精甲霜靈、咯菌腈與嘧菌酯復(fù)配對水稻爛秧病的室內(nèi)活性及種衣劑田間藥效試驗研究

江川安 金立 湯鐘祥

摘要 針對水稻爛秧病防控，采用室內(nèi)生物測定方法開展了精甲霜靈、咯菌腈、嘧菌酯及其不同配比組合對水稻爛秧病的聯(lián)合毒力以及田間藥效試驗，明確最佳藥劑配比，為藥劑開發(fā)提供科學(xué)指導(dǎo)。結(jié)果表明，精甲霜靈、咯菌腈、嘧菌酯配比為1∶1∶2時，混劑對水稻爛秧病防治增效作用最為明顯，增效系數(shù)為6.13。田間藥效結(jié)果顯示，4%精甲霜靈·咯菌腈·嘧菌酯種子處理懸浮劑對水稻晚疫病爛秧病效果較好，制劑量為600 mL/100 kg種子，防效可達(dá)到80%以上，適宜施藥時期為水稻播種前包衣，推薦有效成份使用劑量為18～24 g/100 kg種子（制劑量為450～600 mL/100 kg種子）。

關(guān)鍵詞 水稻；爛秧?。痪姿`；咯菌腈；嘧菌酯

中圖分類號 S435? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A

文章編號 1007-7731（2023）03-0095-04

水稻爛秧病是水稻生產(chǎn)中發(fā)生最普遍、危害性較大的一種病害。由綿腐菌屬引起，在我國各水稻種植區(qū)均有發(fā)生。精甲霜靈屬于苯基酰胺類，為高效、低毒、低殘留、持效期長、施藥方式多樣化、保護(hù)與治療效果均優(yōu)異的廣譜內(nèi)吸殺菌劑，可以作莖葉處理、種子處理和土壤處理，對霜霉菌、疫霉菌、腐霉菌等引起的作物病害有顯著的防治效果?？┚鏆⒕V非常廣，從鐮刀菌、雪腐病菌、鏈格孢菌到立枯病菌、褐腐病菌等，除了卵菌之外的大多數(shù)植物病原真菌，都是咯菌腈的靶標(biāo)。嘧菌酯是線粒體呼吸抑制劑，即通過抑制細(xì)胞色素b和C1間電子轉(zhuǎn)移而抑制線粒體的呼吸，其殺菌譜廣，對晚疫病等真菌病害有良好的活性[1-3]。為進(jìn)一步明確精甲霜靈、咯菌腈和嘧菌酯聯(lián)合對水稻爛秧病作用效果和復(fù)配后的田間應(yīng)用效果，采用室內(nèi)生物測定方法開展了精甲霜靈與嘧菌酯及其不同配比組合對水稻爛秧病作用效果病原菌的聯(lián)合毒力以及田間藥效試驗，為藥劑開發(fā)提供科學(xué)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 室內(nèi)配方篩選試驗

1.1.1 供試靶標(biāo)。水稻爛秧?。壕d腐菌屬（Achlya spp.），由豐樂農(nóng)化有限責(zé)任公司研發(fā)中心分離、純化、保存并提供。

1.1.2 試驗藥劑。精甲霜靈原藥，92%，購自浙江禾本科技股份有限公司，PD20094902；咯菌腈原藥，99%，購自維訊化工（南京）有限公司，PD20181224；嘧菌酯原藥，97%，購自河北威遠(yuǎn)生物化工有限公司，PD20121486。

1.1.3 儀器設(shè)備。FA1004A型電子天平（上海力辰儀器科技有限公司）；生物培養(yǎng)箱（常州金壇良友儀器有限公司）；可控日光溫室（12 h/12 h光暗交替，光照強(qiáng)度8 000～30 000 lx，溫度15～26 ℃，相對濕度65%～80%），系青州暉耀溫室工程有限公司建。

1.1.4 試驗方法[4-5]。按照精甲霜靈∶咯菌腈∶嘧菌酯的混合比例為3∶1∶8、3∶2∶7、3∶3∶6、3∶4∶5、3∶5∶4混配好的供試藥劑與精甲霜靈、咯菌腈、嘧菌酯單劑選用丙酮溶液進(jìn)行溶解，用0.1%的吐溫80水溶液將母液稀釋成5個系列濃度梯度待用。其濃度配制見表1。空白對照CK為含有等量丙酮溶液的0.1%的吐溫80水溶液。

將培養(yǎng)好的病原真菌孢子用去離子水從培養(yǎng)基上洗脫、過濾，離心（1 000 r/min）5 min，倒去上清液，加入去離子水，再離心。最后用去離子水將孢子重懸浮至每mL 105～107個孢子，加入0.5%葡萄糖溶液。

用移液管從低濃度到高濃度，依次吸取藥液0.5 mL分別加入至小試管中，然后吸取制備好的孢子懸浮液0.5 mL，使藥液與孢子懸浮液等量混合均勻。用微量加樣器吸取上述混合液滴到凹玻片上，然后架放于帶有淺水層的培養(yǎng)皿中，加蓋保濕培養(yǎng)于26 ℃培養(yǎng)箱中。每處理4次重復(fù)，并設(shè)不含藥劑的處理作空白對照。當(dāng)空白對照孢子萌發(fā)率達(dá)到90%以上時，檢查各處理孢子萌發(fā)情況。每處理各重復(fù)隨機(jī)觀察3個以上視野，調(diào)查孢子總數(shù)不少于200個，分別記錄萌發(fā)數(shù)和孢子總數(shù)。孢子芽管長度大于孢子的短半徑視為萌發(fā)。

根據(jù)調(diào)查數(shù)據(jù)，計算各處理的孢子萌發(fā)相對抑制率，按公式（1）、（2）計算，計算結(jié)果保留小數(shù)點后兩位：

[R（%）=NgNt×100] （1）

式中，R—孢子萌發(fā)率；Ng—孢子萌發(fā)數(shù)；Nt—調(diào)查的孢子總數(shù)。

[Re（%）=RtR0×100] （2）

式中，Re—處理校正孢子萌發(fā)率；Rt—處理孢子萌發(fā)率；R0—空白對照孢子萌發(fā)率。

[I（%）=R0-ReR0×100] （3）

式中，I—孢子萌發(fā)相對抑制率；R0—空白對照孢子萌發(fā)率；Re—處理校正的孢子萌發(fā)率。

1.1.5 統(tǒng)計分析。根據(jù)各藥劑濃度的對數(shù)值及對應(yīng)的孢子萌發(fā)相對抑制率概率值作回歸分析，計算各藥劑的EC50、EC90及95%置信限。

根據(jù)Wadley法計算混劑的增效系數(shù)（SR），評價混劑的聯(lián)合作用類型。根據(jù)增效系數(shù)（SR）來評價藥劑混用的增效作用，即SR＜0.5為拮抗作用，0.5≤SR≤1.5為相加作用，SR＞1.5為增效作用。增效系數(shù)（SR）按式（3）、（4）計算：

[X1=PA+PBPA/A+PB/B] （4）

式中，X1—混劑EC50理論值，單位mg/L；PA—混劑中A的百分含量，單位為%；PB—混劑中B的百分含量，單位為%；A—混劑中A的EC50值，單位為mg/L；B—混劑中B的EC50值，單位為mg/L。

[SR=X1X2] （5）

式中，SR—混劑的增效系數(shù)；X1—混劑EC50理論值，單位mg/L；X2—混劑EC50實測值，單位為mg/L。

1.2 田間藥效試驗

根據(jù)室內(nèi)配方篩選的結(jié)果，選取增效系數(shù)最高的配比配制成4%精甲霜靈·嘧菌酯懸乳劑。用精甲霜靈、嘧菌酯單劑作為對照開展田間藥效試驗驗證。

1.2.1 試驗用地概況。為安徽省合肥市高劉鎮(zhèn)孟小莊水稻田，試驗田面積3 000 m2，屬水稻爛秧病較重發(fā)生區(qū)。

1.2.2 作物和試驗對象。試驗防治對象為水稻爛秧病，播種前水稻包衣。作物為水稻，品種為特優(yōu)70。2020年5月11日第1次旋耕，2020年5月14日第2次旋耕，2020年5月14日種子包衣，2020年5月18日播種，播種量為360 kg/hm2，各小區(qū)水稻品種、播量、播種時間、田間密度、肥水管理等栽培條件一致，水稻長勢均勻，試驗田為冬閑田。土壤類型為壤土，有機(jī)質(zhì)含量為14.3 g/kg，pH 7.1。2020年5月18日播種水稻當(dāng)天，施（N∶P∶K=15∶15∶15）三元復(fù)合肥450 kg/hm2基肥。

1.2.3 試驗藥劑。試驗藥劑及試驗設(shè)計見表2。

1.2.4 藥劑試驗小區(qū)設(shè)計。小區(qū)面積4 m2（2 m×2 m），小區(qū)之間設(shè)有畦溝隔離，兩端設(shè)有保護(hù)行。4次重復(fù)。

1.2.5 藥劑施用。水稻播種前種子包衣，從清水對照開始由低濃度向高濃度逐個包衣。播種前種子包衣，共1次。用水量2 L/100 kg種子。

1.2.6 藥效調(diào)查。共調(diào)查2次，第1次調(diào)查為2020年6月2日播種后14 d；第2次調(diào)查為2020年6月9日，播種后21 d。每小區(qū)對角線5點取樣，每點調(diào)查200株，記錄調(diào)查總株數(shù)、病株數(shù)。

1.2.7 藥效計算方法

防治效果（%）=（對照區(qū)病株率-處理區(qū)病株率）/對照區(qū)病株率×100

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)配方篩選試驗結(jié)果

試驗結(jié)果（表3）表明，精甲霜靈、咯菌腈、嘧菌酯單劑及其各混合比例對水稻爛秧病均有明顯的抑制效果。精甲霜靈、咯菌腈、嘧菌酯混配后在試驗配比下均表現(xiàn)為增效作用，其中精甲霜靈∶咯菌腈∶嘧菌酯配比為3∶3∶6時增效作用最高，其增效系數(shù)為6.13，EC50為0.247 mg/L、EC90為2.825 mg/L。

2.2 田間藥效試驗結(jié)果

出苗后14 d調(diào)查結(jié)果表明，4%精甲·咯·嘧菌酯FS對水稻爛秧病有較高的防效，其有效成分12～24 g/100 kg種子處理防效隨著用量的增加而顯著提高；其低劑量處理①的防效為68.46%，其中劑量處理②的防效為79.87%，其高劑量處理③的防效為85.23%；其中，高劑量（處理②和處理③）極顯著高于其低劑量處理①、對照350 g/L精甲霜靈種子處理乳劑處理④和25 g/L咯菌腈FS處理⑤的防效，與對照10%嘧菌酯FS處理⑥的防效無顯著差異。

出苗后21 d調(diào)查結(jié)果表明，4%精甲·咯·嘧菌酯FS低劑量處理①的防效為70.36%，其中劑量處理②的防效為78.83%，其高劑量處理③的防效為84.36%；其高劑量處理③極顯著高于其低、中劑量（處理①、處理②）和所有對照藥劑的防效；其中劑量處理②與對照350 g/L精甲霜靈種子處理乳劑處理④ 10%嘧菌酯FS處理⑥的防效無顯著差異，極顯著高于其低劑量處理①和對照25 g/L咯菌腈FS處理⑤。在試驗使用劑量內(nèi)對水稻安全，可用于水稻爛秧病的防治（表4）。

3 結(jié)論與討論

水稻爛秧病是水稻上重要的苗期病害，棉腐病傳染性爛秧會造成水稻種子、幼芽和幼苗在秧田爛種，嚴(yán)重影響水稻產(chǎn)量與品質(zhì)。不同種作用機(jī)制的藥劑混配，擴(kuò)大防治譜，可以減緩抗性的發(fā)展，替代已經(jīng)產(chǎn)生抗性的產(chǎn)品，為農(nóng)民防治病害提供新的選擇，可以更好地指導(dǎo)農(nóng)民用藥，減少農(nóng)民用藥次數(shù)，節(jié)省用藥開支，同時節(jié)省勞動力的支出，也減少了環(huán)境生物對藥劑的暴露機(jī)會。種子包衣是一種操作簡便、成本低、藥效高的精確施藥技術(shù)，采用化學(xué)藥劑進(jìn)行種子處理是防治水稻苗期爛秧病的關(guān)鍵。種子包衣已成為防治農(nóng)作物苗期病蟲害的重要手段，在節(jié)約用藥、減少環(huán)境污染、提高種子成苗率和促進(jìn)幼苗生長等方面具有重要作用。良好的種衣劑可牢固地附著在種子表面，減少農(nóng)藥在水中擴(kuò)散，使藥劑在苗期生長過程中緩慢釋放，延長藥劑的持效期。因此，開發(fā)精甲霜靈、咯菌腈、嘧菌酯混配的種子處理劑防治水稻惡苗病、立枯病、爛秧病既降低了農(nóng)民的使用成品本，也降低了環(huán)境的消耗成本。

室內(nèi)藥效配方篩選測定結(jié)果表明，精甲霜靈與嘧菌酯按1∶1∶2比例混配時，對水稻爛秧病增效系數(shù)在所有配比中最高，且其生產(chǎn)成本也較低，可大大降低勞動力成本，在田間推廣具有較好的市場前景。

田間試驗結(jié)果表明，4%精甲·咯·嘧菌酯FS對水稻爛秧病具有很好的防治效果，是防治爛秧病較為理想的藥劑。持效性較好，對水稻安全，可作為防治水稻爛秧病的藥劑登記使用。推薦施藥劑量和施用方法：4%精甲·咯·嘧菌酯FS防治水稻爛秧病，推薦有效成分使用劑量為18～24 g/100 kg種子（制劑量為450～600 mL/100 kg種子）；適宜施藥時期為水稻播種前種子包衣。

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[5] NY/T 1156.6-2006 農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗準(zhǔn)則 第6部分：混配的聯(lián)合作用測定[S].

（責(zé)編：王慧晴）

作者簡介 江川安（1981—），男，安徽蕪湖人，助理工程師，從事農(nóng)藥研究工作。

收稿日期 2022-03-24