種公豬精液品質(zhì)候選基因的研究進展

吳 雨，周 迪*，陳 琨，蔣桂榮，楊 蓉，王 燕，敖 葉，方 華，王 舍

（1.貴州省種畜禽種質(zhì)測定中心，貴州貴陽 550018；2.貴州省人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)遺傳科，貴州貴陽 550002）

中國幅員遼闊，地大物博，自然環(huán)境復(fù)雜多樣，為地方豬種群多樣性演化提供了得天獨厚的條件[1]。近年來，國家出臺了一系列方針政策大力推進農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化發(fā)展，2022 年中央一號文件指出要全面實施 “種業(yè)振興” 戰(zhàn)略，打好種業(yè) “翻身仗”。其中健全生豬產(chǎn)業(yè)平穩(wěn)有序發(fā)展長效機制，加強制種基地和良種繁育體系建設(shè)是未來養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重中之重。2022 年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部為進一步加強制種基地建設(shè)，聚焦生豬遺傳改良，在全國范圍內(nèi)組織遴選5 個國家級核心種公豬站，通過核心育種群公豬精液交換，實現(xiàn)群體間遺傳物質(zhì)交流，大力推動種豬聯(lián)合育種工作，體現(xiàn)了國家對種公豬繁育體系建設(shè)的重視程度和實施力度，表明優(yōu)良種公豬的選育選配在現(xiàn)代化養(yǎng)豬生產(chǎn)中占有重要地位。在養(yǎng)豬業(yè)中，生豬養(yǎng)殖經(jīng)濟效益很大程度上受種豬種用價值的影響，包括公豬的繁殖率、母豬受孕率以及產(chǎn)仔數(shù)等生產(chǎn)性能指標(biāo)，這與公豬精液質(zhì)量的好壞密不可分[2]。

目前評價種公豬精液品質(zhì)主要集中在精子的密度、活力、形態(tài)、膜生化活性和DNA 片段化等常規(guī)形態(tài)學(xué)參數(shù)上，在研究候選基因?qū)i精液質(zhì)量影響的相關(guān)報道較少。研究證實，遺傳是影響種公豬精液質(zhì)量最為重要的因素之一，不同地方豬種由于遺傳特性不同，精液品質(zhì)存在一定差異[3]。近年來，研究人員先后從人類、小鼠以及家畜精液中檢測出影響精液品質(zhì)的候選基因，包括AKAP3、HSF-1、WIP1和SPATA6等基因，通過信號傳導(dǎo)、基因重組和編輯等方式，能夠有效調(diào)節(jié)精子相關(guān)因子的表達，從而影響精子的獲能和運動，這對進一步揭示種公豬繁殖性能的遺傳機理和加強高繁殖力種豬的選育具有重要的理論指導(dǎo)意義。因此，本文主要從分子遺傳學(xué)角度介紹精液品質(zhì)相關(guān)基因在豬方面的研究進展，旨在更高效、精準(zhǔn)對種公豬精液品質(zhì)進行評價，為后續(xù)公豬精液質(zhì)量研究奠定基礎(chǔ)。

1 AKAP3 基因

1.1 AKAP3 基因結(jié)構(gòu)

A 型激酶錨定蛋白3（A-kinase anchoring protein3，AKAP3）屬于A 型激酶錨定蛋白（A-kinase anchoring proteins，AKAPs）家族，是一類精子特異性蛋白，具有結(jié)合PKA 保守區(qū)和引導(dǎo)AKAP-PKA 復(fù)合體到亞細胞位點的靶向區(qū)[4]，調(diào)節(jié)精子纖維鞘的組成，參與精子的獲能和運動[5]。不同物種之間AKAP3基因結(jié)構(gòu)略有差異，其中豬AKAP3基因定位于5 號染色體，包含7 個外顯子和6 個內(nèi)含子，全長27288bp，編碼855 個氨基酸。

1.2 豬AKAP3 基因研究現(xiàn)狀

研究表明，AKAP3基因主要在精子形成過程中的減數(shù)分裂后表達，能夠有效調(diào)節(jié)哺乳動物精子相關(guān)因子表達、染色質(zhì)濃縮、獲能和運動，在精子前體細胞形態(tài)變化和調(diào)節(jié)精子功能中起重要作用[6]。目前，AKAP3基因在豬方面的研究多集中在精子形態(tài)變化、磷酸化水平以及蛋白發(fā)生原理上。研究證實，哺乳動物精子在獲能過程中發(fā)生多種變化，包括cAMP 水平的增加、膜流動性和細胞內(nèi)蛋白酪氨酸磷酸化增加，其中酪氨酸磷酸化與AKAP3蛋白存在互作[7]。Mahabadi 等[8]采用實時熒光定量PCR 和流式細胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)AKAP3基因在雄性生殖細胞系的不同階段均有表達，推測該基因可能為機體生殖細胞發(fā)育的關(guān)鍵調(diào)控因子。隨后，免疫沉淀和western blot 檢測分析顯示，精子獲能需要AKAP3的降解，其降解程度受酪氨酸磷酸化水平調(diào)控，可通過抑制酪氨酸激酶增強AKAP3的降解，促進精子獲能[9]。Qu 等[10]利用共沉淀法檢測AKAP3蛋白對豬精子功能的影響，在精子獲能過程中，通過抑制蛋白酶體，PKA 與AKAP3之間發(fā)生解耦并被UPP 降解，解耦的PKA-AKAP3 進一步誘導(dǎo)酪氨酸磷酸化水平降低和絲氨酸蘇氨酸磷酸化水平升高，從而對豬精子獲能產(chǎn)生影響。改變機體精子中cAMP 含量，會引起精子活力改變[11]。故在對約克夏公豬和杜洛克公豬的研究中發(fā)現(xiàn)，AKAP3可通過cAMP/PKA 信號通路參與兩個豬種的精子發(fā)生，有效調(diào)節(jié)精子運動、纖毛形態(tài)發(fā)生、精卵識別和獲能等生理功能[12]，其中杜洛克公豬AKAP3蛋白含量顯著高于約克夏公豬，表明該蛋白對杜洛克公豬的精子作用效果更明顯，推測可能是由于不同品種間遺傳資源背景不同所導(dǎo)致。同時，有研究發(fā)現(xiàn)AKAP3缺失導(dǎo)致成熟精子中RNA 代謝和翻譯因子的積累以及PKA 亞基的位移，使精子蛋白組發(fā)生全局性的錯誤定位[13]，進一步證實AKAP3在豬精子蛋白質(zhì)組、精子形態(tài)和獲能中的巨大作用，提示其可作為公豬精液品質(zhì)的候選基因。此外，AKAP3基因在牛、小鼠、人類精子發(fā)育中也有相關(guān)研究，且均對精液質(zhì)量具有重要影響。小鼠AKAP3基因敲除后，精子蛋白17（Sperm protein 17，Sp17）mRNA 表達下降，導(dǎo)致小鼠精子形態(tài)存在缺陷，發(fā)生不育障礙[14]。Karanwal 等[15]通過免疫細胞化學(xué)分析證實AKAP3是牛精子中與生育相關(guān)的差異豐富蛋白，提示其可作為預(yù)測水牛生育力的潛在候選蛋白。Liu 等[16]對150 例中國漢族男性弱畸形精子癥患者進行遺傳學(xué)分析，結(jié)果顯示，患者精子中AKAP3基因均發(fā)生錯義突變且表達顯著降低，表明AKAP3可作為一個新的基因參與人類弱畸形精子癥研究。綜上，可知AKAP3基因在哺乳動物精液品質(zhì)方面的研究已有相關(guān)報道，并取得一些成果。其中AKAP3基因?qū)ωi精子功能的影響機制被證實，具有潛在的調(diào)控作用。因此，AKAP3基因可作為公豬精液品質(zhì)候選基因進行分子遺傳輔助標(biāo)記。

2 HSF-1 基因

2.1 HSF-1 基因結(jié)構(gòu)

熱休克轉(zhuǎn)錄因子1（Heat shock factor 1，HSF-1）屬于熱休克（heat shock transcription factors，HSFs）轉(zhuǎn)錄因子家族，是一種具有熱激活DNA 結(jié)合能力的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，可介導(dǎo)真核生物熱休克蛋白基因的應(yīng)激誘導(dǎo)表達。該基因存在4種不同的HSF-1蛋白亞型（HSF1α、HSF1β、HSF1γα、HSF1γβ），且在哺乳動物睪丸組織中高表達[17]。其中豬HSF-1基因定位于4 號染色體，包含15 個外顯子和14 個內(nèi)含子，全長22953bp，編碼653 個氨基酸。

2.2 豬HSF-1 基因研究現(xiàn)狀

哺乳動物的熱應(yīng)激是由一系列熱休克轉(zhuǎn)錄因子家族（HSFs）水平調(diào)控的，即HSF-1、HSF-2、HSF-3、HSF-4。其中HSF-1 是該家族的主要調(diào)節(jié)因子，可通過誘導(dǎo)相關(guān)因子轉(zhuǎn)錄，上調(diào)熱休克蛋白（HSPs）的表達來啟動熱休克反應(yīng)，以抵消環(huán)境溫度升高引起的細胞損傷[18]。非應(yīng)激條件下，HSF-1以單體形式出現(xiàn)，當(dāng)機體受到熱或其他形式的應(yīng)激時，HSF-1則轉(zhuǎn)化為一種 “活性” 的三聚體形式，通過DNA 結(jié)合，誘導(dǎo)編碼分子伴侶基因（HSP40、HSP70和HSP90）轉(zhuǎn)錄，從而促進精子細胞的增殖分化[19]。目前，HSF-1基因在豬方面的研究主要集中在各組織器官以及精液的mRNA 表達上。研究發(fā)現(xiàn)，HSF-1基因敲除小鼠，其生殖細胞在減數(shù)分裂前期發(fā)生粗線期增殖停滯，導(dǎo)致初級精母細胞大量凋亡，造成睪丸發(fā)育不全，說明HSF-1除了受熱應(yīng)激刺激發(fā)揮功能，在生理條件下對機體精子發(fā)育也起著至關(guān)重要的作用[20]。隨后，HSF-1基因在杜洛克豬、霍壽黑豬和長白豬的研究結(jié)果中顯示，該基因在上述3 個豬種的精液中均有表達，其中杜洛克豬mRNA 表達量最高，與其他兩個豬種達到差異極顯著；相關(guān)性分析顯示，HSF-1基因與霍壽黑豬的精子密度和頂體完整性呈極顯著正相關(guān)。HSF-1基因表達越高，霍壽黑豬的精子密度越高，具有正向調(diào)控精子頂體完整性的作用，表明其對霍壽黑豬精液品質(zhì)影響較大，后續(xù)可進一步開展基因功能和機制驗證；而HSF-1基因在杜洛克豬、長白豬精液的各項性能指標(biāo)中均無顯著相關(guān)性[21]，推測可能是由于品種之間存在個體差異，遺傳效能不同所導(dǎo)致。除了在豬精液中表達，研究人員在90～210 日齡的公豬中發(fā)現(xiàn)隨著年齡增加，HSF-1基因在其肌肉、脂肪、胃等組織器官的mRNA 表達也隨之增加，推測其對豬的多個組織器官生理發(fā)育起著重要作用[22-23]。此外，HSF-1基因在人體衰老、癌癥以及一些神經(jīng)退行性疾病中也有相關(guān)研究，具有作為治療生物靶點的潛力[24]。通過以上報道可知，HSF-1基因?qū)Σ糠重i種的精子密度、頂體完整性等指標(biāo)存在相關(guān)性，但具體調(diào)控機制尚未闡明。目前HSF-1基因在公豬精液中的相關(guān)研究報道不多，還有待深入探究。

3 WIP1 基因

3.1 WIP1 基因結(jié)構(gòu)

野生型p53 誘導(dǎo)的磷酸酯酶1（Wild-type p53-induced phosphatase 1，Wip1）屬于蛋白磷酸酯酶2C（Protein phosphatase type 2C，PP2C）家族，是一種絲氨酸/ 蘇氨酸磷酸酶，F(xiàn)iscella 等[25]于1997 年首次通過γ 射線和UV 射線誘導(dǎo)發(fā)現(xiàn)，可廣泛調(diào)節(jié)哺乳動物體內(nèi)多種類型細胞的增殖分化、凋亡以及DNA 損傷修復(fù)等生理活動。目前WIP1 基因定位于4 號染色體，包括2 個外顯子和1 個內(nèi)含子，全長2249bp，編碼690 個氨基酸。

3.2 豬WIP1 基因研究現(xiàn)狀

在哺乳動物生殖細胞發(fā)育過程中，WIP1基因通過活化位點去磷酸化，與Nemo 樣激酶（NLK）發(fā)生相互作用，進一步磷酸化反向調(diào)控因子LEF1，降低其活性，最終導(dǎo)致Wnt 信號增強，從而促進精子的發(fā)生和獲能[26]。研究發(fā)現(xiàn)，通過抑制WIP1基因的活性可增強精子父本DNA損傷修復(fù)的氧化應(yīng)激，嚴重阻礙精子DNA 修復(fù)，導(dǎo)致機體精子活力受到影響[27]。隨后，Wei 等[28]發(fā)現(xiàn)WIP1基因在小鼠睪丸組織中高表達，且WIP1基因敲除小鼠表現(xiàn)出明顯的雄性生殖缺陷，包括睪丸變小、精子發(fā)生障礙和生育不良，證實WIP1基因?qū)π坌詣游锷称鞴俚陌l(fā)育具有潛在調(diào)控作用。目前，WIP1基因在豬方面的研究主要集中在精液mRNA 表達、基因敲除以及發(fā)生原理上。在杜洛克豬、霍壽黑豬和長白豬的研究中發(fā)現(xiàn)，WIP1基因在3 個豬種的精液中均有表達。其中，在長白豬中mRNA 表達量最高，與其他2個豬種呈極顯著差異；相關(guān)性分析顯示，WIP1基因表達量與杜洛克豬的精子活力和精子DNA完整率呈顯著負相關(guān)；與霍壽黑豬的線粒體完整性、精子活力和鞭打速率呈顯著負相關(guān)。表明WIP1基因?qū)? 個豬種的精液品質(zhì)相關(guān)參數(shù)具有反向調(diào)控作用，推測通過下調(diào)該基因表達量，可一定程度上改善其精液質(zhì)量，增強公豬繁殖力；而與長白豬的精子活力和DNA 完整性呈顯著正相關(guān)[21]，說明WIP1基因正向調(diào)控長白豬的相關(guān)精液指標(biāo)，通過上調(diào)該基因表達量，促進其精子發(fā)生?？傮w上看WIP1基因?qū)ι鲜? 個豬種的精液品質(zhì)均有較大影響，與豬精液品質(zhì)各項性能指標(biāo)密切相關(guān)。隨后，Wang 等[29]采用豬睪丸支持細胞系（Sertoli），研究WIP1基因是否調(diào)節(jié)Sertoli細胞的增殖、參與雄性生殖。結(jié)果顯示，抑制WIP1 表達抑制豬Sertoli 細胞增殖，增強P53 表達，提升P53 磷酸化水平，表明WIP1通過抑制P53 磷酸化而正向調(diào)節(jié)豬Sertoli 細胞的增殖。Xu等[30]研究發(fā)現(xiàn)WIP1基因敲除豬表現(xiàn)出明顯的雄性生殖障礙，精液的數(shù)量和精子質(zhì)量顯著下降，進一步證實WIP1基因在公豬精子發(fā)生過程中的重要作用。此外，Sun 等[31]研究發(fā)現(xiàn)通過下調(diào)WIP1可顯著抑制男性前列腺癌（Prostate cancer，PCa）細胞的增殖、侵襲和克隆能力，提示其可能是治療PCa 的潛在治療靶點。綜上，已證實WIP1基因在公豬、小鼠以及人類的精子發(fā)生中具有潛在調(diào)控作用，且對不同品種豬的精子活力、DNA 完整率以及線粒體完整性等指標(biāo)存在顯著相關(guān)性。因此，提示W(wǎng)IP1基因可作為公豬精液品質(zhì)候選基因進行分子遺傳輔助標(biāo)記。

4 SPATA6 基因

4.1 SPATA6 基因

精子發(fā)生相關(guān)基因6（Spermatogenesis associated 6，SPATA6）屬于精子發(fā)生相關(guān)（Spermatogenesis associateds，SPATAs）基因家族，可直接參與動物體精子細胞的發(fā)育和生殖。不同物種之間SPATA6基因結(jié)構(gòu)略有差異，該基因最早在老鼠睪丸中發(fā)現(xiàn)，定位于5 號染色體，編碼488 個氨基酸[32]。而豬SPATA6基因則定位于6號染色體，由13 個外顯子和12 個內(nèi)含子組成，全長131221bp，編碼489 個氨基酸。

4.2 豬SPATA6 基因研究現(xiàn)狀

SPATA6基因是一類保守的睪丸特異性基因，可調(diào)控精子發(fā)育后期頂體的形成，對精子的發(fā)生、成熟和受精起著重要作用[33]。原位雜交實驗分析顯示，SPATA6基因在哺乳動物睪丸的所有細胞類型中均有表達，其中精子細胞表達量最高，且SPATA6表達豐度與精子數(shù)量、活力和形態(tài)呈正相關(guān)[34]。研究發(fā)現(xiàn)，SPATA6基因失活導(dǎo)致啟動子區(qū)域DNA 高度甲基化，影響精子產(chǎn)生途徑，造成睪丸發(fā)育不全，出現(xiàn)生殖障礙[35]。目前，在豬方面的研究主要集中在基因多態(tài)性檢測和組織表達上。Song 等[36]發(fā)現(xiàn)SPATA6基因在大白豬不同器官組織中均有表達，其中睪丸組織mRNA 表達量最高，具有組織表達特異性。對該基因的核苷酸多態(tài)性檢測結(jié)果顯示，長白豬中有兩個突變位點，分別是rs341061477 位點和rs331255092 位點。隨后，周佳偉等[37]選取177 頭杜洛克豬和78 頭大白豬進行基因分型驗證，從SPATA6基因中擴增含有上述兩個SNPs 位點的DNA 序列進行分型檢測。結(jié)果顯示，這兩個個SNPs 位點與兩個豬種的精子畸形率、精液量等指標(biāo)均存在顯著相關(guān)性，其中兩個SNPs 位點在大白豬中均存在優(yōu)勢等位基因T，杜洛克豬的rs331255092 位點優(yōu)勢等位基因為A，進一步證實SPATA6基因?qū)Σ煌贩N豬的精液品質(zhì)存在潛在調(diào)控作用。與此同時，研究人員相繼在其他豬種的中發(fā)現(xiàn)rs330516022、rs342323574、rs321193752 和rs338297955 等突變位點[38]，且與公豬精液品質(zhì)性狀均呈正相關(guān)，表明在不同種豬中SPATA6基因多態(tài)性豐富，遺傳多樣性程度高，選擇潛力大，其可作為豬精液品質(zhì)性狀的分子輔助標(biāo)記。此外，SPATA6基因在其他動物身上也有研究。Li等[39]發(fā)現(xiàn)過表達SPATA6基因會顯著促進綿羊睪丸間質(zhì)細胞的增殖分化以及睪酮激素的分泌。通過基因多態(tài)性篩選，檢測出綿羊的第72272 處發(fā)生T>C 突變，提示其可作為選育高繁殖力的綿羊的分子標(biāo)記。彩麗干[40]通過實時熒光定量PCR 技術(shù)檢測出蒙古馬性成熟后睪丸SPATA6基因的表達量是性成熟前的2 倍。通過上述實驗結(jié)果可知，在不同家畜中檢測出的SPATA6基因多態(tài)性豐富。其中在公豬精液中存在多個突變位點，較其他家畜選擇潛力大，且在睪丸組織中特異性表達。故提示該基因可作為公豬精液品質(zhì)候選基因進行研究。

5 MTHFR 基因

5.1 MTHFR 基因結(jié)構(gòu)

亞甲基四氫葉酸還原酶（Methylene tetrahydrofolate reductase，MTHFR）是一種細胞質(zhì)酶，通過催化亞甲基四氫氰酸酯將其還原為甲基四氫葉酸，為體內(nèi)生殖細胞輔助因子合成提供甲基供體，從而保障精子發(fā)生。此外還參與機體葉酸以及同型半胱氨酸代謝，廣泛調(diào)控內(nèi)部各項生理變化，對機體的生長發(fā)育具有重要作用[41]。豬MTHFR基因定位于6 號染色體，包含13 個外顯子和12 個內(nèi)含子，基因序列長約18482bp，編碼2396 個氨基酸。

5.2 豬MTHFR 基因研究現(xiàn)狀

MTHFR是葉酸與HCY 代謝中的重要酶，參與許多影響基因組穩(wěn)定性、印跡以及表達的生理過程[42]。研究發(fā)現(xiàn)，哺乳動物MTHFR基因多態(tài)性，可誘導(dǎo)酶活性降低，造成DNA 甲基化異常，出現(xiàn)精子DNA 和膜損傷，影響精子發(fā)生過程，導(dǎo)致雄性不育[43,44]。近年來，研究人員先后在小鼠、人類以及家畜中檢測出MTHFR基因的20 余種多態(tài)位點，其中C677T 位點廣泛應(yīng)用于不孕不育的研究，該位點已證實對男性精子發(fā)生具有顯著影響，其他突變位點還有待進一步探究[45]。目前，在豬方面的研究多集中于多態(tài)位點與精液參數(shù)的相關(guān)性分析上。在長白豬的研究中，共檢測到五個SNP 位點，分別為c.1278G ＞A、c.1041G＞A、c.570C＞T、c.414C＞G、c.450C＞T位點，相關(guān)性分析顯示，前四個SNP 位點與其精子密度、精子畸形率以及精漿的MDA、H2O2呈顯著性相關(guān)性，且c.450C＞T 位點與其精液量和精子密度顯著相關(guān)，表明MTHFR基因在長白豬中的多態(tài)變異位點豐富，選擇潛力大，不僅對其精液品質(zhì)部分參數(shù)有顯著相關(guān)性，同時也影響了公豬精漿中的氧化應(yīng)激，這對研究其精漿內(nèi)精子形態(tài)，增加精子密度和活力，改善精液質(zhì)量存在重要提示，建議進行深入探究；在杜洛克豬中，共檢測到兩個SNP 位點，即c.450C ＞T 和c.294C＞T 位點，它們分別與杜洛克豬的精子密度、精子活力和總精子數(shù)、有效精子數(shù)顯著相關(guān)，說明該基因在杜洛克豬體內(nèi)同樣存在突變位點，且對其精子的一些關(guān)鍵性參數(shù)指標(biāo)具有顯著影響，推測可一定程度上調(diào)節(jié)該豬種的繁殖性能；在大白豬中，檢測到的突變位點與其精液品質(zhì)均無顯著性差異，影響效果不大，推測原因可能是該品種樣本量不夠或遺傳特性不同所導(dǎo)致[46]。通過比對，發(fā)現(xiàn)在三個豬種中檢測出的突變位點與NCBI 數(shù)據(jù)庫公布的豬MTHFR基因SNP 位點（rs690512234）不一致，表明不同種豬均存在該基因變異位點，且具有DNA 遺傳特異性，并對豬精液品質(zhì)有一定影響。隨后，研究發(fā)現(xiàn)MTHFR基因除了影響公豬精液品質(zhì)，還與豬的骨骼發(fā)育、礦物質(zhì)代謝以及形態(tài)特征有所關(guān)聯(lián)，對豬的生長發(fā)育起到一定作用[47,48]。綜上，表明MTHFR基因?qū)i精液品質(zhì)具有潛在調(diào)控作用，存在多個變異位點，可進一步影響其繁殖性能。目前該基因的研究主要聚焦在男性不育與基因多態(tài)性的關(guān)系，對種公豬精液品質(zhì)的影響研究報道較少，其可作為公豬精液品質(zhì)候選基因進行深入研究。

6 小結(jié)與展望

公豬精液品質(zhì)在養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展和豬品種改良中發(fā)揮重要作用，可直接影響后代的數(shù)量、質(zhì)量以及養(yǎng)豬場經(jīng)濟效益。公豬育種的目的在于生產(chǎn)大量優(yōu)質(zhì)精液，將親本的優(yōu)良性狀穩(wěn)定地遺傳給后代，但在實際生產(chǎn)中，公豬精液質(zhì)量存在較大差異，這是制約養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的重要因素之一。目前，除了在公豬精液品質(zhì)形態(tài)參數(shù)層面研究各個指標(biāo)的變化，更重要的是從分子遺傳學(xué)角度深度挖掘豬精液品質(zhì)相關(guān)基因的研究和分子標(biāo)記篩選，使其具有更高的精準(zhǔn)性和生物安全性。因此，通過以上研究結(jié)果表明，AKAP3、HSF-1、WIP1、SPATA6和MTHFR基因能一定程度上影響種豬的精子活力、密度以及DNA 完整率等性能指標(biāo)，具有正向調(diào)控作用，提示可作為種公豬精液品質(zhì)候選基因進行分子遺傳輔助標(biāo)記。后續(xù)可結(jié)合現(xiàn)有科研成果，利用基因組編輯、酵母雙雜交以及cDNA 文庫構(gòu)建等現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)，進一步探索公豬精液性狀相關(guān)的遺傳基因，開展基因功能驗證，深度挖掘影響公豬精液質(zhì)量的分子標(biāo)記物，旨在更準(zhǔn)確、快速地篩選出品質(zhì)優(yōu)良公豬精液，同時通過基因遺傳修飾，進一步改善公豬精液質(zhì)量，優(yōu)化品種遺傳特性，使其在遺傳改良上發(fā)揮更大作用，為后續(xù)種公豬遺傳育種研究提供有利依據(jù)。