• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    高溫對(duì)“萬(wàn)圣節(jié)”花青素代謝的影響

    2023-05-30 22:55:18薛雅施竹玥李舒敏王婷陳淑婷趙榮李素華張麗華
    安徽農(nóng)學(xué)通報(bào) 2023年3期
    關(guān)鍵詞:多肉植物高溫脅迫萬(wàn)圣節(jié)

    薛雅 施竹玥 李舒敏 王婷 陳淑婷 趙榮 李素華 張麗華

    摘要 為研究高溫脅迫對(duì)多肉植物‘萬(wàn)圣節(jié)花青素代謝的影響,以‘萬(wàn)圣節(jié)扦插苗為材料,對(duì)其進(jìn)行37 ℃處理,分別處理0、6、12、24、48 h,測(cè)定各處理下‘萬(wàn)圣節(jié)葉片花青素含量、過(guò)氧化物酶活性、多酚氧化酶活性、過(guò)氧化物酶基因和多酚氧化酶基因的表達(dá)水平。結(jié)果表明,在高溫脅迫處理的48 h內(nèi),‘萬(wàn)圣節(jié)葉片花青素含量總體呈現(xiàn)下降的趨勢(shì),但前12 h內(nèi)花青素含量無(wú)顯著變化;‘萬(wàn)圣節(jié)葉片多酚氧化酶活性和過(guò)氧化物酶總體均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),且均在24 h時(shí)達(dá)到頂峰;過(guò)氧化物酶基因cluster-7 148.177和cluster-7 148.112 77表達(dá)水平的變化趨勢(shì)總體上與過(guò)氧化物酶活性的變化較為一致,但是過(guò)氧化物酶基因cluster-7 148.326 45和cluster-7 148.152 9的變化趨勢(shì)與過(guò)氧化物酶活性的變化趨勢(shì)不一致。由此可見(jiàn),高溫脅迫處理影響‘萬(wàn)圣節(jié)葉片中花青素的積累、多酚氧化酶和過(guò)氧化物酶活性;多酚氧化酶基因cluster-7 148.531 8、過(guò)氧化物酶基因cluster-7 148.177和cluster-7 148.112 77可能在高溫引起的‘萬(wàn)圣節(jié)花青素降解中起重要作用。

    關(guān)鍵詞 高溫脅迫;多肉植物;花青素代謝

    中圖分類(lèi)號(hào) TS201.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

    文章編號(hào) 1007-7731(2023)03-0029-05

    Effects of High Temperature on the Metabolism of Anthocyanins in

    Aeonium arboreum ′Halloween′

    XUE Ya? ?SHI Zhuyue? ?LI Shumin? ?WANG Ting? ?CHEN Shuting? ?ZHAO Rong? ?LI Suhua? ?ZHANG Lihua

    (Suqian College, Suqian Jiangsu 223800)

    Abstract In order to study the effect of high temperature stress on the anthocyanin metabolism of Aeonium arboreum 'Halloween', the cuttings of 'Halloween' were used as materials and treated at 37 ℃ for 0 h, 6 h, 12 h, 24 h and 48 h, respectively. Then, the anthocyanin content, peroxidase activity, polyphenol oxidase activity, peroxidase gene and polyphenol oxidase gene expression levels in the leaves of 'Halloween' under each treatment were determined. The results showed that the anthocyanin content in the leaves of 'Halloween' showed a downward trend in the 48 h of high temperature stress treatment, but there was no significant change in the first 12 h; the activity of polyphenol oxidase and peroxidase in the leaves of 'Halloween' showed a trend of increasing first and then decreasing, and both reached the peak at 24 h; the change trend of the expression level of peroxidase genes cluster-7 148.177 and cluster-7 148.112 77 was generally consistent with the change trend of peroxidase activity, however, the change trend of peroxidase genes cluster-7 148.326 45 and cluster-7 148.152 9 is not consistent with the change trend of peroxidase activity. High temperature stress affects the accumulation of anthocyanins, polyphenol oxidase and peroxidase activities in leaves of 'Halloween'; polyphenol oxidase gene cluster-7 148.531 8, peroxidase gene cluster-7 148.177 and cluster-7 148.112 77 may play an important role in the degradation of 'Halloween' anthocyanins induced by high temperature.

    Keywords high temperature stress; succulent plants; anthocyanin metabolism

    多肉植物是一類(lèi)具有膨大且肉質(zhì)化器官的高等植物,多生于較干旱的地區(qū),常體型小巧。這類(lèi)植物因其小巧優(yōu)雅的形態(tài)、絢麗奪目的色彩和耐陰耐旱的適應(yīng)性,廣受園藝愛(ài)好者的青睞,成為我國(guó)新興產(chǎn)業(yè)。近年來(lái)已經(jīng)形成四大多肉植物主產(chǎn)區(qū),分別是山東青州、云南昆明、福建漳州和江蘇常州,多個(gè)具有相當(dāng)規(guī)模的種植基地、特色小鎮(zhèn)和國(guó)家農(nóng)業(yè)龍頭企業(yè)應(yīng)運(yùn)而生,多肉產(chǎn)業(yè)對(duì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展和鄉(xiāng)村振興起到了較大的推動(dòng)作用[1-2]。

    花青素在植物組織中廣泛存在,對(duì)植物葉片、花和果實(shí)的著色起著至關(guān)重要的作用[3]。色彩對(duì)觀(guān)賞植物的重要性不言而喻,因而花青素代謝的研究一直是觀(guān)賞植物的研究熱點(diǎn),如矮牽牛、月季、百合等植物均有相關(guān)研究的報(bào)道[4-6]。合成和降解是花青素代謝中2個(gè)重要的過(guò)程。花青素生物合成途徑已十分明晰,該途徑由一系列酶基因構(gòu)成[7],在這些酶基因上游存在著一些調(diào)控其轉(zhuǎn)錄水平的轉(zhuǎn)錄因子,如MYB、BHLH和WD40等轉(zhuǎn)錄因子[8]。目前花青素代謝的研究主要集中在花青素生物合成及其調(diào)控上,花青素降解相關(guān)的研究還少有報(bào)道,僅有少數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道花青素降解可能與過(guò)氧化物酶、多酚氧化酶活性有關(guān)[9-10]。

    ‘萬(wàn)圣節(jié)(Aeonium arboreum‘Halloween)為景天科蓮花掌屬多肉植物,分布于亞洲、非洲和美洲的干旱和半干旱地區(qū)?!f(wàn)圣節(jié)形態(tài)優(yōu)雅、色彩艷麗、觀(guān)賞價(jià)值高,在多肉生產(chǎn)中占有重要地位。然而,夏季高溫下葉色紅艷的‘萬(wàn)圣節(jié)易變暗淡,觀(guān)賞價(jià)值降低,經(jīng)濟(jì)效益不理想。本課題組前期的研究表明,彩葉‘萬(wàn)圣節(jié)葉片中主要的色素是矢車(chē)菊3-o-半乳糖苷,該色素是一種天然花青素,這意味著高溫影響了‘萬(wàn)圣節(jié)葉片中花青素的代謝?;诖?,該研究以‘萬(wàn)圣節(jié)扦插苗為材料,對(duì)其進(jìn)行37 ℃處理,分別處理0、6、12、24、48 h,測(cè)定各處理下‘萬(wàn)圣節(jié)葉片花青素含量、過(guò)氧化物酶活性、多酚氧化酶活性、過(guò)氧化物酶基因和多酚氧化酶基因的表達(dá)水平,探明高溫對(duì)‘萬(wàn)圣節(jié)花青素代謝的影響,以期為減輕或消除高溫對(duì)‘萬(wàn)圣節(jié)葉片呈色的影響提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    選取宿遷學(xué)院園林實(shí)驗(yàn)基地苗床上當(dāng)年扦插的‘萬(wàn)圣節(jié)單頭植株為材料,將大小一致的扦插苗移入盆中栽培,盆高20 cm,上口直徑24 cm,每盆1 株,分5個(gè)處理,每處理6盆,共移栽30盆,培養(yǎng)于室溫為18 ℃的生長(zhǎng)室內(nèi)。在移栽21 d后,‘萬(wàn)圣節(jié)生長(zhǎng)趨于穩(wěn)定,此時(shí)將30盆植株轉(zhuǎn)至37 ℃的人工氣候箱進(jìn)行培養(yǎng),分別培養(yǎng)0、6、12、24、48 h后取‘萬(wàn)圣節(jié)植株第4至第5輪的葉片,檢測(cè)不同處理時(shí)長(zhǎng)下葉片花青素含量、過(guò)氧化物酶活性、多酚氧化酶活性、過(guò)氧化物酶基因和多酚氧化酶基因的表達(dá)水平,3次重復(fù),取平均值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

    1.2 試驗(yàn)方法

    花青素含量測(cè)定采用0.1%鹽酸比色法[11],過(guò)氧化物酶活性測(cè)定采用愈創(chuàng)木酚比色法[11],多酚氧化酶活性測(cè)定采用鄰苯二酚比色法[12],‘萬(wàn)圣節(jié)葉片RNA提取采用天根生化的多糖多酚植物總RNA提取試劑盒,熒光定量PCR采用朗基Q2000B進(jìn)行。采用Primer Premier 5設(shè)計(jì)過(guò)氧化物酶基因和多酚氧化酶基因的定量引物(表1),‘萬(wàn)圣節(jié)AaACT2為內(nèi)參基因。

    1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

    采用GraphPad Prism 5制圖,采用SPSS 25.0進(jìn)行ANOVA單因素分析,分析數(shù)據(jù)間是否具有顯著性差異。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 高溫脅迫對(duì)‘萬(wàn)圣節(jié)葉片花青素含量的影響

    由圖1可知,高溫脅迫對(duì)‘萬(wàn)圣節(jié)葉片中花青素積累量影響很大。在高溫脅迫處理的48 h內(nèi),隨著時(shí)間的延長(zhǎng),‘萬(wàn)圣節(jié)葉片花青素含量總體呈現(xiàn)下降的趨勢(shì),花青素含量在高溫脅迫處理的12 h內(nèi)無(wú)顯著變化,24 h后才表現(xiàn)出顯著下降,且24和48 h后的花青素含量無(wú)顯著性差異。

    2.2 高溫脅迫對(duì)‘萬(wàn)圣節(jié)葉片多酚氧化酶含量的影響

    由圖2可知,高溫脅迫對(duì)‘萬(wàn)圣節(jié)葉片中多酚氧化酶活性具有一定的影響。在高溫脅迫處理的48 h內(nèi),隨著時(shí)間的延長(zhǎng),‘萬(wàn)圣節(jié)葉片多酚氧化酶活性總體呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),多酚氧化酶活性在高溫脅迫處理的6 h內(nèi)無(wú)顯著的變化,12 h后才表現(xiàn)出顯著的上升,在24 h時(shí)達(dá)到頂峰,后呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。

    2.3 高溫脅迫對(duì)‘萬(wàn)圣節(jié)葉片過(guò)氧化物酶含量的影響

    由圖3可知,高溫脅迫對(duì)‘萬(wàn)圣節(jié)葉片中過(guò)氧化物酶活性具有一定的影響。在高溫脅迫處理的48 h內(nèi),隨著時(shí)間的延長(zhǎng),‘萬(wàn)圣節(jié)葉片過(guò)氧化物酶活性總體呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),多酚氧化酶活性在高溫脅迫處理的12 h內(nèi)無(wú)顯著的變化,24 h后才表現(xiàn)出顯著的上升,后呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。

    2.4 高溫脅迫對(duì)‘萬(wàn)圣節(jié)葉片多酚氧化酶基因表達(dá)的影響

    為進(jìn)一步探究多酚氧化酶對(duì)高溫脅迫下花青素積累的影響,從已構(gòu)建的‘萬(wàn)圣節(jié)葉片轉(zhuǎn)錄組文庫(kù)中篩選出1個(gè)可能的多酚氧化酶基因cluster-7 148.531 8,并以高溫脅迫下的‘萬(wàn)圣節(jié)葉片為材料,進(jìn)行了該基因的表達(dá)量分析。由圖4可知,高溫脅迫對(duì)‘萬(wàn)圣節(jié)葉片中多酚氧化酶基因的表達(dá)影響很大,在高溫脅迫處理的48 h內(nèi),隨著時(shí)間的延長(zhǎng),‘萬(wàn)圣節(jié)葉片多酚氧化酶基因的表達(dá)水平總體呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),多酚氧化酶基因的表達(dá)水平在高溫脅迫處理的12 h內(nèi)無(wú)顯著的變化,24 h后才表現(xiàn)出顯著的上升,后呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。

    2.5 高溫脅迫對(duì)‘萬(wàn)圣節(jié)葉片過(guò)氧化物酶基因表達(dá)的影響

    為進(jìn)一步探究過(guò)氧化物酶對(duì)高溫脅迫下花青素積累的影響,從已構(gòu)建的‘萬(wàn)圣節(jié)葉片轉(zhuǎn)錄組文庫(kù)中篩選出了4個(gè)可能的過(guò)氧化物酶基因,并以高溫脅迫下的‘萬(wàn)圣節(jié)葉片為材料,進(jìn)行了上述基因的表達(dá)量分析。由圖5可知,高溫脅迫對(duì)‘萬(wàn)圣節(jié)葉片中過(guò)氧化物酶基因的表達(dá)影響很大,在高溫脅迫處理的48 h內(nèi),隨著時(shí)間的延長(zhǎng),‘萬(wàn)圣節(jié)葉片中4個(gè)過(guò)氧化物酶基因的表達(dá)水平總體呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),cluster-7 148.177、cluster-7 148.112 77和cluster-7 148.326 45這3個(gè)過(guò)氧化物酶基因的表達(dá)水平在高溫脅迫處理的12 h內(nèi)無(wú)顯著的變化,24 h后才表現(xiàn)出顯著的上升,前2個(gè)基因在48 h后呈現(xiàn)下降趨勢(shì),而最后一個(gè)基因48 h與24 h的表達(dá)水平無(wú)顯著變化。過(guò)氧化物酶基因cluster-7 148.152 9較為獨(dú)特,在高溫脅迫處理的48 h內(nèi),隨著時(shí)間的延長(zhǎng),該基因的表達(dá)水平總體呈現(xiàn)先下降后上升再下降的趨勢(shì),表達(dá)水平的高峰分別在0和24 h。

    3 結(jié)論與討論

    花青素是植物中分布較為廣泛的一類(lèi)色素,其負(fù)責(zé)的顏色范圍從紅色到紫色及藍(lán)色。目前,花青素的生物合成途徑已被解析清楚,花青素的合成調(diào)控已有諸多研究進(jìn)展,然而學(xué)界目前對(duì)花青素在植物中的穩(wěn)定性和分解代謝知之甚少。在紅花檵木[13]、茄子[14]和‘紅陽(yáng)獼猴桃[15]中的研究表明,高溫會(huì)顯著減少植物中花青素的積累,這一結(jié)論與該研究結(jié)果相一致。然而,不同的物種對(duì)不同高溫的反應(yīng)并不相同,紅花檵木中35 ℃處理1周即可使紅色的葉片轉(zhuǎn)青,‘紅陽(yáng)獼猴桃40 ℃處理后,其果肉內(nèi)果皮中花青素含量迅速下降?;ㄇ嗨卦诟邷貤l件下顯著減少,這一過(guò)程中肯定存在著花青素降解這一過(guò)程。氧化水果提取物中花青素的主要酶之一是多酚氧化酶,該酶是一大類(lèi)酶,普遍存在于高等植物中,在綠原酸或咖啡酰酒石酸存在下,多酚氧化酶增加了水果提取物和果汁中花青素的降解速率[16]。另一種可降解水果提取物中花青素的酶是過(guò)氧化物酶,因?yàn)樵贖2O2存在的條件下,過(guò)氧化物酶可降解水果提取物中的花青素[17],且過(guò)氧化物酶在高溫條件下可直接參與紅葡萄漿果花青素分解代謝[18]。因而,該研究主要測(cè)定了以上2種酶的活性及可能編碼這2類(lèi)酶的基因表達(dá)水平。結(jié)果顯示,在‘萬(wàn)圣節(jié)葉片經(jīng)受高溫脅迫的過(guò)程中,多酚氧化酶活性的變化與多酚氧化酶基因cluster-7 148.531 8表達(dá)水平的變化趨勢(shì)一致,均為先上升后下降,過(guò)氧化物酶活性的變化總體上與過(guò)氧化物酶基因cluster-7 148.177和cluster-7 148.112 77表達(dá)水平的變化趨勢(shì)較為一致,均呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì),但是過(guò)氧化物酶基因cluster-7 148.326 45和cluster-7 148.152 9的變化趨勢(shì)與過(guò)氧化物酶活性的變化趨勢(shì)并不一致。過(guò)氧化物酶是一類(lèi)酶,具有多個(gè)成員,每個(gè)成員的功能不盡相同,因而推測(cè)cluster-7 148.326 45和cluster-7 148.152 9可能并不負(fù)責(zé)高脅迫下的花青素降解過(guò)程。

    4 參考文獻(xiàn)

    [1] 陳大勝. 基于特色小鎮(zhèn)建設(shè)的蘇北多肉植物產(chǎn)業(yè)發(fā)展研究[J]. 南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2020,44(6):201-206.

    [2] 蔣亞華,韓浩章,李素華,等. 彩葉系多肉植物培養(yǎng)及其營(yíng)銷(xiāo)模式研究[J]. 安徽農(nóng)學(xué)通報(bào),2019,25(18):47-48.

    [3] 劉愷媛,王茂良,辛海波,等. 植物花青素合成與調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2021,37(14):41-51.

    [4] 王蕾,韋靈林,徐虹. 矮牽?;ㄉ剀蘸铣赏緩街械年P(guān)鍵酶及其轉(zhuǎn)錄調(diào)控[J]. 細(xì)胞生物學(xué)雜志,2009,31(5):641-650.

    [5] 程怡. 月季‘仙境花色素組分及影響花色呈色因子分析[D]. 雅安:四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2014.

    [6] 肖偉,張銘芳,張秀海,等. 百合花青素合成調(diào)控的研究進(jìn)展[J]. 北方園藝,2018(20):154-162.

    [7] HOLTON T,CORNISH E. Genetics and Biochemistry of Anthocyanin Biosynthesis[J]. Plant cell,1995,7:1071-83.

    [8] 高國(guó)應(yīng),伍小方,張大為,等. MBW復(fù)合體在植物花青素合成途徑中的研究進(jìn)展[J]. 生物技術(shù)通報(bào),2020,36(1):126-134.

    [9] MOVAHED N,PASTORE C,CELLINI A,et al. The grapevine VviPrx31 peroxidase as a candidate gene involved in anthocyanin degradation in ripening berries under high temperature. J Plant Res. 2016 May;129(3):513-26.

    [10] LUO H,LI W,ZHANG X,DENG S,et al. planta high levels of hydrolysable tannins inhibit peroxidase mediated anthocyanin degradation and maintain abaxially red leaves of Excoecaria Cochinchinensis[J]. BMC Plant Biol. 2019,19(1):315.

    [11] 李小方,張志良. 植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M]. 北京:高等教育出版社,2016.

    [12] MONTGOMERY MW,SGARBIERI VC. Isoenzymes of banana polyphenol oxidase[J]. Phytochemistry,1975,14(5-6):1245-1249.

    [13] 許威. 紅花檵木CHS基因的克隆及表達(dá)分析[D]. 長(zhǎng)沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2013.

    [14] 張圣美,劉曉慧,尚靜,等. 高溫脅迫對(duì)茄子花青素含量及其合成相關(guān)酶活性和基因表達(dá)的影響[J]. 上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2020,36(6):6-12.

    [15] 方鵬. 高溫脅迫下‘紅陽(yáng)獼猴桃果實(shí)花青素合成與分解途徑解析[D]. 合肥:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué),2016.

    [16] KADER F,HALUK J P,NICOLAS J,et al. Degradation of Cyanidin 3-Glucoside by Blueberry Polyphenol Oxidase: Kinetic Studies and Mechanisms[J]. Journal of Agricultural & Food Chemistry,1998,46(8):3060-3065.

    [17] AA CALDER?N,E GARC?A-FLORENCIANO,R MU?OZ,et al. Gamay grapevine peroxidase:Its role in vacuolar anthocyani(di)n degradation[J]. Vardfacket,1992,31(3):3.

    [18] MOVAHED N,PASTORE C,CELLINI A,et al. The grapevine VviPrx31 peroxidase as a candidate gene involved in anthocyanin degradation in ripening berries under high temperature[J]. Journal of Plant Research,2016,129(3):513-526.

    (責(zé)編:王慧晴)

    基金項(xiàng)目 2021年宿遷學(xué)院省級(jí)大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練項(xiàng)目(202114160039Y);宿遷學(xué)院創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(2021td05)。

    作者簡(jiǎn)介 薛雅(2001—),女,江蘇鹽城人。研究方向:多肉植物種質(zhì)資源創(chuàng)新與應(yīng)用。

    趙榮*通信作者

    收稿日期 2022-04-05

    猜你喜歡
    多肉植物高溫脅迫萬(wàn)圣節(jié)
    萬(wàn)圣節(jié)狂歡派對(duì)
    Sundry Features of Halloween 雜談萬(wàn)圣節(jié)
    淺談多肉植物的養(yǎng)護(hù)管理
    多肉植物火祭空氣環(huán)境效應(yīng)初探
    關(guān)于景天科植物葉插適宜條件的探究報(bào)告
    淺談多肉植物的應(yīng)用
    高溫脅迫對(duì)楊樹(shù)保護(hù)酶活性的影響
    外源水楊酸對(duì)高溫脅迫下甘藍(lán)幼苗生長(zhǎng)及生理特性的影響
    高溫脅迫對(duì)胭脂花葉片細(xì)胞膜透性影響研究
    高溫脅迫下草坪草高羊茅差異表達(dá)基因的分子研究
    亚洲av成人不卡在线观看播放网| 激情视频va一区二区三区| 麻豆乱淫一区二区| 国产精品1区2区在线观看. | 亚洲男人天堂网一区| 蜜桃国产av成人99| 色老头精品视频在线观看| 在线观看免费高清a一片| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 国产亚洲av高清不卡| 下体分泌物呈黄色| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 国产成人欧美| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 妹子高潮喷水视频| 午夜福利一区二区在线看| 精品免费久久久久久久清纯 | 咕卡用的链子| 大型黄色视频在线免费观看| 国产一区二区激情短视频| 国产色视频综合| 国产精品久久电影中文字幕 | 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产欧美日韩一区二区三| 交换朋友夫妻互换小说| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲少妇的诱惑av| 精品免费久久久久久久清纯 | 热99国产精品久久久久久7| 国产在线一区二区三区精| 老汉色av国产亚洲站长工具| 91国产中文字幕| 高清在线国产一区| 动漫黄色视频在线观看| 日韩三级视频一区二区三区| 国产一区二区在线观看av| 色综合婷婷激情| 亚洲全国av大片| 女人久久www免费人成看片| 国产熟女午夜一区二区三区| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产野战对白在线观看| 国产福利在线免费观看视频| 色尼玛亚洲综合影院| 精品福利观看| 国产高清激情床上av| 国产成人精品久久二区二区91| 在线av久久热| 国产精品久久久久成人av| 午夜免费成人在线视频| 国产av精品麻豆| 老司机午夜十八禁免费视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 91成人精品电影| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 9191精品国产免费久久| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 午夜久久久在线观看| 国产精品国产高清国产av | 国产成人精品无人区| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 咕卡用的链子| 一个人免费看片子| 1024视频免费在线观看| 久久人妻av系列| 少妇 在线观看| 国产免费av片在线观看野外av| 久久免费观看电影| 精品一区二区三区av网在线观看 | 欧美精品一区二区大全| 制服人妻中文乱码| 动漫黄色视频在线观看| 国产成人精品在线电影| 精品欧美一区二区三区在线| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 国产成人精品久久二区二区免费| 一本大道久久a久久精品| 怎么达到女性高潮| 久久ye,这里只有精品| 成人三级做爰电影| 高清av免费在线| 两个人看的免费小视频| 丰满迷人的少妇在线观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 一级毛片精品| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 五月天丁香电影| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲少妇的诱惑av| 欧美黑人欧美精品刺激| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产老妇伦熟女老妇高清| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲国产欧美在线一区| 国产精品亚洲一级av第二区| 亚洲中文av在线| 午夜老司机福利片| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产av一区二区精品久久| 这个男人来自地球电影免费观看| 最新美女视频免费是黄的| 国产亚洲av高清不卡| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 中文字幕人妻熟女乱码| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产91精品成人一区二区三区 | 国产欧美日韩一区二区三区在线| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 成年女人毛片免费观看观看9 | 精品国产亚洲在线| 亚洲九九香蕉| 成人三级做爰电影| 黄色 视频免费看| 一个人免费在线观看的高清视频| 国产成人影院久久av| tocl精华| 一进一出抽搐动态| 久热这里只有精品99| 一二三四在线观看免费中文在| 一本综合久久免费| 97人妻天天添夜夜摸| 夜夜夜夜夜久久久久| 精品欧美一区二区三区在线| av一本久久久久| 久久 成人 亚洲| 欧美精品亚洲一区二区| 日本五十路高清| 久久久水蜜桃国产精品网| 久久99一区二区三区| 国产精品偷伦视频观看了| 啦啦啦在线免费观看视频4| 国产精品影院久久| 国产黄色免费在线视频| 99九九在线精品视频| 国产真人三级小视频在线观看| 丝袜人妻中文字幕| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 国产日韩欧美在线精品| 亚洲熟女精品中文字幕| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| h视频一区二区三区| 高清毛片免费观看视频网站 | 国产熟女午夜一区二区三区| 亚洲午夜理论影院| 免费在线观看完整版高清| 免费在线观看黄色视频的| 一本大道久久a久久精品| 一区二区日韩欧美中文字幕| 亚洲国产av新网站| 在线观看66精品国产| 99re6热这里在线精品视频| 人人妻人人澡人人看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 久热这里只有精品99| 久久久国产成人免费| 日韩免费高清中文字幕av| 午夜福利一区二区在线看| 午夜精品久久久久久毛片777| 9191精品国产免费久久| 人妻一区二区av| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 国产精品免费视频内射| 大香蕉久久网| 欧美一级毛片孕妇| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 亚洲情色 制服丝袜| www.自偷自拍.com| 亚洲人成电影观看| 超碰成人久久| 久久中文看片网| 国产一区二区在线观看av| 亚洲色图av天堂| 天堂动漫精品| 亚洲成国产人片在线观看| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 久久久久精品人妻al黑| 午夜久久久在线观看| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| av网站免费在线观看视频| 黄色怎么调成土黄色| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 丝袜人妻中文字幕| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲视频免费观看视频| 日韩中文字幕视频在线看片| 午夜视频精品福利| 久久免费观看电影| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲视频免费观看视频| 操美女的视频在线观看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | e午夜精品久久久久久久| 欧美日韩av久久| 欧美黄色片欧美黄色片| 久久九九热精品免费| 亚洲免费av在线视频| 久久国产精品人妻蜜桃| 精品国产乱子伦一区二区三区| 亚洲国产欧美网| 女同久久另类99精品国产91| 嫩草影视91久久| 天堂动漫精品| 亚洲精品自拍成人| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 在线永久观看黄色视频| 久久久国产精品麻豆| 亚洲一区二区三区欧美精品| 午夜成年电影在线免费观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 美女高潮到喷水免费观看| 国产亚洲精品久久久久5区| 精品久久久久久电影网| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 成人国产一区最新在线观看| 国产不卡一卡二| 久久中文字幕一级| 女警被强在线播放| 91老司机精品| 9热在线视频观看99| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 少妇被粗大的猛进出69影院| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲成国产人片在线观看| 窝窝影院91人妻| xxxhd国产人妻xxx| 女同久久另类99精品国产91| 久久婷婷成人综合色麻豆| 久久久久精品人妻al黑| 高清在线国产一区| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 欧美激情高清一区二区三区| 亚洲情色 制服丝袜| 国产一区有黄有色的免费视频| 久久九九热精品免费| 99国产精品一区二区三区| 99精品欧美一区二区三区四区| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 另类精品久久| 在线看a的网站| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 人妻 亚洲 视频| 亚洲国产av影院在线观看| 午夜两性在线视频| 天天操日日干夜夜撸| 日日爽夜夜爽网站| 欧美黄色片欧美黄色片| www.熟女人妻精品国产| 国产不卡一卡二| 国产熟女午夜一区二区三区| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 亚洲七黄色美女视频| 日日夜夜操网爽| 90打野战视频偷拍视频| 国产人伦9x9x在线观看| 99久久人妻综合| 最新的欧美精品一区二区| 高清欧美精品videossex| 91精品三级在线观看| 国产精品欧美亚洲77777| 国产野战对白在线观看| 国产麻豆69| 欧美日韩av久久| 免费高清在线观看日韩| 伦理电影免费视频| 午夜福利乱码中文字幕| 亚洲综合色网址| 91字幕亚洲| 十八禁人妻一区二区| 欧美激情久久久久久爽电影 | 天堂8中文在线网| 精品视频人人做人人爽| 中文字幕色久视频| videos熟女内射| 麻豆国产av国片精品| 国产精品1区2区在线观看. | 一边摸一边抽搐一进一小说 | 国产成人系列免费观看| 最新在线观看一区二区三区| 99国产极品粉嫩在线观看| 香蕉国产在线看| 一二三四在线观看免费中文在| 欧美激情高清一区二区三区| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 在线天堂中文资源库| 欧美精品av麻豆av| 两个人免费观看高清视频| 十分钟在线观看高清视频www| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产精品电影一区二区三区 | 亚洲一区二区三区欧美精品| 一二三四在线观看免费中文在| 一夜夜www| 美女福利国产在线| 视频区欧美日本亚洲| 我的亚洲天堂| 蜜桃在线观看..| www.精华液| 国产一区有黄有色的免费视频| 日本wwww免费看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 久久免费观看电影| 午夜激情av网站| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美乱码精品一区二区三区| 丝袜美腿诱惑在线| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 国产精品九九99| 午夜免费鲁丝| 亚洲男人天堂网一区| 伦理电影免费视频| 久久久欧美国产精品| 桃花免费在线播放| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 99香蕉大伊视频| 国产一区二区三区视频了| 欧美日韩成人在线一区二区| 日本黄色视频三级网站网址 | 精品第一国产精品| 高清视频免费观看一区二区| 高潮久久久久久久久久久不卡| 在线永久观看黄色视频| 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲,欧美精品.| 在线播放国产精品三级| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 宅男免费午夜| 制服人妻中文乱码| 亚洲第一青青草原| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 国产一区二区三区综合在线观看| 精品少妇久久久久久888优播| 免费在线观看完整版高清| 搡老乐熟女国产| 国产高清激情床上av| 高清av免费在线| 精品一区二区三卡| 国产精品免费大片| 久久久欧美国产精品| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产高清激情床上av| 国产成人啪精品午夜网站| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 一级毛片电影观看| 欧美激情 高清一区二区三区| 搡老乐熟女国产| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 在线观看一区二区三区激情| 一级片'在线观看视频| 日本欧美视频一区| 亚洲综合色网址| 精品国产一区二区三区四区第35| 国产精品欧美亚洲77777| 精品人妻在线不人妻| 欧美国产精品一级二级三级| a级片在线免费高清观看视频| 国产人伦9x9x在线观看| 日本精品一区二区三区蜜桃| 怎么达到女性高潮| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 国产精品亚洲一级av第二区| 两性夫妻黄色片| 麻豆成人av在线观看| 亚洲国产欧美一区二区综合| 国产精品免费视频内射| 青草久久国产| 不卡一级毛片| 后天国语完整版免费观看| 欧美日韩黄片免| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 老汉色∧v一级毛片| 欧美日韩视频精品一区| 久久久久久人人人人人| 日本vs欧美在线观看视频| 国产亚洲精品第一综合不卡| 久久久久视频综合| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产精品电影一区二区三区 | 精品国产一区二区久久| 日韩成人在线观看一区二区三区| 午夜激情久久久久久久| 国产欧美日韩一区二区三| 久久国产精品人妻蜜桃| 岛国毛片在线播放| 久久精品国产综合久久久| 久久中文字幕人妻熟女| 在线 av 中文字幕| 免费看十八禁软件| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 人人妻人人澡人人看| 97在线人人人人妻| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 国产高清视频在线播放一区| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 一个人免费看片子| 国产精品欧美亚洲77777| 亚洲精品一二三| 黄片播放在线免费| av有码第一页| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 18禁美女被吸乳视频| 老司机在亚洲福利影院| 久久九九热精品免费| 中文字幕制服av| 精品久久久久久电影网| 99re在线观看精品视频| 久久影院123| 男女床上黄色一级片免费看| 大片免费播放器 马上看| 99国产综合亚洲精品| 色婷婷久久久亚洲欧美| 麻豆av在线久日| 亚洲精品在线美女| 热99re8久久精品国产| 丁香六月天网| 午夜成年电影在线免费观看| www.999成人在线观看| 99国产精品99久久久久| 免费观看av网站的网址| av免费在线观看网站| 91国产中文字幕| 日韩免费av在线播放| 国产成人免费观看mmmm| av欧美777| 国产高清videossex| 十八禁网站免费在线| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 久久精品成人免费网站| 欧美 日韩 精品 国产| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲第一av免费看| 制服人妻中文乱码| 90打野战视频偷拍视频| 久久久久网色| 免费人妻精品一区二区三区视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产97色在线日韩免费| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 国产成+人综合+亚洲专区| 欧美在线一区亚洲| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲黑人精品在线| 成年人午夜在线观看视频| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 亚洲专区中文字幕在线| 777米奇影视久久| 欧美午夜高清在线| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产有黄有色有爽视频| 国产精品1区2区在线观看. | 精品久久蜜臀av无| 欧美变态另类bdsm刘玥| 看免费av毛片| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 久热爱精品视频在线9| 国产熟女午夜一区二区三区| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 欧美大码av| 国产精品.久久久| 又黄又粗又硬又大视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 欧美亚洲日本最大视频资源| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 黄色毛片三级朝国网站| 久久99一区二区三区| 精品国产亚洲在线| 国产区一区二久久| 1024香蕉在线观看| 精品国产国语对白av| av网站免费在线观看视频| 蜜桃国产av成人99| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 欧美精品一区二区大全| 免费在线观看影片大全网站| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 亚洲精品国产一区二区精华液| 高清视频免费观看一区二区| 一本久久精品| 高清毛片免费观看视频网站 | 搡老熟女国产l中国老女人| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 久久精品国产亚洲av高清一级| 日韩一区二区三区影片| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 午夜福利乱码中文字幕| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 18禁美女被吸乳视频| 成人特级黄色片久久久久久久 | 亚洲精品国产区一区二| 久久久久视频综合| 国产精品二区激情视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 超色免费av| 老熟女久久久| √禁漫天堂资源中文www| 国产午夜精品久久久久久| www日本在线高清视频| 久久午夜亚洲精品久久| 在线观看一区二区三区激情| 我的亚洲天堂| 亚洲av第一区精品v没综合| 热re99久久精品国产66热6| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 久久毛片免费看一区二区三区| 中文字幕高清在线视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 91字幕亚洲| 午夜成年电影在线免费观看| videosex国产| 黄色成人免费大全| 日韩有码中文字幕| 一区二区日韩欧美中文字幕| 一区二区三区国产精品乱码| 麻豆av在线久日| 老熟女久久久| 成人影院久久| 久久中文字幕一级| 亚洲精品在线美女| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲精品美女久久av网站| 女性被躁到高潮视频| 男人操女人黄网站| 国产淫语在线视频| 在线观看免费高清a一片| 一级片免费观看大全| 欧美+亚洲+日韩+国产| 免费av中文字幕在线| 色94色欧美一区二区| 亚洲专区国产一区二区| 免费不卡黄色视频| 亚洲成人国产一区在线观看| 亚洲专区字幕在线| 亚洲天堂av无毛| 啦啦啦免费观看视频1| 亚洲色图综合在线观看| cao死你这个sao货| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| www.熟女人妻精品国产| 极品教师在线免费播放| 999久久久精品免费观看国产| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产一区二区三区综合在线观看| 下体分泌物呈黄色| 亚洲国产av影院在线观看| 蜜桃在线观看..| 日韩免费高清中文字幕av| 香蕉国产在线看| 午夜福利欧美成人| 中文字幕高清在线视频| 高清毛片免费观看视频网站 | 成年人午夜在线观看视频| 免费在线观看黄色视频的| 考比视频在线观看| 亚洲欧美一区二区三区久久| 青草久久国产| 国产又色又爽无遮挡免费看| 国产成人免费无遮挡视频| 1024视频免费在线观看| 91成人精品电影| 精品国产乱子伦一区二区三区| 久久久久久久精品吃奶| 日韩欧美国产一区二区入口| 最近最新中文字幕大全电影3 | 成人手机av| 欧美av亚洲av综合av国产av| 精品国产乱子伦一区二区三区| 欧美在线一区亚洲| av天堂在线播放| 国产精品一区二区免费欧美| 国产成人精品无人区| 国产深夜福利视频在线观看| 久久热在线av| 51午夜福利影视在线观看| 国产高清视频在线播放一区| 黄色丝袜av网址大全| 中文字幕人妻丝袜制服| 亚洲国产成人一精品久久久| 黑人猛操日本美女一级片| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 美女视频免费永久观看网站| 国产精品 欧美亚洲| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 成年人免费黄色播放视频| 一二三四在线观看免费中文在| 成人国产av品久久久| 精品一区二区三区av网在线观看 | 一本久久精品| 99香蕉大伊视频| kizo精华| 欧美性长视频在线观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 成年女人毛片免费观看观看9 | 精品福利永久在线观看| 亚洲少妇的诱惑av| 精品国内亚洲2022精品成人 | 操出白浆在线播放| 国产一卡二卡三卡精品| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 国产成人一区二区三区免费视频网站|