高血壓病患者外周血Cx43、Ang2表達(dá)及意義

張金春 李志華

高血壓病主要表現(xiàn)為體循環(huán)動(dòng)脈壓增高，在高血壓患者中的比例高達(dá)95%以上，是導(dǎo)致心腦血管疾病死亡的主要危險(xiǎn)因素［1-2］。間隙連接蛋白43（connexin 43，Cx43）是一種重要的心肌電偶聯(lián)蛋白，其功能受磷酸化調(diào)控，影響心肌縫隙連接（gap junction，GJ），心肌持續(xù)缺血缺氧可導(dǎo)致GJ關(guān)閉，極易引發(fā)心律失常［3］。而高血壓病是造成心律失常的重要誘因之一［4］。促血管生成素2（angiopoietin 2，Ang2）是發(fā)揮破壞血管生成、促進(jìn)血管退化的作用［5］。研究發(fā)現(xiàn)，高血壓患者Ang2水平升高可能與高血壓累及靶器官受損有關(guān)［6］，但其與患者血壓變化的關(guān)系國(guó)內(nèi)外未見報(bào)道。因此，本研究通過觀察高血壓病患者治療前后外周血Cx43、Ang2 表達(dá)水平，分析其水平變化與患者血壓控制及其他指標(biāo)的關(guān)系，探討其臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年4 月至2020 年6 月于上海健康區(qū)學(xué)院附屬崇明醫(yī)院門診體檢的高血壓患者210 例為研究組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合高血壓病的相關(guān)診斷及分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)［7］；②年齡≥18 歲；③至少近兩周內(nèi)未服用降壓藥；④臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)疾病；②合并惡性腫瘤；③合并意識(shí)、語(yǔ)言、聽覺等障礙，無法完成本研究者；④中途失訪或拒絕隨訪復(fù)查者。同期隨機(jī)選取于本院進(jìn)行健康體檢的非高血壓人群240 名作為對(duì)照組，排除腫瘤、近一個(gè)月發(fā)生感染或激素類藥物服用史等影響外周血Cx43、Ang2 水平者。所有對(duì)象均知情并自愿簽署知情同意書，本研究獲得本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 血樣采集及檢測(cè)

所有入組對(duì)象均于體檢當(dāng)日清晨采集空腹靜脈外周血8 mL，分為兩份，一份用于檢測(cè)空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)PG）、糖化血紅蛋白（glycated hemoglobin，HbA1c）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C），檢測(cè)儀器為全自動(dòng)生化分析儀；另一份于2 000 r/min 的離心機(jī)中離心10 min，離心半徑為10 cm，分離上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)外周血血清中Cx43、Ang2、白介素-6（interleukin-6，IL-6）、C 反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）水平，試劑盒均購(gòu)自上海聯(lián)邁生物科技有限公司，操作步驟均按照試劑盒說明書步驟進(jìn)行。另根據(jù)心臟彩超儀檢查結(jié)果計(jì)算左心室質(zhì)量指數(shù)（left ventricular mass index，LVMI）。

1.2.2 治療及隨訪

高血壓患者均合理飲食、戒煙、戒酒、適當(dāng)運(yùn)動(dòng)等，同時(shí)服用苯磺酸氨氯地平片（國(guó)藥準(zhǔn)字H20093727，南京海辰藥業(yè)股份有限公司，規(guī)格：5 mg）治療，1 片/次，2 次/d。每4 周進(jìn)行一次門診復(fù)查，若血壓≥140/90 mmHg，則調(diào)整降壓藥物劑量或聯(lián)合使用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑或者血管緊張素受體拮抗劑治療。分別在治療后3、6 個(gè)月進(jìn)行復(fù)查。

1.2.3 血壓分級(jí)

根據(jù)《中國(guó)高血壓防治指南（2018 年修訂版）》［7］中的相關(guān)定義和分類依據(jù)，即在未使用降壓藥的情況下，診室收縮壓（systolic blood pressure，SBP）≥140 mmHg 和（或）舒張壓（diastolic blood pressure，DBP）≥90 mmHg 定義為高血壓，并根據(jù)血壓升高水平將高血壓分為1 級(jí)：140 mmHg≤SBP＜160 mmHg 和（或）90 mmHg≤DBP＜100 mmHg；2 級(jí)：160 mmHg≤SBP＜180 mmHg 和（或）100 mmHg≤DBP＜110 mmHg；3 級(jí)：SBP≥180 mmHg和（或）DBP≥110 mmHg。若SBP 和DBP 分屬不同級(jí)別時(shí)，以較高分級(jí)為準(zhǔn)。

1.2.4 動(dòng)態(tài)血壓監(jiān)測(cè)

采用動(dòng)態(tài)血壓監(jiān)測(cè)儀（型號(hào)：ACF-D1，上海伊沐醫(yī)療器械有限公司）記錄研究組患者入組時(shí)、治療后3、治療后6 個(gè)月白天（6：00～22：00）、夜間（22：00～次日早晨6：00）及24 h 時(shí)的血壓情況。白天每30 min 測(cè)量1 次，夜間每1 h 測(cè)量1 次，測(cè)量有效率≥80%為合格。統(tǒng)計(jì)白天、夜間、24 h 收縮壓（dSBP、nSBP、24 hSBP），及白天、夜間、24 h舒張壓（dDBP、nDBP、24 hDBP）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS 25.0 分析數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。計(jì)量資料用以（±s）表示，兩組間采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。等級(jí)資料（血壓分級(jí)）比較采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)，并以Nemenyi 法進(jìn)行多重比較。Pearson法分析高血壓病患者外周血Cx43、Ang2 水平與血壓控制及其他指標(biāo)的關(guān)系。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組基本資料及其他指標(biāo)水平比較

兩組年齡、性別等差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），研究組SBP、DBP、LVMI、HbA1c、IL-6、CRP、LDL-C 水平高于對(duì)照組（P＜0.05），HDL-C 水平低于對(duì)照組（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組基本資料及其他指標(biāo)水平比較［（±s），n（%）］Table 1 Comparison of basic data and other indicators between the two groups［（±s），n（%）］

表1 兩組基本資料及其他指標(biāo)水平比較［（±s），n（%）］Table 1 Comparison of basic data and other indicators between the two groups［（±s），n（%）］

2.2 高血壓病患者治療前后外周血Cx43、Ang2水平變化

與對(duì)照組比較，研究組患者入組時(shí)外周血Cx43 水平降低，Ang2 水平升高（P＜0.05）；治療后3、6 個(gè)月時(shí)，高血壓病患者外周血Cx43 水平逐漸升高，均高于入組時(shí)水平（P＜0.05），Ang2 水平逐漸下降，均低于入組時(shí)水平（P＜0.05）；治療后6 個(gè)月外周血Cx43、Ang2 水平與對(duì)照組水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 高血壓病患者治療前后外周血Cx43、Ang2 水平變化Table 2 Changes of peripheral blood Cx43 and Ang2 levels in patients with hypertension before and after treatment

2.3 高血壓病患者治療前后血壓控制情況及其他指標(biāo)變化

與入組時(shí)比較，血壓指標(biāo)、LVMI、TC、TG 水平在治療后3、6 個(gè)月水平降低（P＜0.05）；與入組時(shí)和治療后3 個(gè)月比較，治療后6 個(gè)月HDL-C 水平升高（P＜0.05），LVMI、LDL-C 水平降低（P＜0.05）。與入組時(shí)比較，血壓恢復(fù)正常人數(shù)比例在治療后3、6個(gè)月升高（P＜0.05），且治療后6 個(gè)月時(shí)1 級(jí)血壓人數(shù)比例較入組時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。入組時(shí)和治療后6 個(gè)月時(shí)，血壓正常人數(shù)比例與血壓1 級(jí)、2 級(jí)、3 級(jí)人數(shù)比例差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 高血壓病患者治療前后血壓控制情況及其他指標(biāo)變化Table 3 Changes of blood pressure control and other indicators in patients with hypertension before and after treatment

2.4 高血壓病患者外周血Cx43、Ang2 水平與各指標(biāo)及血壓之間的關(guān)系

高血壓病患者外周血Cx43 與IL-6、CRP、LVMI 及血壓指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)（r=-0.439、-0.397、-0.504、-0.390、-0.429、-0.548、-0.534、-0.470、-0.455，P＜0.05），Ang2 與IL-6、CRP、LVMI 及血壓指標(biāo)呈正相關(guān)（r=0.455、0.423、0.511、0.412、0.511、0.399、0.483、0.406、0.574，P＜0.05），與HbA1c、TC、TG、HDL-C水平無相關(guān)性（r=-0.230、-0.214、-0.215、0.197、0.239、0.226、0.213、-0.201，P＞0.05）。

3 討論

Cx43 是間隙連接蛋白家族中分布最廣、數(shù)量最多的蛋白，其在代謝類疾病中的作用近年來越來越受到重視［8-9］。在自發(fā)性高血壓大鼠中，利用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑雷米普利可調(diào)節(jié)Cx43 蛋白表達(dá)降低，改善高血壓誘發(fā)的血管功能障礙［10］。本研究中，高血壓病患者外周血Cx43 水平低于對(duì)照組，經(jīng)治療后水平有所上升，且與患者血壓指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)，表明低水平Cx43 可能與高血壓病患者的血壓升高有關(guān)。Cx43 水平上調(diào)可能通過介導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)等生物進(jìn)程，調(diào)節(jié)血管舒張，進(jìn)而促進(jìn)高血壓患者血壓恢復(fù)正常。

Ang2 可通過與內(nèi)皮細(xì)胞特異性酪氨酸激酶受體結(jié)合，促進(jìn)新生血管生成，導(dǎo)致血管內(nèi)壁通透性增加［11］。本研究中，高血壓病患者外周血Ang2 水平高于對(duì)照組，經(jīng)治療后，Ang2 水平有所降低，提示高水平Ang2 可能參與高血壓病患者的血壓升高。并且外周血Cx43、Ang2 水平與IL-6、CPR 水平均有相關(guān)性。研究發(fā)現(xiàn)，高血壓病患者外周血IL-6、CRP 水平均高于對(duì)照組，表明高血壓患者機(jī)體處于炎性浸潤(rùn)狀態(tài)，Cx43、Ang2 可能參與機(jī)體免疫應(yīng)答作用。研究發(fā)現(xiàn)，Cx43、Ang2 水平可能與患者左心室重構(gòu)有一定關(guān)系，Cx43、Ang2 可能通過影響心肌細(xì)胞凋亡等影響患者心肌功能和左心室重構(gòu)［12-13］。另外，經(jīng)治療后高血壓病患者血壓指標(biāo)均呈下降趨勢(shì)，血壓正常人數(shù)比例增多，2 級(jí)、3 級(jí)血壓人數(shù)比例降低，表明合理的健康治療指導(dǎo)方案能夠有效降壓，分析未能成功降壓的患者原因可能有自身病情較為嚴(yán)重，多年的不良生活習(xí)慣導(dǎo)致身體受損嚴(yán)重，藥物治療敏感性降低等。高血壓病患者外周血Cx43、Ang2 水平與上述血壓指標(biāo)具有一定相關(guān)性，二者水平變化可在一定程度上反映患者血管收縮舒張功能，可能通過刺激機(jī)體內(nèi)皮損傷、免疫應(yīng)答等參與患者病情發(fā)展，具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，高血壓病患者外周血Cx43 水平降低，Ang2 水平升高，經(jīng)治療后Cx43 水平升高，Ang2 水平降低，且其水平與患者血壓相關(guān)指標(biāo)具有相關(guān)性，提示Cx43、Ang2 可在一定程度上反映患者血管收縮舒張功能，可能作為指示高血壓病患者血壓變化的生物指標(biāo)。