不同培養(yǎng)條件對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

賁海燕，郝永娟，霍建飛，姚玉榮，王萬立

（天津市農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，天津 300384）

草莓白粉病病原菌為真菌子囊菌亞門單囊殼屬羽衣草單囊殼菌（Sphaerotheca aphanis），為專性寄生菌。我國(guó)于1959 年首次在原沈陽農(nóng)學(xué)院溫室草莓上發(fā)現(xiàn)白粉病[1]。近年來國(guó)內(nèi)草莓白粉病害愈發(fā)嚴(yán)重，尤其是保護(hù)地草莓白粉病，從苗期到果實(shí)成熟期不間斷發(fā)生，特別是適宜采摘的‘紅顏’‘章姬’等品種對(duì)草莓白粉病較為敏感，設(shè)施栽培重茬連作棚架及土壤中病原菌積累，以及棚室通風(fēng)透光性差、種植密度大，棚內(nèi)適溫高濕等原因，致使草莓白粉病發(fā)病早且重，一般減產(chǎn)20%～30%，重則減產(chǎn)可達(dá)50%、甚至絕收，嚴(yán)重影響了草莓的產(chǎn)量和品質(zhì)[2]。天津地區(qū)多為鹽堿地，草莓不耐鹽堿，管理不到位，植株生長(zhǎng)受阻很容易發(fā)生白粉病。目前，對(duì)草莓白粉病病原菌的研究報(bào)告較少[3-4]，針對(duì)草莓白粉病菌生物學(xué)特性的研究更是鮮見報(bào)道，為進(jìn)一步明確草莓白粉病菌分生孢子生物學(xué)性狀，本研究在室內(nèi)對(duì)分生孢子在不同溫度、濕度、光照、碳源等條件下的萌發(fā)率、芽管長(zhǎng)度進(jìn)行研究，以期為草莓白粉病流行規(guī)律研究、藥劑篩選及病害防治提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試草莓白粉病菌（Sphaerotheca aphanis(Wall.)Braun）為天津市農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所蔬菜病害室采自感病品種純化后活體保存的菌株。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 pH 值對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響 在無菌條件下，用滅菌解剖刀切下約4 cm2的2%水瓊脂培養(yǎng)基塊，置于載玻片上。將草莓病果表面的新鮮白粉病菌用滅菌毛刷刷至pH 值分別為4、5、6、7、8、9、10 的無菌水溶液內(nèi)，取10 μL 滴在水瓊脂塊表面，蓋上蓋玻片，將載玻片置于有濕潤(rùn)濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)，每組處理3 次重復(fù)。將培養(yǎng)皿置于25 ℃培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)，分別在0、18、24、48 h 取出，并用光學(xué)顯微鏡觀察分生孢子的萌發(fā)情況：芽管長(zhǎng)度超過分生孢子短徑的1/2 記為萌發(fā)，于20×10 倍顯微鏡下觀察統(tǒng)計(jì)分生孢子萌發(fā)數(shù)，每視野40～50 個(gè)分生孢子，隨機(jī)取5 個(gè)視野統(tǒng)計(jì)分生孢子的萌發(fā)率并測(cè)量芽管長(zhǎng)度。

0 h 為試驗(yàn)處理前初始孢子萌發(fā)率（以下同）。為準(zhǔn)確的表示各處理真實(shí)的孢子萌發(fā)情況，處理前需統(tǒng)計(jì)已萌發(fā)的孢子數(shù)量，即0 h 觀察記錄的初始孢子萌發(fā)數(shù)量，再分別用培養(yǎng)18、24、48 h 的孢子萌發(fā)率減去未處理的初始萌發(fā)率作為最終的萌發(fā)率結(jié)果。

1.2.2 碳源對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響 配制2%葡萄糖培養(yǎng)基（每100 mL 2%水瓊脂中加入2 g 葡萄糖）、2%蔗糖培養(yǎng)基（每100 mL 2%水瓊脂中加入2 g 蔗糖）、2%果糖培養(yǎng)基（每100 mL 2%水瓊脂中加入2 g 果糖）、2%淀粉培養(yǎng)基（每100 mL 2%水瓊脂中加入2 g 淀粉）；用新鮮草莓果肉搗碎、紗布過濾，獲得草莓煮沸汁液備用。采用瓊脂培養(yǎng)法，在無菌條件下，將各處理培養(yǎng)基融化后，倒入滅菌培養(yǎng)皿中一薄層（厚度約為2～3 mm），待凝固后用滅菌解剖刀切下約4 cm2的培養(yǎng)基小塊，置于載玻片上，并將事先準(zhǔn)備的草莓白粉病果上的霉層直接蘸取到培養(yǎng)基表面上待用。

試驗(yàn)設(shè)6 個(gè)處理，以只加蒸餾水的2%水瓊脂玻片為對(duì)照，各處理培養(yǎng)基蘸取白粉病菌霉層后分別進(jìn)行如下處理：①2%葡萄糖培養(yǎng)基滴加10 μL 蒸餾水；②2%蔗糖培養(yǎng)基滴加10 μL 蒸餾水；③2%果糖培養(yǎng)基滴加10 μL 蒸餾水；④2%淀粉培養(yǎng)基滴加10 μL 蒸餾水；⑤2%水瓊脂培養(yǎng)基滴加10 μL 草莓汁煮沸液；⑥2%水瓊脂培養(yǎng)基滴加10 μL 蒸餾水（CK），各處理完成后蓋上蓋玻片。每組處理3 次重復(fù)。培養(yǎng)條件同1.2.1，于0、18、24、48 h 取出鏡檢，隨機(jī)取5 個(gè)視野統(tǒng)計(jì)孢子萌發(fā)率并測(cè)量芽管長(zhǎng)度。

1.2.3 不同光照條件對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響 取10 μL 白粉病菌孢子懸浮液（濃度為1×105個(gè)孢子·mL-1，pH 為7）接種于2%葡萄糖培養(yǎng)基玻片上，分別進(jìn)行24 h 黑暗、24 h 光照、12 h 黑暗-12 h 光照3 個(gè)處理，每處理3 次重復(fù)，在溫度為25 ℃、相對(duì)濕度100%的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。萌發(fā)率統(tǒng)計(jì)同1.2.2。

1.2.4 溫度對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

（1）不同溫度對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響。取孢子濃度為1×105個(gè)孢子·mL-1的懸浮液10 μL，接種于2%葡萄糖培養(yǎng)基玻片上，分別置于5、15、20、25、30、35 ℃，相對(duì)濕度100%、全光照的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，每處理3 次重復(fù)，于0、18、24、48 h取出在顯微鏡下觀察，隨機(jī)取5 個(gè)視野統(tǒng)計(jì)分生孢子萌發(fā)率并測(cè)量芽管長(zhǎng)度。

（2）草莓白粉病菌分生孢子致死溫度測(cè)定。刷取發(fā)病草莓葉片上白粉病菌制成pH 為7、孢子濃度為1×105個(gè)孢子·mL-1的孢子懸浮液，分別置于35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45 ℃的水浴鍋中，懸浮液達(dá)目標(biāo)溫度后保持恒溫水浴10 min 后，取10 μL接種于2%葡萄糖培養(yǎng)基玻片上；對(duì)照不進(jìn)行水浴處理，在溫度為25 ℃、相對(duì)濕度100%的光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，以上處理均重復(fù)4 次。分別在0、24 h 時(shí)取出，于20×10 倍顯微鏡下觀察統(tǒng)計(jì)分生孢子萌發(fā)數(shù)，芽管長(zhǎng)度超過分生孢子短徑的1/2 記為萌發(fā)，每視野40～50 個(gè)分生孢子，隨機(jī)取5 個(gè)視野統(tǒng)計(jì)孢子萌發(fā)率。

1.2.5 濕度對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響利用飽和鹽溶液使干燥器的相對(duì)濕度分別控制在100%、92%、81%、67%、52%、34%、20%共7 個(gè)處理，將10 μL、孢子濃度1×105個(gè)孢子·mL-1的菌懸液接種于2%水瓊脂玻片上，置于不同相對(duì)濕度的干燥器中，密閉后25 ℃、全光照培養(yǎng)，分別在0、18、24、48 h 取出鏡檢，每個(gè)處理3 次重復(fù)。萌發(fā)率和芽管長(zhǎng)度統(tǒng)計(jì)同1.2.2。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

使用Excel 2010 和SPSS 22.0 對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用Duncan’s multiple range test 進(jìn)行多組樣本間的差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 pH 值對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

由圖1 可知，草莓白粉病菌分生孢子在pH 值5～10 下均有不同程度萌發(fā)。當(dāng)培養(yǎng)18 h，在pH 值6～8 處理環(huán)境下，分生孢子整體萌發(fā)率高于其他處理；隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，各處理孢子萌發(fā)呈上升趨勢(shì)。培養(yǎng)48 h 后，pH 值為7 的孢子萌發(fā)率最高，值為44.7%，其次是pH 值為8 的處理值為26.4%，pH值為5 和10 處理的孢子萌發(fā)率最低，僅為2.2%～2.6%，而pH 值為4 處理，未見孢子萌發(fā)。

圖1 pH 值對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

由圖2 可知，酸堿環(huán)境對(duì)孢子芽管長(zhǎng)度的影響存在差異，其中pH 值為7 和8 環(huán)境培養(yǎng)18 h 的芽管長(zhǎng)度顯著長(zhǎng)于其他處理，且各處理芽管長(zhǎng)度與培養(yǎng)時(shí)間呈正比。當(dāng)培養(yǎng)48 h 時(shí)，pH 值為7 處理的芽管長(zhǎng)度最長(zhǎng)達(dá)484.25 μm，且偏堿性環(huán)境下更有利于芽管伸長(zhǎng)。以上結(jié)果表明，pH 值為6～8 的環(huán)境條件下更有利于草莓白粉病菌分生孢子的萌發(fā)及芽管的生長(zhǎng)，最適pH 值為7。

圖2 pH 值對(duì)草莓白粉病菌芽管伸長(zhǎng)的影響

2.2 不同碳源條件對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

由不同碳源條件培養(yǎng)草莓白粉病菌分生孢子的試驗(yàn)結(jié)果（圖3、圖4）可知，各處理的孢子萌發(fā)率、芽管長(zhǎng)度與培養(yǎng)時(shí)間呈正相關(guān)。各處理對(duì)孢子萌發(fā)的影響存在顯著差異（圖3）。培養(yǎng)18 h 后，草莓汁煮沸液的萌發(fā)率最高，其次是2%葡萄糖培養(yǎng)處理，顯著高于2%淀粉培養(yǎng)基和2%果糖培養(yǎng)基的萌發(fā)率；隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)萌發(fā)率上升，當(dāng)培養(yǎng)48 h，2%葡萄糖培養(yǎng)基處理的萌發(fā)率最高達(dá)47.96%，此時(shí)草莓汁煮沸液和2%蔗糖培養(yǎng)基培養(yǎng)處理的孢子萌發(fā)率也能達(dá)到39.07%和36.53%，明顯高于水瓊脂對(duì)照處理的萌發(fā)率，而2%果糖和2%淀粉處理對(duì)孢子萌發(fā)抑制作用顯著，低于對(duì)照處理的萌發(fā)率。

圖3 不同碳源條件對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

由圖4 可知，各處理芽管萌發(fā)長(zhǎng)度與培養(yǎng)時(shí)間呈正相關(guān)。培養(yǎng)18 h 后，以蔗糖為碳源處理的孢子芽管長(zhǎng)度最長(zhǎng)，平均值達(dá)（260.9±6.4）μm；隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，以葡萄糖為碳源處理的芽管長(zhǎng)度迅速增長(zhǎng)，培養(yǎng)24、48 h 的芽管平均長(zhǎng)度分別為（350.8±9.6）μm 和（500.7±10.1）μm，蔗糖處理次之，顯著長(zhǎng)于對(duì)照處理及其他處理；以草莓果汁、果糖、淀粉為碳源的處理對(duì)芽管伸長(zhǎng)有一定抑制作用，與對(duì)照處理相比，芽管生長(zhǎng)緩慢，培養(yǎng)48 h 的芽管平均長(zhǎng)度分別為（191.0±2.4）μm、（167.0±4.9）μm 和（140.6±6.0）μm，與對(duì)照處理相比，芽管長(zhǎng)度短了（160.1～210.4）μm。由此可見，草莓白粉病菌分生孢子在以葡萄糖為碳源的條件下有較強(qiáng)的適應(yīng)性。

圖4 不同碳源條件對(duì)草莓白粉病菌芽管萌發(fā)的影響

2.3 不同光照條件對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

將結(jié)果進(jìn)行差異顯著性分析，結(jié)果表明不同光照條件對(duì)孢子萌發(fā)的影響存在顯著差異。由圖5 可知，連續(xù)24 h 光照處理的孢子萌發(fā)率顯著高于連續(xù)24 h 黑暗處理的萌發(fā)率，光照處理組的萌發(fā)率可達(dá)44.40%；24 h 黑暗處理的孢子萌發(fā)率顯著高于12 h黑暗-12 h 光照處理的萌發(fā)率。由圖6 可知，24 h 光照處理與24 h 黑暗處理的孢子芽管長(zhǎng)度差異不顯著，但顯著長(zhǎng)于12 h 黑暗-12 h 光照處理組。

圖5 光照對(duì)草莓白粉病菌孢子萌發(fā)的影響

圖6 光照對(duì)草莓白粉病菌孢子芽管長(zhǎng)度的影響

2.4 溫度對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

2.4.1 不同溫度對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響 由不同溫度對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響的試驗(yàn)結(jié)果（圖7）可知，不同培養(yǎng)溫度對(duì)孢子萌發(fā)有顯著影響。培養(yǎng)18 h 后，25 ℃培養(yǎng)條件下，孢子萌發(fā)率為20.41%，顯著高于其他處理；10、15、35 ℃條件下，對(duì)孢子萌發(fā)抑制作用明顯，萌發(fā)率為1.26%～2.15%；5 ℃條件下，未見孢子萌發(fā)。隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，15～30 ℃培養(yǎng)處理的孢子萌發(fā)數(shù)量逐漸增多，其中25 ℃培養(yǎng)處理的孢子萌發(fā)率增幅最大，培養(yǎng)48 h 的孢子萌發(fā)率達(dá)44.13%，其次是20、30 ℃培養(yǎng)處理，萌發(fā)率分別為28.42%、20.7%；而5、10、35 ℃培養(yǎng)處理的孢子萌發(fā)受限，萌發(fā)率在3.14%以下。

圖7 溫度對(duì)草莓白粉病菌孢子萌發(fā)的影響

不同溫度條件下，草莓白粉病菌的芽管長(zhǎng)度明顯不同。整個(gè)培養(yǎng)過程中，25、30 ℃條件下，芽管長(zhǎng)度較長(zhǎng)，培養(yǎng)48 h 的芽管長(zhǎng)度分別為481.18、472.98 μm，顯著長(zhǎng)于其他溫度處理；其次是20 ℃條件下，培養(yǎng)48 h的芽管長(zhǎng)度為410.27 μm；而5～15 ℃及35 ℃條件下芽管伸長(zhǎng)受到抑制，培養(yǎng)48 h 的芽管長(zhǎng)度在274.64 μm 以下。

圖8 溫度對(duì)草莓白粉病菌芽管長(zhǎng)度的影響

2.4.2 草莓白粉病菌分生孢子致死溫度的測(cè)定從表1 結(jié)果能夠看出，35、36 ℃培養(yǎng)處理24 h 的孢子萌發(fā)率已經(jīng)很低，萌發(fā)率僅為2.79%～3.16%；隨著溫度升高，萌發(fā)率降低，當(dāng)溫度為41 ℃時(shí)萌發(fā)率幾乎接近于零，但仍有2 次重復(fù)的顯微鏡觀察視野中有零星萌發(fā)的孢子，而42 ℃及以上溫度處理，孢子未見萌發(fā)，完全受到抑制。以上結(jié)果說明，42 ℃為草莓白粉病菌致死溫度的臨界溫度。

表1 不同溫度處理對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

2.5 濕度對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的影響

由試驗(yàn)結(jié)果（圖9）可知，不同相對(duì)濕度處理對(duì)草莓白粉病菌分生孢子的萌發(fā)有顯著影響，且各處理之間的差異較大。培養(yǎng)18 h 后，相對(duì)濕度為92%的處理萌發(fā)率最高達(dá)22.04%，與相對(duì)濕度為100%處理的萌發(fā)率相當(dāng)，顯著高于其他處理；隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)萌發(fā)率整體呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。培養(yǎng)48 h 后，相對(duì)濕度為92%、100%的處理萌發(fā)率分別達(dá)37.35%、40.88%，而相對(duì)濕度為20%～67%的處理萌發(fā)率為5.11%～15.80%，對(duì)白粉菌孢子的萌發(fā)抑制作用明顯。

圖9 濕度對(duì)草莓白粉病菌孢子萌發(fā)率的影響

不同濕度環(huán)境下草莓白粉病菌的芽管長(zhǎng)度顯著不同（圖10），整個(gè)培養(yǎng)過程中相對(duì)濕度92%～100%的芽長(zhǎng)度明顯長(zhǎng)于其他處理，培養(yǎng)18 h 的芽管長(zhǎng)度分別為386.93、397.74 μm；隨著培養(yǎng)時(shí)間增加，芽管逐漸伸長(zhǎng)，其中相對(duì)含水量81%～100%的芽管增長(zhǎng)幅較大，培養(yǎng)48 h 芽管長(zhǎng)度為408.75～437.99 μm，其次是相對(duì)濕度52%～67%，而相對(duì)濕度20%～34%的芽管伸長(zhǎng)顯著受到抑制，長(zhǎng)度分別為283.99、289.60 μm。

圖10 濕度對(duì)草莓白粉病菌芽管長(zhǎng)度的影響

3 討論與結(jié)論

草莓白粉病是設(shè)施草莓栽培的主要病害，草莓白粉病病原菌為Sphaerotheca aphanis，楊俊譽(yù)等[2]通過DNA 分子檢測(cè)，證實(shí)S.aphanis 與P.aphanis 的同源性為100%；Pei 等[5]首次報(bào)道華中地區(qū)的草莓白粉病菌為Golovinomyces orontii。本研究采用的白粉病菌是由草莓果實(shí)上采集保存而來，通過形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方法鑒定為羽衣草單囊殼菌Sphaerotheca aphanis。國(guó)內(nèi)關(guān)于草莓白粉病菌的報(bào)道多見于發(fā)生情況與防治技術(shù)方面，如王偉群等[3]、王璐等[4]報(bào)道了田間草莓白粉病發(fā)生的影響，而目前未見其生物學(xué)特性方面的研究[6]。本研究擬通過對(duì)草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)條件的摸索，為草莓白粉病的物理和化學(xué)防治提供新思路。接種初期孢子能否萌發(fā)對(duì)接種成功有著至關(guān)重要的作用，對(duì)品種抗病性鑒定、室內(nèi)藥劑篩選均有影響[7-9]。草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的條件中，溫度與其他單囊殼白粉菌基本相似[10-12]，分生孢子萌發(fā)最適溫度為25 ℃，溫度過高或過低均會(huì)導(dǎo)致分生孢子萌發(fā)率下降，筆者在研究中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)溫度低于10 ℃或高于35 ℃以上，草莓白粉病菌孢子活性受到抑制，萌發(fā)率大幅降低，芽管伸長(zhǎng)也受到限制，當(dāng)溫度高于42 ℃處理10 min，孢子停止萌發(fā)。因此，在草莓白粉病預(yù)防中，在晴朗天氣持續(xù)進(jìn)行高溫悶棚，使棚室溫度達(dá)到42 ℃以上孢子致死高溫，可抑制白粉病菌分生孢子的萌發(fā)，從而控制白粉病的發(fā)生。相對(duì)濕度為81%～100%的高濕環(huán)境有利于草莓白粉病菌孢子的萌發(fā)和芽管的伸長(zhǎng)，濕度越大越有利于孢子萌發(fā)侵染，而低濕度環(huán)境對(duì)孢子萌發(fā)、芽管伸長(zhǎng)抑制作用明顯。環(huán)境pH值也是影響白粉病菌孢子萌發(fā)的重要因素，通常白粉病菌分生孢子的酸堿度適應(yīng)范圍較廣。苦瓜白粉病分生孢子萌發(fā)最適pH 值為5～9[13]、煙草白粉病病原菌在pH 值5～8 內(nèi)的萌發(fā)率較高[14]，番茄白粉病病原新番茄粉孢菌在pH 值為3～12 的條件下分生孢子萌發(fā)率較高[15]。本研究發(fā)現(xiàn)，草莓白粉病菌分生孢子在pH 值為6～8 的環(huán)境下萌發(fā)率相對(duì)較高，且弱堿環(huán)境的孢子萌發(fā)率高于酸性環(huán)境的萌發(fā)率。當(dāng)pH 值為7 時(shí)，最適合孢子萌發(fā)及芽管伸長(zhǎng)。因此，噴施中性水，使草莓植株處于中性環(huán)境條件，更有利于草莓白粉病菌的擴(kuò)繁、傳播，以及病原菌活體保存。而pH 值在5 以下或pH 值為9 以上的酸堿環(huán)境對(duì)草莓白粉病菌孢子萌發(fā)抑制作用明顯。白粉病菌對(duì)光照敏感性差異較大，苦瓜白粉病菌分生孢子萌發(fā)最適條件是全黑暗[13]，煙草白粉病菌受光照時(shí)長(zhǎng)的影響差異不大[14-16]。完全光照條件下，更有利于草莓白粉病菌的孢子萌發(fā)，萌發(fā)率顯著高于完全黑暗及黑暗-12 h 光照處理的萌發(fā)率，而孢子芽管長(zhǎng)度受完全光照或完全黑暗處理的影響差異不顯著。在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用方面，草莓白粉病菌更喜歡利用葡萄糖促進(jìn)其孢子萌發(fā)及芽管伸長(zhǎng)，而在以果糖和淀粉為碳源的條件下草莓白粉病菌的適應(yīng)性較差。

草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)的最適溫度、致死溫度分別為25 ℃、42 ℃，喜高濕、中性環(huán)境，喜葡萄糖，光照有利于草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)。因此，生產(chǎn)中可降低棚室內(nèi)相對(duì)濕度，保持葉片、果實(shí)表面無水滴等防治草莓白粉病。生產(chǎn)空閑期間，選擇晴朗的高溫天氣進(jìn)行高溫悶棚，關(guān)閉通風(fēng)口充分密閉棚室，使土壤及棚室內(nèi)環(huán)境溫度達(dá)到病原菌致死高溫，充分切斷內(nèi)部傳染源，從而達(dá)到物理預(yù)防和控制的目的[17-18]。