益氣養(yǎng)陰活血湯輔助治療對(duì)腎病綜合征患兒TIMP-2、T淋巴細(xì)胞亞群及IL-8影響

梁上艷 黃書(shū)麗 吳靜靜 王紀(jì)云 劉媛媛 柴樹(shù)偉 魏明杰 李燦燦

小兒腎病綜合征為臨床中常見(jiàn)的泌尿系統(tǒng)疾病，患兒常表現(xiàn)為面色蒼白、水腫、精神萎靡等，嚴(yán)重威脅患兒生命健康［1］。其發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，在治療中較為棘手，表現(xiàn)為久治不愈、反復(fù)發(fā)作等，西醫(yī)以糖皮質(zhì)激素治療為主，但長(zhǎng)期單一用藥可引起骨質(zhì)疏松、發(fā)育不良以及血糖、血脂上升等不良反應(yīng)，因此尋找更為安全有效的治療方式為目前臨床中亟需解決的問(wèn)題［2］。中西結(jié)合治療體現(xiàn)了中醫(yī)的對(duì)癥治療以及多靶點(diǎn)治療的優(yōu)勢(shì)，減少激素藥物使用，彌補(bǔ)了單純西醫(yī)治療不足，對(duì)預(yù)防病情反復(fù)也具有一定效果［3］。腎病綜合征在中醫(yī)學(xué)中屬于“水腫”、“水氣”等范疇，病因主要為素體虛弱、飲食不節(jié)、風(fēng)寒濕邪外感等所致，水腫與血瘀密切相關(guān)，同時(shí)可加重水腫瘀阻脈絡(luò)，阻塞氣機(jī)［4］。本研究通過(guò)益氣養(yǎng)陰活血湯輔助治療腎病綜合征患兒，分析其臨床療效及對(duì)患兒金屬蛋白酶組織抑制因子-2（Metalloproteinase tissue inhibitor-2，TIMP-2）、T 淋巴細(xì)胞亞群及白細(xì)胞介素-8（Interleukin-8，IL-8）水平的影響，以期為臨床診療提供理論參考依據(jù)，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年1 月至2021 年1 月河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院收治的102 例腎病綜合征患兒臨床資料，診斷標(biāo)準(zhǔn)：①西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：參考《腎臟病診療指南》［5］中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，尿蛋白＞3 g/24 h，白蛋白＜30 g/L，體征檢查可見(jiàn)水腫，實(shí)驗(yàn)室檢查見(jiàn)血脂升高。②中醫(yī)診斷參照《中醫(yī)病癥診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》［6］中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)：血瘀證，主癥：舌質(zhì)紫黯，舌體瘀斑，口唇色黑；次癥：皮膚瘀斑，眼圈色暗，肌膚甲錯(cuò)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①患兒監(jiān)護(hù)人知曉本次研究，簽署知情同意書(shū)；②符合上述中西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)；③臨床資料完整；④未接受過(guò)激素治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并凝血功能障礙者；②治療藥物過(guò)敏者；③先天性腎臟畸形、糖尿病腎病、遺傳性腎小球疾病等；④有其他嚴(yán)重靶器官疾病者。

根據(jù)患者治療方式不同分為對(duì)照組（西醫(yī)常規(guī)治療）47 例與觀察組（西醫(yī)常規(guī)聯(lián)合益氣養(yǎng)陰活血湯治療）55 例。對(duì)照組中男33 例，女14 例，年齡5～14 歲，平均年齡（7.25±2.64）歲，病程4～20 d，平均年齡（8.11±2.74）d；疾病類型：?jiǎn)渭冃?6 例，腎炎型11例。觀察組中男36 例，女19 例，年齡5～15 歲，平均年齡（7.15±2.33）歲，病程4～21 d，平均年齡（8.38±2.30）d；疾病類型：?jiǎn)渭冃?0 例，腎炎型15 例。兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)。

1.2 方法

對(duì)照組給予常規(guī)西醫(yī)治療：給予患兒低鹽低脂優(yōu)質(zhì)蛋白，并進(jìn)行抗凝、利尿、降脂、防感染等治療，口服醋酸潑尼松（國(guó)藥準(zhǔn)字H34021846，規(guī)格：5 mg，生產(chǎn)廠家：安徽金太陽(yáng)生化藥業(yè)有限公司），劑量為2 mg/kg，最大量為60 mg/d，分早中晚3 次服用。在治療過(guò)程中檢測(cè)尿蛋白情況，4 周內(nèi)尿蛋白轉(zhuǎn)陰者繼續(xù)鞏固（未轉(zhuǎn)陰者需維持原劑量，最長(zhǎng)不超過(guò)8 周改量），2 周后開(kāi)始減量，改為隔日2 mg/kg 每天，最大量為60 mg/d，在晨起頓服，連續(xù)進(jìn)行4 周治療，以后需按3 周減單日總劑量2.5 mg，直到停止服用藥物。

觀察組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上給予益氣養(yǎng)陰活血湯輔助治療：藥物組成黃芪20 g，太子參20 g，澤瀉15 g，茯苓15 g，丹參20 g，黃精20 g，丹皮15 g，山茱萸12 g，山藥15 g，益母草15 g，生地黃12 g，甘草6 g。以水煎服，1 劑/d，早晚溫服，3 周為1 個(gè)療程，治療4 個(gè)療程。

1.3 觀察指標(biāo)

①臨床療效［7］：痊愈，臨床癥狀消失，白蛋白＞30 g/L，尿蛋白定量持續(xù)＜0.5 g/24 h；有效，臨床癥狀好轉(zhuǎn)，白蛋白25～30 g/L，尿蛋白定量持續(xù)＜1.5 g/24 h；無(wú)效，臨床癥狀加重或無(wú)改善。②中醫(yī)癥狀積分：在治療前與治療4療程后參考《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》［6］進(jìn)行評(píng)估，包含舌質(zhì)紫黯、舌體/皮膚瘀斑、肌膚甲錯(cuò)、眼圈色暗等項(xiàng)目，滿分為5分，得分越高代表癥狀越嚴(yán)重。③TIMP-2、T 淋巴細(xì)胞亞群、IL-8 水平：患兒在治療前后空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血液5 mL，離心處理后獲取血清待檢，使用酶聯(lián)檢免疫吸附法（儀器：GY-190 酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀，生產(chǎn)廠家：河南冠宇儀器有限公司，試劑為儀器所配套）檢測(cè)TIMP-2、IL-8水平；T 淋巴細(xì)胞亞群包括CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+，使用流式細(xì)胞術(shù)（儀器：Attune NxT 流式細(xì)胞儀，生產(chǎn)廠家：賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司，檢測(cè)試劑為儀器所配套）檢測(cè)。④腎功能：在治療前后抽取靜脈血液5 mL，離心后獲取血清用于肌酐（Creatinine，SCr）、血尿素氮（Blood urea nitrogen，BUN）、24 小時(shí)尿蛋白定量（24-hour urine protein quantification，24 h UTP）檢測(cè)，其中SCr、BUN 使用葡萄糖氧化酶法檢測(cè)，24 h UTP 使用熒光免疫分析儀檢測(cè)（儀器：日立全自動(dòng)生化分析儀7600，生產(chǎn)廠家：北京泰林東方商貿(mào)有限公司，試劑為儀器所配套）。⑤記錄患兒治療期間不良反應(yīng)：肝功能異常、心電圖改變、嘔吐、惡心等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（）描述，兩組間比較行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)（Z），均以P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床療效比較

觀察組治療后總有效率明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組臨床療效比較［n（%）］Table 1 Comparison of clinical efficacy between the two groups［n（%）］

2.2 兩組中醫(yī)癥狀積分比較

治療前兩組中醫(yī)癥狀積分比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），治療后觀察組舌質(zhì)紫黯、舌體/皮膚瘀斑、肌膚甲錯(cuò)、眼圈色暗評(píng)分明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 兩組中醫(yī)癥狀積分比較（±s）Table 2 Comparison of TCM symptom scores between the two groups（±s）

表2 兩組中醫(yī)癥狀積分比較（±s）Table 2 Comparison of TCM symptom scores between the two groups（±s）

注：同組間治療前后比較，aP＜0.05。

2.3 兩組TIMP-2、T 淋巴細(xì)胞亞群、IL-8 水平比較

治療前兩組TIMP-2、T 淋巴細(xì)胞亞群、IL-8 水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），治療后觀察組CD8+、TIMP-2、IL-8 水平均低于對(duì)照組，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平則高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 兩組TIMP-2、T 淋巴細(xì)胞亞群、IL-8 水平比較（±s）Table 3 Comparison of TIMP-2，T-lymphocyte subsets and IL-8 levels between the two groups（±s）

表3 兩組TIMP-2、T 淋巴細(xì)胞亞群、IL-8 水平比較（±s）Table 3 Comparison of TIMP-2，T-lymphocyte subsets and IL-8 levels between the two groups（±s）

注：與同組間治療前比較，aP＜0.05。

2.4 兩組腎功能比較

治療前兩組SCr、BUN、24hUTP值比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），治療后觀察組SCr、BUN、24hUTP 值均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 兩組腎功能比較（±s）Table 4 Comparison of renal function between the two groups（±s）

表4 兩組腎功能比較（±s）Table 4 Comparison of renal function between the two groups（±s）

注：同組間治療前后比較，aP＜0.05。

2.5 不良反應(yīng)

兩組治療過(guò)程中均未出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)，未發(fā)生肝功能、心電圖改變。觀察組2 例患者發(fā)生胃腸道反應(yīng)（惡心/嘔吐），對(duì)照組1 例患者出現(xiàn)胃腸道反應(yīng)，兩組不良反應(yīng)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.095，P=0.757），患者未經(jīng)特殊處理，逐漸好轉(zhuǎn)。

3 討論

在本研究中，觀察組治療后臨床療效優(yōu)于對(duì)照組，臨床癥狀恢復(fù)情況更佳。分析原因如下：益氣養(yǎng)陰活血湯藥方中以黃芪作為君藥，其性微溫，歸屬于肺、脾、肝、腎經(jīng)，可有益氣固表、補(bǔ)氣升陽(yáng)、利水消腫［7］。現(xiàn)代藥理學(xué)也證實(shí)，黃芪可有效改善人體免疫功能及脂質(zhì)代謝，促進(jìn)機(jī)體水鈉排泄、蛋白質(zhì)合成。也有研究顯示，黃芪可改善糖尿病患者機(jī)體微循環(huán)及血液高凝狀態(tài)［8］。益氣養(yǎng)陰活血湯以茯苓、益母草、丹皮、澤瀉為臣藥，其中茯苓味甘性平，歸屬于心、肺、脾、腎經(jīng)，可健脾寧心、利水滲濕；益母草味苦、微寒，歸屬于肝、心包、膀胱經(jīng)，可利尿消腫、調(diào)經(jīng)活血，現(xiàn)代藥理學(xué)也證實(shí)益母草可有效改善機(jī)體微循環(huán)，減少機(jī)體內(nèi)細(xì)胞內(nèi)鈣超載；丹皮則有活血散淤、清血的作用，同時(shí)現(xiàn)代藥理學(xué)中也表明其可抗炎、利尿、抗凝；澤瀉歸腎、膀胱經(jīng)，可泄熱化濁、利水滲濕，其主要成份三萜類化合物具有顯著的利尿效果［9］。再佐以太子參益、丹參、黃精、山藥、生地黃、山茱萸，分別有益氣健脾、祛血瘀、清心涼血、補(bǔ)氣養(yǎng)陰、益腎氣、補(bǔ)血固精之效，再以甘草調(diào)和諸藥，共奏活血化瘀、益氣養(yǎng)陰之效［10］。

近年研究報(bào)道，腎病綜合征患者有機(jī)體細(xì)胞、細(xì)胞因子平衡紊亂、體液免疫功能失調(diào)等表現(xiàn)，這是促進(jìn)患者病情進(jìn)展、復(fù)發(fā)的重要因素［11］。TIMP-2是特異性抑制基質(zhì)金屬蛋白酶的抑制因子，在腎病綜合征患者中為高表達(dá)，可引起MMP-2/TIMP-2失衡，促進(jìn)調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)的合成，加重腎功能腎細(xì)胞損傷。T 淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）則可反映機(jī)體免疫情況，以往研究顯示，腎病綜合征患者存在免疫功能紊亂的現(xiàn)象，CD4+淋巴細(xì)胞減少，CD4/CD8 比值下降［12］。也有研究顯示，CD4+、CD8+細(xì)胞亞群比例失調(diào)在腎病綜合征的發(fā)病致病過(guò)程中起著重要的作用［13］。IL-8 為重要的炎性因子，它們通過(guò)級(jí)聯(lián)放大交互作用直接或間接地參與患兒的免疫功能紊亂，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞損傷，腎小球毛細(xì)血管增生，凝血功能障礙等情況，最終引起尿蛋白持續(xù)反復(fù)的產(chǎn)生［14］。以往研究證實(shí)，免疫網(wǎng)絡(luò)的失衡是引起機(jī)體持續(xù)慢性微炎癥、耐藥性甚至病理改變的基礎(chǔ)［15］。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)治療后兩組TIMP-2、T 淋巴細(xì)胞亞群、IL-8 水平、腎功能指標(biāo)均明顯改善，且觀察組改善幅度優(yōu)于對(duì)照組，提示以益氣養(yǎng)陰活血湯輔助治療可顯著緩解患者的炎癥反應(yīng)損傷，從而延緩患者病情進(jìn)展，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能。同時(shí)兩組不良反應(yīng)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示益氣養(yǎng)陰活血湯輔助治療安全性尚可，未增加不良反應(yīng)。

綜上所述，益氣養(yǎng)陰活血湯輔助治療腎病綜合征臨床療效顯著，可有效改善患者TIMP-2、T 淋巴細(xì)胞亞群及IL-8 水平，緩解患者臨床癥狀，安全性尚可。