苦橙不同部位揮發(fā)油成分及抗氧化與抗菌活性分析

劉亞男　文雅麗　陳霞蔚　林家遜　許有瑞

摘 要：? 為較全面地研究苦橙（Citrus aurantium var. amara）全植株揮發(fā)油成分及抗氧化與抗菌活性，該研究以其葉、花、幼果為材料，采用水蒸氣蒸餾法（SD）結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用技術(shù)分析其成分，并利用體外測試方法比較了三者的抗氧化與抗菌活性。結(jié)果表明：（1）從苦橙葉、花、幼果3個部位揮發(fā)油中共分離鑒定出94種成分，3個部位的揮發(fā)油成分種類及含量存在一定差異，其中13種為共有成分。從葉中鑒定出34種成分，含量較高的有芳樟醇（30.51%）、α-松油醇（14.78%）；從花中鑒定出32種成分，主要成分有芳樟醇（57.59%）和d-檸檬烯（16.15%）；從幼果中鑒定出69種揮發(fā)性成分，主要含有d-檸檬烯（25.55%）和γ-萜品烯（10.48%）。（2）苦橙3個部位揮發(fā)油表現(xiàn)出不同程度的抗氧化活性，其中苦橙幼果、葉及花的揮發(fā)油對ABTS自由基的IC50值分別為2.6、5.1、8.2 mg·mL-1，對DPPH自由基的IC50值分別為2.7、4.3、5.0 mg·mL-1，幼果揮發(fā)油的抗氧化活性最好。（3）苦橙幼果揮發(fā)油對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌表現(xiàn)出的抗菌活性強(qiáng)于葉和花。該研究結(jié)果為苦橙葉、花及其幼果中揮發(fā)油的提取與利用提供了理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞： 苦橙， 揮發(fā)油， GC-MS， 抗氧化活性， 抗菌活性

中圖分類號：? Q946文獻(xiàn)標(biāo)識碼：? A文章編號：? 1000-3142（2023）06-1163-10

Essential oil components and their antioxidant and antibacterial activities in different parts of Citrus aurantium var. amara

LIU Yanan1， WEN Yali2， CHEN Xiawei1， LIN Jiaxun1， XU Yourui1*

（ 1. School of Pharmacy， Guilin Medical University， Guilin 541199， Guangxi， China; 2. Science

Experiment Center， Guilin Medical University， Guilin 541199， Guangxi， China ）

Abstract：? In order to comprehensively analyze the essential oil components，? antioxidant and antibacterial activities of the whole plant? of Citrus aurantium var. amara， the essential oils from leaves， flowers and young fruits were extracted respectively by steam distillation （SD） and their chemical compositions were identified by GC-MS. Moreover， their antioxidant and antibacterial activities were evaluated and compared using in vitro methods. The results were as follows： （1） A total of 94 volatile components were isolated and identified from the essential oils of leaves， flowers and young fruits， there were some differences between three parts， of which 13 were common components. A total of 34 components were identified from leaves， and the major compounds were linalool （30.51%） and α-terpineol （14.78%）; a total of 32 components were identified from flowers， the main components were linalool （57.59%） and d-limonene （16.15%）; a total of 69? components were identified from young fruits， mainly containing d-limonene （25.55%） and γ-terpene （10.48%）. （2） The essential oils from different parts showed different antioxidant activities. The IC50 values of essential oils from young fruits， leaves and flowers to ABTS free radicals were 2.6， 5.1 and 8.2 mg·mL-1， respectively， and the IC50 values to DPPH free radicals were 2.7， 4.3 and 5.0 mg·mL-1， respectively. The antioxidant activity of young fruits was better than that of leaves and flowers. （3） The essential oil from? young fruits showed certain antibacterial activity against Escherichia coli， Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa， which was better than the leaves and flowers. The results can provide a theoretical basis for the extraction and utilization of the essential oils from different parts of Citrus aurantium var. amara.

Key words： Citrus aurantium var. amara， essential oil， GC-MS， antioxidant activity， antibacterial activity

苦橙（Citrus aurantium var. amara）為蕓香科（Rutaceae）柑橘屬常綠帶刺小喬木，為酸橙（Citrus aurantium）的一個栽培變種，廣泛種植于中國長江以南地區(qū)（黃善松等，2016）。作為中藥枳實與枳殼的一個重要來源，苦橙具有理氣寬中、行滯消脹、破氣消積、化痰散痞之功效?，F(xiàn)代研究表明，苦橙可用于焦慮癥、肺癌和前列腺癌等多種疾病的治療（Suntar et al.， 2018；葉一丹等，2019）。蕓香科植物普遍含有揮發(fā)油，主要成分為萜烯類、芳香族、脂肪族和含硫含氮類化合物（靖會和佐建鋒，2005；陳麗艷和崔志恒，2006），而苦橙揮發(fā)油中含有的芳樟醇、檸檬烯、甲酸芳樟酯、α-松油醇、橙花醇、3-蒈烯等成分（Ali et al.， 2015），具有濃郁的鈴蘭香味、清新的檸檬香味和柑橘味，廣泛應(yīng)用于香料、日化和食品等方面（Stohs， 2017），已進(jìn)入美國食品香料和萃取物制造者協(xié)會（FEMA）的食用香料名錄，同時被《中國食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》納入允許食品香料。更為重要的是，從苦橙中提取到的具有獨特芬芳?xì)馕兜某然ㄓ停ㄓ置鸑eroli），被FDA認(rèn)定為GRAS （generally regarded as safe） ，在伊朗、突尼斯、阿爾及利亞、摩洛哥、埃及、法國等地被用來緩解多種疼痛、抑郁、痙攣等癥（Haj Ammar et al.， 2012；Choi et al.， 2014）。

植物資源是指來源于植物的器官（如根、莖、葉、花、果實、種子）或植物的全株。近年來，不少研究者開始關(guān)注藥用植物的非藥用部位或全株，檢測其成分和效用差異，以實現(xiàn)資源的全面利用。柑橘屬植物果實在外果皮的表層生長有大量油囊，合成并儲存具有獨特芳香氣味的揮發(fā)油，廣泛應(yīng)用于芳香治療、食品加工、化妝品制備等領(lǐng)域（樊榮，2011）。然而，苦橙藥用部位主要是其未成熟的果實，已有研究對苦橙葉和花中揮發(fā)油成分進(jìn)行了分析，并進(jìn)行了抗炎和抗菌活性比較，但其幼果的揮發(fā)油成分種類、相對含量和抗氧化活性尚不明確，而將其幼果作為揮發(fā)油提取原料也未見報道，為了全面開發(fā)苦橙全植株，避免造成資源浪費，從而達(dá)到綜合開發(fā)其地上部分的目的。本研究采用水蒸氣蒸餾法分別對苦橙葉、花及其幼果的揮發(fā)油進(jìn)行提取，并應(yīng)用GC-MS分析其化學(xué)成分；通過DPPH法和ABTS法對苦橙不同部位揮發(fā)油的抗氧化活性進(jìn)行研究，并對其抗菌活性進(jìn)行評價，以期為苦橙葉、花及其幼果中揮發(fā)油的提取與利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料和試劑

材料：苦橙葉、花和幼果來源于浙江省金華市浙八味中藥材市場，以上材料由桂林醫(yī)學(xué)院黃德青副教授鑒定為苦橙（Citrus aurantium var. amara）的葉、花、幼果。

試劑：ABTS（純度≥98%）、DPPH（純度為99%）、BHT（純度為99%）均購自Sigma-Aldrich公司；瓊脂粉購自成都科龍化學(xué)試劑有限公司；無水乙醇購自南寧西隴化工有限責(zé)任公司。

1.2 儀器

Aglient7890B-5977B型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國安捷倫公司）；UV-PC1800型紫外-可見分光光度計（上海美譜達(dá)科學(xué)儀器有限公司）；DLSB-5L/30低溫冷卻循環(huán)泵（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）；BT224S型電子分析天平（北京Satorius天平有限公司）；KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 苦橙不同部位揮發(fā)油的提取

1.3.1.1 苦橙葉揮發(fā)油的提取 依照2020年版《中國藥典》四部通則中2204揮發(fā)油測定法提取苦橙葉揮發(fā)油（L.O）。取干燥苦橙葉80 g于1 000 mL圓底燒瓶中，按料液比1 ∶10（g·mL-1）加入800 mL蒸餾水，置于電爐上加熱使微沸，連續(xù)提取5 h，得微黃綠色油狀物，冷卻后收集得0.780 2 g揮發(fā)油。連續(xù)提取5次后得到苦橙葉揮發(fā)油供試品3.804 g，密封，于4 ℃冰箱中避光保存，揮發(fā)油單次提取率為0.95%。

1.3.1.2 苦橙花揮發(fā)油的提取 取鹽浸苦橙花280 g于1 000 mL圓底燒瓶中，按料液比1∶3（g·mL-1）加入840 mL蒸餾水，按“1.3.1.1”中方法提取苦橙花揮發(fā)油（F.O），連續(xù)提取4次，待冷卻后收集苦橙花揮發(fā)油供試品3.056 g，密封，置于4 ℃冰箱中避光保存，苦橙花揮發(fā)油單次提取率為0.27%。

1.3.1.3 苦橙幼果揮發(fā)油的提取 取干燥苦橙幼果粉末200 g于1 000 mL圓底燒瓶中，按料液比1∶4（g·mL-1）加入800 mL蒸餾水，按“1.3.1.1”中方法提取苦橙幼果揮發(fā)油（YF.O），連續(xù)提取4次得黃綠色油狀物，冷卻后收集得2.708 g苦橙幼果揮發(fā)油供試品，密封，于4 ℃冰箱中避光保存，苦橙幼果揮發(fā)油單次提取率為0.34%。

1.3.2 GC-MS分析條件

1.3.2.1 GC條件 氣相色譜條件：HP-5MS石英毛細(xì)柱（30 m × 0.25 mm × 0.25 μm）；柱溫45～200 ℃，45 ℃維持3 min，20 ℃·min-1升溫至200 ℃，維持10 min；柱流量為1.2 mL·min-1；進(jìn)樣口溫度為250 ℃；柱前壓9.466 7 psi，進(jìn)樣量1 μL；不分流；載氣為高純氦氣。

1.3.2.2 MS條件 質(zhì)譜條件：電離方式EI；電子能量70 eV；傳輸線溫度250 ℃；離子源溫度230 ℃；四級桿溫度150 ℃；質(zhì)量范圍50～550 amu。

1.3.3 體外抗氧化活性研究

1.3.3.1 ABTS自由基清除率的測定 根據(jù)孔鈺婷等（2021）的方法，精密稱取6.62 mg K2S2O8于10 mL棕色容量瓶中，用蒸餾水溶解并定容至刻度，搖勻后得2.45 mmol·L-1 K2S2O8溶液。另精密稱取38.41 mg ABTS于10 mL棕色容量瓶中，用蒸餾水溶解并定容至刻度，搖勻后得7 mmol·L-1 ABTS溶液。將以上兩種溶液按1∶1體積混合定容至25 mL棕色容量瓶中，室溫下暗處反應(yīng)13 h后，用無水乙醇稀釋至其在734 nm處吸光度為0.70±0.02。在具塞試管中加入1 mL不同濃度揮發(fā)油乙醇溶液和5 mL ABTS工作液，渦旋混勻，置于室溫下避光反應(yīng)6 min后于734 nm處測量樣品吸光度（Ai）；用無水乙醇代替樣品溶液按上述方法測定對照品溶液吸光度（Ac）；用無水乙醇代替ABTS工作液按上述方法測定空白吸光度（Ao）；以BHT為陽性對照，平行試驗3次取平均值，按式（1）計算。

ABTS自由基清除率（%）=（1-（Ai-Ao）/Ac）×100（1）

1.3.3.2 DPPH自由基清除率的測定 根據(jù)王定美等（2021）的方法，精密稱取DPPH標(biāo)準(zhǔn)品4 mg于50 mL棕色容量瓶中，用無水乙醇溶解并定容至刻度，搖勻后得到0.2 mmol·L-1 DPPH母液，置于冰箱中冷藏保存。準(zhǔn)確量取DPPH母液10 mL于100 mL棕色容量瓶中，用無水乙醇稀釋并定容，搖勻后得到0.02 mmol·L-1的DPPH工作液。在具塞試管中依次加入不同濃度的揮發(fā)油乙醇溶液2.0 mL和DPPH工作液4.0 mL，渦旋混勻，于暗處反應(yīng)30 min后在517 nm處測定樣品吸光度（Ai）；用無水乙醇代替樣品溶液按上述方法測定對照品溶液吸光度（Ac）；用無水乙醇代替ABTS工作液按上述方法測定空白吸光度（Ao）；以BHT為陽性對照，平行試驗3次，按式（2）計算。

DPPH自由基清除率（%）=（1-（Ai-Ao）/Ac）×100（2）

1.3.4 抑菌實驗

1.3.4.1 抗菌活性評估 選用桂林醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院微生物實驗室提供的3種致病菌，即大腸桿菌（ATCC 25922）、金黃色葡萄球菌（ATCC 25923）和銅綠假單胞菌（ATCC 27853）。抽取供試菌液（1×108 CFU·mL-1）200 μL置于LB培養(yǎng)基中，通過經(jīng)典的圓盤擴(kuò)散試驗評估3種精油的抗菌敏感性（Rota et al.， 2008）。用等量DMSO制備陰性對照，用慶大霉素作陽性對照。37 ℃下孵育24 h后，通過測量抑菌圈的大小來評估抑菌活性。

1.3.4.2 最低抑菌濃度（MIC）的測定 采用肉湯微量稀釋法測定精油對供試菌的MIC（Zhang et al.， 2017）。試驗菌懸液用無菌生理鹽水調(diào)至1×107 CFU·mL-1。不同部位精油在DMSO中采用2倍稀釋法配制，加入LB肉湯培養(yǎng)基中，得到（1 ～ 32）μg·mL-1的最終濃度。將20 μL菌懸液轉(zhuǎn)移到96孔培養(yǎng)板上。陽性對照品和陰性對照品分別用相同體積的慶大霉素溶液和空白溶液制備，不加供試品。37 ℃下孵育24 h。MIC定義為無肉眼可見菌生長的測試樣品的最低濃度。

1.4 數(shù)據(jù)處理

利用峰面積歸一化法對其揮發(fā)性成分進(jìn)行定量分析（魏婧等，2022）。所有數(shù)據(jù)均以3次重復(fù)測量的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 化學(xué)成分分析

苦橙不同部位揮發(fā)油經(jīng)GC-MS分析后，得到圖1的總離子流圖。對分離出的各揮發(fā)性成分采用NIST17.L標(biāo)準(zhǔn)譜庫計算機(jī)檢索進(jìn)行定性分析，經(jīng)質(zhì)譜解析，苦橙3個部位中共鑒定出94種揮發(fā)性成分，其中葉34種、花32種、幼果69種。

苦橙不同部位揮發(fā)油的化學(xué)成分有一定差異，葉和花中含量最高的均是芳樟醇，分別為30.51%、57.59%；幼果中含量較高的有d-檸檬烯（25.55%）和γ-萜品烯（10.48%）?？喑热~揮發(fā)油中醇類化合物含量最多，占總化學(xué)成分的55.37%，酯類占22.71%，烯類占20.25%；主要化學(xué)成分有芳樟醇（30.51%）、α-松油醇（14.78%）、甲酸芳樟酯（11.60%）、橙花醇（8.56%）、3-蒈烯（7.39%）、 β-蒎烯（4.45%）等。苦橙花揮發(fā)油中醇類化合物成分最多，占總化學(xué)成分的65.70%，其次是烯類占30.81%，酯類占2.02%；主要化學(xué)成分有芳樟醇（57.59%）、d-檸檬烯（16.15%）、3-蒈烯（5.35%）、檜烯（4.36%）、α-松油醇（3.32%）、β-蒎烯（3.26%）等?？喑扔坠麚]發(fā)油中烯類成分最多，占75.43%，醇類占17.31%，酯類占1.31%；主要化學(xué)成分有d-檸檬烯（25.55%）、γ-萜品烯（10.48%）、γ-多烯（4.05%）、檜烯（3.66%）、3-蒈烯（3.25%）等。表1結(jié)果表明烯類成分是苦橙幼果區(qū)別于葉、花的特異性成分。

2.2 體外抗氧化活性

2.2.1 ABTS自由基清除率 ABTS在734 nm波長處有最強(qiáng)吸收峰，當(dāng)其與抗氧化劑結(jié)合后， 兩者反應(yīng)能使ABTS溶液本身的藍(lán)綠色褪去，其褪色程度與抗氧化劑成定量關(guān)系。由圖2可知，BHT和苦橙不同部位揮發(fā)油對ABTS自由基的清除能力均隨著濃度的增大而逐步增強(qiáng)。當(dāng)苦橙葉揮發(fā)油濃度為30 mg·mL-1時，對ABTS的清除率可超99.00%，表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化能力。當(dāng)苦橙花揮發(fā)油濃度為20 mg·mL-1時，對ABTS的清除率可達(dá)99.52%。當(dāng)苦橙幼果揮發(fā)油濃度為15 mg·mL-1時，對ABTS的清除率可達(dá)100.0%。而幼果、花、葉的IC50值分別為2.6、5.1、8.2 mg·mL-1，BHT為0.1 mg·mL-1?？梢?，幼果的揮發(fā)油清除ABTS自由基能力優(yōu)于花和葉的。

2.2.2 DPPH自由基清除率

DPPH自由基本身存在單電子，在517 nm波長處有最大吸收，當(dāng)其醇溶液與抗氧化劑反應(yīng)時，抗氧化劑可以和孤對電子配對使得吸收逐漸下降，甚至褪色消失，其吸光度下降程度與其接受的電子數(shù)量成定量關(guān)系。由圖3可知，隨著BHT及苦橙揮發(fā)油濃度的增大，其對DPPH自由基的清除能力不斷增強(qiáng)。當(dāng)苦橙葉揮發(fā)油濃度為30 mg·mL-1時，其對DPPH自由基的清除率可達(dá)92.8%，與陽性組BHT的清除率基本達(dá)到相同水平，并且繼續(xù)增大濃度，清除率基本保持不變。當(dāng)苦橙花揮發(fā)油濃度小于20 mg·mL-1時，其對DPPH自由基的清除能力均小于陽性組BHT，而當(dāng)濃度大于20 mg·mL-1時，苦橙花揮發(fā)油對DPPH自由基的清除率大于BHT對DPPH自由基的清除率，最高清除率達(dá)95.24%?？喑扔坠麚]發(fā)油對DPPH自由基的清除率始終低于BHT，當(dāng)濃度為10 mg·mL-1時，苦橙幼果揮發(fā)油對DPPH的清除率達(dá)86.92%，繼續(xù)增大濃度，清除率基本保持不變。而幼果、花、葉的IC50值分別為2.7、4.3、5.0 mg·mL-1，BHT為0.1 mg·mL-1。可見，幼果的揮發(fā)油清除DPPH自由基能力優(yōu)于花和葉的。

2.3 抗菌活性

由表2可知，3種揮發(fā)油對所有被測細(xì)菌均表現(xiàn)出一定的抗菌活性，特別是對抑菌圈直徑為（15.2 ～ 22.7）mm的大腸桿菌具有一定的抗菌活性。此外， 苦橙的花和幼果對被試菌有較強(qiáng)的抗菌活性，這可歸因于d-檸檬烯的存在，其相對含量分別為16.15%和25.55%。3種揮發(fā)油對被試菌的MIC值不同，大腸桿菌對揮發(fā)油更敏感?？喑然ǖ腗IC值為1～32 μg·mL-1，苦橙幼果的MIC值為8～16 μg·mL-1?？喑然〒]發(fā)油的抗菌活性與之前關(guān)于橙花油的報告一致。

3 討論與結(jié)論

常見的揮發(fā)油提取方法有水蒸氣蒸餾法、超臨界流體萃取法、超聲波輔助萃取法等。超臨界流體萃取法雖然能夠提升揮發(fā)油的提取率，但從經(jīng)濟(jì)效益、設(shè)備要求等多方面綜合考慮，水蒸氣蒸餾法更適用于工業(yè)生產(chǎn)（孫吳倩等，2022）。本研究采用水蒸氣蒸餾法提取苦橙葉、花及其幼果的揮發(fā)油，應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用技術(shù)對其化學(xué)成分進(jìn)行定性定量分析。本研究結(jié)果表明苦橙葉、花和幼果的揮發(fā)油單次提取率分別為0.95%、0.27%和0.34%。從得率來看，苦橙葉揮發(fā)油含量較高，易于獲取，為可持續(xù)利用資源。而苦橙3個部位揮發(fā)油的化學(xué)成分種類與含量均存在一定差異，也正是這些香氣成分及含量的不同，從而形成了各自的特性：苦橙葉揮發(fā)油呈微黃綠色油狀，清香輕飄，主要成分有芳樟醇（30.51%）、α-松油醇（14.78%）、甲酸芳樟酯（11.60%）、橙花醇（8.56%）、3-蒈烯（7.39%）等；苦橙花揮發(fā)油呈無色透明油狀，花香撲鼻，主要成分有芳樟醇（57.59%）、d-檸檬烯（16.15%）、3-蒈烯（5.35%）、α-松油醇（3.32%）、β-蒎烯（3.26%）等；苦橙幼果揮發(fā)油呈黃綠色油狀物，香味濃郁，主要成分有d-檸檬烯（25.55%）、γ-萜品烯（10.48%）、γ-多烯

（4.05%）、檜烯（3.66%）、3-蒈烯（3.25%）等。

董雪等（2022）對苦橙花揮發(fā)油化學(xué)成分分析發(fā)現(xiàn)其主要的化合物為醇類和萜烯類，葉一丹等（2019）對苦橙葉揮發(fā)油化學(xué)成分研究發(fā)現(xiàn)其含酯類和醇類物質(zhì)為主，它們與本研究結(jié)果一致。另外本研究發(fā)現(xiàn)苦橙幼果中萜烯類成分最多，這是有異于葉和花的地方，可能是植株在生長發(fā)育過程中的代謝產(chǎn)物轉(zhuǎn)化導(dǎo)致。

藥用植物不同部位的生物學(xué)活性具有顯著性差異的現(xiàn)象已有前人的研究結(jié)果得到佐證：李慧敏等（2022）研究發(fā)現(xiàn)北柴胡不同部位總黃酮含量與抗氧化活性從高到低分別為花、葉>莖>根；查雨鋒等（2022）研究表明三七根提取物對改善氧化損傷的作用優(yōu)于莖、葉、花提取物；此外也有研究對冷飯團(tuán)、丁香、木蝴蝶的不同部位進(jìn)行成分與活性比較（楊艷和高漸飛，2018；左遨勛等，2022；李慧敏等，2022）。了解其成分與活性差異有助于明確物質(zhì)在植株中轉(zhuǎn)運和積累機(jī)制。本研究結(jié)果表明苦橙不同部位揮發(fā)油對ABTS自由基和DPPH自由基均有較強(qiáng)的清除能力，幼果揮發(fā)油成分主要為萜烯類化合物，其抗氧化活性優(yōu)于葉和花。大部分蕓香科揮發(fā)油對葡萄球菌、大腸桿菌、傷寒桿菌和枯草芽孢桿菌的生長均表現(xiàn)出不同程度的抑制活性（劉巧等，2019）。本研究中幼果揮發(fā)油表現(xiàn)出的抗菌活性優(yōu)于葉，可將幼果作為苦橙揮發(fā)油提取原料用于功效產(chǎn)品研發(fā)，其功效等級高于葉、花，但無顯著性差異，也可用葉、花作為苦橙揮發(fā)油提取原料以實現(xiàn)苦橙資源的綜合開發(fā)利用。

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（責(zé)任編輯 鄧斯麗 蔣巧媛）

收稿日期：? 2022-10-17

基金項目：? 廣西自然科學(xué)基金（2017GXNSFAA198237）。

第一作者： 劉亞男（1995-），碩士研究生，研究方向為藥物研發(fā)與轉(zhuǎn)化，（E-mail）medicallyn@163.com。

*通信作者：? 許有瑞，博士，講師，研究方向為中藥活性成分的研究與開發(fā)，（E-mail）xuyourui1980@ sina.com。