平臥菊三七根中化學(xué)成分的研究

溫堅(jiān)

（吉安市市場(chǎng)監(jiān)督管理局，江西吉安 343000）

平臥菊三七（Gynuraprocumbens(Lour.) Merr.）屬攀援草本植物，菊科，約20 種，主要分布于中國(guó)、馬來(lái)西亞、泰國(guó)、印度尼西亞、韓國(guó)、菲律賓。2012 年5 月被國(guó)家衛(wèi)生部批準(zhǔn)為新資源普通食品。平臥菊三七莖葉營(yíng)養(yǎng)豐富，富含綠原酸、異綠原酸、粗多糖等成分。據(jù)《傣醫(yī)藥》記載，平臥菊三七具有散瘀血、消腫痛、活血生肌之功能效果；現(xiàn)代藥理研究表明，平臥菊三七具有保護(hù)肝臟[1]、降低血壓[2]、調(diào)節(jié)血脂和降低血糖功效[3]，同時(shí)還具有抗炎癥、鎮(zhèn)痛[4-7]和抗癌[8-10]等多種藥理活性。平臥菊三七葉可生吃、清炒、涼拌，是一種高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的可食用植物。大量研究發(fā)現(xiàn)平臥菊三七葉中含有黃酮類、鞣質(zhì)、皂苷、萜類、生物堿等活性物質(zhì)[11]，但對(duì)其根部的研究仍然較少，且平臥菊三七根往往作為一種農(nóng)業(yè)廢棄物被任意丟棄。本研究以平臥菊三七根為研究對(duì)象，通過(guò)色譜、波譜等手段考察其化學(xué)成分，以期為平臥菊三七根的充分利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

INOVA-600 型核磁共振儀，美國(guó)Varian 公司；prep 150 制備型液相色譜儀，美國(guó)Waters 公司；MVP型HPLC分析色譜儀，配備VP-ODS C18色譜柱（50 m×4.6 mm，5.0 μm），日本島津公司；Sephadex LH-20，美國(guó)GE 公司。乙腈、甲醇，色譜純，上海阿拉丁生化科技股份有限公司；乙酸乙酯、無(wú)水乙醇、無(wú)水甲醇、石油醚、正己烷、丙酮、氯仿、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼等，分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2 藥材來(lái)源

平臥菊三七根由江西省贛州市江西華紫仁農(nóng)業(yè)開(kāi)發(fā)公司提供，其樣品標(biāo)本（GP-010）放置在吉安市市場(chǎng)監(jiān)督管理局標(biāo)本室。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

將干燥的平臥菊三七根（5 kg）粉碎，然后用95%乙醇（10 L）在室內(nèi)提取3 次。提取液經(jīng)過(guò)濾減壓濃縮后得到粗提物，將粗提物溶解于丙酮溶液中，采用干法拌硅膠進(jìn)行柱色譜分離。首先，通過(guò)硅膠柱（100 ～200 目）進(jìn)行粗分離，采用流動(dòng)相石油醚-乙酸乙酯（50 ∶1 →25 ∶1 →10 ∶1 →5 ∶1，體積比，下同）→二氯甲烷-甲醇（50 ∶1 →10 ∶1 →5 ∶1 →0 ∶1）梯度洗脫，得到9 個(gè)組分（A ～I(xiàn)）。組分A繼續(xù)進(jìn)行硅膠柱（200 ～300 目）分離，并用石油醚-乙酸乙酯（10 ∶1）洗脫，在甲醇中結(jié)晶得到化合物1（25.3 mg）。組分B 繼續(xù)進(jìn)行硅膠柱（200 ～300目）分離，并用石油醚-乙酸乙酯（50 ∶1）洗脫，在甲醇中結(jié)晶得到化合物2（26.0 mg）和化合物3（27.2 mg）。組分D 繼續(xù)進(jìn)行硅膠（200 ～300 目）柱色譜分離，并用二氯甲烷-甲醇（50 ∶1 →5 ∶1）洗脫，得到5 個(gè)亞組分（D1～D5），分別從D1和D3中結(jié)晶得到化合物4（26.1 mg）和化合物5（13.8 mg）。組分F 繼續(xù)上硅膠柱（200 ～300 目）分離，并用石油醚-丙酮（10 ∶1 →2 ∶1）進(jìn)行洗脫，在甲醇中結(jié)晶得到化合物6（30.2 mg）和化合物7（37.8 mg）。組分H 和組分I 首先過(guò)Sephadex LH-20 柱色譜，洗脫劑為甲醇-水（4 ∶1 →1 ∶1），然后采用制備HPLC進(jìn)行分離得到化合物8（19.5 mg）和9（16.7 mg）。

2 結(jié)果與分析

化合物1：白色無(wú)定形粉末，ESI-MSm/z415[M+H]+，分子式為C29H50O（理論分子量為414.71）。（1）1H-NMR（400 MHz，CDCl3）。δ：5.40（1H，dd，J=5.2、2.8 Hz，H-6），3.53（1H，m，H-3），1.06（3H，s，H-21），0.95（3H，d，J=6.0 Hz，H-29），0.86 （3H，t，J=7.2 Hz，H-27），0.83（3H，d，J=6.6 Hz，H-26），0.83（3H，d，J=6.6 Hz，H-29），0.64（3H，s，H-18）。（2）13C-NMR（100 MHz，CDCl3）。δ：140.38（C-5），122.79（C-6），71.33（C-3），56.92（C-14），55.71（C-17），50.21（C-9），45.57（C-24），42.08（C-13），39.14（C-20），39.11（C-12），39.05（C-4），37.49（C-10），37.02（C-1），34.15（C-22），31.42（C-8），31.31（C-2），30.23（C-25），29.92（C-7），28.32（C-16），26.84（C-23），25.88（C-15），24.04（C-28），20.87（C-21），20.73（C-11），20.12（C-27），20.00（C-26），19.88（C-19），13.14（C-18），13.03（C-29）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道的結(jié)果一致，故鑒定為β-谷甾醇。

化合物2：白色無(wú)定形粉末，ESI-MSm/z577[M+H]+，分子式為C35H60O6（理論分子量為576.85）。（1）1H-NMR（400 MHz，CDCl3）。δ：5.66（1H，m，H-6），5.05（1H，brs，H-1′），4.44（1H，t，H-3），2.33（1H，s，H-9），1.07（1H，d，J=6.3 Hz，H-21），0.96（1H，d，J=6.3 Hz，H-27），0.95（1H，s，H-19），0.94（1H，d，J=5.4 Hz，H-26），0.90（1H，s，H-29），0.67（1H，s，H-18）。（2）13C-NMR（100 MHz，CDCl3）。δ：141.32（C-5），122.28（C-6），103.32（C-1′），79.03（C-3′），78.94（C-5′），78.47（C-3），75.82（C-2′），72.15（C-4′），63.21（C-6′），56.93（C-14），56.58（C-17），50.65（C-9），46.43（C-24），42.68 （C-13），40.28（C-12），38.42（C-4），37.34（C-1），36.78（C-10），34.53（C-20），32.58（C-22），31.78（C-7），30.62（C-8），29.38（C-2），28.87（C-25），26.78（C-16），24.87（C-23），23.76（C-15），21.68（C-28），20.42（C-11），20.15（C-27），19.82（C-26），19.57（C-19），19.43（C-21），12.48（C-29），12.37（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]報(bào)道的相關(guān)數(shù)據(jù)一致，故鑒定為胡蘿卜苷。

化合物3：白色無(wú)定形粉末，ESI-MSm/z413 [M+H]+，分子式為C29H48O（理論分子量為416.24）。（1）1H-NMR（400 MHz，CDCl3）。δ：5.27（1H，d，J=2.9、2 Hz，H-23），5.14（1H，dd，J=13.8、6.8 Hz，H-22），5.01（1H，d，J=8.4 Hz，H-6），3.36（1H，m，H-3），1.01（3H，d，J=6.6 Hz，H-21），0.85（3H，d，J=6.4 Hz，H-29），0.83（6H，m，H-26，27），0.80（3H，s，H-19），0.55（3H，s，H-18）。（2）13C-NMR（101 MHz，CDCl3）。δ：140.63（C-5），138.17（C-22），129.15（C-23），121.57（C-6），71.67（C-3），56.69（C-14），55.89（C-17），51.11（C-24），50.02（C-9），45.72（C-4），42.14（C-13），40.35（C-20），39.60（C-12），37.13（C-1），36.38（C-10），33.82（C-7，8），31.78（C-2），31.54（C-25），29.04（C-16），25.97（C-28），24.20（C-15），22.94（C-11），21.01（C-26），19.68（C-21），19.26（C-19），18.88（C-27），18.65（C-29），11.46（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[14]，故確定該化合為β-豆甾烯醇（β-stigmasterol）。

化合物4：白色無(wú)定形粉末，ESI-MSm/z415[M+H]+，分子式為C29H50O（理論分子量為414.54）。（1）1H NMR（400 MHz，CDCl3）。δ：0.68（3H，s，Me-18），0.91（3H，d，J=6.5 Hz，Me-21），0.80 ～0.87（9H，m，Me-26,27,29），1.01（3H，s，Me-19）。（2）13C-NMR（100 MHz，CDCl3）。δ：211.14（C-3），56.34（C-17,14），52.36（C-9），46.72（C-5），45.20（C-24），44.21（C-4），43.12（C-13），39.99（C-12），38.99（C-1），38.29（C-2），36.48（C-20），35.46（C-8），35.15（C-10），34.66（C-22），31.11（C-7），29.47（C-6，25），28.35（C-16），27.16（C-23），24.67（C-15），23.66（C-28），21.05（C-11），19.89（C-26），19.13（C-27），18.78（C-21），12.09（C-18,19），11.39（C-29）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[15]，故確定該化合物為5α-stigmastna-3-one。

化合物5：黃色的油狀物，ESI-MSm/z294 [M]+，分子式為C19H34O2（理論分子量為294.47）。（1）1H-NMR（400 MHz，CDCl3）。δ：5.35（4H，m，H-9，H-10，H-12，H-13），3.66（3H，s，-OCH3），2.77（2H，t，J=6.8 Hz，H-11），2.30（2H，t，J=7.2 Hz，H-2），2.04（4H，m，H-8,14），1.60（2H，m，H-3），1.25 ～1.37（m，H-4 ～H-7，H-15 ～H-17），0.88（3H，t，J=6.8 Hz，H-18）。（2）13C-NMR（100 MHz，CDCl3）。δ：175.86（C-1），130.80（C-9,10），129.75（C-12,13），51.59（-OCH3），34.39（C-2），32.54（C-8），31.87（C-14），29.96 ～22.88（C-3 ～C-7和C-15 ～C-17），14.02（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[16]，故確定該化合物為亞油酸甲酯（methyl linoleate）。

化合物6：白色無(wú)定形粉末，ESI-MSm/z343[M+H]+，分子式為C22H46O2（理論分子量為342.15）。（1）1H-NMR（400 MHz，CDCl3）。δ：4.80（1H，s，H-1），3.51（3H，s，-OCH3），1.63（2H，s，H-20），0.90（3H，s，H-21）。（2）13C-NMR（100 MHz，CDCl3）。δ：100.00（C-1），50.84（-OCH3），31.92（C-2），29.71（C-3 ～C-19），22.68（C-20），14.10（C-21）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[17]，故確定該化合物為1-甲氧基苯基-1-醇（1-methoxyhenicosan-1-ol）。

化合物7：黃色結(jié)晶體，ESI-MSm/z447 [M-H]-，分子式為C21H20O11（理論分子量為448.38）。（1）1H-NMR（600 MHz，C5D5N）。δ：8.15（2H，dd，J=1.8、9.1 Hz，H-2′,6′），6.90（2H，dd，J=1.8、9.1 Hz，H-3′,5′），6.78（1H，d，J=7.3 Hz，H-1′′），3.89（1H，dd，J=2.3，12.2 Hz，H-6′′a），3.71（1H，dd，J=5.8、12.2 Hz，H-6′′b）。（2）13C-NMR（150 MHz，C5D5N）。δ：148.8（C-2），138.7（C-3），177.9（C-4），162.3（C-5），100.2（C-6），164.2（C-7），95.5（C-8），157.4（C-9），106.6（C-10），123.4（C-1′），131.2（C-2′,6′），116.9（C-3′,5′），161.5（C-4′），102.2（C-1′′），75.4（C-2′′），79.8（C-3′′），71.6（C-4′′），79.1（C-5′′），62.8（C-6′′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[18]，故確定該化合物為山柰酚-7-O-β-D-葡萄糖苷（kaempferol-7-O-β-D-glucopyranoside）。

化合物8：黃色粉末（甲醇），ESI-MSm/z609[M-H]-，分子式為C27H30O16（理論分子量為610.52）。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）。δ：12.58（1H，s，5-OH），7.56（1H，s，H-2′），7.53（1H，d，J=8.3 Hz，H-6′），6.84（1H，d，J=8.3 Hz，H-5′），6.38（1H，s，H-8），6.18（1H，s，H-6），5.34（1H，d，J=6.6 Hz，Glu-H-1），4.40（1H，s，Rha-H-1），0.98（3H，d，J=6.4 Hz，Rha-CH3）。（2）13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）。δ：156.5（C-2），133.2（C-3），177.4（C-4），161.3（C-5），98.7（C-6），163.5（C-7），93.6（C-8），156.6（C-9），103.8（C-10），121.3（C-1′），115.4（C-2′），144.8（C-3′），148.6（C-4′），116.4（C-5′），121.6（C-6′），101.2（C-1′′），74.1（C-2′′），76.6（C-3′′），70.4（C-4′′），75.8（C-5′′），67.0（C-6′′），108.7（C-1′′′），70.4（C-2′′′），70.0（C-3′′′），71.8（C-4′′′），68.4（C-5′′′），17.6（C-6′′′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[19]，故確定該化合物為蘆?。╮utin）。

化合物9：黃色粉末，溶于甲醇，ESI-MSm/z258[M+H]+，分子式C15H10O6（理論分子量為286.23）。（1）1H-NMR（400 MHz，CD3OD）。δ：8.06（2H，d，J=8.74 Hz，H-2′,6′），6.87（2H，d，J=8.91 Hz，H-3′,5′），6.37（1H，d，J=1.88 Hz，H-8），6.14（1H，d，J=1.96 Hz，H-6）。（2）13C-NMR（100 MHz，CD3OD）。δ：177.60（C-4），165.78（C-7），162.73（C-5），160.76（C-4′），158.45（C-9），148.24（C-2），137.59（C-3），130.88（C-2′,6′），123.96（C-1′），6.50（C-3′,5′），104.74（C-10），99.46（C-6），94.54（C-8）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[20]，故確定該化合物為山柰酚（kaempferol）。

3 結(jié)論

本研究從平臥菊三七根部的乙醇提取物中分離鑒定了9 個(gè)單體化合物，其中化合物1、5 ～8 和9均為首次從菊三七屬中分離得到，可為平臥菊三七根的綜合利用提供理論依據(jù)。