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    血清25(OH)D、YKL-40水平與腎綜合征出血熱患者疾病進程及預后的關(guān)系研究

    2023-09-23 12:05:16劉改代薇代坤
    海南醫(yī)學 2023年17期
    關(guān)鍵詞:受檢者進程血清

    劉改,代薇,代坤,

    1.西安市第八醫(yī)院檢驗科,陜西 西安 710061;

    2.西安市閻良鐵路醫(yī)院檢驗科,陜西 西安 710089

    腎綜合征出血熱(HFRS)是由漢坦病毒感染引起的鼠源性人畜共患病,其臨床特點是全身血管內(nèi)皮功能障礙和血管通透性增加[1],臨床表現(xiàn)包括發(fā)熱、出血、腎功能不全、血小板減少和休克等[2]。迄今為止,HFRS尚無有效的抗病毒藥物治療,導致危重癥病死率較高[3]。因此早期準確評估HFRS患者的病情嚴重程度及預后,對于指導臨床治療和合理配置藥物具有重要意義。25羥維生素D[25-hydroxyvitamin D,25(OH)D]是維生素D的活性形式,具有調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣磷代謝、內(nèi)分泌系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等重要作用[4]。研究表明25(OH)D對腎臟具有保護作用,參與并調(diào)控多種細胞的活動[5]。甲殼質(zhì)酶蛋白40 (chitinase protein 40,YKL-40)是一種40 KDa的糖蛋白,可通過調(diào)節(jié)多種生物學過程參與多種炎癥性疾病的發(fā)生、發(fā)展進程[6]。而HFRS是一種全身性炎癥疾病,因此推測研究YKL-40 也與HFRS 疾病進展相關(guān)。但目前關(guān)于25(OH)D、YKL-40在HFRS疾病中表達尚不明確?;诖?,本研究旨在通過檢測HFRS 患者血清中25(OH)D,YKL-40 表達水平,初步探討兩者與HFRS疾病進程及預后的關(guān)系。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取2021 年1 月至2022 年6 月西安市第八醫(yī)院收治的170 例HFRS 患者作為研究組。納入標準:(1)HFRS患者診斷及分型參考《流行性出血熱診斷標準WS278-2008》[9];(2)外周血漢坦病毒特異性免疫球蛋白(Ig)M 抗體陽性。排除標準:(1)孕婦;(2)急性或慢性腎病和血液病;(3)心血管疾?。?4)自身免疫性疾??;(5)病毒性肝炎(A、B、C、D、E 型)或任何其他肝病。根據(jù)臨床分型標準[7]將患者分為輕型組(n=36)、中型組(n=49)、重型組(n=46)和危重型組(n=39)。以住院期間及出院后28 d 疾病轉(zhuǎn)歸界定預后(存活或死亡)[8],分為存活組(n=152)和死亡組(n=18),此外,選取在本院體檢的健康志愿者150例作為對照組。本研究均經(jīng)家屬或受試者同意,符合《世界醫(yī)學協(xié)會赫爾辛基宣言》。

    1.2 方法

    1.2.1 資料收集 收集所有研究對象的性別、年齡、疾病嚴重程度、預后情況等一般臨床資料。

    1.2.2 標本采集及指標監(jiān)測 研究組于入院次日清晨,對照組受試者于體檢當日清晨靜息狀態(tài)下采集空腹靜脈血5 mL,均于上午空腹收集,取標本后2 h內(nèi)于4℃3 000 r/min 離心10 min。隨后對對血漿上清進行移液,并轉(zhuǎn)移到聚丙烯管中,在分析前存儲在-80°C。為避免血漿反復凍融造成實驗誤差,所有標本采集后一起進行檢測。應用全自動生化分析儀(上海玉研科學儀器有限公司,Microlab300)檢測白蛋白、血紅蛋白、血小板、紅細胞、尿素氮、肌酐水平。應用全自動凝血分析儀(上海玉研科學儀器有限公司,RAC-030)檢測凝血酶原時間(Prothrombin time,PT)、纖維蛋白原(fibrinogen,F(xiàn)ib)、D-二聚體(D-dimer,DD)。

    1.2.3 25(OH) D,YKL-40 水平檢測 采用全自動電化學發(fā)光免疫分析儀(試劑盒購自上海禾高生物科技有限公司)檢測血清25(OH)D水平,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清中YKL-40(試劑盒購自上海富雨生物科技有限公司)水平,具體操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。

    1.3 統(tǒng)計學方法 應用SPSS20.0 統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)。計量資料符合正態(tài)分布,以均數(shù)±標準差(±s)表示,組間比較采用t檢驗,多組數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析,進一步兩兩比較采用LSD-t檢驗;計數(shù)資料比較采用χ2檢驗;采用Spearman 相關(guān)分析評估25(OH)D、YKL-40與疾病進程之間的相關(guān)性,采用Pearson 相關(guān)分析評估25(OH)D、YKL-40 與常規(guī)實驗室參數(shù)之間的相關(guān)性;通過受試者工作特征曲線(ROC)評估25(OH)D、YKL-40 對HFRS 患者預后的預測效果,并通過ROC 曲線下面積(AUC)進行量化。以P<0.05 為差異具有統(tǒng)計學意義。

    2 結(jié)果

    2.1 兩組受檢者的一般資料比較 兩組受檢者的年齡、性別比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。與對照組比較,研究組患者的白蛋白、尿素氮、肌酐、PT、DD 水平均升高,血紅蛋白、血小板、紅細胞、Fib 水平均降低,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表1。

    表1 兩組受檢者的一般資料比較[例(%),±s]Table 1 Comparison of general data between the study group and the control group[n(%),±s]

    表1 兩組受檢者的一般資料比較[例(%),±s]Table 1 Comparison of general data between the study group and the control group[n(%),±s]

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    2.2 兩組受檢者的血清25(OH)D、YKL-40水平比較 研究組患者的血清25(OH)D 水平明顯低于對照組,YKL-40水平明顯高于對照組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表2。

    表2 兩組受檢者血清25(OH)D、YKL-40水平比較(±s,ng/mL)Table 2 Comparison of serum 25(OH)D and YKL-40 levels between the study group and the control group(±s,ng/mL)

    表2 兩組受檢者血清25(OH)D、YKL-40水平比較(±s,ng/mL)Table 2 Comparison of serum 25(OH)D and YKL-40 levels between the study group and the control group(±s,ng/mL)

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    2.3 研究組不同疾病進程患者血清25(OH)D、YKL-40水平比較 不同疾病進程患者血清中25(OH)D表達水平隨著病變程度的加重逐漸升高,YKL-40 表達水平隨著病變程度的加重逐漸降低,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表3。

    表3 不同疾病進程患者血清25(OH)D、YKL-40水平比較(±s,ng/mL)Table 3 Comparison of serum 25(OH)D and YKL-40 levels among patients with different disease processes(±s,ng/mL)

    表3 不同疾病進程患者血清25(OH)D、YKL-40水平比較(±s,ng/mL)Table 3 Comparison of serum 25(OH)D and YKL-40 levels among patients with different disease processes(±s,ng/mL)

    注:與危重型組比較,aP<0.05;與重型組比較,bP<0.05;與中型組比較,cP<0.05。Note: Compared with the critical group,aP<0.05; compared with severe group,bP<0.05;compared with moderate group,cP<0.05.

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    2.4 血清YKL-40、25(OH)D 表達水平與疾病進程的相關(guān)性 經(jīng)Spearman 相關(guān)法分析結(jié)果顯示,HFRS 患者血清中YKL-40 表達與疾病進程呈顯著正相關(guān)(r=0.854,P<0.05),25(OH)D表達與疾病進程呈顯著負相關(guān)(r=-0.839,P<0.05),見圖1。

    圖1 血清YKL-40、25(OH)D表達與疾病進程的相關(guān)性Figure 1 Correlation between serum YKL-40, 25(OH)D expression and disease progression

    2.5 HFRS患者血清25(OH)D、YKL-40表達水平與臨床指標的相關(guān)性 經(jīng)Pearson 相關(guān)法分析結(jié)果顯示,HFRS患者血清中25(OH)D表達與血紅蛋白、血小板、紅細胞、Fib均呈正相關(guān),與白蛋白、尿素氮、肌酐、PT、DD表達均呈負相關(guān)。血清中YKL-40表達與血紅蛋白、血小板、紅細胞、Fib均呈負相關(guān),與白蛋白、尿素氮、肌酐、PT、DD表達均呈正相關(guān)(P<0.05),見表4。

    表4 血清25(OH)D、YKL-40水平與臨床指標的相關(guān)性Table 4 Correlation between serum 25(OH)D and YKL-40 levels and clinical indicators

    2.6 不同預后患者血清中25(OH)D、YKL-40 水平比較 死亡組患者的血清25(OH)D 水平明顯低于存活組,而YKL-40水平明顯高于存活組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表5。

    表5 不同預后患者血清中25(OH)D、YKL-40水平比較(±s,ng/mL)Table 5Comparison of serum 25(OH)D and YKL-40 levels in patients with different prognosis(±s,ng/mL)

    表5 不同預后患者血清中25(OH)D、YKL-40水平比較(±s,ng/mL)Table 5Comparison of serum 25(OH)D and YKL-40 levels in patients with different prognosis(±s,ng/mL)

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    2.7 血清25(OH)D、YKL-40 水平對預后的預測價值 經(jīng)ROC分析結(jié)果顯示,血清25(OH)D、YKL-40水平預測預后的AUC 分別為0.897 (95%CI:0.842~0.939)、0.913(95%CI:0.860~0.950),最佳截斷值分別為9.39ng/mL、55.89 ng/mL,對應的敏感度分別為88.89%、83.33%,特異度分別為85.53%、94.08%,血清YKL-40、25(OH)D水平聯(lián)合預測的AUC為0.935(95%CI:0.887~0.967),敏感度為94.44%,特異度為88.82%,見圖2。

    圖2 血清25(OH)D、YKL-40水平預測預后的ROCFigure 2 ROC curve of serum 25(OH)D and YKL-40 levels in predicting prognosis

    3 討論

    近年來HFRS對世界各地的公共衛(wèi)生都構(gòu)成了嚴重威脅,引起越來越多的關(guān)注。目前中國是HFRS 的主要流行地區(qū),占全球病例總數(shù)的90%以上[10-11]。由于HFRS疾病進展迅速、臨床表現(xiàn)復雜等,經(jīng)常出現(xiàn)誤診、漏診等情況,從而影響治療效果和患者預后[12],且目前常規(guī)實驗室參數(shù)的預測價值有限。因此,有必要探索與HFRS疾病嚴重程度及預后相關(guān)的新的生物標志物。

    YKL-40(也稱為幾丁質(zhì)酶-3 樣蛋白-1)屬于哺乳動物殼質(zhì)酶家族,是一種新的炎癥標志物。研究表明,在非酒精性脂肪性肝炎[13]、病毒性肺炎[14]、膿毒癥[15]患者血清中YKL-40 水平均升高。但目前YKL-40 與HFRS 患者疾病進程和預后的關(guān)系尚不明確。本研究結(jié)果顯示YKL-40在HFRS 患者血清中水平顯著升高,且進一步發(fā)現(xiàn)HFRS 患者血清YKL-40水平隨著疾病進程加重而逐漸升高,表明YKL-40 與HFRS疾病的發(fā)生、發(fā)展進程密切相關(guān),可能作為反應HFRS 病情進展的潛在血清指標之一,其作用機制可能是YKL-40 參與介導了患者體內(nèi)發(fā)生的炎癥反應,其表達水平越高患者體內(nèi)炎癥反應越劇烈,從而加重了疾病進展。預后(死亡)的HFRS 患者血清中YKL-40水平較存活患者升高,表明HFRS可作為判斷患者預后的血清指標之一,ROC 結(jié)果也提示YKL-40可在一定程度預測HFRS患者預后(死亡)。

    25(OH)D 是維生素D 在人體內(nèi)的存在形式,可用于評估人體營養(yǎng)狀態(tài)[16]。研究表明25(OH)D不僅參與調(diào)節(jié)炎性因子分泌及免疫功能,也在維持機體正常狀態(tài)和生長發(fā)育中發(fā)揮重要作用[17]。但目前25(OH)D與HFRS的關(guān)系未見相關(guān)報道。在本研究中,HFRS患者血清中25(OH)D水平顯著降低,其水平隨著疾病進程的加重及預后(死亡)的發(fā)生逐漸降低,提示25(OH)D與HFRS 疾病進程及患者預后均關(guān)系密切,可能作為評估HFRS 病情嚴重程度及預后的血清指標,其作用機制可能是因為維生素D 具有抑制炎性細胞分泌的作用,從而減輕腎臟血管內(nèi)皮細胞的損傷[18]。Pearson法分析結(jié)果顯示,HFRS患者血清中25(OH)D、YKL-40 表達與臨床指標血紅蛋白、血小板、紅細胞、Fib、白蛋白、尿素氮、肌酐、PT、DD表達均具有相關(guān)性,進一步表明25(OH)D、YKL-40與HFRS疾病的發(fā)生、發(fā)展進程關(guān)系密切。ROC 結(jié)果顯示,25(OH)D、YKL-40兩者聯(lián)合預測患者預后(死亡)的AUC為0.935,敏感度為94.44%,特異度為88.82%,均高于單一指標的診斷效能,提示聯(lián)合檢測兩者可作為診斷預后(死亡)患者的血清學指標。為疾病的早期診斷提供一定參考依據(jù),并可及時給予HFRS患者治療,改善患者預后。

    綜上所述,在HFRS 患者血清中YKL-40 表達升高,25(OH)D 表達降低,兩者表達與患者疾病進程及預后密切相關(guān),兩者聯(lián)合檢測可作為評估疾病進展及預后的血清學指標,具有重要臨床價值。但本研究收集的病例數(shù)較少,且屬于單中心研究,后續(xù)研究中我們將收集更多樣本量,并更深一步分析25(OH)D、YKL-40在HFRS疾病中的具體作用機制。

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