三陰性乳腺癌雄激素受體表達狀態(tài)與臨床病理特征及預(yù)后相關(guān)性分析

范云鵬 楊穎濤

鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院乳腺外科，河南鄭州 450000

乳腺癌（breast cancer，BC）是影響全球眾多女性身體健康最常見的惡性腫瘤。最新數(shù)據(jù)報道[1]，2020 年乳腺癌全球新發(fā)病例為226.14 萬人次，取代肺癌成為世界第一大癌種。三陰性乳腺癌（triplenegative breast cancer，TNBC）是一種復(fù)雜且惡性程度較高的乳腺癌亞型，是指同時缺乏孕激素受體（progesterone receptor，PR）、人表皮生長因子受體-2（human epidermal growth factor receptor-2，HER-2）及雌激素受體（estrogen receptor，ER）表達的一類乳腺癌，其發(fā)病率為乳腺癌的10%～15%[2]。由于該亞型本身異質(zhì)性較強、預(yù)后差且常規(guī)的治療靶點都呈現(xiàn)出低表達或未表達的狀態(tài)，常規(guī)的治療手段（如內(nèi)分泌及靶向治療等）對其療效不佳，因此只能從化療中獲益[3]。雄激素受體（androgen receptor，AR）是一種可與雄激素進行結(jié)合從而發(fā)揮作用的類固醇激素受體，在TNBC 病情發(fā)生發(fā)展中起著相當重要的作用[4]，其在乳腺癌患者中表達率為70%～90%，在TNBC 患者中約為15%[3]。AR在TNBC 中的表達、水平變化以及預(yù)后關(guān)系目前尚存爭議。本研究旨在收集患者臨床資料，進而探討AR 在TNBC 患者的表達水平以及預(yù)后關(guān)系?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017 年1 月至2019 年1 月鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院（我院）收治的TNBC 患者108 例，均為女性，年齡28 ～71 歲，平均（50.17±8.19）歲。納入標準：所有臨床病歷完整且病理資料無缺失；意識及精神狀態(tài)正常；未發(fā)生遠處器官轉(zhuǎn)移且未行術(shù)前新輔助化療；術(shù)后經(jīng)過常規(guī)病理結(jié)果判斷為單側(cè)原發(fā)的TNBC。排除標準：年齡＜18 歲的患者；病歷資料缺失者；存在意識障礙，依從性差者；有嚴重的心、肝以及腎功能障礙者。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化分析方法 對全部患者的組織學(xué)標本進行采集并用全自動免疫組化儀進一步處理。分別確定AR、HER-2、ER、CK5/6、PR、Ki-67、表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)及P53 的表達狀態(tài)。判定標準具體如下[5-6]：癌細胞的細胞核或其細胞質(zhì)出現(xiàn)顆粒狀棕黃色染色則判定為AR 陽性染色，陽性的染著色細胞占比≥10%為AR 陽性；IHC 檢測為3+或?qū)HC 檢測為2+進而行FISH 檢測表明基因出現(xiàn)擴增判定為HER-2 表達陽性；癌細胞中出現(xiàn)細胞核染色陽性≥1%判定ER 和PR 表達為陽性；判定Ki-67 臨界值標準，以陽性細胞在所有癌細胞中的占比平均值為指標，若結(jié)果≥14%，即為高表達，＜14%則為低表達。

1.2.2 隨訪 隨訪主要采用門診及住院復(fù)查、電話聯(lián)系等方式，隨訪內(nèi)容主要有常規(guī)檢查（如血常規(guī)，尿常規(guī)、心電圖等），彩色多普勒超聲，胸部CT，骨掃描、PET-CT 等，明確是否有復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。以無病生存時間（disease-free survival，DFS）和總生存時間（overall survival，OS）為指標。DFS 為術(shù)后第一天至腫瘤出現(xiàn)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的時間；OS 為術(shù)后第一天至任何因素導(dǎo)致的病死或者末次隨訪時間。隨訪截止日期為2022 年1 月1 日。

1.3 觀察指標

觀察AR 陽性表達狀態(tài)及其和臨床病理特征之間的關(guān)聯(lián)。根據(jù)本研究所有TNBC 患者的AR 表達情況，統(tǒng)計AR 陽性組與陰性組比例，對AR 陰性和陽性兩組患者進行組間差異比較，主要包含年齡、原發(fā)腫瘤大小、病理類型、月經(jīng)狀態(tài)、身體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）、淋巴結(jié)狀態(tài)、臨床分期、Ki-67 指數(shù)、CK5/6、EGFR 狀態(tài)、P53 表達等。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 21.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析。計量資料用均數(shù)±標準差（x±s）表示，行t 檢驗，計數(shù)資料用[n（%）] 表示，行χ2檢驗。用Kaplan-Meier 生存分析法來繪制生存曲線，Log-rank 檢驗比較兩組生存時間。P ＜ 0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 AR陽性的表達

本研究中108 例TNBC 患者出現(xiàn)AR 表達陽性的有31 例，陽性率為28.7%。

2.2 TNBC中AR表達和相關(guān)臨床病理指標的關(guān)聯(lián)

在108 例TNBC 患 者 中，AR 陽 性 組 中 年 齡≥50 歲、絕經(jīng)后狀態(tài)、Ki-67 指數(shù)低表達（＜14%）、CK5/6 陰性、P53 陰性表達的患者占比均顯著大于AR陰性組（61.3% vs. 35.1%；64.5% vs. 37.7%；58.1% vs.15.6%；58.1% vs. 27.3%；64.5% vs. 40.3%），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜ 0.05）。另外AR 表達狀態(tài)和患者的病理類型、原發(fā)腫瘤大小、BMI、臨床分期、淋巴結(jié)狀態(tài)、組織學(xué)分級、脈管癌栓、EGFR 狀態(tài)因素均無顯著相關(guān)性（P ＞ 0.05），見表1。

表1 AR表達和臨床病理特征的關(guān)聯(lián)[n（%）]

2.3 生存分析

全部患者均完成隨訪，隨訪時間為9 ～58 個月，隨訪時間中位數(shù)為40 個月。共有9 例患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，14 例患者病死。在AR 陽性組中出現(xiàn)肺轉(zhuǎn)移1 例和病死患者1 例；而AR 陰性組中出現(xiàn)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移共有8 例（5 例復(fù)發(fā)于患側(cè)乳房或胸壁、1 例健側(cè)乳房轉(zhuǎn)移和2 例肺轉(zhuǎn)移）和13 例病死患者。Kaplan-Meier 生存分析顯示，本研究中108 例患者的3 年無病生存率為91.7%（n=99）且3 年的總生存率為87.0%（n=94）。其中AR 陽性組與陰性組TNBC 患者的無病生存率比較（96.8%vs. 89.6%），差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=1.488，Log-rankP=0.223），見圖1；AR 陽性組TNBC 患者的總生存率優(yōu)于陰性組（96.8%vs. 83.1%），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=4.208，Log-rankP=0.040），見圖2。

圖1 兩種AR 表達狀態(tài)的無病生存

圖2 兩種AR 表達狀態(tài)的總生存

3 討論

TNBC 是預(yù)后極差且復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率較高的乳腺癌亞型，與激素受體陽性乳腺癌相比，TNBC 的治療選擇較少，年輕和肥胖女性的患病率較高，術(shù)后3 ～5 年患者的復(fù)發(fā)率和病死率也很高[7]。2015 年，Burstein 等[8]對198 例TNBC 患者進行研究，根據(jù)定量分析將TNBC 分為兩大類別，根據(jù)潛在的靶點進一步分為四個亞型包括表達AR 和細胞表面黏蛋白受體的LAR 組，該亞型單獨形成分組1；另外間充質(zhì)亞型（mesenchymal subtype，MES）表達生長因子受體，基底樣免疫抑制亞型（basal-like immunosuppressive subtype，BLIS）以及基底樣免疫激活（basal-like immunity activation，BLIA）亞型，這三種亞型共同形成分組2，因為它們具有相似的基因表達譜。TNBC 的發(fā)生發(fā)展受多種因素的共同作用，其中BRCA 1/2 突變狀態(tài)與其密切相關(guān)，有10%～20%的TNBC 患者攜帶有此類突變[9]。LAR 亞型細胞經(jīng)常攜帶PIK3CA 突變，這也使得它們對PI3K/mTOR 抑制劑高度敏感[10]。

既往研究表明，乳腺癌中的AR 陽性表達率為60%～80%，在TNBC 中的陽性率約為10%～35%[11]，而本研究中AR 在TNBC 中陽性率為28.7%，與李華芳等[12-13]研究結(jié)果一致，但本研究中TNBC 患者的AR陽性組與陰性組之間有著不同的臨床病理以及預(yù)后特征。基于以上AR 在TNBC 中存在的陽性表達率差異，考慮可能與臨床研究所使用的抗體來源以及陽性判定標準略有不同（如1%、5%或10%等）有關(guān)。目前對于AR 陽性判定標準的指南以及標準化的檢測試劑仍未統(tǒng)一。隨著越來越多的臨床研究都傾向AR作為TNBC 的潛在治療靶點的趨勢下，進一步優(yōu)化及統(tǒng)一AR 的陽性及檢測標準顯得尤為重要。結(jié)合前述研究，本研究選定10%作為AR陽性標準進行收集、歸納和統(tǒng)計分析，不同于ER/PR 的陽性診斷標準。

本研究中，對于AR 與相關(guān)臨床病理指標的關(guān)系進行一系列的統(tǒng)計分析后，結(jié)果顯示，AR 的表達與年齡、Ki-67 指數(shù)等顯著相關(guān)，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05）。Dieci 等[14]的研究結(jié)果顯示AR 的陽性表達與較高的年齡段、病理類型（非導(dǎo)管原位癌）、組織學(xué)分級（低組織學(xué)分級）以及較低的Ki-67 指數(shù)相關(guān)，本研究結(jié)果與以上結(jié)論部分一致。對于存在不一致的結(jié)果，考慮可能與樣本數(shù)量、東西方種族差異以及醫(yī)療水平等有一定相關(guān)。針對不同AR 表達狀態(tài)下的TNBC 患者進行生存分析，結(jié)果顯示，AR 陽性組與陰性組的DFS 差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞ 0.05），而陽性組則表現(xiàn)出更好的總生存率（P＜ 0.05）。與歐陽學(xué)哲等[15]研究結(jié)果相符。提示AR 陽性的TNBC患者可能從長期預(yù)后中獲益。本研究也有不足之處，如樣本量較少，不能較好展現(xiàn)出該群體的總體特征。

綜上所述，AR 的陽性表達往往與年齡較大（≥50 歲）、絕經(jīng)后以及Ki-67 指數(shù)低表達（＜14%）等較有利的臨床病理特征相關(guān)，雖然AR 陽性組相較于陰性組未表現(xiàn)出更好的無病生存期，但其總生存期顯示出了較大的優(yōu)勢。因此，本研究認為AR陽性表達的TNBC 患者可能有著更好的預(yù)后且AR非常有潛力成為TNBC 的新型治療靶點。