRP、TNF-α、CCL21、CXCR7對陣發(fā)性房顫術(shù)后早期復(fù)發(fā)的預(yù)測價值分析 ROC結(jié)果顯示，血清hs-CRP、TNF-α水平預(yù)測術(shù)后早期復(fù)發(fā)的曲線下面積（area under the curve，AUC）分別為0.81、0.82，血清CCL21、CXCR7水平預(yù)測術(shù)后早期復(fù)發(fā)的AUC分別為0.88、0.87，二者聯(lián)合預(yù)測術(shù)后早期復(fù)發(fā)的AUC為0.94，其中二者聯(lián)合預(yù)測的AUC值高于hs-CRP、TNF-α、單獨預(yù)測的AUC值（Z=2.20，P＜0.05；Z=1.70，P＜0.05），二者聯(lián)合預(yù)測的AUC值CCL21、CXCR7單獨預(yù)測的AUC值相比，（Z=1.06，P=0.143；Z=1.31，P=0.095），見表2。

表2 hs-CRP、TNF-α、CCL21、CXCR7對陣發(fā)性房顫術(shù)后早期復(fù)發(fā)的預(yù)測價值

2.3 logistic回歸分析陣發(fā)性房顫射頻消融術(shù)后早期復(fù)發(fā)的影響因素 以陣發(fā)性房顫射頻消融術(shù)后是否發(fā)生早期復(fù)發(fā)為因變量（未早期復(fù)發(fā)=0，早期復(fù)發(fā)=1），以LAD、LVEF、hs-CRP、TNF-α、CCL21、CXCR7為自變量（LAD、LVEF、hs-CRP、TNF-α為連續(xù)變量，CCL21＜138.36 ng/L=0，CCL21≥138.36 ng/L=1；CXCR7＞2 113.83 μg/L=0，CXCR7≤2 113.83 μg/L=1），進(jìn)行l(wèi)ogistic回歸分析，結(jié)果顯示，高LAD值、CCL21≥138.36 ng/L、CXCR7≤2 113.83μg/L是陣發(fā)性房顫射頻消融術(shù)后早期復(fù)發(fā)的危險因素（P＜0.05），高LVEF值是陣發(fā)性房顫射頻消融術(shù)后早期復(fù)發(fā)的保護(hù)因素（P＜0.05）。LAD每增加1 mm，病人術(shù)后早期復(fù)發(fā)風(fēng)險增加1.675倍，LVEF每升高1%，病人術(shù)后早期復(fù)發(fā)風(fēng)險降低0.622倍，CCL21≥138.36 ng/L病人術(shù)后早期復(fù)發(fā)風(fēng)險是CCL21＜138.36 ng/L病人1.764倍，CXCR7≤2 113.83 μg/L病人術(shù)后早期復(fù)發(fā)風(fēng)險是CXCR7＞2 113.83 μg/L病人1.655倍（表3）。

表3 logistic回歸分析陣發(fā)性房顫射頻消融術(shù)后早期復(fù)發(fā)的影響因素

3 討論

房顫的發(fā)生機(jī)制比較復(fù)雜，其病理基礎(chǔ)是心房基質(zhì)的纖維化，左心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)，進(jìn)而引起心房擴(kuò)大、心肌間質(zhì)纖維化，這一過程涉及多種炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激反應(yīng)［9-10］。臨床研究［11］顯示，炎性因子是心房纖維化的啟動因子，炎癥可刺激心房纖維化的多種成分，促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖、遷移并向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化。因此尋找炎性因子與房顫射頻消融術(shù)后早期復(fù)發(fā)的相關(guān)性，降低房顫射頻消融術(shù)后早期復(fù)發(fā)率，對提高房顫病人術(shù)后生活質(zhì)量具有重要意義。

CCL21屬于CC型趨化因子家族，主要表達(dá)于淋巴管、內(nèi)皮小靜脈及淋巴結(jié)的T細(xì)胞區(qū)域及基質(zhì)細(xì)胞內(nèi)，位于染色體9q13上，其序列與其他CC型趨化因子有21%～32%的相似性。在體內(nèi)，CCL21需要結(jié)合趨化因子受體7（CCR7）才能發(fā)揮趨化作用；CCL21/CCR7廣泛表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞及纖維細(xì)胞等非淋巴細(xì)胞組織，并參與炎癥調(diào)節(jié)、平滑肌細(xì)胞增殖等生物學(xué)效應(yīng)［12］。成熟的樹突狀細(xì)胞具有分泌CCR7功能，CCL21與成熟的樹突狀細(xì)胞可相互作用，誘導(dǎo)炎性反應(yīng)形成，參與體液免疫應(yīng)答［13］。CCL21可通過調(diào)控炎癥反應(yīng)而造成冠狀動脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定，誘導(dǎo)急性心肌梗死發(fā)生［14］。本研究發(fā)現(xiàn)早期復(fù)發(fā)組病人血清CCL21水平明顯高于未早期復(fù)發(fā)組，且ROC結(jié)果顯示，血清CCL21水平預(yù)測陣發(fā)性房顫病人術(shù)后早期復(fù)發(fā)的AUC為0.88，靈敏度為89.50%，特異度為90.30%，提示CCL21可能對陣發(fā)性房顫病人術(shù)后早期復(fù)發(fā)有預(yù)測價值。

CXCR7位于染色體2q37上，廣泛表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞中，在調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、血管生成及腫瘤的器官特異性轉(zhuǎn)移中扮演關(guān)鍵角色［15］。近年來新發(fā)現(xiàn)CXCR7是CXC型趨化因子配體12（CXCL12）的新受體，CXCR7與CXCL12特異性結(jié)合，在機(jī)體肺、心、肝臟等中廣泛存在，可調(diào)控許多重要的生物過程，例如細(xì)胞增殖，侵襲，遷移及黏附［16］。Shen等［17］研究顯示，過表達(dá)的CXCR7可通過調(diào)控Wnt/β-Catenin通路抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞纖維化。Zhang等［18］研究報道，CXCR7高表達(dá)可抑制心肌梗死小鼠體內(nèi)炎癥反應(yīng)及巨噬細(xì)胞遷移至損傷部位，并改善心肌梗死后心肌損傷。本研究發(fā)現(xiàn)，早期復(fù)發(fā)組病人血清CXCR7水平較未早期復(fù)發(fā)組低，且ROC曲線顯示，血清CXCR7水平預(yù)測陣發(fā)性房顫病人術(shù)后早期復(fù)發(fā)的AUC為0.87，提示CXCR7可能對陣發(fā)性房顫病人術(shù)后早期復(fù)發(fā)有一定預(yù)測價值，猜測CXCR7可能通過調(diào)控陣發(fā)性房顫病人術(shù)后心肌纖維化或心肌損傷而影響房顫早期復(fù)發(fā)。TNF-α參與機(jī)體炎癥及免疫反應(yīng)，心房細(xì)胞傳導(dǎo)阻滯與離散度增加與房顫的發(fā)生息息相關(guān)，而過程是通過TNF-α介導(dǎo)炎癥應(yīng)激反應(yīng)，影響心房傳導(dǎo)［19］。CCL21聯(lián)合CXCR7預(yù)測陣發(fā)性房顫病人術(shù)后早期復(fù)發(fā)的AUC為0.94，靈敏度為84.20%，特異度為95.10%，高于hs-CRP、TNF-α單獨預(yù)測陣發(fā)性房顫病人術(shù)后早期復(fù)發(fā)的AUC，提示CCL21聯(lián)合CXCR7可提高預(yù)測陣發(fā)性房顫病人術(shù)后早期復(fù)發(fā)的價值。臨床上接受射頻消融術(shù)治療的房顫病人出院后，復(fù)診時，應(yīng)檢測病人血清CCL21、CXCR7水平，早期評估病人射頻消融術(shù)治療后臨床結(jié)局。以往研究［20］報道，年齡、房顫病程、LAD、LVEF等因素影響心房顫動病人射頻消融術(shù)后復(fù)發(fā)。本研究logistic回歸分析，LAD、CCL21≥138.36 ng/L、CXCR7≤2 113.83 μg/L是陣發(fā)性房顫病人術(shù)后早期復(fù)發(fā)的危險因素，高LVEF值是陣發(fā)性房顫射頻消融術(shù)后早期復(fù)發(fā)的保護(hù)因素，表明除LAD、LVEF外，CCL21、CXCR7也影響陣發(fā)性房顫病人術(shù)后早期復(fù)發(fā)，提示CCL21水平越高、CXCR7水平越低，陣發(fā)性房顫病人射頻消融術(shù)后早期復(fù)發(fā)的風(fēng)險越高。