血清趨化素、網(wǎng)膜素-1水平與缺血性腦血管病頸動(dòng)脈狹窄的相關(guān)性

張樂國(guó)，賈建普，王麗軒，洪震，張俊玲，朱翠敏

作者單位：滄州市中心醫(yī)院，a神經(jīng)內(nèi)八科，b神經(jīng)內(nèi)二科，c神經(jīng)血管介入科，d兒內(nèi)五科，河北 滄州061001

缺血性腦血管病（ischemic cerebrovascular disease，ICVD）占據(jù)腦血管疾病的70%，病理原因多為動(dòng)脈粥樣硬化造成的血管堵塞，從而引起局部腦組織缺血壞死［1］。ICVD致死率、致殘率高，嚴(yán)重威脅人們生活質(zhì)量和生命健康。數(shù)字減影血管造影（digital subtraction angiography，DSA）技術(shù)可檢查病人頸動(dòng)脈狹窄程度，從而評(píng)估病情程度，但屬于有創(chuàng)性檢查，重復(fù)率及病人接受度受到一定限制［2］。因此尋找簡(jiǎn)單、快捷的血清因子對(duì)準(zhǔn)確評(píng)估病人疾病發(fā)展進(jìn)程及干預(yù)治療是意義重大。趨化素是在脂肪細(xì)胞中呈高表達(dá)，與其受體相結(jié)合而促進(jìn)脂肪細(xì)胞分解、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)、脂質(zhì)代謝等，且能夠加重機(jī)體的炎癥反應(yīng)［3］。近年來研究發(fā)現(xiàn)，趨化素在肥胖、相關(guān)代謝綜合征和心血管疾病相關(guān)的疾病中發(fā)揮著重要作用［4］。網(wǎng)膜素-1是網(wǎng)膜素家族中一個(gè)亞型，由血管基質(zhì)細(xì)胞分泌，具有抑制血管黏附分子表達(dá)作用，在細(xì)胞內(nèi)皮損傷修復(fù)，抑制血管病變及抗炎中發(fā)揮重要作用［5］。目前趨化素和網(wǎng)膜素-1在心血管疾病中的研究較多，而涉及腦血管疾病的文獻(xiàn)較少，故本研究旨在探究血清趨化素、網(wǎng)膜素-1水平與ICVD病人頸動(dòng)脈狹窄的相關(guān)性，以期為臨床診治提供價(jià)值參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年2月至2020年1月在滄州市中心醫(yī)院接受治療的ICVD病人且行腦部DSA檢查者60例為研究對(duì)象，其中男35例，女25例，年齡范圍為45～80歲，年齡（59.65±9.13）歲，BMI（24.82±4.68）kg/m2。并選擇同期30例健康體檢者為對(duì)照組，其中男19例，女11例，年齡范圍為45～80歲，年齡（60.53±9.25）歲，BMI（24.11±4.62）kg/m2，兩組病人基線資料均差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：①根據(jù)檢查標(biāo)準(zhǔn)發(fā)現(xiàn)腦動(dòng)脈狹窄，明確診斷為ICVD［6］；②無(wú)其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病。③腦部未進(jìn)行過嚴(yán)重?fù)p傷者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患惡性腫瘤者；②患心、肝、腎等嚴(yán)重疾病者；③患自身免疫性疾??；④血液病、腫瘤、腦血管畸形等引起的ICVD；⑤患精神性疾病，不能積極配合治療者。本研究?jī)?nèi)容均經(jīng)病人及其近親屬了解并簽字。本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。

1.2 方法

1.2.1 DSA檢查 DSA檢查及分組：ICVD病人均接受DSA檢查，同組醫(yī)師完成顱內(nèi)動(dòng)脈、顱外動(dòng)脈檢查。病人顱內(nèi)、外腦大動(dòng)脈≥1支，血管狹窄率≥50%者納入中重度狹窄組；顱內(nèi)、外腦大動(dòng)脈≥1支，血管狹窄率＜50%者納入輕度狹窄組。

1.2.2 血樣采集 病人入組后進(jìn)行10 h的禁食，次日清晨采取靜脈血4 mL并靜置1 h左右，在3 000 r/min條件下離心10 min，取血清于EP管內(nèi)，-80 ℃冰箱中保存待測(cè)。

1.2.3 血清趨化素、網(wǎng)膜素-1水平檢測(cè) 采用雙抗體夾心免疫吸附法檢測(cè)血清趨化素、網(wǎng)膜素-1水平，參照人趨化素、網(wǎng)膜素-1酶聯(lián)免疫吸附試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司）說明操作。

1.2.4 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo) 對(duì)所有病人進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測(cè)，包括收縮壓（systolic blood pressure，SBP）、舒張壓（diastolic blood pressure，DBP）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglycerides，TG）、空腹血糖（fasting plasma glucose，F(xiàn)PG）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）和C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）。TC、TG、FPG、HDL-C和LDL-C采用BS-350S全自動(dòng)生化分析儀（南京貝登醫(yī)療股份有限公司）進(jìn)行檢測(cè)；CRP采用免疫比濁法進(jìn)行測(cè)定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)分析選擇軟件SPSS 23.0，采用表示計(jì)量資料，兩組間行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，組間有差異進(jìn)一步采用SNK-q檢驗(yàn)，用例（%）表示計(jì)數(shù)資料，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。Pearson相關(guān)性分析趨化素、網(wǎng)膜素-1與實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的關(guān)系。ROC曲線分析趨化素、網(wǎng)膜素-1對(duì)病人發(fā)生中重度狹窄的評(píng)估價(jià)值。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同狹窄程度病人一般臨床資料比較 ICVD病人行腦部DSA檢查后分為輕度狹窄組30例和中重度狹窄組30例。兩組一般臨床資料均差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。見表1。

表1 頸動(dòng)脈輕度狹窄組30例和頸動(dòng)脈中重度狹窄組30例一般臨床資料比較

2.2 三組血清趨化素、網(wǎng)膜素-1水平比較 與對(duì)照組相比，輕度狹窄組和中重度狹窄組病人血清趨化素水平依次升高，而網(wǎng)膜素-1水平依次下降，均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 對(duì)照組、頸動(dòng)脈輕度狹窄組和中重度狹窄組血清趨化素、網(wǎng)膜素-1水平比較/

表2 對(duì)照組、頸動(dòng)脈輕度狹窄組和中重度狹窄組血清趨化素、網(wǎng)膜素-1水平比較/

注：①與對(duì)照組相比，P＜0.05。②與輕度狹窄組相比，P＜0.05。

組別對(duì)照組輕度狹窄組中重度狹窄組F值P值網(wǎng)膜素-1/（ng/L）51.18±6.94 32.41±5.48①25.65±4.06①②166.32＜0.001例數(shù)30 30 30趨化素/（μg/L）74.61±8.47 93.42±12.53①121.68±16.42①②101.37＜0.001

2.3 三組病人實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測(cè)水平 與對(duì)照組相比，輕度狹窄組和中重度狹窄組SBP、TG、FPG和CRP水平均升高，而HDL-C水平降低（P＜0.05）。與輕度狹窄組相比，中重度狹窄組SBP、TG、FPG、CRP和LDL-C升高，而HDL-C降低（P＜0.05）。見表3。

表3 對(duì)照組、頸動(dòng)脈輕度狹窄組和中重度狹窄組實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測(cè)水平比較/

表3 對(duì)照組、頸動(dòng)脈輕度狹窄組和中重度狹窄組實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測(cè)水平比較/

注：SBP為收縮壓，DBP為舒張壓，TC為總膽固醇，TG為三酰甘油，F(xiàn)PG為空腹血糖，CRP為C反應(yīng)蛋白，LDL-C為低密度脂蛋白膽固醇，HDL-C為高密度脂蛋白膽固醇。①與對(duì)照組相比，P＜0.05。②與輕度狹窄組相比，P＜0.05。

P值＜0.001 0.168 0.079＜0.001 0.158＜0.001＜0.001＜0.001指標(biāo)SBP/mmHg DBP/mmHg TC/（mmol/L）TG/（mmol/L）FPG/（mmol/L）CRP/（mg/L）LDL-C/（mmol/L）HDL-C/（mmol/L）對(duì)照組（n=30）124.35±11.27 76.48±9.84 4.53±0.65 1.26±0.23 5.46±0.51 5.01±0.76 2.43±0.42 1.51±0.41輕度狹窄組（n=30）138.47±14.85①79.24±10.36 4.79±0.77 1.94±0.33①5.68±0.62①8.36±1.01①2.61±0.44 1.27±0.28①中重度狹窄組（n=30）151.32±16.74①②81.75±11.79 4.98±0.86 2.26±0.41①②5.75±0.67①②11.27±1.67①②3.27±0.73①②1.03±0.21①②F值26.09 1.82 2.62 71.15 1.88 201.33 19.50 17.84

2.4 Pearson相關(guān)性分析趨化素、網(wǎng)膜素-1與實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的關(guān)系 Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，趨化素與SBP、CRP和LDL-C呈顯著正相關(guān)，網(wǎng)膜素-1與SBP、CRP呈顯著負(fù)相關(guān)，與HDL-C呈顯著正相關(guān)（P＜0.05）。見表4。

表4 Pearson相關(guān)性分析檢驗(yàn)趨化素、網(wǎng)膜素-1與實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的關(guān)系

2.5 ROC曲線分析趨化素、網(wǎng)膜素-1對(duì)病人發(fā)生中重度狹窄的評(píng)估價(jià)值 ROC曲線分析趨化素、網(wǎng)膜素-1截?cái)嘀捣謩e為106.71 μg/L、29.23 ng/L，對(duì)病人發(fā)生中重度狹窄的評(píng)估曲線下面積（AUC）分別為0.86、0.83，95%CI：（0.76，1.00）、 9（0.72，0.94），靈敏度分別為80.00%、80.00%，特異度分別為83.30%、76.70%。

3 討論

ICVD是臨床病死率僅次于心臟病、腫瘤的嚴(yán)重神經(jīng)系統(tǒng)疾病，且發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，并逐步年輕化［7］。研究表明動(dòng)脈粥樣硬化是ICVD的危險(xiǎn)因素，病人頸動(dòng)脈狹窄造成血液成分及血流動(dòng)發(fā)生改變，從而造成腦部組織缺氧、缺血，導(dǎo)致腦部供血功能發(fā)生障礙［8］。ICVD容易引發(fā)病人語(yǔ)言功能、肢體功能、神經(jīng)障礙等嚴(yán)重癥狀，甚至發(fā)生腦梗死［9］。因此早期診斷頸動(dòng)脈狹窄程度對(duì)降低ICVD病人致死率和致殘率是十分有必要的。

2007年確認(rèn)新型脂肪細(xì)胞因子趨化素可參與機(jī)體的多種生理過程，包括調(diào)控糖脂代謝、炎性反應(yīng)和免疫反應(yīng)。趨化素可促進(jìn)炎性因子分泌，同時(shí)炎性因子也可促進(jìn)趨化素表達(dá)，進(jìn)而影響動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展［10］。Kammerer等［11］研究表明，晚期頸動(dòng)脈狹窄病人趨化素水平較健康對(duì)照組更高，且與CRP等炎癥相關(guān)參數(shù)相關(guān)，另外高水平趨化素還將增加病人冠狀動(dòng)脈疾病患病風(fēng)險(xiǎn)。王麗軒等［12］研究發(fā)現(xiàn)，趨化素因子在ICVD病人中表達(dá)上調(diào)，且其水平隨著動(dòng)脈狹窄程度的加劇而升高，提示趨化素參與ICVD疾病的發(fā)展。

網(wǎng)膜素是從人網(wǎng)膜脂肪組織中發(fā)現(xiàn)的一種特異度脂肪因子，包含網(wǎng)膜素-1和網(wǎng)膜素-2兩個(gè)亞型，其中網(wǎng)膜素-1是人體中主要的存在形式，以保護(hù)因子的角色存在，對(duì)血管的內(nèi)皮功能具有穩(wěn)定作用，還具有抗炎效果［13］。有研究推測(cè)其機(jī)制可能是網(wǎng)膜素-1水平下降時(shí)，加重機(jī)體炎性反應(yīng)，從而加速血管發(fā)生病變，導(dǎo)致動(dòng)脈狹窄，血管供血中斷［14］。Xu等［15］研究發(fā)現(xiàn)在缺血性卒中病人中，存在不穩(wěn)定頸動(dòng)脈斑塊的血清網(wǎng)膜素-1水平較穩(wěn)定斑塊顯著降低。賀旭東［16］研究還發(fā)現(xiàn)缺血性腦卒中合并多發(fā)性硬化組病人血清網(wǎng)膜素-1水平明顯低于健康對(duì)照組及缺血性腦卒中單病組，且對(duì)病人神經(jīng)功能殘疾情況可進(jìn)行有效評(píng)估。徐品麗等［17］研究發(fā)現(xiàn)，急性腦梗死（ACI）病人發(fā)病＜48 h及第7天血清趨化素水平較非ACI者顯著增高，網(wǎng)膜素-1水平顯著降低，且與腦梗死面積、神經(jīng)功能缺損程度、預(yù)后情況存在一定聯(lián)系。

Baig等［18］研究發(fā)現(xiàn)，與健康受試者相比，急性心肌梗死病人血清網(wǎng)膜素水平明顯降低，且與TC、TG呈正相關(guān)，與HDL-C呈負(fù)相關(guān)，而趨化素和hs-CRP水平顯著升高。本研究與對(duì)照組相比，輕度狹窄組和中重度狹窄組血清趨化素水平依次升高，而網(wǎng)膜素-1水平依次下降，與Baig等［18］結(jié)果相似，提示血清趨化素、網(wǎng)膜素-1可能參與調(diào)控ICVD疾病的發(fā)生、發(fā)展。對(duì)比其他指標(biāo)，研究顯示SBP、TG、FPG、CRP和LDL-C水平隨著病人血管狹窄程度加深而升高，HDL-C水平而隨之降低。Pearson相關(guān)性分析進(jìn)一步顯示，趨化素與SBP、CRP和LDL-C呈顯著正相關(guān)，網(wǎng)膜素-1與SBP、CRP呈顯著負(fù)相關(guān)，與HDL-C呈顯著正相關(guān)。提示趨化素、網(wǎng)膜素-1與血壓、血脂、血糖水平和炎癥有關(guān)，兩者水平在一定程度可反映ICVD病人疾病進(jìn)程和動(dòng)脈狹窄程度。ROC曲線分析趨化素、網(wǎng)膜素-1對(duì)病人發(fā)生中重度狹窄的AUC分別為0.86、0.83，靈敏度分別為80.00%、80.00%，特異度分別為83.30%、76.70%，提示趨化素、網(wǎng)膜素-1對(duì)ICVD病人發(fā)生中重度狹窄有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值，臨床中對(duì)兩者水平進(jìn)行及時(shí)檢測(cè)，對(duì)評(píng)估疾病有重要意義。

綜上所述，ICVD病人血清趨化素、網(wǎng)膜素-1水平表達(dá)異常，且與頸動(dòng)脈狹窄程度存在密切的聯(lián)系，可能是評(píng)估ICVD疾病發(fā)展程度的潛在標(biāo)志物。但本研究仍存在一些缺點(diǎn)，后期將進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，探究ICVD病理機(jī)制，從而為ICVD早期診斷及制定合理的預(yù)防策略和治療方案提供可靠依據(jù)。