TK1、TPS及LDH在非霍奇金淋巴瘤治療前后水平變化及與預(yù)后生存的相關(guān)性

李向壘 許英君 張孟偉 劉燦 翟亞超

非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL）為成人最常見(jiàn)的淋巴組織腫瘤，該病復(fù)雜多樣，可和任何惰性淋巴瘤共存，有部分病例與淋巴結(jié)反應(yīng)性增生鑒別困難［1］。NHL 患者病情發(fā)展迅速，及時(shí)準(zhǔn)確診斷并對(duì)其預(yù)后進(jìn)行判斷具有一定難度。細(xì)胞質(zhì)胸苷激酶（thymidine kinase 1，TK1）主要存在于各類(lèi)增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，與細(xì)胞增殖密切相關(guān)，研究發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤患者血清中TK1 濃度會(huì)明顯增高［2］。組織多肽特異性抗原（Tissue Polypeptide Specific Antigen，TPS）是臨床用于評(píng)估腫瘤細(xì)胞分裂和增殖活性的特異性指標(biāo)，但TPS 用于評(píng)價(jià)NHL 預(yù)后的研究較少［3］。乳酸脫氫酶同工酶（Lactate dehydrogenase，LDH）在人體心、腎等組織中分布較為廣泛，在惡性腫瘤患者血清中呈高表達(dá)狀態(tài)，與NHL 的關(guān)系密切［4］。本研究旨在探討TK1、TPS、LDH 在NHL 患者治療前后變化情況，并分析三者與NHL 患者預(yù)后的關(guān)系?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016 年6 月至2019 年6 月于河南大學(xué)淮河醫(yī)院化療治療的NHL 患者作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者及家屬知曉本研究，并簽署知情同意書(shū)；②未接受過(guò)化療、手術(shù)等治療者；③預(yù)計(jì)生存期6 個(gè)月以上；④經(jīng)病理組織學(xué)明確診斷為NHL［5］。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在重要器官功能障礙者；②存在精神疾病者；③中途退出研究者；④納入研究前1 個(gè)月內(nèi)服用過(guò)影響激素水平藥物，或進(jìn)行過(guò)相關(guān)治療者；⑤隨訪(fǎng)過(guò)程中失訪(fǎng)者。選取符合納入排除標(biāo)準(zhǔn)的113 例NHL 患者作為研究對(duì)象，選取同期本院健康體檢者118 名設(shè)為對(duì)照組。本研究經(jīng)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)。兩組患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者一般資料比較［（±s），n（%）］Table 1 Comparison of general data between the two groups［（±s），n（%）］

表1 兩組患者一般資料比較［（±s），n（%）］Table 1 Comparison of general data between the two groups［（±s），n（%）］

1.2 方法

1.2.1 化療方法

NHL 患者采用標(biāo)準(zhǔn)劑量CHOP 方案或R-CHOP 方案化療6～8 個(gè)療程，化療效果不理想患者加用依托泊苷，或改用DHAP 方案繼續(xù)化療［6］。

1.2.2 TK1、TPS、LDH 檢測(cè)方法

對(duì)照組于體檢當(dāng)日，NHL 患者于入院后次日清晨8：00 空腹抽取肘靜脈5 mL，其中2 mL 用含0.109 mol/L 枸櫞酸1∶9 抗凝，3 500 r/min 離心10 min，離心半徑：8 cm，分離血漿。采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)TK1，試劑盒由深圳華瑞同康生物技術(shù)有限公司提供。采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)TPS、LDH，試劑盒由美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特提供，檢測(cè)儀器為DXI800 美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特全自動(dòng)免疫分析儀。

1.2.3 隨訪(fǎng)

對(duì)NHL 患者隨訪(fǎng)兩年，隨訪(fǎng)截止時(shí)間為2021年6 月。隨訪(fǎng)方式以電話(huà)隨訪(fǎng)為主，上門(mén)復(fù)查為輔。了解NHL 患者預(yù)后情況，依據(jù)隨訪(fǎng)結(jié)果將患者分為生存組（2 年內(nèi)存活）和死亡組（2 年內(nèi)死亡）。

1.3 觀(guān)察指標(biāo)

依據(jù)患者治療效果即：完全緩解、部分緩解、穩(wěn)定、疾病進(jìn)展［7］，將觀(guān)察組分為緩解組（包括完全緩解、部分緩解）和未緩解組（包括穩(wěn)定、疾病進(jìn)展）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用（）描述，兩組間比較，采用t檢驗(yàn)；多組間比較采用F檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料通過(guò)n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；采用受試者工作特征曲線(xiàn)（ROC）評(píng)估診斷價(jià)值，計(jì)算曲線(xiàn)下面積（AUC），AUC 值越高，診斷價(jià)值越高；以P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)照組、NHL 患者化療前后TK1、TPS、LDH水平比較

TK1、TPS、LDH 水平分析：對(duì)照組＜觀(guān)察組化療后＜觀(guān)察組化療前，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 對(duì)照組、NHL 患者化療前后TK1、TPS、LDH 水平比較（±s）Table 2 Difference TK1，TPS and LDH levels between control group and NHL patients before and after chemotherapy（±s）

表2 對(duì)照組、NHL 患者化療前后TK1、TPS、LDH 水平比較（±s）Table 2 Difference TK1，TPS and LDH levels between control group and NHL patients before and after chemotherapy（±s）

注：與對(duì)照組比較aP＜0.05；與化療前比較，bP＜0.05。

2.2 化療結(jié)果

113 例NHL 患者化療后有67 例患者得到緩解（包括完全緩解、部分緩解）。緩解組TK1、TPS、LDH 水平低于未緩解組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 緩解組與未緩解組TK1、TPS、LDH 水平差異分析（±s）Table 3 Difference analysis of TK1，TPS，LDH levels between remission group and non-remission group（±s）

表3 緩解組與未緩解組TK1、TPS、LDH 水平差異分析（±s）Table 3 Difference analysis of TK1，TPS，LDH levels between remission group and non-remission group（±s）

2.3 不同預(yù)后的NHL 患者TK1、TPS、LDH 水平差異分析

隨訪(fǎng)結(jié)果顯示，2 年內(nèi)死亡患者34 例，生存患者79 例。生存組NHL 患者TK1、TPS、LDH水平低于死亡組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 不同預(yù)后的NHL 患者TK1、TPS、LDH 水平差異分析（±s）Table 4 Difference analysis of TK1，TPS and LDH levels in NHL patients with different prognosis（±s）

表4 不同預(yù)后的NHL 患者TK1、TPS、LDH 水平差異分析（±s）Table 4 Difference analysis of TK1，TPS and LDH levels in NHL patients with different prognosis（±s）

2.4 TK1、TPS、LDH 檢測(cè)及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)NHL患者預(yù)后死亡的預(yù)測(cè)價(jià)值分析

TK1、TPS、LDH 三者聯(lián) 合檢測(cè) 靈敏度（0.968）、特異度（0.952）、AUC（0.988）均高于各指標(biāo)單一檢測(cè)（P＜0.05）。見(jiàn)表5、圖1。

表5 TK1、TPS、LDH 檢測(cè)及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)NHL 患者預(yù)后死亡的預(yù)測(cè)價(jià)值分析Table 5 Analysis of the predictive value of TK1，TPS，LDH and their combined detection on prognosis and death in patients with NHL

圖1 ROC 曲線(xiàn)Figure 1 ROC curve

3 討論

NHL 是淋巴細(xì)胞異常增殖性疾病，近年來(lái)發(fā)病率有所上升。隨著化療方案的不斷改進(jìn)，NHL患者治療效果較以往提升明顯，但仍有部分NHL患者化療治療后因療效不理想而出現(xiàn)病情進(jìn)展或復(fù)發(fā)，影響生存率［8］。因此對(duì)NHL 患者化療效果進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)估，有助于臨床醫(yī)生謹(jǐn)慎選擇合理的治療方案，加強(qiáng)病情監(jiān)測(cè)，改善患者預(yù)后。

以往研究發(fā)現(xiàn)，在正常人體內(nèi)的TK1 處于低水平狀態(tài)，在惡性腫瘤患者體內(nèi)的TK1 則呈現(xiàn)出異常表達(dá)趨勢(shì)，且TK1 可反映腫瘤細(xì)胞的增殖速度，因此TK1 在腫瘤早期篩查中有著不可忽視的意義［9-11］。Skopas 等［12］報(bào)道，血清TPS 水平的高低可反映腫瘤細(xì)胞分裂和增殖的活性，可依據(jù)化療前后TPS 水平變化情況對(duì)化療療效進(jìn)行評(píng)定。LDH 屬于一種糖酵解酶，廣泛存在于組織細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，正常組織發(fā)生惡變后，腫瘤細(xì)胞內(nèi)LDH 大量釋放，血清中LDH 活性相應(yīng)增高［13-15］。本研究發(fā)現(xiàn)，健康人群中TK1、TPS、LDH 表達(dá)水平均低于NHL患者，與既往文獻(xiàn)研究結(jié)果相符［16］。據(jù)劉文霞［17］在復(fù)發(fā)性NHL 患者的研究中發(fā)現(xiàn)，血清LDH 可間接反映出體內(nèi)腫瘤負(fù)荷情況，血清LDH 的升高與NHL 的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。結(jié)合本次研究結(jié)果，可見(jiàn)TK1、TPS、LDH 可用于NHL 的輔助診斷中，以提高NHL 診斷率。NHL 患者化療后TK1、TPS、LDH 水平顯著下降，分析可能為NHL 患者化療治療后，患者體內(nèi)腫瘤細(xì)胞被大量殺傷，殘余腫瘤組織受到抑制，使腫瘤增殖緩慢或者不增殖，最終導(dǎo)致三項(xiàng)指標(biāo)表達(dá)水平下降［18］。從以上結(jié)論來(lái)看，TK1、TPS、LDH 水平與NHL 的疾病恢復(fù)、患者預(yù)后情況存在一定聯(lián)系，推測(cè)TK1、TPS、LDH 可作為判斷NHL 患者化療療效、預(yù)后的新指標(biāo)。

Kenzik 等［19］報(bào)道，在未緩解的白血病患者中，TK1 水平要顯著高于部分緩解及完全緩解的患者，推測(cè)TK1 對(duì)評(píng)估血液系統(tǒng)疾病的治療效果具有一定意義。本研究結(jié)果顯示：緩解組TK1、TPS、LDH水平低于未緩解組，與Attarbaschi 等［20］報(bào)道結(jié)果一致?？梢?jiàn)TK1、TPS、LDH 均對(duì)指導(dǎo)臨床治療方案有著重要意義，若NHL 患者在化療治療期間，TK1、TPS 及LDH 水平與化療前比較無(wú)明顯差異，可能是化療方案療效欠佳的提示，臨床可對(duì)NHL 患者進(jìn)一步檢查，更換化療方案。分析NHL 患者2 年預(yù)后，發(fā)現(xiàn)生存組NHL 患者TK1、TPS、LDH 水平低于死亡組，可以看出，三項(xiàng)指標(biāo)的表達(dá)水平直觀(guān)反映出NHL 患者的生存情況，與NHL 患者預(yù)后關(guān)系密切。

繪制ROC 曲線(xiàn)，TK1、TPS、LDH 三者聯(lián)合檢測(cè)靈敏度（0.968）、特異度（0.952）、AUC（0.988）均高于各指標(biāo)單一檢測(cè)，表明聯(lián)合三項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)對(duì)評(píng)估NHL 患者預(yù)后死亡有著較高的靈敏度、特異度。由此可知，聯(lián)合三項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)為判斷NHL 患者預(yù)后提供了有效的參考依據(jù)。

綜上所述，臨床可通過(guò)聯(lián)合TK1、TPS、LDH 檢測(cè)，提高NHL 早期診斷率，三者可作為評(píng)估化療治療效果，判斷患者預(yù)后的血清標(biāo)志物。