“四白”中藥復(fù)方醇提液的安全性及護(hù)膚作用研究

唐子溦，王艷，葉小花，謝鋅儀，羅璽，時(shí)軍，趙力民，趙平（.廣東藥科大學(xué)醫(yī)藥化工學(xué)院，廣東 中山 58458；.廣東藥科大學(xué)中藥學(xué)院，廣東 廣州 50006）

中藥及中藥復(fù)方在護(hù)膚領(lǐng)域的應(yīng)用歷史悠久，諸多古代中醫(yī)典籍中都有關(guān)于中藥美容養(yǎng)膚的記載，為現(xiàn)代中藥化妝品的研發(fā)提供了重要參考。其中，記錄在《太平圣惠方》《本草綱目》《唐本草》《永類(lèi)鈐方》中的“洗面七白散”（白芷、白牽牛、白僵蠶、白芍、白蘞、白術(shù)、白附子）的護(hù)膚功效顯著，被廣泛應(yīng)用[1-2]。目前，“洗面七白散”中的白芷、白附子、白牽牛由于安全性方面的原因，已被《化妝品安全技術(shù)規(guī)范（2015 年版）》列入禁用化妝品名單中，但白僵蠶、白蘞、白術(shù)和白芍（“四白”）4種中藥依舊在化妝品生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用。采用現(xiàn)代分析技術(shù)和方法對(duì)傳統(tǒng)中藥的安全性及功效進(jìn)行深入的系統(tǒng)研究，對(duì)中藥天然化妝品新原料的開(kāi)發(fā)具有重要意義。

近年來(lái)，有相關(guān)研究對(duì)“四白”中單一組分的安全性和護(hù)膚功效進(jìn)行了探索，并揭示其中的白蘞[3-4]、白術(shù)[5-6]可能具有美白功效，白芍[7-8]、白僵蠶[9-10]具有抗炎、抗氧化作用，但由于中藥組合作用機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，目前對(duì)這4種中藥組合的安全性及功效研究尚未見(jiàn)報(bào)道。因此，本文擬探討“四白”中藥復(fù)方醇提液的安全性及其抗氧化、美白、抗炎等護(hù)膚功效，以期為現(xiàn)代化妝品功效原料的開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物KM 雌性小鼠，SPF 級(jí)，體質(zhì)量（20±2）g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（京）2019-0010。本研究中的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)經(jīng)過(guò)廣東藥科大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)審查批準(zhǔn)，批文號(hào)：gdpu20220801。

1.2 細(xì)胞株小鼠黑色素瘤B16細(xì)胞株，由廣東藥科大學(xué)附屬第一醫(yī)院研究室提供；人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞株HaCaT，由廣東藥科大學(xué)生命科學(xué)與生物制藥學(xué)院提供；小鼠單核巨噬細(xì)胞株RAW264.7，由廣東藥科大學(xué)新藥研發(fā)中心提供。

1.3 藥物及試劑白蘞、白芍、白術(shù)、白僵蠶，購(gòu)自蘇州市天靈中藥飲片有限公司，經(jīng)廣東藥科大學(xué)劉基柱副教授鑒定為正品。1640 培養(yǎng)基（批號(hào)：8120527）、DMEM 高糖培養(yǎng)基（批號(hào)：2202004）、0.05%胰蛋白酶（含EDTA，批號(hào)：2376021）、青霉素/鏈霉素（批號(hào)：2321138），均購(gòu)于美國(guó)Gibco 公司；酪氨酸酶（酶活性≥500 U·mg-1），合肥博美生物科技有限責(zé)任公司，批號(hào)：31B20972；脂多糖（LPS），上海源葉生物科技有限公司，批號(hào)：S03GS159712；透明質(zhì)酸酶（酶活力≥300 U·mg-1），上海羅恩化學(xué)技術(shù)有限公司，批號(hào)：RH32634；一氧化氮（NO）檢測(cè)試劑盒（貨號(hào)：S0021S）、MTT（貨號(hào)：ST316），均購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)有限公司；1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH，貨號(hào)：D807297-100mg，純度96%）、L-酪氨酸（貨號(hào)：L818844-100g，純度99%）、L-多巴（貨號(hào)：D807434-100g，純度99%），均購(gòu)自上海麥克林生化技術(shù)有限公司。

1.4 主要儀器UV-2600型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，日本島津公司；Varioskan LUX 多功能酶標(biāo)儀、371 型CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱，美國(guó)賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司；OLYMPUS 倒置顯微鏡，日本奧林巴斯株式會(huì)社。

1.5 “四白”中藥復(fù)方醇提液制備將白僵蠶、白蘞、白術(shù)、白芍4 味藥材分別粉碎，過(guò)60 目篩，各取7.5 g 混合后置于錐形瓶?jī)?nèi)；用80%乙醇浸泡24 h后超聲0.5 h，重復(fù)3次完成提取[11-12]；提取結(jié)束后進(jìn)行抽濾，濾液濃縮后加入4倍量無(wú)水乙醇過(guò)夜，靜置后離心取上清液；濃縮后加去離子水配至生藥濃度為600 g·L-1，過(guò)0.22 μm微孔濾膜后于4 ℃保存。

1.6 細(xì)胞培養(yǎng)在HaCaT、B16、RAW264.7細(xì)胞中加入DMEM 培養(yǎng)基（含10%FBS、1%鏈霉素/青霉素），于細(xì)胞培養(yǎng)箱（37 ℃、5% CO2）孵育24 h；當(dāng)細(xì)胞密度超過(guò)80%時(shí)，用0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化細(xì)胞，離心，以1∶3傳代。

1.7 安全性實(shí)驗(yàn)

1.7.1紅細(xì)胞溶血實(shí)驗(yàn) 溶血實(shí)驗(yàn)是體內(nèi)眼刺激試驗(yàn)（Draize test）的一種替代方法，被廣泛應(yīng)用于評(píng)估藥品或化妝品的眼刺激性。收集雌性KM小鼠血液，加入PBS 緩沖溶液，室溫下以3 000 r·min-1離心（離心半徑9 cm）15 min，棄去上清，再次加入PBS 混勻。重復(fù)離心3次后，加入血液9倍量的PBS，混勻，得到紅細(xì)胞溶液。以PBS 為空白對(duì)照、0.1%十二烷基硫酸鈉（SDS）為陽(yáng)性對(duì)照、水為全溶管。取濃度為30 g·L-1的“四白”中藥復(fù)方醇提液100 μL，加入875 μL PBS及25 μL紅細(xì)胞溶液，室溫條件下置于水平搖床振蕩反應(yīng)30 min，離心，取上清，于560 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度（A）值[13-14]。計(jì)算：溶血率（HR，%）=（A受試管-A陰性對(duì)照）/（A全溶管-A陰性對(duì)照）×100%。

1.7.2MTT 法檢測(cè)細(xì)胞毒性 將HaCaT、RAW264.7、B16 細(xì)胞分別接種于96 孔板，密度為每孔1×104個(gè)，于培養(yǎng)箱中過(guò)夜。24 h 后棄去原培養(yǎng)基，加入100 μL 含有“四白”中藥復(fù)方醇提液的培養(yǎng)基（5、10、15、20、25、30 g·L-1），孵育24 h 后棄去培養(yǎng)基；經(jīng)PBS浸洗2～3次后，每孔加入100 μL MTT工作液，于450 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度（A）值。計(jì)算：細(xì)胞存活率（%）=A給藥孔/A空白孔×100%[15]。同法檢測(cè)煙酰胺（5、10、15、20、25、30 g·L-1）對(duì)B16 細(xì)胞的毒性。

1.8 抗氧化實(shí)驗(yàn)

1.8.1自由基清除及Fe3+還原實(shí)驗(yàn) 參考相關(guān)研究方法，進(jìn)行羥自由基[16]、DPPH 自由基[17-18]清除實(shí)驗(yàn)和Fe3+還原實(shí)驗(yàn)[19]。

1.8.2抗過(guò)氧化氫（H2O2）氧化損傷實(shí)驗(yàn)[20]用DMEM培養(yǎng)基將“四白”中藥復(fù)方醇提液稀釋至不同生藥濃度。將HaCaT 細(xì)胞接種于96 孔板，細(xì)胞密度為每孔1×104個(gè)，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過(guò)夜，24 h 后棄去原培養(yǎng)基。以DMEM 培養(yǎng)基為空白組，實(shí)驗(yàn)組加入100 μL“四白”中藥復(fù)方醇提液（5、10、15、20、25、30 g·L-1），于培養(yǎng)箱中孵育24 h，用PBS 清洗后，加入5.6 mmol·L-1H2O2繼續(xù)孵育4 h。棄去所有孔中的上清液，PBS清洗2次后，采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率。

1.9 美白功效驗(yàn)證

1.9.1體外酪氨酸酶活性抑制實(shí)驗(yàn)[21-22]取“四白”中藥復(fù)方醇提液（5、10、15、20、25、30 g·L-1）1 mL，并以pH=6.8 的PBS 溶液作為空白代替；加入625 μL 酪氨酸酶溶液（200 U·mL-1）后，37 ℃水浴10 min；加入1 mL 0.05% L-酪氨酸溶液，37 ℃水浴40 min，測(cè)定475 nm 波長(zhǎng)處的吸光度值。計(jì)算：酪氨酸酶活性抑制率（%）= [1-（A-B）/（C-D）] ×100%，A～D 分別表示有樣品的含酶體系、有樣品的無(wú)酶體系、無(wú)樣品的含酶體系、無(wú)樣品的無(wú)酶體系的吸光度值。

1.9.2細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性抑制實(shí)驗(yàn)[23-25]將B16細(xì)胞接種于96孔板中，密度為每孔1×104個(gè)，于培養(yǎng)箱中孵育24 h 后，棄去原培養(yǎng)基；以不含樣品的DMEM培養(yǎng)基作為空白組，實(shí)驗(yàn)組加入由DMEM 培養(yǎng)基配制的“四白”中藥復(fù)方醇提液（15、20、25、30 g·L-1）100 μL，孵育24 h后棄去培養(yǎng)基；PBS清洗2 次，加入100 μL 1% Triton X-100，置于-80 ℃急凍1 h 凝固；于室溫下復(fù)融后，每孔加入20 μL 0.5% L-多巴，室溫下水平振蕩4 h；反應(yīng)結(jié)束后于490 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度（A）值。計(jì)算：細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性抑制率（%）=A給藥孔/A空白孔×100%。

1.10 抗炎實(shí)驗(yàn)

1.10.1透明質(zhì)酸酶活性抑制實(shí)驗(yàn)[26-27]將125 μL“四白”中藥復(fù)方醇提液（5、10、15、25 g·L-1）與125 μL 透明質(zhì)酸酶-醋酸緩沖溶液均勻混合，37 ℃恒溫水浴20 min；加入2.5 mmol·L-1CaCl2溶液25 μL，繼續(xù)37 ℃孵育20 min；加入125 μL 透明質(zhì)酸鈉溶液（0.4 g·L-1）至含透明質(zhì)酸酶的管內(nèi)，37 ℃孵育20 min后，室溫下靜置10 min；加入1.0 mL超純水、25 μL NaOH 溶液（5.0 mol·L-1）及125 μL 乙酰丙酮溶液，沸水浴15 min后冰水浴10 min，然后室溫下靜置10 min；加入250 μL P-DAB（EhrLich試劑），充分震蕩后，加入950 μL無(wú)水乙醇，室溫下靜置30 min；在530 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值。計(jì)算：透明質(zhì)酸酶活性抑制率（%）= [1-（A-B）/（C-D）]×100%，A～D 分別表示有樣品的含酶體系、有樣品的無(wú)酶體系、無(wú)樣品的含酶體系、無(wú)樣品的無(wú)酶體系的吸光度值。

1.10.2ELISA 法檢測(cè)細(xì)胞NO 水平[28-33]將RAW264.7細(xì)胞種于96孔板中，密度為每孔1×104個(gè)，在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過(guò)夜；24 h 后棄去原培養(yǎng)基，加入100 μL 由DMEM 培養(yǎng)基稀釋的“四白”中藥復(fù)方醇提液（5、10、15、20、25 g·L-1），并以無(wú)血清DMEM培養(yǎng)基作為空白組，加入LPS的DMEM培養(yǎng)基作為模型組，每組設(shè)3 個(gè)復(fù)孔；模型組及給藥2 h 后的實(shí)驗(yàn)組直接加入10 μg·mL-1LPS，并共同孵育至24 h；反應(yīng)結(jié)束后取50 μL 細(xì)胞上清液，依次加入Griess 試劑盒內(nèi)的A 液、B 液各50 μL，混合均勻，室溫下緩慢水平振蕩反應(yīng)15 min；在540 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算NO含量。

1.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法采用GraphPad Prism 8.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示；多組間比較采用單因素方差分析（One-way ANOVA），兩兩比較采用LSD 檢驗(yàn)；以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 “四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)紅細(xì)胞溶血率的影響結(jié)果見(jiàn)圖1。與0.1% SDS 組比較，30 g·L-1“四白”中藥復(fù)方醇提液組的紅細(xì)胞溶血率（18.5%）顯著降低（P＜0.01），提示“四白”中藥復(fù)方醇提液的眼刺激性較0.1% SDS更低。

圖1 “四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)紅細(xì)胞溶血率的影響（±s，n=6）Figure 1 Effect of alcoholic extract of "four whites" on the hemolysis rate of red blood cells（±s，n=6）

2.2 “四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)HaCaT、B16 及RAW264.7 細(xì)胞活力的影響結(jié)果見(jiàn)圖2。與空白組比較，“四白”中藥復(fù)方醇提液及煙酰胺不同濃度組（5、10、15、20、25、30 g·L-1）的HaCaT、B16 及RAW264.7 細(xì)胞活力均顯著降低（P＜0.05，P＜0.01）。“四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)HaCaT、B16 及RAW264.7細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度（IC50）值分別為（29.8±2.3）、（33.8±2.7）、（22.0±1.7）g·L-1。市面常用化妝品原料煙酰胺對(duì)B16細(xì)胞的IC50值為（26.3±1.3）g·L-1，低于“四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)B16 細(xì)胞的IC50值［（33.8± 2.7）g·L-1］，提示“四白”中藥復(fù)方醇提液可能比煙酰胺具有更低的細(xì)胞毒性。

圖2 “四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)HaCaT、B16 及RAW264.7 細(xì)胞活力的影響（±s，n=6）Figure 2 Effects of alcoholic extract of "four whites" on HaCaT，B16 and RAW264.7 cells viability（±s，n=6）

2.3 “四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)羥自由基清除能力的影響結(jié)果見(jiàn)圖3-A。與空白組比較，“四白”中藥復(fù)方醇提液（2、4、8、16、32 g·L-1）的羥自由基清除率顯著升高（P＜0.01），且呈濃度依賴(lài)性。“四白”中藥復(fù)方醇提液清除羥自由基的IC50值為（17.6±0.2）g·L-1，32 g·L-1“四白”中藥復(fù)方醇提液的羥基自由基清除率達(dá)到78.6%，表明其在安全濃度下具有較強(qiáng)的抗氧化能力。

圖3 “四白”中藥復(fù)方醇提液的抗氧化作用（±s，n=6）Figure 3 The antioxidant effect of the alcoholic extract of "four whites"（±s，n=6）

2.4 “四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)DPPH 自由基清除能力的影響結(jié)果見(jiàn)圖3-B。與空白組比較，“四白”中藥復(fù)方醇提液（0.25～4 g·L-1）的DPPH 自由基清除率顯著升高（P＜0.01），且呈濃度依賴(lài)性。“四白”中藥復(fù)方醇提液清除DPPH 自由基的IC50值為0.6 g·L-1，較低的IC50值說(shuō)明其具有優(yōu)異的DPPH 自由基清除能力。

2.5 “四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)Fe3+還原能力的影響結(jié)果見(jiàn)圖3-C。與空白組比較，“四白”中藥復(fù)方醇提液（5、10、15、20、25、30 g·L-1）對(duì)Fe3+的還原力顯著增強(qiáng)（P＜0.01），且呈濃度依賴(lài)性，結(jié)果表明其具有良好的Fe3+還原能力。

2.6 H2O2對(duì)HaCaT 細(xì)胞活力的影響結(jié)果見(jiàn)圖3-D。與空白組比較，H2O2不同濃度（1～9 mmol·L-1）組的HaCaT 細(xì)胞活力隨著H2O2濃度增加而降低，呈濃度依賴(lài)性，其中5～9 mmol·L-1組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。H2O2對(duì)HaCaT 細(xì)胞的IC50值為（5.6±0.2）mmol·L-1，因此后續(xù)選擇該濃度建立HaCaT細(xì)胞氧化損傷模型。

2.7 “四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)H2O2致氧化損傷HaCaT細(xì)胞活力的影響結(jié)果見(jiàn)圖3-E。與空白組比較，模型組HaCaT 細(xì)胞活力顯著降低（P＜0.01），說(shuō)明H2O2誘導(dǎo)HaCaT 細(xì)胞氧化損傷模型復(fù)制成功。與模型組比較，“四白”中藥復(fù)方醇提液（5、10、15、20、25、30 g·L-1）預(yù)保護(hù)后，HaCaT 細(xì)胞活力有上升趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。20 g·L-1“四白”中藥復(fù)方醇提液預(yù)保護(hù)能使HaCaT細(xì)胞活力從39.6%上升到57.3%，細(xì)胞氧化損傷得到一定恢復(fù)。

2.8 “四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)體外酪氨酸酶活性的影響結(jié)果見(jiàn)圖4-A。隨著“四白”中藥復(fù)方醇提液濃度的升高，酪氨酸酶活性抑制率逐漸升高，呈現(xiàn)良好的劑量依賴(lài)性。在30 g·L-1濃度時(shí)，活性抑制率達(dá)到92.1%，表明酪氨酸酶活性受到了明顯的抑制。

圖4 “四白”中藥復(fù)方醇提液的美白功效驗(yàn)證（±s，n=5）Figure 4 Validation of the whitening efficacy of alcoholic extract of "four whites"（±s，n=5）

2.9 “四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)B16 細(xì)胞酪氨酸酶活性的影響結(jié)果見(jiàn)圖4-B。與空白組比較，“四白”中藥復(fù)方醇提液（15、20、25、30 g·L-1）對(duì)B16細(xì)胞的酪氨酸酶活性抑制率顯著升高（P＜0.05，P＜0.01），且呈現(xiàn)良好的劑量依賴(lài)性。在30 g·L-1濃度時(shí)，抑制率可達(dá)49.4%，表明“四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)B16細(xì)胞酪氨酸酶活性具有明顯抑制作用。

2.10 “四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)透明質(zhì)酸酶活性的影響結(jié)果見(jiàn)圖5-A。隨著“四白”中藥復(fù)方醇提液濃度的升高，透明質(zhì)酸酶活性抑制率逐漸升高，呈現(xiàn)一定的劑量依賴(lài)性，表明“四白”中藥復(fù)方醇提液具有良好的透明質(zhì)酸酶活性抑制效果。

圖5 “四白”中藥復(fù)方醇提液的抗炎活性驗(yàn)證（±s，n=5）Figure 5 Validation of anti-inflammatory activity of alcoholic extract of "four whites"（±s，n=5）

2.11 “四白”中藥復(fù)方醇提液對(duì)LPS 誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞NO 水平的影響結(jié)果見(jiàn)圖5-B。與空白組比較，LPS 模型組細(xì)胞的NO 含量顯著增加（P＜0.01），表明LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞炎癥模型復(fù)制成功。與模型組比較，“四白”中藥復(fù)方醇提液（5、10、15、20、25 g·L-1）不同濃度組RAW264.7 細(xì)胞的NO 含量顯著降低（P＜0.01）。結(jié)果表明，“四白”中藥復(fù)方醇提液能夠降低LPS 誘導(dǎo)RAW264.7 炎癥細(xì)胞的NO水平。

3 討論

本研究對(duì)“四白”中藥復(fù)方醇提液的安全性、抗氧化、美白及抗炎活性進(jìn)行了初步研究。研究結(jié)果顯示，中藥復(fù)方醇提液組的紅細(xì)胞溶血率顯著降低，提示其眼刺激性較0.1% SDS 更低；對(duì)HaCaT、B16、RAW264.7 細(xì)胞的IC50值在22～33 g·L-1范圍內(nèi)，其中對(duì)B16細(xì)胞的IC50值比市面常用化妝品原料煙酰胺更低，具有較好的安全性。

中藥的抗氧化性能與其美白、抗衰功效密切相關(guān)。羥自由基是生物體內(nèi)最活躍的自由基之一，具有很強(qiáng)的氧化能力，可以與生物分子中的多種化合物發(fā)生反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞膜、DNA、蛋白質(zhì)等生物分子的氧化損傷，從而引起氧化應(yīng)激反應(yīng)和衰老[16]。Fe3+還原能力與樣品的抗氧化能力呈正相關(guān)[19]。研究結(jié)果顯示，“四白”中藥復(fù)方醇提液能有效清除羥基自由基及DPPH 自由基，且具有良好的Fe3+還原能力，并對(duì)H2O2誘導(dǎo)HaCaT 細(xì)胞的氧化損傷具有預(yù)保護(hù)能力。

人體皮膚黑色素的分布和含量決定了膚色，而酪氨酸酶是黑色素形成過(guò)程中的限速酶，酪氨酸酶活性越高，皮膚黑色素形成就越多，抑制酪氨酸酶活性對(duì)美白具有重要意義[21]，同時(shí)也是篩選美白藥物活性成分的重要靶點(diǎn)。研究結(jié)果顯示，“四白”中藥復(fù)方醇提液在無(wú)細(xì)胞毒性的濃度范圍內(nèi)，在體外和細(xì)胞內(nèi)都表現(xiàn)出明顯的酪氨酸酶抑制活性，可能作為化妝品美白原料。

透明質(zhì)酸酶是炎癥發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的重要酶類(lèi)物質(zhì)，其可以高效、專(zhuān)一水解透明質(zhì)酸，引起人體細(xì)胞脫顆粒及介質(zhì)滲出，直接導(dǎo)致過(guò)敏及炎癥反應(yīng)的發(fā)生[26-27]。透明質(zhì)酸酶是抗炎功效研究的重要靶點(diǎn)，降低或抑制透明質(zhì)酸酶活性是防止炎癥發(fā)生的有效途徑。NO 是炎癥反應(yīng)的一個(gè)重要負(fù)反饋調(diào)節(jié)分子，可促進(jìn)炎癥引起的細(xì)胞及組織功能障礙。而LPS可以通過(guò)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)激活多種細(xì)胞合成或釋放NO、IL-6、TNF-α 等多種炎性介質(zhì)。研究結(jié)果顯示，在體外透明質(zhì)酸酶活性抑制實(shí)驗(yàn)中“四白”中藥復(fù)方醇提液具有良好的透明質(zhì)酸酶抑制效果；LPS誘導(dǎo)RAW264.7 細(xì)胞NO 水平顯著升高，而“四白”中藥復(fù)方醇提液預(yù)處理能夠明顯降低RAW264.7炎癥細(xì)胞的NO水平，具有一定的抗炎潛力。

綜上所述，“四白”中藥復(fù)方醇提液具有較低的刺激性和細(xì)胞毒性，且有一定的抗氧化、美白及抗炎功效，在中藥化妝品領(lǐng)域具有一定應(yīng)用潛力，值得進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)。