日糧添加益生菌對肉雞免疫功能及其生長性能的影響研究

朱春紅

(平邑縣畜牧發(fā)展促進(jìn)中心，山東臨沂 273300）

目前，飼料全面“禁抗” 的成果斐然，抗菌肽、微生態(tài)制劑、植物提取劑以及益生菌等都成了肉雞養(yǎng)殖中廣泛使用的抗生素替代品。其中，益生菌的定義是非致病性活微生物，在適量的攝入后，對機(jī)體健康有益。在肉雞飼養(yǎng)中，益生菌能夠起到的有益作用有：促進(jìn)機(jī)體免疫功能的發(fā)育、幫助腸道維持正常的微生物群落、強(qiáng)化腸上皮屏障功能等[1]。在肉雞的飼養(yǎng)上，腸道炎癥為常見病，其發(fā)病與肉雞腸道中有益菌數(shù)量的多少息息相關(guān)，若有害菌數(shù)量增多，便會誘使疾病發(fā)生。益生菌及其代謝產(chǎn)物可以調(diào)節(jié)腸道緊密連接蛋白，維系動(dòng)物機(jī)體中腸道微生物區(qū)系的平衡狀態(tài)[2]。本試驗(yàn)通過在日糧中添加益生菌，研究其對肉雞免疫功能和生長性能的影響，并進(jìn)一步比較乳雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌兩種益生菌的應(yīng)用效果，以期為肉雞飼養(yǎng)中益生菌的合理選用提供一定參考。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)選用乳雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌(皆購自廣東微生物菌種保藏中心）作為研究菌種，取凍干純菌菌粉各1g，將乳雙歧桿菌菌粉放到無菌牛乳中進(jìn)行厭氧活化；嗜酸乳桿菌菌粉放到MRS肉湯培養(yǎng)基中進(jìn)行活化；在37℃的條件下恒溫培養(yǎng)14h，接種到改良MRS 固體培養(yǎng)基上，再于37℃條件下培養(yǎng)持續(xù)36h，選擇大小大致相同、光滑且圓潤的單菌落在200mL、30%無菌脫脂牛乳中擴(kuò)大培養(yǎng)14h。

1.2 日糧配方和營養(yǎng)組成

結(jié)合雞營養(yǎng)需求、飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)條件等，對配制試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧，使用的是玉米-豆粕型日糧。具體成分和營養(yǎng)水平如表1 所示。

表1 基礎(chǔ)日糧配方和營養(yǎng)組成

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選擇1 日齡的肉雞(皆為雄性）540 只，隨機(jī)分成3 組，每組有6 個(gè)重復(fù)、各重復(fù)有30只雞。處理1 中肉雞僅飼喂基礎(chǔ)日糧；處理2 和處理3 中肉雞分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.5%的乳雙歧桿菌(益生菌活菌密度為4.15×109CFU/mL）和嗜酸乳桿菌(益生菌活菌密度為4.4×109CFU/mL）；為了保證試驗(yàn)菌種的活性，菌種應(yīng)每日新配并在4℃條件下進(jìn)行保存，用攪拌機(jī)將其與日糧充分混合均勻之后使用。試驗(yàn)飼養(yǎng)持續(xù)42d。試驗(yàn)時(shí)間：2022 年6 月18 日—7 月29日，試驗(yàn)地點(diǎn)為平邑縣運(yùn)興生態(tài)農(nóng)場。

1.4 飼養(yǎng)管理方法

該次試驗(yàn)為全封閉管理，雞舍中使用的飼養(yǎng)方法為3 層階梯式籠養(yǎng)，肉雞為1～21 日齡時(shí)，各籠中飼養(yǎng)10 只；肉雞進(jìn)入22～42 日齡后，各籠中飼養(yǎng)5 只。嚴(yán)格按照肉雞飼養(yǎng)管理要求進(jìn)行雞舍環(huán)境管理，允許肉雞自由進(jìn)食與飲水。每日定時(shí)投喂飼料，并觀察和記錄雞群的健康情況；按照正常程序進(jìn)行疫苗的接種。記錄各處理組飼料消耗量。

1.5 分析指標(biāo)

1.5.1 生長性能

記錄肉雞初始體重，并于試驗(yàn)第21、42 天，分別對各處理組肉雞進(jìn)行稱重，稱重之前肉雞禁食10h，但可自由飲水；結(jié)合試驗(yàn)期記錄數(shù)據(jù)，計(jì)算肉雞平均日增重 (ADG）、平均日采食量(ADFI）以及耗料增重比(F/G）。

1.5.2 免疫功能

免疫器官指數(shù)：

于試驗(yàn)第42 天，分別在各處理組隨機(jī)抽選肉雞3 只，在空腹(禁食10h、飲水自由）條件下稱重，于翅下采集靜脈血，屠宰。摘取試驗(yàn)肉雞的胸腺、脾臟與法氏囊，將脂肪及結(jié)締組織剔除并稱重。計(jì)算公式：免疫器官指數(shù)=免疫器官鮮重(g）/宰前空腹體重(kg）×100%[3]。

血清免疫球蛋白：取試驗(yàn)采集血液放到促凝管里，在室溫條件下靜放20min，并以3000r/min的速度進(jìn)行離心處理15min，取其上層血清，使用ELISA 試劑盒對IgA、IgG、IgM 含量指標(biāo)進(jìn)行測定

1.6 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，數(shù)據(jù)的檢驗(yàn)使用F 檢驗(yàn)，p＜0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果和分析

2.1 益生菌對肉雞生長性能的影響

由表2 可知，肉雞在1～21 日齡、22～42 日齡時(shí)，處理2、處理3 平均日增重顯著高于處理1 (p＜0.01），料重比顯著低于處理1 (p＜0.01）；處理2 平均日增重均顯著高于處理3 (p＜0.01），處理2 料重比顯著低于處理3 (p＜0.01）。對于平均日采食量，1～21 日齡各組之間差異不顯著，但在22～42 日齡時(shí)，處理2、處理3 平均日采食量顯著高于處理1 (p＜0.01）。

表2 不同處理組肉雞生長性能差異

2.2 益生菌對肉雞免疫功能的影響

由表3 可知，在免疫器官指數(shù)上，處理2、處理3 胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)以及法氏囊指數(shù)均顯著高于處理1 (p＜0.01），且處理2 顯著高于處理3 (p＜0.01）；在血清免疫球蛋白上，處理2、處理3 肉雞血清IgM 顯著高于處理1 (p＜0.05），且處理2 肉雞血清IgM 顯著高于處理3 (p＜0.05），但I(xiàn)gG 和IgA 各組之間差異不顯著(p＞0.05）。

表3 不同處理組肉雞免疫功能差異

3 討論

在本試驗(yàn)中，與處理1 相比，處理2、處理3 肉雞在21 日齡及42 日齡時(shí)的平均日增重皆有顯著提高、料重比均有明顯降低，說明在日糧中添加0.5%的益生菌有利于改善肉雞生長性能。其原因可能是益生菌會定植于肉雞腸道中，刺激消化酶分泌，使得肉雞能夠更有效地吸收日糧當(dāng)中的營養(yǎng)物質(zhì)，從而促進(jìn)其生長性能的提高[4]。此外，發(fā)現(xiàn)處理2 相較于處理3 的平均日增重更有顯著提高、料重比更低，提示添加0.5%乳雙歧桿菌相較于添加0.5%嗜酸乳桿菌更有利于提高肉雞生長性能?？赡苁且?yàn)槿殡p歧桿菌在肉雞胃腸道里的生存能力更高，胃腸道里的有效菌株能夠競爭性的將致病菌排除，對免疫加以刺激，使胃腸道更好地利用營養(yǎng)物質(zhì)，使肉雞獲得益處[5,6]。

胸腺、脾臟和法氏囊是重要的免疫器官，發(fā)揮著中樞、外周和體液免疫作用，其發(fā)育狀況可以在很大程度上反映出機(jī)體的免疫水平[7]。在本試驗(yàn)中，42 日齡時(shí)，處理2、處理3 肉雞胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)以及法氏囊指數(shù)都明顯高于處理1，說明在日糧中添加0.5%益生菌有利于促進(jìn)肉雞免疫器官的生長發(fā)育，同時(shí)處理2 以上評估指數(shù)數(shù)據(jù)皆要更高于處理3，說明添加0.5%乳雙歧桿菌相較于添加0.5%嗜酸乳桿菌更有利于肉雞免疫器官的生長發(fā)育。另外，動(dòng)物機(jī)體中的免疫球蛋白可通過對病原微生物的清除來溶解細(xì)菌、中和病毒，并基于抗原作用發(fā)揮重要的免疫調(diào)節(jié)功能[8]。在本試驗(yàn)中，處理2、處理3 肉雞血清IgM 皆要顯著高于處理1，且處理2 肉雞血清IgM 更高于處理3，說明益生菌能夠有效作用于對肉雞機(jī)體免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，尤其是乳雙歧桿菌可以通過對肉雞機(jī)體抗炎因子、促炎因子水平的平衡維持，激活機(jī)體免疫系統(tǒng)，保證良好的免疫功能。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，綜合考慮平均日增重、料重比、免疫器官指數(shù)和免疫球蛋白，日糧中添加益生菌能夠顯著提高肉雞免疫功能與生長性能，與嗜酸乳桿菌相比，乳雙歧桿菌的使用效果較好。