高效液相色譜法同時檢測食品中多種添加劑的方法研究

◎ 楊吉祥，關松梅，孫 瑩，王學政，柴瓏瓏，胡安慧

（青島元信檢測技術有限公司，山東 青島 266109）

食品添加劑是人類生活中的重要組成部分。隨著人們生活水平的提高和對食品品質(zhì)要求的不斷提高，食品添加劑的種類和用量也在不斷增加[1]。目前，世界上已經(jīng)有數(shù)千種食品添加劑，包括防腐劑、著色劑、膨松劑、酸味劑、漂白劑等。這些添加劑可以使食品更加美味、營養(yǎng)豐富、方便保存和運輸，但同時也可能存在一定的安全風險[2]。因此，研究和應用食品添加劑時需要考慮其安全性和必要性。食品添加劑的不良影響主要包括以下幾個方面：①過敏反應。一些人對某些食品添加劑可能產(chǎn)生過敏反應，如對檸檬黃、胭脂紅等食品添加劑過敏。②毒性作用。某些化學物質(zhì)，如重金屬，在一定條件下會對人體造成毒性作用，長期大量攝入會對健康產(chǎn)生負面影響。③環(huán)境污染。過度使用食品添加劑會增加工業(yè)化生產(chǎn)帶來的環(huán)境污染，使環(huán)境生態(tài)系統(tǒng)受到破壞。

因此，對各類食品中食品添加劑的含量測定一直是食品檢驗檢測工作的重點。本文在已有研究的基礎上，建立了一種同時測定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精鈉（以糖精計）、安賽蜜和脫氫乙酸的液相色譜方法，可用于食品中添加劑的日常監(jiān)測[3]。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1260 InfinityⅡ型高效液相色譜儀；SHZ-D(Ⅲ) 型循環(huán)水真空泵；BSM-220.3型電子天平；Milli Q超純水器；KQ-500DB型超聲波清洗器；TGL-16M型高速離心機；山梨酸、苯甲酸、糖精鈉（以糖精計）、安賽蜜和脫氫乙酸對照品，來源于國家標準物質(zhì)中心官網(wǎng)；水為一級水；甲醇、乙腈，均為色譜純。

1.2 樣品來源

實驗所需樣品源于市面，選取市面上銷售的常見品牌的液體和固體食品進行食品添加劑的含量測定。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品的處理

參照食品安全國家標準（GB 5009.28—2016），采用以下方法對樣品進行前處理[4-5]。

取均勻樣品（液態(tài)樣品混勻后取樣、固態(tài)樣品取可食部分均質(zhì)后取樣）2 g，置于50 mL具塞離心管中，加水約25 mL，渦旋混勻，于50 ℃水浴超聲20 min，冷卻至室溫后加亞鐵氰化鉀溶液2 mL和乙酸鋅溶液2 mL，混勻，于8000 r/min 離心5 min，將水相轉移至50 mL容量瓶中，于殘渣中加水20 mL，渦旋混勻后超聲5 min，于8000 r/min離心5 min，將水相轉移到同一50 mL容量瓶中，并用水定容至刻度，混勻。取適量上清液過0.22 μm濾膜，待液相色譜測定。

1.3.2 標準溶液的配置

準確稱取山梨酸、苯甲酸、糖精鈉、安賽蜜和脫氫乙酸對照品10.32、10.16、10.95、10.83 和10.05 mg，用色譜純乙腈溶液溶解后定容于1000 mL的容量瓶中，配制成混合對照品貯備液。

1.3.3 主要儀器參數(shù)

色譜條件：色譜柱選擇Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱（150×4.6 mm，5μm）；柱溫：40 ℃；進樣量：10 μL；波長：230 nm；流速：1.0 mL?min-1；流動相：甲醇和0.02 mol/L的乙酸銨溶液。洗脫程序見表1。

表1 洗脫程序表

1.3.4 標準曲線的繪制

分別用刻度管移取0.50、1.00、3.00、5.00、7.00 和10.00 mL混標儲備液于10.00 mL的容量瓶中，分別用甲醇溶液定容，得到一系列不同濃度的標準溶液。濃度分別為0.5、1.0、3.0、5.0、7.0、1.0 μg/mL的標準曲線系列溶液。分別精密量取各標準曲線系列溶液各10 μL，在擬定的液相色譜條件下進樣分析，記錄峰面積。以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標進行線性回歸，獲得標準曲線。

1.3.5 檢出限與定量限

取混合對照品貯備液（10 μg/mL）在擬定的色譜條件下進行分析，根據(jù)分析結果逐級稀釋樣品濃度，分別測定山梨酸、苯甲酸、糖精鈉（以糖精計）、安賽蜜和脫氫乙酸的檢出限（S/N=3）和定量限（S/N=10）。

1.3.6 加標回收率測定

取樣品2 g于50 mL離心管中，分別加入“1.3.2”項下標準溶液0.8、1.0、1.2 mL后，照“1.3.1”項下方法，處理樣品并測定樣品中的添加劑含量。

1.3.7 樣品中各添加劑含量的測定

照“1.3.1”項下方法，處理樣品并測定樣品中的添加劑含量。

2 結果與分析

2.1 標準曲線、檢出限和定量限的測定結果

山梨酸、苯甲酸、糖精鈉（以糖精計）、安賽蜜和脫氫乙酸的測定結果見表2。

表2 標準曲線數(shù)據(jù)表

結果顯示，各添加劑在線性范圍內(nèi)線性良好，檢出限和定量限滿足相關國家標準要求。

2.2 樣品中各添加劑的加標回收率測定結果

各添加劑的加標回收率結果見表3。

表3 樣品中食品添加劑的回收率測定結果表

結果顯示，本方法測定各添加劑的加標回收率在93.12%～99.63%范圍內(nèi)，測定結果的RSD值均小于5%。本方法測定樣品中各食品添加劑的準確度良好。

2.3 樣品中各添加劑的測定結果

采用本方法，對8種不同食品中的各添加劑含量進行測定，結果見表4。

表4 8種不同食品中的添加劑含量測定結果表

從表4的測定結果看出，8種不同食品中添加劑的含量存在不同差異，其中，糖精鈉（以糖精計）含量最高達3516.3 μg/g。在確保食品安全和質(zhì)量的前提下，應該合理使用食品添加劑。因此，在日常生活中，相關部門應當對各類食品中食品添加劑的含量進行重點監(jiān)控，從而保證食品的質(zhì)量和人民群眾的飲食安全。

3 結論及展望

本實驗建立了一種同時測定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精鈉（以糖精計）、安賽蜜和脫氫乙酸的液相色譜方法，并通過對定量分析方法進行驗證，得到以下結論：在建立的定量分析方法中，山梨酸、苯甲酸、糖精鈉（以糖精計）、安賽蜜和脫氫乙酸在0.5～10 μg/mL范圍內(nèi)R2均大于0.9990，線性關系良好；方法的檢出限(LOD) 為0.0027～0.027 μg/g；定量限(LOQ)為0.50～10.95 μg/g；加標回收率在93.12%～99.63%范圍內(nèi)，測定結果的RSD值均小于5%。由此可見，本方法簡單快捷，靈敏度和準確度均較高，可用于測定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精鈉（以糖精計）、安賽蜜和脫氫乙酸的日常監(jiān)測。