遼藁本根腐病菌室內(nèi)藥劑篩選

張?zhí)祆o,孫文松,劉 坤,沈?qū)氂?/p>

(遼寧省經(jīng)濟(jì)作物研究所/遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所,遼寧 遼陽(yáng) 111000)

遼藁本(LigusticumjeholenseNakai et Kitag.)為傘形科(Apiales)藁本屬多年生草本植物,是東北地區(qū)常見(jiàn)道地藥材之一[1]。以干燥的根及根莖入藥,具有祛風(fēng),散寒,除濕,止痛。用于風(fēng)寒感冒,巔頂疼痛,風(fēng)濕肢節(jié)痹痛[2]。目前,遼寧清原、新賓、鳳城等地有大面積人工種植[3],隨著種植面積的不斷擴(kuò)大和重茬種植習(xí)慣,遼藁本病蟲(chóng)害發(fā)生率和發(fā)生面積加重[4],制約了遼藁本產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。遼藁本根腐病為近幾年發(fā)生的新病害,主要為害根及根莖部,嚴(yán)重發(fā)病造成整株死亡。高溫多雨季節(jié),排水不暢,連作地塊發(fā)病嚴(yán)重,遼寧省經(jīng)濟(jì)作物研究所課題組分離鑒定遼藁本根腐病病原菌為茄鐮孢菌,但針對(duì)遼藁本根腐病目前尚缺乏藥劑防治研究。本試驗(yàn)采用菌絲速率法,對(duì)10種常用殺菌劑進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定,旨在篩選出防治遼藁本根腐病的高效藥劑,為遼藁本根腐病的科學(xué)防治提供指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試菌株:2019年由遼寧省經(jīng)濟(jì)作物研究所實(shí)驗(yàn)室采用常規(guī)組織分離法分離純化并鑒定保存的茄鐮孢菌Fusariumsolani,菌株在PDA培養(yǎng)基上活化后置于25℃培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)。

供試藥劑:本研究通過(guò)查閱文獻(xiàn)并結(jié)合遼寧當(dāng)前常用的防治土傳病菌殺菌劑,選用10種化學(xué)藥劑作為供試藥劑(表1)。

表1 供試藥劑名稱(chēng)、劑型及生產(chǎn)廠家

1.2 試驗(yàn)方法

采用菌絲生長(zhǎng)速率法進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定:無(wú)菌條件下,依據(jù)每種藥劑含有效成分的量制成0.1 g/ml的藥液,配制5個(gè)質(zhì)量濃度梯度的含藥PDA培養(yǎng)基,打取直徑為5 mm的病原菌菌餅分別接種,每個(gè)處理3次重復(fù),以無(wú)藥劑的PDA平板做空白對(duì)照[5~6]。接種后置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng),待對(duì)照直徑約為75 mm左右時(shí),采用十字交叉法測(cè)量菌落直徑[7],并計(jì)算抑菌率[8]。

抑菌率=(對(duì)照菌落直徑-處理菌落直徑)/(對(duì)照菌落直徑-5 mm)×100%

應(yīng)用SPSS 22.0軟件,以防治藥劑質(zhì)量濃度的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo),抑菌率的生物幾率值為縱坐標(biāo),作毒力回歸方程(y=a+bx)[9],同時(shí)計(jì)算供試藥劑對(duì)病原菌的EC50,即當(dāng)y=50%時(shí),求得的x是EC50的對(duì)數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同殺菌劑對(duì)遼藁本根腐病病原菌的抑制作用

由表2可以看出,10種供試藥劑對(duì)病原菌的生長(zhǎng)有不同程度的抑制作用,抑菌率隨著供試藥劑濃度的增大而增加,其中3%噻霉酮和 80%乙蒜素濃度為 100 mg/L時(shí)抑菌率可達(dá)100%,10%苯醚甲環(huán)唑和1.8%辛菌胺醋酸鹽濃度在 100 mg/L,抑菌率都達(dá)到 90%以上,濃度為0.01 mg/L時(shí),抑菌率均超過(guò)50%,40%嘧霉胺抑菌率大于80%,百菌清抑菌率58.93%,其他供試藥劑抑菌率較差,在50%以下。

2.2 殺菌劑對(duì)遼藁本根腐病室內(nèi)毒力測(cè)定

供試的藥劑回歸曲線(xiàn)的相關(guān)系數(shù)均在0.8以上,說(shuō)明供試藥劑質(zhì)量濃度與對(duì)應(yīng)的抑制率之間的相關(guān)性高,因此毒力方程得出的EC50值具有較高的可靠性。供試藥劑對(duì)遼藁本根腐病病原菌菌絲生長(zhǎng)均表現(xiàn)出一定的抑制作用,但抑制作用有明顯差異。10%苯醚甲環(huán)唑?qū)Σ≡z生長(zhǎng)抑制效果最強(qiáng),其EC50值為0.0173 mg/L;3%噻霉酮、80%乙蒜素、75%百菌清和1.8%辛菌胺醋酸鹽的EC50在0.3186~2.6932 mg/L,也具有較強(qiáng)的抑制效果;40%嘧霉胺和22.5%啶氧菌酯抑制效果較差,EC50均大于 10 mg/L,嘧菌酯抑制效果最差,EC50為167.7724 mg/L。

表3 藥劑對(duì)遼藁本根腐病病原菌毒力測(cè)定

3 結(jié)論與討論

土傳病害發(fā)生環(huán)境復(fù)雜,在病害發(fā)展的前期,地上部分的癥狀往往表現(xiàn)不明顯而錯(cuò)過(guò)最佳防治時(shí)期,而且土傳病害長(zhǎng)受土壤微生態(tài)環(huán)境影響,增加了土傳病害防治難度[10]。傳統(tǒng)上,常用溴甲烷、氯化苦、異硫氰酸甲酯等熏蒸劑,對(duì)土壤進(jìn)行化學(xué)熏蒸來(lái)控制土傳病害,但土壤化學(xué)熏蒸劑劑量大、難降解,對(duì)生態(tài)環(huán)境造成極大污染,尋求土傳病害防治新藥劑迫在眉睫[11]。

目前尚未見(jiàn)關(guān)于遼藁本根腐病的藥劑防治報(bào)道。本試驗(yàn)篩選10種殺菌劑進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定,以期為根腐病的防治提供指導(dǎo)。EC50值越小,說(shuō)明病原菌對(duì)藥劑的反應(yīng)靈敏度越高[12],本試驗(yàn)中,10%苯醚甲環(huán)唑、3%噻霉酮、80%乙蒜素和1.8%辛菌胺醋酸鹽對(duì)根腐病菌均有較強(qiáng)的抑制作用,EC50值在0.0173~2.6932 mg/L之間,抑菌率均大于 90%,尤其是 10%苯醚甲環(huán)唑,EC50為0.0173 mg/L,這與任建國(guó)研究結(jié)果10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑對(duì)太子參根腐病具有良好的效果一致,苯醚甲環(huán)唑?yàn)槿蝾?lèi)殺菌劑,具有內(nèi)吸、保護(hù)和治療作用,具有低毒、高效無(wú)公害,高效、廣譜、用量少、易降解等特性,且易被根系吸收,對(duì)植物體無(wú)害,但對(duì)致病真菌具有極高的生物毒性[13]。乙蒜素為植物源仿生型殺菌劑,兼具有植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)作用,促進(jìn)生長(zhǎng),增加產(chǎn)量和改善品質(zhì)[14]。張博等研究表明:乙蒜素對(duì)小麥根腐病防治有明顯效果[15]。因此。遼藁本根腐病的防治可優(yōu)先考慮10%苯醚甲環(huán)唑、3%噻霉酮和80%乙蒜素和1.8%辛菌胺醋酸鹽作為防治遼藁本根腐病的參考用藥,并注意藥劑輪換使用。

本試驗(yàn)室內(nèi)測(cè)定的試驗(yàn)結(jié)果,要將它們運(yùn)用到農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,仍需進(jìn)行田間試驗(yàn)以便生產(chǎn)上推廣和應(yīng)用[16]。