基于中西醫(yī)臨床病癥特點(diǎn)的腎癌動(dòng)物模型分析

周天豹，佘琳靜，喻帥克，王連睿，白明，苗明三（河南中醫(yī)藥大學(xué)，河南 鄭州 450046）

腎細(xì)胞癌（renal cell carcinoma，RCC）簡(jiǎn)稱腎癌，是腎實(shí)質(zhì)泌尿小管上皮系統(tǒng)的惡性腫瘤，以血尿、腰痛和腹部腫塊為主要臨床表現(xiàn)[1]。其他常見癥狀及體征有正細(xì)胞正色素性貧血、發(fā)熱及消瘦，也可合并有高血壓、紅細(xì)胞增多癥、非腫瘤轉(zhuǎn)移引起的肝功能異常、高鈣血癥等[2]。據(jù)調(diào)查，腎癌在我國(guó)泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤發(fā)病率中占第二位，僅次于膀胱腫瘤[3]，且發(fā)病率逐年上升[4]，嚴(yán)重威脅人類生命健康。

目前西醫(yī)治療腎細(xì)胞癌的方法主要包括手術(shù)、化療、放療、生物治療、熱療及靶向治療等。中醫(yī)則依據(jù)傳統(tǒng)辨證論治，多采用中藥湯劑內(nèi)服法治療[5]。近年來臨床趨向于采用熱療、生物治療及靶向治療[6]。西醫(yī)治療后常伴有后遺癥，有些患者術(shù)后并不理想，有數(shù)據(jù)顯示，中藥參與聯(lián)合用藥，能夠提高患者治愈及好轉(zhuǎn)率，改善患者生命質(zhì)量[7]；并且中醫(yī)綜合性護(hù)理能夠減少術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生，縮短康復(fù)周期[8]，因此優(yōu)化腎癌臨床治療中的方案很有必要。而通過建立中西醫(yī)結(jié)合動(dòng)物模型，能夠幫助認(rèn)識(shí)疾病病因、疾病發(fā)展以及優(yōu)化治療方案，旨在臨床上提高患者治愈率，改善患者術(shù)后心理狀態(tài)及生活質(zhì)量。現(xiàn)今動(dòng)物模型大多采用手術(shù)，復(fù)制臨床上的癥狀，忽略了病因，難以體現(xiàn)中醫(yī)的“證候” “病癥結(jié)合”等因素，而這不利于腎癌的相關(guān)研究。因此，建立一種準(zhǔn)確、規(guī)范的中西醫(yī)病癥結(jié)合腎癌動(dòng)物模型是今后腎癌相關(guān)研究的重點(diǎn)。

本文通過對(duì)現(xiàn)有腎癌動(dòng)物模型文獻(xiàn)的整理歸納，收集腎癌中西醫(yī)病因病機(jī)相關(guān)資料，整理中西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)并進(jìn)行權(quán)重賦值，比較動(dòng)物模型疾病癥狀與臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)的吻合程度，對(duì)動(dòng)物模型進(jìn)行中西醫(yī)吻合度評(píng)價(jià)，并提出完善模型的建議，以期對(duì)腎癌發(fā)病機(jī)制的深入研究和治療方案的優(yōu)化提供基礎(chǔ)。

1 腎細(xì)胞癌病因病機(jī)

1.1 西醫(yī)病因病機(jī)目前對(duì)腎細(xì)胞癌發(fā)病的原因尚未完全清楚。據(jù)相關(guān)調(diào)查[9]發(fā)現(xiàn)，食物、藥物、吸煙、肥胖、職業(yè)、放射、經(jīng)濟(jì)文化背景、輸血史、糖尿病、利尿劑、飲酒、高血壓、家族史等因素可能與腎腫瘤發(fā)病有關(guān)。也有研究[10]發(fā)現(xiàn)腎癌發(fā)病與接觸有害物質(zhì)如芳香族碳?xì)浠衔?、芳香胺、黃曲霉素、激素、放射線、病毒等有關(guān)。腎細(xì)胞癌的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，但有研究[11-13]發(fā)現(xiàn)腎癌的發(fā)生與缺氧、腫瘤抑制基因失活、炎癥、內(nèi)分泌環(huán)境改變等密切相關(guān)。

1.2 中醫(yī)病因病機(jī)中醫(yī)文獻(xiàn)中并無“腎癌”的病名，因其臨床主要表現(xiàn)為痛性血尿、腰痛、腰部或上腹部腫塊，因此常將腎癌歸屬于中醫(yī)學(xué)“尿血”“癥積”“腎積”“中石疽”等范疇[14]。早在《靈樞·百病始生》篇中就有類似腎癌的相關(guān)記載：“其著于膂筋，在腸后者饑則積見，按之不得。其著于輸之脈者，閉塞不通，津液不下，孔竅干壅”。而《瘍醫(yī)大全》中對(duì)腎癌的癥狀也有所描述：“石疽生腰胯之間，肉色不變，堅(jiān)硬如石，經(jīng)月不變，若黑陷不起，麻木不痛，嘔噦不食，精神昏亂，脈散或代者死”[15]。隨著腎細(xì)胞癌病因病機(jī)理論研究的不斷發(fā)展，多數(shù)醫(yī)家認(rèn)為，腎虛是腎癌發(fā)病的主要原因[16]?；艚楦裾J(rèn)為，脾腎虧虛是腎癌發(fā)病之本[17]。王蘭英認(rèn)為腎癌的發(fā)生乃是正氣虧虛，氣血不足，邪毒侵襲人體，致使體內(nèi)經(jīng)絡(luò)壅塞不通，腎絡(luò)虧虛，癌毒隨經(jīng)絡(luò)所虛之處而留止，日久則形成腎癌[18]。賈英杰教授認(rèn)為腎癌發(fā)病的根本原因在于脾腎虧虛，濁邪是腎癌發(fā)生發(fā)展的重要因素[19]。除此之外，也有學(xué)者認(rèn)為肝、脾、腎三臟功能失調(diào)、痰瘀毒互結(jié)、外受濕邪、濕熱下注和勞累過度等是腎癌病因[15]。

2 腎細(xì)胞癌中西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)及臨床特點(diǎn)

2.1 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)及臨床表現(xiàn)西醫(yī)主要采用影像學(xué)診斷、病理學(xué)診斷以及化驗(yàn)檢測(cè)等方式，結(jié)合患者病史、癥狀對(duì)腎細(xì)胞癌做出臨床診斷。西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參照中國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)（CSCO）發(fā)布的《腎癌診療指南2022》[20]以及相關(guān)文獻(xiàn)研究[21]，按照模型評(píng)價(jià)新方法[22-24]，將動(dòng)物模型診斷標(biāo)準(zhǔn)總結(jié)為核心指標(biāo)3 項(xiàng)：影像學(xué)診斷、病理學(xué)檢查以及細(xì)胞學(xué)檢查，每項(xiàng)賦值20%。直接相關(guān)指標(biāo)2項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)室檢查、臨床癥狀，每項(xiàng)賦值15%；其中臨床癥狀中的血尿、腫塊以及腰痛，每項(xiàng)賦值5%。間接相關(guān)指標(biāo)2 項(xiàng)：腎外表現(xiàn)和分期診斷，每項(xiàng)賦值5%?？偡?00%。量化積分權(quán)重由指標(biāo)分類觀察得出的貢獻(xiàn)度進(jìn)行計(jì)算[25]。具體見表1。

表1 腎細(xì)胞癌（RCC）西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Diagnostic criteria for western medicine

2.2 中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)及臨床表現(xiàn)參照現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)，即中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)發(fā)布的《腫瘤中醫(yī)診療指南》中的《腎癌》[26]指南，對(duì)其中的中醫(yī)診斷、辨證進(jìn)行歸納總結(jié)，可分為以下4 個(gè)證型：腎虛毒聚證、濕熱瘀毒證、氣血雙虧證、陰虛火旺證。主癥包括：①血尿；②腰部腫塊；③腰酸痛，符合一項(xiàng)賦值20%。次癥包括：①低熱；②口干；③神疲乏力；④消瘦，符合一項(xiàng)賦值10%，總分值100%。具體見表2。

表2 腎細(xì)胞癌（RCC）中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)Table 2 Diagnostic criteria of traditional Chinese medicine for renal cell carcinoma（RCC）

3 基于中西醫(yī)臨床病癥特點(diǎn)的動(dòng)物模型評(píng)價(jià)方法

動(dòng)物模型是現(xiàn)代醫(yī)藥研究領(lǐng)域重要的的研究方法與研究手段，在疾病研究、藥物篩選、毒副作用探究等方面具有重要作用。對(duì)動(dòng)物模型進(jìn)行準(zhǔn)確客觀的評(píng)價(jià)，能夠促進(jìn)動(dòng)物模型的修正與改進(jìn)，使其與臨床疾病更接進(jìn)，能更好地促進(jìn)醫(yī)藥、生命事業(yè)的發(fā)展。目前動(dòng)物模型研究偏向病癥結(jié)合動(dòng)物模型，因此在對(duì)動(dòng)物模型進(jìn)行評(píng)價(jià)時(shí)，要基于中西醫(yī)臨床病癥特點(diǎn)，進(jìn)行統(tǒng)籌評(píng)估，以便建立系統(tǒng)、客觀且準(zhǔn)確的動(dòng)物模型。

3.1 動(dòng)物模型評(píng)估依據(jù)參照權(quán)威最新的中醫(yī)、西醫(yī)臨床病癥診斷標(biāo)準(zhǔn)（必要時(shí)可參考療效標(biāo)準(zhǔn)），作為動(dòng)物模型的評(píng)估依據(jù)。本文中醫(yī)標(biāo)準(zhǔn)參照中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)發(fā)布的《腫瘤中醫(yī)診療指南》中的《腎癌》[26]診療指南，西醫(yī)標(biāo)準(zhǔn)參照中國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)（CSCO）發(fā)布的《腎癌診療指南2022》[20]以及相關(guān)研究[27]，作為本文動(dòng)物模型評(píng)估的最新權(quán)威診斷標(biāo)準(zhǔn)。

3.2 動(dòng)物模型評(píng)價(jià)方法通過觀察動(dòng)物疾病癥狀與臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)的吻合程度，來評(píng)估模型的吻合度。

中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)中醫(yī)的“望、聞、問、切”，收集模型動(dòng)物的毛發(fā)狀態(tài)、舌下脈絡(luò)、應(yīng)激反應(yīng)、聲音和氣味、體質(zhì)量、心率等信息，然后按照中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)發(fā)布的中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)，將癥狀表現(xiàn)與疾病直接相關(guān)者列為主證（Ⅰ級(jí)指標(biāo)），與疾病間接相關(guān)者作為次證（Ⅱ級(jí)指標(biāo)），見表3。

表3 中西醫(yī)臨床病癥特點(diǎn)動(dòng)物模型評(píng)價(jià)Table 3 Evaluation for animal models of clinical symptoms characteristics of traditional Chinese and western medicine

西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)中國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)（CSCO）發(fā)布的西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)，收集行為體征等表觀指標(biāo)信息與病理檢查、生化檢查、影像學(xué)檢查等檢測(cè)指標(biāo)信息，按其權(quán)重占比分為核心指標(biāo)（Ⅰ級(jí)指標(biāo)）、直接相關(guān)指標(biāo)（Ⅱ級(jí)指標(biāo)）、間接相關(guān)指標(biāo)（Ⅲ級(jí)指標(biāo)），見表3。

3.3 動(dòng)物模型的吻合度評(píng)價(jià)[22]將中西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)中各類診斷指標(biāo)按Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)指標(biāo)進(jìn)行分類，再分別按權(quán)重100%進(jìn)行量化分配，見表3。同一類的指標(biāo)，其組成的小指標(biāo)目前按同一權(quán)重值進(jìn)行賦值，例如某一類指標(biāo)有5項(xiàng)小指標(biāo)，積分時(shí)每項(xiàng)小指標(biāo)都為20%。如果同一類的指標(biāo)中有對(duì)疾病診斷特別重要的指標(biāo)，可參考指標(biāo)分類時(shí)的權(quán)重比，對(duì)同一類指標(biāo)中的小指標(biāo)再進(jìn)行一次權(quán)重賦值。計(jì)算出動(dòng)物模型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ類指標(biāo)各自的總積分，乘以相應(yīng)指標(biāo)的權(quán)重，將三類指標(biāo)權(quán)重積分加和，即該類動(dòng)物模型制備成功時(shí)的總積分。

4 腎細(xì)胞癌動(dòng)物模型研究現(xiàn)狀分析

腎細(xì)胞癌動(dòng)物模型目前常用的建模方法有自發(fā)性模型、誘發(fā)性模型、移植瘤模型以及基因修飾模型，常用的動(dòng)物有大鼠、小鼠、新西蘭兔，斑馬魚、狗以及敘利亞金黃地鼠等[28]。本文結(jié)合腎細(xì)胞癌中西醫(yī)臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，以及模型評(píng)定新方法，對(duì)現(xiàn)有的腎細(xì)胞癌動(dòng)物模型作用機(jī)制、模型特點(diǎn)進(jìn)行分析，并模擬中西醫(yī)吻合度，進(jìn)行吻合度賦值。具體動(dòng)物模型和中西醫(yī)吻合度見表4。

表4 腎細(xì)胞癌（RCC）動(dòng)物模型與相應(yīng)臨床病癥特點(diǎn)吻合度分析Table 4 Analysis on the coincidence degree between RCC animal model and corresponding clinical symptoms

5 討論

腎細(xì)胞癌是威脅世界居民健康的惡性腫瘤之一，病因復(fù)雜，其具體產(chǎn)生機(jī)制至今尚不明確[3]。在當(dāng)今藥理學(xué)研究中，動(dòng)物模型是研究疾病病因、疾病發(fā)展以及篩選治療藥物的重要工具，復(fù)制出高吻合度的腎細(xì)胞癌動(dòng)物模型對(duì)腎癌相關(guān)研究有著重要意義。

本文首先對(duì)腎細(xì)胞癌中西醫(yī)腎癌病因病機(jī)進(jìn)行了歸納和總結(jié)，發(fā)現(xiàn)西醫(yī)對(duì)病因的觀點(diǎn)眾多，至今尚無明確定論[9-13]；而當(dāng)今中醫(yī)的主流觀點(diǎn)認(rèn)為，腎虛是腎癌發(fā)病的主要原因[16-19]，且已有完備的腎虛證動(dòng)物模型建立體系[44]。腎癌動(dòng)物模型常采用手術(shù)造模[38-39]，雖反應(yīng)疾病特征，卻難以體現(xiàn)病因。目前文獻(xiàn)研究中，尚未有腎細(xì)胞癌復(fù)合模型，因此可以考慮在現(xiàn)有腎癌動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上，疊加腎虛證動(dòng)物模型，建立既符合病癥特征，又體現(xiàn)病因的疊加模型，從而提高中西醫(yī)臨床吻合度，這值得我們思考。

動(dòng)物模型的吻合度高低，主要通過觀察動(dòng)物病癥特征與臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)的吻合程度來評(píng)價(jià)[22]。因此，本文對(duì)現(xiàn)有腎細(xì)胞癌動(dòng)物模型的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了總結(jié)，發(fā)現(xiàn)其建模成功標(biāo)準(zhǔn)以影像學(xué)檢查和病理學(xué)檢查為主要依據(jù)[20]。然而，腎細(xì)胞癌患者常表現(xiàn)有血尿、腰部腫塊、腰痛等臨床癥狀[26]，這在現(xiàn)有模型評(píng)價(jià)指標(biāo)中較少體現(xiàn)，因此建議模型評(píng)價(jià)增加表觀指標(biāo)，如動(dòng)物體質(zhì)量變化、活躍程度、尿液顏色、腰部是否有腫塊及腫塊大小等表觀指標(biāo)以及腰痛行為學(xué)實(shí)驗(yàn)等，來進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。

同時(shí)，本文對(duì)現(xiàn)有的腎細(xì)胞癌動(dòng)物模型進(jìn)行了總結(jié)，并依據(jù)中西醫(yī)病因病機(jī)和臨床病癥特點(diǎn)對(duì)現(xiàn)有的腎細(xì)胞癌動(dòng)物模型進(jìn)行了吻合度分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：自發(fā)性腎細(xì)胞癌模型不經(jīng)人為干預(yù)，模型動(dòng)物自然生長(zhǎng)，但實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)，發(fā)病率低，故使用情況較少；誘發(fā)性腎細(xì)胞癌模型雖方便研究者研究致癌過程中的順序階段，具有高度異質(zhì)性，但易出現(xiàn)多部位成瘤現(xiàn)象，難以反映疾病的自然過程，因此應(yīng)用不多；基因工程模型造模時(shí)間短，與人類腫瘤遺傳背景有相似性，雖在未來有著巨大的應(yīng)用潛力，但目前具體操作復(fù)雜，成本高，成功率低，且缺乏腫瘤天然的微環(huán)境，影像學(xué)難以檢測(cè)，所以應(yīng)用較少；腎細(xì)胞癌移植瘤模型操作簡(jiǎn)單、周期短、成瘤率高、模型穩(wěn)定，而且模型動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)不同程度的行為遲鈍及消瘦癥狀，能與中醫(yī)證候特征中次證的神疲乏力、消瘦相對(duì)應(yīng)，與中西醫(yī)吻合度較高，因此應(yīng)用較為廣泛。綜合而言，腎細(xì)胞癌移植瘤模型的中西醫(yī)臨床吻合度較高，其他模型中西醫(yī)臨床吻合度較低，且有的動(dòng)物模型難以表現(xiàn)出中醫(yī)的臨床病癥特點(diǎn)及其證候特征，這對(duì)腎細(xì)胞癌發(fā)病機(jī)制的研究以及治療方案的優(yōu)化會(huì)產(chǎn)生一定阻礙。因此，在當(dāng)前動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上，建立出具有更高中西醫(yī)臨床吻合度，以及符合中醫(yī)病癥特點(diǎn)的腎細(xì)胞癌動(dòng)物模型，是今后的重要任務(wù)之一。

綜上，在未來建立腎癌動(dòng)物模型時(shí)，可以考慮在中西醫(yī)吻合度較高的腎細(xì)胞癌模型基礎(chǔ)上，施加中醫(yī)患病因素，疊加腎虛證模型。如對(duì)模型動(dòng)物進(jìn)行氫化可的松混懸液肌肉注射[44]，待動(dòng)物表現(xiàn)出腎虛癥狀時(shí)，進(jìn)行手術(shù)造模，疊加移植瘤模型，以提高中西醫(yī)臨床吻合度。此外，根據(jù)流行病學(xué)家調(diào)查的腎細(xì)胞癌患病因素[45]，可以考慮對(duì)自發(fā)、誘發(fā)模型施加患病因素（如吸煙、喝酒、放射線、芳香族碳?xì)浠衔锏萚9-10]），來模擬病患的生活環(huán)境，提高動(dòng)物患病概率，縮短造模時(shí)間。以上在未來的模型構(gòu)建中均值得參考。

本文通過對(duì)現(xiàn)有腎細(xì)胞癌動(dòng)物模型整理歸納，分析現(xiàn)有模型優(yōu)缺點(diǎn)，并進(jìn)行吻合度評(píng)價(jià)。通過對(duì)腎細(xì)胞癌中西醫(yī)病因病機(jī)和診斷標(biāo)準(zhǔn)歸納分析，對(duì)現(xiàn)有動(dòng)物模型的完善提供建議，以期建立可表現(xiàn)臨床癥狀和臨床病因的腎細(xì)胞癌中西醫(yī)病癥結(jié)合的模型，為深入探索腎細(xì)胞癌疾病的復(fù)雜病因，優(yōu)化腎細(xì)胞癌的臨床治療提供理論參考。