續(xù)斷化學(xué)成分、藥理作用及炮制對(duì)其質(zhì)量的影響研究進(jìn)展*

劉 麗，楊 征，傅若秋，李 莉，明 月，孟德勝，劉 耀

（中國(guó)人民解放軍陸軍特色醫(yī)學(xué)中心，重慶 400042）

續(xù)斷又名和尚頭、鼓槌草，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于2020 年版《中國(guó)藥典（一部）》，為川續(xù)斷科植物川續(xù)斷Dipsacus asperWall. ex Henry 的干燥根，味苦、辛，性微溫，歸肝、腎經(jīng)，具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、續(xù)折傷、止崩漏的功效，主要用于治療肝腎不足、腰膝酸軟、筋傷骨折、崩漏、胎漏等癥［1］。含三萜皂苷類、環(huán)烯醚萜苷類、酚酸類、生物堿類、揮發(fā)油等成分，具有抗骨質(zhì)疏松、抗氧化、抗腫瘤、預(yù)防復(fù)發(fā)性流產(chǎn)等作用?，F(xiàn)代研究表明，發(fā)汗及其他炮制方法會(huì)影響續(xù)斷的化學(xué)成分與藥理作用，臨床使用過(guò)程中往往忽視了這一變化，造成藥效不佳。為更加合理使用續(xù)斷，使其充分發(fā)揮作用，在此對(duì)續(xù)斷化學(xué)成分、藥理作用，以及發(fā)汗及其他炮制方法對(duì)其質(zhì)量的影響進(jìn)行綜述，為續(xù)斷的質(zhì)量控制和臨床應(yīng)用提供參考。

1 化學(xué)成分

1.1 三萜皂苷類

續(xù)斷中三萜皂苷類化合物含量較高，是其主要活性成分。目前分離得到的三萜皂苷類化合物均為齊墩果烷型［2-5］，主要有川續(xù)斷皂苷Ⅵ、川續(xù)斷皂苷Ⅴ、川續(xù)斷皂苷X、刺楸皂苷A（kalopanaxsaponin A）、川續(xù)斷皂苷Ⅻ、日本續(xù)斷皂苷E1（japondisaponin E1）、川續(xù)斷皂苷A、川續(xù)斷皂苷B、川續(xù)斷皂苷C、威巖仙皂苷A（cauloside A）、灰氈毛忍冬皂苷A（macranthoidin A）、灰氈毛忍冬皂苷B（macranthoside B）、HN saponin F等。

1.2 環(huán)烯醚萜苷類

目前，已從續(xù)斷中分離得到環(huán)烯醚萜苷類化合物，包括馬錢(qián)子苷（loganin）、馬錢(qián)苷酸（loganin acid）、獐牙菜苷（sweroside）、茶茱萸苷（cantleyoside）、6′ -O-β-D-apiofuranosyl-sweroside、大花雙參苷A（triplostosideA）、續(xù)斷苷A、續(xù)斷苷B、續(xù)斷苷E、續(xù)斷苷F、續(xù)斷苷H、林生續(xù)斷苷Ⅰ（sylvestroside Ⅰ）、林生續(xù)斷苷Ⅲ（sylvestrosideⅢ）、林生續(xù)斷苷Ⅳ（sylvestroside Ⅳ）等［6-9］。

1.3 酚酸類

目前，已從續(xù)斷中分離得到15 種酚酸類化合物，分別為dipsaicin、2，6 - 二羥基桂皮酸、香草酸（vanillic acid）、咖啡酸（caffeic acid）、2′-O-caffeoyl-D-glucopyranoside ester、咖啡奎寧酸（caffeoylquinic acid）、綠原酸（chlorogrnic acid）、異綠原酸A（isochlorogenic acid A）、3，5-O-二咖啡酰基奎寧酸甲酯、異綠原酸B（isochlorogenic acid B）、3，4-O-二咖啡?；鼘幩峒柞ァ惥G原酸C（isochlorogenic acid C）、4，5-O-二咖啡?；鼘幩峒柞?、4-咖啡奎寧酸、5-咖啡奎寧酸，后面10 個(gè)化合物均為咖啡?？鼘幩犷惢衔铮?0-15］。

1.4 生物堿類

目前，已從續(xù)斷中分離得到3 種生物堿類化合物，分別為坎特萊因堿（cantleyine）、喜樹(shù)堿（venoterpine）和龍膽堿（gentianine）［16-17］。

1.5 揮發(fā)油

李濤等［18］通過(guò)氣相色譜-質(zhì)譜（GC -MS）法分析超聲輔助提取得到的揮發(fā)油，共檢測(cè)53種成分，已鑒定51 種化合物，其中醇類化合物相對(duì)含量最高，烴類化合物種類最多，相對(duì)含量較高的化合物主要有γ-谷甾醇（35.80%）、豆甾醇（8.37%）、24 - 甲基- 5 - 膽甾烯-3-醇（7.06%）、羊毛甾醇（6.71%）等。

1.6 其他

續(xù)斷中還含有木脂素，如（7R，8S，7′R，8′S）- prinsepiol - 4 -O-β-D- glucopyranoside、（7R，8S，7′R，8′S）-8-hydroxypinoresinol-4-O-β-D-dglucopyranoside 等，多糖、β- 谷甾醇、蔗糖、維生素，以及鈣（Ca）、鐵（Fe）、鎂（Mg）、鋅（Zn）、銅（Cu）等無(wú)機(jī)元素，其中微量元素鈦（Ti）的含量較高［2-4，19-20］。

2 藥理作用

2.1 抗骨質(zhì)疏松

研究表明，續(xù)斷既可抑制破骨細(xì)胞增殖、分化，也可促進(jìn)成骨細(xì)胞分化，從而促使基質(zhì)鈣化、骨痂生長(zhǎng)，在防治骨質(zhì)疏松、促進(jìn)骨愈合方面有較好的臨床療效［21-22］。

胡獻(xiàn)躍等［23］發(fā)現(xiàn)，續(xù)斷離子提取液具有促進(jìn)破骨細(xì)胞RAW264.7 生長(zhǎng)和抑制成骨細(xì)胞MC3T3 - E1 活性的雙向作用。

許勇等［24］通過(guò)研究川續(xù)斷提取皂苷（ASA）促進(jìn)骨質(zhì)疏松模型中骨髓基質(zhì)細(xì)胞（rBMSCs）成骨分化的作用機(jī)制發(fā)現(xiàn)，ASA通過(guò)磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶（AKT）信號(hào)通路促進(jìn)骨質(zhì)疏松模型rBMSCs成骨分化。

WU 等［25］研究表明，獐牙菜苷通過(guò)MC3T3 - E1 細(xì)胞膜雌激素受體-α 和GPR30 相互作用，激活p38 信號(hào)通路，促進(jìn)成骨細(xì)胞分化。

SUN 等［20］從川續(xù)斷根中得到多糖DAP，進(jìn)一步試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)DAP 通過(guò)上調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）和護(hù)骨因子（OPG），下調(diào)去卵巢大鼠蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)中的核因子-κB（NF-κB）受體活化因子（RANK）和NF-κB受體激活蛋白配體（RANKL），激活PI3K/AKT/內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）信號(hào)通路，進(jìn)而預(yù)防和治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥。

2.2 預(yù)防復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（RSA）

RSA 是臨床常見(jiàn)的婦科疾病，是指2次及以上在妊娠28 周前的自然流產(chǎn)［26］。續(xù)斷含有豐富的甾醇，具有類雌激素樣活性，能抑制子宮平滑肌收縮，促進(jìn)卵巢黃體形成、子宮及胚胎的生長(zhǎng)發(fā)育，是防治RSA 的高頻使用中藥。同時(shí)，續(xù)斷中含有豐富的維生素E 和多種微量元素，能增強(qiáng)機(jī)體免疫功能［27-28］。

XIA 等［29］研究發(fā)現(xiàn)，川續(xù)斷皂苷Ⅵ可調(diào)節(jié)蛻膜細(xì)胞中關(guān)鍵靶點(diǎn)禽肉瘤病毒17 的假定轉(zhuǎn)化因子（JUN）、重組人胱天蛋白酶3（CASP3）、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3（STAT3）、非受體酪氨酸激酶（SRC）和前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物合成酶2（PTGS2）的表達(dá)，以誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜蛻膜化，促使受精卵植入宮腔，預(yù)防RSA。

2.3 抗氧化

魏東偉等［30］測(cè)定了10 種中草藥水提液的總抗氧化能力、自由基清除能力及總酚含量，綜合研究其抗氧化活性，其中續(xù)斷的抗氧化能力硫酸亞鐵當(dāng)量為0.985 mmol/L，自由基清除率為41.849%，總酚含量為1.631 μg/mL，表明續(xù)斷具有一定的抗氧化能力。

陳菊［31］對(duì)續(xù)斷多糖提取液進(jìn)行抗氧化試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)續(xù)斷多糖具有較強(qiáng)的清除1，1 - 二苯基- 2 - 若基肼（DPPH）自由基、羥基自由基能力，有良好的體外抗氧化活性。

王應(yīng)玲等［32］發(fā)現(xiàn)，續(xù)斷中各種含硒化合物都具有清除超氧陰離子和羥自由基的能力，且不同溶劑提取物的清除率不同，其中醇溶性提取物清除超氧自由基的能力最強(qiáng)，硒多糖清除羥自由基的能力最強(qiáng)。

2.4 保護(hù)神經(jīng)

續(xù)斷的神經(jīng)保護(hù)作用的研究大部分與阿爾茲海默病（AD）有關(guān)［33］。

YU 等［34］研究表明，川續(xù)斷皂苷Ⅵ通過(guò)抑制膠質(zhì)細(xì)胞釋放細(xì)胞因子和炎性因子，從而抑制炎性反應(yīng)的發(fā)生，有效減少AD的發(fā)病。

WANG 等［35］的研究表明，川續(xù)斷皂苷Ⅵ通過(guò)下調(diào)下丘腦- 垂體- 腎上腺（HPA）軸，降低全身皮質(zhì)酮水平，從而改善β 淀粉樣蛋白25 - 35（Aβ25-35）誘導(dǎo)的大鼠記憶障礙和焦慮狀態(tài)，對(duì)認(rèn)知功能障礙的大鼠具有神經(jīng)保護(hù)作用。

未小明［36］的研究表明，續(xù)斷可能通過(guò)對(duì)抗或減少血管性癡呆模型大鼠體內(nèi)氧自由基來(lái)改善其認(rèn)知功能障礙。

鄭建君等［37］發(fā)現(xiàn)，川續(xù)斷總皂苷通過(guò)降低聚腺苷二磷酸- 核糖聚合酶（PARP）、促凋亡蛋白（Bax）、CASP3表達(dá)水平和升高B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2基因（Bcl-2）表達(dá)水平來(lái)改善血管性癡呆模型大鼠的學(xué)習(xí)與記憶能力。

2.5 保護(hù)心肌

LI 等［38］研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期口服川續(xù)斷皂苷Ⅵ能明顯改善心肌缺血損傷后的心功能和心肌纖維化，其作用機(jī)制可能與減少氧化應(yīng)激和調(diào)節(jié)炎性介質(zhì)有關(guān)。

馮海斌等［39］研究表明，川續(xù)斷皂苷Ⅵ通過(guò)激活轉(zhuǎn)錄激活因子6（ATF6）通路，減輕H2O2誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞（H9c2）氧化應(yīng)激和抑制細(xì)胞凋亡，發(fā)揮心肌保護(hù)作用，為川續(xù)斷皂苷Ⅵ治療心肌損傷的開(kāi)發(fā)提供了理論基礎(chǔ)。

JIANG 等［40］研究表明，川續(xù)斷皂苷X 在心肌I/ R損傷期間能保護(hù)大鼠的心肌功能，主要與血清促炎因子水平的降低及缺血心肌組織中高遷移率組蛋白1（HMGB1）、磷酸化人核因子κB 抑制蛋白α（IκB-α）和NF-κB蛋白的減少相關(guān)。

2.6 鎮(zhèn)痛抗炎

許建安［41］研究表明，續(xù)斷能提高小鼠熱板所致痛閾值，降低由醋酸所致大鼠扭體反應(yīng)次數(shù)，對(duì)二甲苯和蛋清引起的急性炎癥及無(wú)菌棉球所致亞急性炎癥有明顯的對(duì)抗作用。

SUH 等［42］研究表明，川續(xù)斷皂苷Ⅵ對(duì)小鼠具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，且該作用呈劑量依賴性。

GONG 等［43］、LUO 等［44］研究表明，川續(xù)斷皂苷Ⅵ是續(xù)斷發(fā)揮鎮(zhèn)痛抗炎作用的主要活性成分，其通過(guò)抑制白細(xì)胞介素6（IL-6）/STAT3 通路激活，下調(diào)DNMT3b表達(dá)，發(fā)揮抗炎活性。此外，還能調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化，激活脂多糖（LPS）刺激的RAW264.7 巨噬細(xì)胞中的核轉(zhuǎn)錄因子（Nrf2）通路，減少炎性反應(yīng)的發(fā)生。

2.7 抗腫瘤

史夢(mèng)瑤等［45］研究表明，續(xù)斷三萜皂苷HN Saponin F可表現(xiàn)出類雄激素樣活性，能抑制雄激素依賴性前列腺癌LNCaP 細(xì)胞的增殖，表現(xiàn)出抗腫瘤作用，可用于雄激素依賴性前列腺癌藥物的開(kāi)發(fā)。

周鵬等［46］研究表明，續(xù)斷皂苷通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)NO的產(chǎn)生，抑制人急性白血病細(xì)胞U937 和人早幼粒白血病細(xì)胞HL-60的增殖并誘導(dǎo)其凋亡。

WU 等［47］利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究續(xù)斷活性成分與靶基因之間的相互作用發(fā)現(xiàn)，有254個(gè)靶基因與續(xù)斷中的林生續(xù)斷苷Ⅲ、異綠原酸B、威巖仙皂苷A、豆甾醇等6 種活性化合物及骨相關(guān)，其中SRC、AKT1、生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2（GRB2）是前3位的Hub基因。續(xù)斷可通過(guò)多靶點(diǎn)、多途徑調(diào)節(jié)骨生理功能來(lái)發(fā)揮抗肺癌作用，可作為治療肺癌的候選藥物。

2.8 其他

續(xù)斷的活性成分能與人牙周細(xì)胞膜受體特異性結(jié)合，可在口腔局部更好保留而發(fā)揮藥理作用，為治療口腔牙周炎的中藥研發(fā)提供了理論基礎(chǔ)［48］。陳佩佩等［49］研究表明，局部注射川續(xù)斷皂苷Ⅵ對(duì)于大鼠正畸壓力側(cè)破骨細(xì)胞形成有推動(dòng)作用，有助于增進(jìn)牙周改建和加速正畸牙移動(dòng)。

續(xù)斷有助于糖尿病腎病的預(yù)防和治療［50］，川續(xù)斷多糖二氨基庚二酸（DAP）能降低糖尿病模型大鼠的空腹血糖（FBG）和糖化血紅蛋白（HbA1C）水平，改善腎功能紊亂。通過(guò)抗高血糖、調(diào)血脂和抗氧化活性，以及抑制晚期糖基化終產(chǎn)物（AGE）積累和晚期糖基化終產(chǎn)物受體（RAGE）表達(dá)來(lái)保護(hù)糖尿病模型大鼠的腎臟。

3 發(fā)汗對(duì)續(xù)斷質(zhì)量的影響

3.1 續(xù)斷發(fā)汗工藝

產(chǎn)地加工是影響續(xù)斷質(zhì)量好壞的重要因素之一。續(xù)斷傳統(tǒng)的產(chǎn)地加工方法中，發(fā)汗處理是必不可少的環(huán)節(jié)［51］。2020 年版《中國(guó)藥典（一部）》規(guī)定，杜仲、茯苓、厚樸、續(xù)斷等需經(jīng)發(fā)汗處理［1］。《中草藥加工技術(shù)》中，大黃、川芎、天麻、何首烏、藿香、梔子、石斛等均有發(fā)汗處理的記載［52］。發(fā)汗前后，藥材在外觀性狀、化學(xué)成分、藥理作用方面有所變化，一定程度上會(huì)影響藥材及飲片質(zhì)量，從而影響其臨床療效。目前尚缺乏一套完整的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)規(guī)范發(fā)汗加工方法，如未規(guī)定發(fā)汗所需的溫度、相對(duì)濕度、時(shí)間等。發(fā)汗工藝不一致導(dǎo)致藥材質(zhì)量存在差異，故產(chǎn)地加工時(shí)選擇適宜的工藝能保證藥材的藥用效果。

2020 年版《中國(guó)藥典（一部）》規(guī)定，續(xù)斷秋季采挖，除去根頭和須根，用微火烘至半干，堆置發(fā)汗至內(nèi)部變綠色時(shí)，再烘干［1］。劉艷等［53］以續(xù)斷總皂苷、川續(xù)斷皂苷Ⅵ、水溶性及醇溶性浸出物為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)續(xù)斷不同的產(chǎn)地加工方法進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)續(xù)斷烘至半干時(shí)發(fā)汗較好，與藥典中“微火烘至半干”描述一致。周太敏等［54］以藥材相對(duì)含水量、發(fā)汗溫度、發(fā)汗時(shí)間為考察因素設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，優(yōu)選續(xù)斷發(fā)汗條件為45 ℃烘至相對(duì)含水量為（40±5）%時(shí)，在25 ℃溫度下發(fā)汗72 h。

3.2 發(fā)汗對(duì)續(xù)斷外觀性狀的影響

形、色、氣、味是中藥材的固有屬性，即中藥材的真、偽、優(yōu)、劣在形、色、氣、味均有不同的表現(xiàn)［55］。發(fā)汗后的藥材在顏色、性狀上多有變化。未發(fā)汗續(xù)斷內(nèi)呈棕色，而發(fā)汗續(xù)斷內(nèi)呈墨綠色［56］，多酚氧化酶是導(dǎo)致色澤變化的重要酶之一［57］。魏慶紅等［58］研究表明，續(xù)斷藥材發(fā)汗至外觀為斷面豆青色時(shí)的質(zhì)量?jī)?yōu)于切面皮部墨綠色或棕褐色時(shí)。

3.3 發(fā)汗對(duì)續(xù)斷化學(xué)成分的影響

發(fā)汗過(guò)程中，隨著藥材內(nèi)部溫度、相對(duì)濕度的改變，藥物化學(xué)成分會(huì)在酶作用下發(fā)生轉(zhuǎn)化，影響其化學(xué)成分的種類及含量［59］。

姜東京［60］和李亞霏等［61］對(duì)比了續(xù)斷發(fā)汗前后的成分發(fā)現(xiàn)，發(fā)汗后水溶性浸出物、醇溶性浸出物、總皂苷和常春藤皂苷元的含量均減少。

龔安慧［62］對(duì)續(xù)斷進(jìn)行發(fā)汗處理后發(fā)現(xiàn)，總皂苷、續(xù)斷皂苷A、續(xù)斷皂苷B 含量減少，含量差異與其色澤差異有顯著相關(guān)性。

何華等［63］、周太敏等［64］研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)汗加工后續(xù)斷總?cè)圃碥蘸匡@著減少，川續(xù)斷皂苷Ⅵ的含量顯著增加，可能與藥材真菌群落豐度相關(guān)，發(fā)汗后富集的優(yōu)勢(shì)菌會(huì)促進(jìn)川續(xù)斷皂苷Ⅵ積累。

楊瑩等［65］研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)汗會(huì)改變繼斷中揮發(fā)油的成分及含量。

洪智慧等［66］、DU 等［67］研究發(fā)現(xiàn)，續(xù)斷發(fā)汗后綠原酸、異綠原酸A、馬錢(qián)酸、馬錢(qián)子苷的含量減少，咖啡酸、異綠原酸B、異綠原酸C、大花雙參苷A 的含量增加。

3.4 發(fā)汗對(duì)續(xù)斷藥理作用的影響

目前，對(duì)續(xù)斷發(fā)汗前后藥理學(xué)變化的研究甚少。姜東京［60］通過(guò)比較發(fā)汗前后續(xù)斷主要入血成分馬錢(qián)苷、川續(xù)斷皂苷Ⅵ的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特征發(fā)現(xiàn)，未發(fā)汗續(xù)斷在體內(nèi)更易吸收。

楊瑩等［68］研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)汗前后的續(xù)斷水煎液均有促進(jìn)MG - 63 細(xì)胞、成骨細(xì)胞增殖的作用，進(jìn)一步研究表明，川續(xù)斷皂苷Ⅵ、綠原酸和馬錢(qián)苷是影響續(xù)斷對(duì)成骨細(xì)胞增殖活性的主要物質(zhì)基礎(chǔ)［65］。

相關(guān)藥物效應(yīng)動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)表明，川續(xù)斷皂苷Ⅵ具有增加骨密度的作用［56］，與中醫(yī)臨床應(yīng)用續(xù)斷“補(bǔ)肝腎，強(qiáng)筋骨，續(xù)折斷”的主治功能一致。

4 其他炮制方法對(duì)續(xù)斷質(zhì)量的影響

4.1 炮制方法

4.1.1 概述

中藥在炮制過(guò)程中，不同的炮制方法可能對(duì)化學(xué)成分及含量產(chǎn)生影響，影響中藥藥性和臨床療效。續(xù)斷生品以補(bǔ)肝腎、行血脈為主；酒炙可增強(qiáng)通血脈、續(xù)筋骨、止崩漏作用，多用于風(fēng)濕痹痛、跌撲損傷，筋傷骨折；鹽炙后引藥下行，增強(qiáng)補(bǔ)肝腎、強(qiáng)腰膝作用，多用于腰膝酸軟。炮制前后化學(xué)成分的變化是導(dǎo)致藥理作用發(fā)生改變的主要因素，故臨床使用續(xù)斷時(shí)應(yīng)結(jié)合病癥與臨床功效，有針對(duì)性地選擇適宜炮制品，以達(dá)增強(qiáng)臨床療效、保證藥用價(jià)值的目的。

4.1.2 歷代炮制方法

古代關(guān)于續(xù)斷的炮制方法有很多，有簡(jiǎn)單的凈制、切制，有不加輔料的炒制，也有加輔料的米泔制、面制、酒制等。其中，酒制又分為酒焙、酒浸、酒炒、酒蒸、酒洗、酒煎等［69］。

1977 年版、1985 年版、1990 年版、1995 年版《中國(guó)藥典（一部）》僅收載生續(xù)斷；2000 年版《中國(guó)藥典（一部）》開(kāi)始收載其酒炙品和鹽炙品；2020 年版《中國(guó)藥典（一部）》規(guī)定將原藥材洗凈，潤(rùn)透，切厚片，干燥。酒炙時(shí)每100 kg待炮炙品用黃酒10～20 kg，鹽炙時(shí)每100 kg待炮炙品用食鹽2 kg［1］。在古代炮制方法基礎(chǔ)上，保留其酒炙法，發(fā)展了鹽炙法。

4.1.3 現(xiàn)代炮制方法

李妍等［70］以川續(xù)斷皂苷Ⅵ、續(xù)斷總皂苷、水浸出物、醇浸出物含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，以軟化用水量、軟化時(shí)間、切制片型、干燥溫度為影響因素，對(duì)續(xù)斷切制工藝進(jìn)行正交優(yōu)選，得出切制最佳工藝為取烘干減重50%發(fā)汗后于60 ℃下干燥的藥材，加4 倍量水軟化6 h，取出，稍潤(rùn)，橫切3 mm厚片，70 ℃下烘干。

許臘英等［71］以川續(xù)斷皂苷Ⅵ為評(píng)價(jià)指標(biāo)，以下鍋溫度、悶潤(rùn)加酒量、炒炙時(shí)間為參數(shù)，發(fā)現(xiàn)黃酒用量對(duì)川續(xù)斷皂苷Ⅵ的影響最大，得到酒炙續(xù)斷最佳工藝為加酒量為10%，下鍋溫度為150 ℃，炒6 min。

張丹等［72］以川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，以悶潤(rùn)時(shí)間、鹽用量、炒制溫度和炒制時(shí)間為考察因素，采用正交試驗(yàn)法優(yōu)選續(xù)斷鹽炙工藝為每500 g 續(xù)斷藥材用10 g鹽浸潤(rùn)45 min，150 ℃炒制8 min。

4.2 對(duì)續(xù)斷化學(xué)成分的影響

4.2.1 皂苷類成分

續(xù)斷經(jīng)炮制后，大部分皂苷類成分的含量有所升高，如川續(xù)斷皂苷Ⅵ、續(xù)斷皂苷B、川續(xù)斷皂苷Ⅸ、熊果酸等，證明了傳統(tǒng)炮制方法的合理性。

羅君等［73］、樊媛潔等［74］研究發(fā)現(xiàn)，炮制后川續(xù)斷皂苷Ⅵ的含量均高于生品，酒續(xù)斷中川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量增加較鹽續(xù)斷更顯著，炮制后川續(xù)斷皂苷Ⅹ含量減少，可能由于一定條件下含糖較多的川續(xù)斷皂苷Ⅹ水解為川續(xù)斷皂苷Ⅵ。

王強(qiáng)等［75］采用液相色譜- 質(zhì)譜（LC - MS）法測(cè)定不同炮制工藝對(duì)續(xù)斷化學(xué)成分含量的影響，發(fā)現(xiàn)酒炙品川續(xù)斷皂苷Ⅷ、川續(xù)斷皂苷Ⅸ、常春藤皂苷元、川續(xù)斷皂苷Ⅴ、川續(xù)斷皂苷Ⅵ、HN saponin F 明顯高于鹽炙品及生品，鹽炙品中環(huán)烯醚萜苷類化合物大花雙參苷A的含量較高。

TAO 等［14］通過(guò)比較生品和酒續(xù)斷中10 種活性成分，發(fā)現(xiàn)酒炙后川續(xù)斷皂苷Ⅵ、川續(xù)斷皂苷Ⅴ、續(xù)斷皂苷、續(xù)斷苷A的含量顯著升高。

汪建平等［76］研究了炮制對(duì)續(xù)斷理化性質(zhì)的影響，發(fā)現(xiàn)酒續(xù)斷、鹽續(xù)斷中熊果酸含量較續(xù)斷生品略高。

4.2.2 生物堿類成分

總生物堿是續(xù)斷安胎、治療流產(chǎn)的有效成分［77］。張丹等［78］采用酸性染料比色法測(cè)定續(xù)斷生品及炮制品中總生物堿的含量，發(fā)現(xiàn)不同炮制方法對(duì)續(xù)斷總生物堿的含量均有影響，其中鹽炙后總生物堿含量明顯升高，酒炙后總生物堿含量降低。

4.2.3 酚酸類成分

續(xù)斷酒炙后，酚酸類成分含量有升有降。陶益等［79］通過(guò)比較續(xù)斷酒炙前后化學(xué)成分，發(fā)現(xiàn)酒續(xù)斷中咖啡酸、單咖啡?？鼘幩犷惓煞秩缇G原酸含量升高，新綠原酸、隱綠原酸及雙咖啡酰奎寧酸類成分如4，5-二咖啡?？鼘幩?、3，4-二咖啡?？鼘幩?、3，5-二咖啡酰奎寧酸的含量均下降。其中，咖啡酸含量升高尤為顯著，這可能與咖啡?？鼘幩犷惓煞衷诩訜釛l件下脫去咖啡酸有關(guān)。

4.2.4 揮發(fā)性成分

續(xù)斷中揮發(fā)性成分大多具有明顯的藥理作用，續(xù)斷炮制前后揮發(fā)性成分差異明顯。盧化等［80］采用頂空固相微萃?。℉S-SPME）法結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）法鑒定續(xù)斷生品及其酒炙品揮發(fā)性成分，生品中主要是萜類及其他不飽和烴類化合物，含量較高的為丁香酚、右旋檸檬烯、芳樟醇、己酸等；酒炙品中醛類及氮氧雜環(huán)類化合物含量較高，主要有壬醛、5-甲基呋喃醛、5-羥甲基糠醛、2，6-二甲基吡嗪等，萜類化合物僅有右旋檸檬烯、丁香酚、1-石竹烯。

4.2.5 微量元素

續(xù)斷功效的發(fā)揮與微量元素相關(guān)，其中Zn 能加速生長(zhǎng)發(fā)育；硒（Se）可促進(jìn)機(jī)體免疫力，保護(hù)機(jī)體抗氧化；錳（Mn）是生長(zhǎng)、發(fā)育、生育必需的元素；Ca 參與骨形成與生長(zhǎng)［81］。炮制對(duì)微量元素的溶出有顯著影響，可能會(huì)影響中藥的藥性、功效及使用的安全性［82］。

羅君等［83］通過(guò)測(cè)定續(xù)斷及其炮制品中微量元素的含量，發(fā)現(xiàn)酒續(xù)斷、鹽續(xù)斷中Zn，Mn，Se 含量均有所增加，酒炙后Mn含量增加顯著；生續(xù)斷、酒續(xù)斷含Ca量略高，與酒續(xù)斷長(zhǎng)于“強(qiáng)筋骨，續(xù)骨折”相吻合。

4.3 對(duì)續(xù)斷藥理作用的影響

陳旭等［84］采用小鼠扭體法、熱板法進(jìn)行鎮(zhèn)痛作用研究，采用小鼠耳腫法及毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)法進(jìn)行抗炎實(shí)驗(yàn)研究，以小鼠凝血時(shí)間測(cè)定法進(jìn)行抗凝血作用研究，發(fā)現(xiàn)續(xù)斷生品、酒炙品及鹽炙品均有鎮(zhèn)痛、抗炎及抗凝血作用，其中酒炙后續(xù)斷作用較強(qiáng)，鹽炙后續(xù)斷作用較弱，這與續(xù)斷酒炙后能增強(qiáng)“通血脈，強(qiáng)筋骨”作用一致。

辛繼蘭等［85］指出，續(xù)斷酒炙品鎮(zhèn)痛、抗炎作用明顯，鹽炙品消血腫作用顯著。不同炮制方法對(duì)續(xù)斷的抗氧化活性均有影響，其中四川產(chǎn)酒炙續(xù)斷抗氧化活性最強(qiáng)［86］。

WU 等［87］采用高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器（HPLC - DAD）指紋圖譜法結(jié)合體內(nèi)藥效動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)來(lái)對(duì)比生續(xù)斷和鹽續(xù)斷之間的差異，發(fā)現(xiàn)鹽續(xù)斷抗骨質(zhì)疏松療效強(qiáng)于生續(xù)斷，初步推測(cè)咖啡酸、馬錢(qián)子苷、異綠原酸C 和續(xù)斷皂苷A 等6 種成分是鹽續(xù)斷提高抗骨質(zhì)疏松療效的主要化學(xué)成分。

汪靖媛等［88］研究發(fā)現(xiàn)，不同炮制品配伍的續(xù)斷散均能促進(jìn)MC3T3-E1 成骨細(xì)胞增殖與分化，促進(jìn)骨生長(zhǎng)的活性作用，且最佳配伍為鹽續(xù)斷與酒牛膝。

陶益等［89］分別用生續(xù)斷、酒續(xù)斷水提液灌胃骨質(zhì)疏松模型大鼠發(fā)現(xiàn)，與生斷續(xù)組比較，酒續(xù)斷組大鼠的Ca、堿性磷酸酶、骨鈣素及RANKL 水平均顯著降低，OPG 和RANK 水平均顯著升高，表明酒續(xù)斷能抑制破骨細(xì)胞生成，抑制骨質(zhì)吸收，對(duì)OPG/ RANK/ RANKL軸的調(diào)控能力更強(qiáng)。

5 結(jié)語(yǔ)

續(xù)斷主要含有三萜皂苷類、環(huán)烯醚萜苷類、酚酸類、生物堿類、揮發(fā)油等化學(xué)成分，能促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖，抑制破骨細(xì)胞分化，防治骨質(zhì)疏松；是治療RSA 的首選藥物；有望治療老年癡呆；具有抗腫瘤、抗氧化、保護(hù)心肌、鎮(zhèn)痛抗炎等作用。續(xù)斷經(jīng)發(fā)汗、鹽炙、酒炙后，其主要有效成分川續(xù)斷皂苷Ⅵ的含量均提高，這與傳統(tǒng)的炮制理論一致。續(xù)斷炮制后的藥理作用會(huì)增強(qiáng)，但目前對(duì)其化學(xué)成分變化與藥理作用增強(qiáng)之間的作用機(jī)制研究較少?，F(xiàn)階段，各地區(qū)發(fā)汗工藝不一致，尚缺乏完善的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)規(guī)范發(fā)汗工藝，導(dǎo)致不同產(chǎn)地藥材的質(zhì)量有差異。為確保續(xù)斷藥材質(zhì)量的安全性與可靠性，應(yīng)建立統(tǒng)一的續(xù)斷發(fā)汗工藝。后期應(yīng)將續(xù)斷發(fā)汗、炮制原理作為研究重點(diǎn)，從根本上保證藥材和飲片的質(zhì)量，為臨床用藥提供保障。