zeste 基因增強子同源物2 與卵巢癌關(guān)系的研究進(jìn)展△

蓋敏雪，劉鳴，李長忠

1山東大學(xué)齊魯醫(yī)學(xué)院，濟(jì)南 250000

2山東省立醫(yī)院婦科，濟(jì)南 250000

3北京大學(xué)深圳醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東深圳 518000

卵巢癌是女性常見的惡性腫瘤，其病死率較高，近年來引起了人們的廣泛關(guān)注。據(jù)統(tǒng)計，全球每年約有20 萬女性死于卵巢癌[1]。由于卵巢癌早期發(fā)現(xiàn)困難，超過75%的患者確診時發(fā)展為晚期，5 年生存率不到30%[2]。因此，探索卵巢癌發(fā)生發(fā)展及耐藥的確切機(jī)制是迫切需要解決的問題。zeste 基因增強子同源物2（enhancer of zeste homolog 2，EZH2）是表觀遺傳修飾因子之一，是多梳抑制復(fù)合體2（polycomb repressive complex 2，PRC2）的成員之一，通常參與轉(zhuǎn)錄抑制。EZH2 是PRC2的催化亞基，可以通過催化組蛋白3 上賴氨酸27的三甲基化來改變基因表達(dá)[3]。在卵巢癌中，EZH2 通常過表達(dá)，因此可能成為有效的治療靶點。本文對EZH2 與卵巢癌發(fā)生發(fā)展及耐藥的關(guān)系進(jìn)行綜述，重點描述其介導(dǎo)細(xì)胞代謝新途徑，以及與微小RNA（microRNA，miRNA）和長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）的相互作用，還強調(diào)了其與鉑類耐藥的關(guān)系及與多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly（ADP- ribose）polymerase，PARP]抑制劑的相互作用。

1 EZH2 的結(jié)構(gòu)與功能

EZH2 是PRC2 的催化亞基，PRC2 包含EZH1和EZH2 兩個催化亞基，EZH2位于染色體7q35。EZH2 蛋白包含4 個高度保守的結(jié)構(gòu)域，其中SET結(jié)構(gòu)域可催化組蛋白3 上賴氨酸27 的三甲基化。EZH1 和EZH2 有部分功能重疊，但EZH1 和EZH2的不同之處在于，PRC2-EZH2 在快速增殖的細(xì)胞中較為豐富，它能夠催化組蛋白3 上賴氨酸27 的三甲基化，形成H3K27me3，從而誘導(dǎo)靶基因的轉(zhuǎn)錄抑制；而PRC2-EZH1 經(jīng)常存在于未分裂的細(xì)胞中，負(fù)責(zé)恢復(fù)EZH2的轉(zhuǎn)錄抑制[4]。EZH2 在多種惡性腫瘤中表達(dá)上調(diào)，如卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌和黑色素瘤，已被證明在腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移、新生血管生成和化療耐藥中發(fā)揮關(guān)鍵作用[5-6]。

2 EZH2 參與卵巢癌發(fā)生發(fā)展的機(jī)制

2.1 EZH2 與IncRNA

lncRNA 在卵巢癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用已引起研究者的廣泛關(guān)注，其參與了卵巢癌的多種生理和病理過程。Zhang 等[7]研究探討了EZH2 介導(dǎo)的人αβ水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白11（abhydrolase domain containing 11，ABHD11）反義RNA1（ABHD11 antisense RNA 1，ABHD11-AS1）啟動子在卵巢癌發(fā)病機(jī)制中的作用，該研究證實了H3K27me3 與ABHD11-AS1 啟動子的結(jié)合部位，ABHD11-AS1 在卵巢癌組織中表達(dá)顯著上調(diào)，其表達(dá)水平與卵巢癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分期及患者的3 年生存率密切相關(guān)；敲低ABHD11-AS1 可抑制卵巢癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。該研究還表明，miRNA-133a-3p 過表達(dá)可顯著增強ABHD11-AS1基因敲除對卵巢癌細(xì)胞惡性特征的影響，而miRNA-133a-3p 表達(dá)恢復(fù)則可消除ABHD11-AS1 基因過表達(dá)對卵巢癌細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)移的影響。表明EZH2 可能通過miRNA-133a-3p 介導(dǎo)H3K27me3 與ABHD11-AS1啟動子結(jié)合，從而調(diào)控卵巢癌的進(jìn)展。

UNC5B 反義RNA1（UNC5B antisense RNA 1，UNC5B-AS1）是新發(fā)現(xiàn)的一種在甲狀腺乳頭狀癌中致癌的lncRNA，但其在卵巢癌中的作用尚不清楚。Wang 等[8]研究探討了UNC5B-AS1 在卵巢癌中的作用及機(jī)制，通過基因表達(dá)譜交互分析（Gene Expression Profiling Interactive Analysis，GEPIA）發(fā)現(xiàn)，在卵巢癌樣本中UNC5B-AS1 表達(dá)上調(diào)，并經(jīng)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction，qRT-PCR）證實，UCN5B-AS1 的缺失抑制了卵巢癌細(xì)胞增殖并促進(jìn)了細(xì)胞凋亡。該研究還發(fā)現(xiàn)，UNC5B-AS1 能夠與EZH2 相互作用，觸發(fā)N-myc 下游調(diào)控基因NDRG家族成員2（NDRG family member 2，NDRG2）啟動子上的H3K27me3，并在表觀遺傳水平抑制NDRG2的表達(dá)。說明UNC5B-AS1 通過EZH2 調(diào)節(jié)NDRG2 上的H3K27me3，從而促進(jìn)卵巢癌發(fā)展，提示UNC5B-AS1 是治療卵巢癌的潛在分子靶點。

Chen 和An[9]的研究發(fā)現(xiàn)，與癌旁正常組織相比，卵巢癌組織中l(wèi)ncRNA ATB表達(dá)升高，且其高表達(dá)與卵巢癌患者的預(yù)后不良有關(guān)；沉默lncRNA ATB 的表達(dá)可抑制卵巢癌SKOV3 和A2780 細(xì)胞增殖、遷移和侵襲；RNA 免疫沉淀和RNA 下拉實驗表明，lncRNA ATB通過直接與EZH2相互作用正向調(diào)節(jié)EZH2的表達(dá)，從而促進(jìn)卵巢癌的發(fā)生發(fā)展。

氯胺酮被廣泛用于治療癌因性疼痛，并已被證明能夠抑制多種腫瘤的生長，然而其對卵巢癌細(xì)胞影響的報道甚少。Li 等[10]研究發(fā)現(xiàn)，氯胺酮對6種卵巢癌細(xì)胞株的增殖有明顯的抑制作用，并可誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞周期停滯、凋亡，該研究還對基因表達(dá)綜合（Gene Expression Omnibus，GEO）數(shù)據(jù)庫進(jìn)行了生物信息學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)氯胺酮能夠調(diào)節(jié)lncRNA 漿細(xì)胞瘤變異體易位1（plasmacytoma variant translocation 1，PVT1）表達(dá)，還可促進(jìn)p300 介導(dǎo)的PVT1 啟動子中H3K27 乙酰化激活，PVT1 能夠與EZH2 結(jié)合，并調(diào)節(jié)包括p57在內(nèi)的靶基因表達(dá)，從而改變卵巢癌細(xì)胞的生物學(xué)特性。

2.2 EZH2 與環(huán)狀RNA（circuIar RNA，circRNA）

Yang 等[11]研究發(fā)現(xiàn)，hsa_circ_0026123 在卵巢癌組織和細(xì)胞系中表達(dá)上調(diào)，而沉默hsa_circ_0026123 的表達(dá)能夠抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖和遷移，并抑制體內(nèi)和體外腫瘤干細(xì)胞（cancer stem cell，CSC）相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)；應(yīng)用熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)分析hsa_circ_0026123、miRNA-124-3p 與EZH2的相關(guān)性，結(jié)果表明，hsa_circ_0026123表達(dá)下調(diào)通過miRNA-124-3p 的“海綿體機(jī)制”抑制EZH2 的表達(dá)，從而抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖和遷移，該方法可用于卵巢癌的靶向治療。

2.3 EZH2 與miRNA

miRNA let-7b 是一種有效的腫瘤抑制因子，Kuang 等[12]研究發(fā)現(xiàn)，賴氨酸去甲基化酶2B（lysine demethylase 2B，KDM2B）通過使H3K36me2 去甲基化直接抑制let-7b 的表達(dá)；增殖、遷移和傷口愈合實驗表明，let-7b 能夠抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖和遷移，EZH2沉默逆轉(zhuǎn)了抑制let-7b 介導(dǎo)的促腫瘤生長作用。因此，在卵巢癌中l(wèi)et-7b 的表達(dá)受到KDM2B 高表達(dá)的表觀遺傳學(xué)抑制，let-7b 的缺失上調(diào)了EZH2 的表達(dá)，從而促進(jìn)了卵巢癌細(xì)胞的體內(nèi)外生長。Wu 等[13]研究發(fā)現(xiàn)，EZH2 通過招募H3K27me3 促進(jìn)miRNA-139 啟動子甲基化，從而抑制miRNA-139 的表達(dá)，而沉默EZH2則通過增加miRNA-139 的表達(dá)抑制體外腫瘤的進(jìn)展；miRNA-139 靶向抑制溶血磷脂酸受體1（lysophosphatidic acid receptor 1，LPA1）和LPA1 激活的轉(zhuǎn)化生長因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）信號通路是EZH2 作用于卵巢癌細(xì)胞的關(guān)鍵機(jī)制。

2.4 EZH2 與細(xì)胞代謝

EZH2 可以催化組蛋白3 上賴氨酸27 的三甲基化，從而誘導(dǎo)靶基因的轉(zhuǎn)錄抑制，這是EZH2 在腫瘤細(xì)胞中發(fā)揮作用的公認(rèn)經(jīng)典機(jī)制。然而，H3K27me3 通常在卵巢癌中表達(dá)缺失，這與EZH2作為H3K27me3 甲基轉(zhuǎn)移酶的致癌作用相矛盾。Chen 等[14]研究發(fā)現(xiàn)，EZH2 高表達(dá)但H3K27me3 水平低的卵巢癌患者的預(yù)后最差，異檸檬酸脫氫酶2（isocitrate dehydrogenase 2，IDH2）是三氯乙酸循環(huán)中催化α-酮戊二酸（α-ketoglutarate，α-KG）產(chǎn)生的重要酶，該研究證明EZH2 通過氧化磷酸化直接促進(jìn)IDH2的轉(zhuǎn)錄，從而增強卵巢癌細(xì)胞的葡萄糖代謝。該研究發(fā)現(xiàn)了EZH2 促進(jìn)卵巢癌發(fā)生發(fā)展的新機(jī)制，為后續(xù)卵巢癌聯(lián)合治療新策略的研發(fā)提供了重要的理論基礎(chǔ)。

2.5 EZH2 與細(xì)胞免疫

卵巢癌的預(yù)后與腫瘤內(nèi)淋巴細(xì)胞的存在直接相關(guān)。Spiliopoulou 等[15]研究發(fā)現(xiàn)，同時抑制組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶G9A 和EZH2 的表達(dá)可以激活CXC 趨化因子配體10（C-X-C motif chemokine ligand 10，CXCL10）/CXC 趨化因子受體3（C-X-C motif chemokine receptor 3，CXCR3）信號通路，增加腫瘤內(nèi)效應(yīng)淋巴細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞的歸巢，同時抑制促瘤的叉頭框蛋白P3（forkhead box P3，F(xiàn)OXP3）+CD4 T 細(xì)胞；G9A/EZH2 雙重抑制劑HKMTI-1-005可誘導(dǎo)染色質(zhì)改變，導(dǎo)致免疫刺激基因網(wǎng)絡(luò)的轉(zhuǎn)錄激活，例如內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒K 家族（endogenous retroviruses of the K family，ERV-K）重新表達(dá)；HKMTI-1-005 治療減輕了卵巢癌小鼠的腫瘤負(fù)荷，并提高了存活率。這些結(jié)果表明，在卵巢癌中抑制G9A 和EZH2 的表達(dá)可以改變免疫微環(huán)境，抑制腫瘤生長，這為臨床治療策略的制訂提供了新思路。

2.6 EZH2 促進(jìn)鉑類耐藥

miRNA-506-3p 過表達(dá)后，多種卵巢癌細(xì)胞中EZH2mRNA 和蛋白表達(dá)均有所下降。Sun 等[16]研究表明，miRNA-506-3p 過表達(dá)可使卵巢癌細(xì)胞對PARP 抑制劑或順鉑敏感；敲低EZH2的表達(dá)后，經(jīng)奧拉帕利或順鉑處理的卵巢癌細(xì)胞的增殖能力明顯下降；過表達(dá)EZH2 后，miRNA-506-3p 對奧拉帕利和順鉑敏感性的影響可以完全被逆轉(zhuǎn)；過表達(dá)EZH2 的卵巢癌細(xì)胞中β-聯(lián)蛋白（β-catenin）表達(dá)水平升高，相反，EZH2干擾小RNA（small interfering RNA，siRNA）轉(zhuǎn)染降低了β-catenin 的表達(dá)；在原位卵巢癌小鼠模型中，PARP 抑制劑和順鉑對由miRNA-506-3p 介導(dǎo)的EZH2 和β-catenin 表達(dá)下調(diào)更具敏感性。以上結(jié)果提示，miRNA-506-3p 通過靶向EZH2/β-catenin 信號通路增強卵巢癌對PARP 抑制劑和順鉑的反應(yīng)，這為miRNA-506-3p 過表達(dá)用于卵巢癌的治療開辟了新的可能性。Zhang 等[17]在耐順鉑的卵巢癌細(xì)胞株SKOV3/DDP 和A2780/DDP 中發(fā)現(xiàn)，HOX 轉(zhuǎn)錄反義RNA（HOX transcript antisense RNA，HOTAIR）表達(dá)上調(diào)，而miRNA-138-5p 表達(dá)下調(diào)，HOTAIR 基因敲除可增加順鉑耐藥細(xì)胞中miRNA-138-5p 的表達(dá)，增強順鉑耐藥細(xì)胞的化療敏感性，并降低EZH2 和組蛋白去乙?；?（sirtuin 1，SIRT1）的表達(dá)。此外，miRNA-138-5p 抑制劑可減弱因HOTAIR 沉默誘導(dǎo)的順鉑耐藥細(xì)胞的化療敏感性。該研究證實了HOTAIR 可以通過抑制miRNA-138-5p 的表達(dá)，阻止其與EZH2 和SIRT1 結(jié)合，從而促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞對順鉑耐藥。

卵巢癌干細(xì)胞（ovarian cancer stem cell，OCSC）在腫瘤治療結(jié)束后的持續(xù)存在可能是耐藥腫瘤出現(xiàn)的原因。EZH2 在OCSC 中過表達(dá)可能有助于化療耐藥。Wen 等[18]將卵巢癌細(xì)胞系SKOV3 注射于裸鼠皮下，并定期將順鉑注入腫瘤，待腫瘤生長至一定體積時，消化獲得的腫瘤移植單細(xì)胞懸液，培養(yǎng)一段時間后將細(xì)胞再次注射到裸鼠體內(nèi)重復(fù)傳代，直至在順鉑處理的第三代異種移植物中獲得了一株富含OCSC 的細(xì)胞系SK-3rd。利用高通量PCR 和生物信息學(xué)方法篩選與OCSC 干性相關(guān)的EZH2 靶標(biāo)，發(fā)現(xiàn)檢查點激酶1（checkpoint kinase 1，CHK1）是參與CSC 特性形成的EZH2 的靶基因。該研究建立了EZH2基因敲除的SK-3rd卵巢癌細(xì)胞系，EZH2基因敲除降低了CHK1 的表達(dá)，而CHK1 過表達(dá)逆轉(zhuǎn)了EZH2基因抑制腫瘤細(xì)胞球體形成和化療耐藥的作用。此外，EZH2 還與卵巢癌細(xì)胞的CHK1啟動子結(jié)合并激活CHK1 信號。在臨床試驗中，EZH2 和CHK1 水平高的卵巢癌患者對鉑類藥物更具耐藥性，預(yù)后也更差。上述研究表明，EZH2 通過激活CHK1 信號在維持OCSC 干性和化療耐藥中發(fā)揮關(guān)鍵作用。此外，Zong 等[19]研究發(fā)現(xiàn)，DAB2 相互作用蛋白（DAB2 interacting protein，DAB2IP）在上皮性卵巢癌細(xì)胞系中表達(dá)缺失上調(diào)了干細(xì)胞相關(guān)基因的表達(dá)，并誘導(dǎo)了非CSC 向CSC 轉(zhuǎn)化，而DAB2IP 表達(dá)上調(diào)則抑制了CSC 的特性。生物信息學(xué)分析和反相蛋白質(zhì)陣列進(jìn)一步證明，DAB2IP 通過下調(diào)重要的干性誘導(dǎo)因子Wnt 家族成員5B（Wnt family member 5B，WNT5B）的表達(dá)來抑制WNT 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。WNT5B 下游靶基因c-Jun可激活非規(guī)范的WNT 信號，而Rac 家族小GTP 酶1（Rac family small GTPase 1，RAC1）是c-Jun 激活的重要調(diào)節(jié)因子，通過抑制RAC1，WNT5B 通路可被阻斷。聯(lián)合應(yīng)用EZH2 抑制劑GSK126 和RAC1 抑制劑NSC23766，在體外抑制了OCSC 的存活，在體內(nèi)抑制了腫瘤生長并提高了其對鉑類藥物的敏感性。因此，以EZH2/DAB2IP/c-Jun 信號通路為靶點是預(yù)防卵巢癌復(fù)發(fā)的一種有前景的策略。

Xiong 等[20]對癌癥基因組圖譜（The Cancer Genome Atlas，TCGA）數(shù)據(jù)庫中果糖-1，6-二磷酸酶1（fructose-1,6-bisphosphatase 1，F(xiàn)BP1）和EZH2基因序列的分析證實，F(xiàn)BP1和EZH2的表達(dá)在卵巢組織中呈正相關(guān)。應(yīng)用FBP1 和EZH2 抗體進(jìn)行的免疫共沉淀（co-immunoprecipitation，Co-IP）實驗證實了FBP1 和EZH2 在卵巢癌細(xì)胞中相互作用。FBP1基因敲除抑制了裸鼠腫瘤的形成和卵巢癌細(xì)胞對順鉑的耐藥，并顯著降低了EZH2mRNA 和蛋白表達(dá)水平。作為EZH2 的下游靶點之一，H3K27me3蛋白表達(dá)也因FBP1基因敲除而顯著下調(diào)。qRTPCR、蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）和免疫組織化學(xué)染色結(jié)果均表明，F(xiàn)BP1敲低組移植瘤中EZH2 和H3K27me3 的表達(dá)強度均弱于對照組。這些結(jié)果提示，F(xiàn)BP1 通過上調(diào)EZH2 和H3K27me3 的表達(dá)來增加卵巢癌細(xì)胞對順鉑的耐藥性。

2.7 EZH2 與其他因子的相互作用

有研究指出，GEPIA 數(shù)據(jù)庫中細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白7（cell division cycle associated 7，CDCA7）在卵巢癌患者卵巢癌組織和卵巢癌細(xì)胞系中的表達(dá)均升高，該現(xiàn)象已通過Western blot 和qRT-PCR進(jìn)一步證實；將短發(fā)夾RNA（short hairpin RNA，shRNA）CDCA7 導(dǎo)入SKOV3 細(xì)胞進(jìn)行功能實驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CDCA7沉默抑制了卵巢癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，并使細(xì)胞周期受阻。GeneMANIA 數(shù)據(jù)庫分析和Co-IP 實驗驗證了CDCA7 與EZH2 之間的相互作用，CDCA7 表達(dá)下調(diào)通過抑制EZH2的表達(dá)抑制血管生成，這為卵巢癌的治療開發(fā)了一個有前景的分子靶點[21]。此外，Wang 等[22]發(fā)現(xiàn)染色質(zhì)域解旋酶DNA 結(jié)合蛋白4（chromodomain helicase DNA binding protein 4，CHD4）在卵巢癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用。在卵巢癌組織中，CHD4 高表達(dá)與患者的預(yù)后不良有關(guān)。CHD4 在卵巢癌細(xì)胞中的功能喪失可抑制腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲。通過基因集富集分析（gene set enrichment analysis，GSEA）和Western blot探索CHD4的調(diào)控機(jī)制，發(fā)現(xiàn)CHD4基因敲除抑制了EZH2 的表達(dá)和βcatenin的核積聚，還抑制了卵巢癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，并阻止了小鼠模型的疾病進(jìn)展。另有研究證明，EZH2可以通過N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine，m6A）參與卵巢癌的抗失巢過程，從而促進(jìn)卵巢腺癌腹腔轉(zhuǎn)移，EZH2在卵巢癌大網(wǎng)膜轉(zhuǎn)移組織中的表達(dá)水平明顯高于正常卵巢組織[23]?？故С驳男纬杀徽J(rèn)為是原發(fā)惡性腫瘤轉(zhuǎn)移過程中的關(guān)鍵步驟。該研究建立了卵巢癌細(xì)胞失巢模型和裸鼠異種移植瘤模型，發(fā)現(xiàn)降低EZH2的表達(dá)水平可在體外抑制m6A的表達(dá)并抑制卵巢癌細(xì)胞的抗失巢，還可在體內(nèi)抑制卵巢癌進(jìn)展。黃芩素是從多年生草本植物黃芩中發(fā)現(xiàn)的一種黃酮類化合物，在多種人類惡性腫瘤中具有抗腫瘤活性。Lang等[24]研究探討了黃芩素對卵巢癌的影響發(fā)現(xiàn)，其抑制了卵巢癌細(xì)胞A2780和SKOV3的存活、遷移和侵襲，并減少了EZH2在卵巢癌細(xì)胞中的表達(dá)。此外，叉頭框蛋白O1（forkhead box O1，F(xiàn)OXO1）在卵巢癌組織和細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)，并受EZH2的負(fù)調(diào)控。同時，黃芩素還能抑制體內(nèi)腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。該研究還發(fā)現(xiàn)，黃芩素可以通過調(diào)節(jié)EZH2/FOXO1 信號通路抑制卵巢癌的發(fā)生發(fā)展。Han等[25]研究發(fā)現(xiàn)，在高級別漿液性卵巢癌中，特異性的細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶2（cyclin dependent kinase 2，CDK2）抑制劑抑制了EZH2在T416位點的磷酸化，進(jìn)而激活其下游靶基因雌激素受體（estrogen receptor，ER）α的表達(dá)。因此CDK2 抑制劑和他莫昔芬聯(lián)合應(yīng)用可發(fā)揮顯著的協(xié)同抗腫瘤作用。

3 EZH2 抑制劑用于卵巢癌的治療

3.1 EZH2 抑制劑與PARP 抑制劑

雖然EZH2 和PARP 分別具有不同的作用機(jī)制和功能，但EZH2 和PARP 在DNA 損傷、細(xì)胞周期等方面具有一些共同特征[26]。因此，PARP 抑制劑和EZH2 抑制劑可能具有協(xié)同或拮抗作用。Karakashev 等[27]研究表明，EZH2 抑制劑可上調(diào)有絲分裂阻滯缺陷2 樣蛋白2（mitotic arrest deficient 2 like 2，MAD2L2）的表達(dá)，并以共激活相關(guān)精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶1（coactivator associated arginine methyltransferase 1，CARM1）依賴的方式使無同源重組缺陷（homologous recombination-proficient，HRp）的上皮性卵巢癌對PARP 抑制劑敏感。CARM1 通過甲基化MAD2L2啟動子上交配型轉(zhuǎn)換（mating type switching，SWI）/蔗糖不發(fā)酵（sucrose non-fermenting，SNF）復(fù)合體的BAF155 亞基，推動亞基從SWI/SNF 復(fù)合體到EZH2 的轉(zhuǎn)換，從而促進(jìn)MAD2L2沉默。EZH2 抑制劑通過上調(diào)MAD2L2 的表達(dá)減少DNA 末端切除，從而增加非同源末端連接（non-homologous end joining，NHEJ）和染色體異常，最終導(dǎo)致HRp 的細(xì)胞在PARP 抑制劑處理后發(fā)生有絲分裂災(zāi)變。以上研究證明EZH2 抑制劑使CARM1高表達(dá)并使HRp 的卵巢癌細(xì)胞對PARP 抑制劑敏感，其中值得一提的是EZH2 與PARP 在腫瘤免疫微環(huán)境中具有相關(guān)性。Pantelidou 等[28]對體外乳腺癌細(xì)胞的分析結(jié)果表明，PARP 抑制劑激活了環(huán)鳥苷酸-腺苷酸合成酶（cyclic GMP-AMP synthase，cGAS）/干擾素反應(yīng)刺激因子cGAMP 相互作用因子1（stimulator of interferon response cGAMP interactor 1，STING）通路，體內(nèi)實驗進(jìn)一步表明PARP抑制劑可誘導(dǎo)STING/TANK 結(jié)合激酶1（TANK binding kinase 1，TBK1）/干擾素調(diào)節(jié)因子3（interferon regulatory factor 3，IRF3）通路激活，從而幫助樹突細(xì)胞識別腫瘤抗原，進(jìn)一步募集和激活CD8+T 細(xì)胞，而EZH2 抑制劑也被證明能夠促進(jìn)STING 通路介導(dǎo)的T 細(xì)胞滲透和抗腫瘤作用[29-30]。以上結(jié)果表明，EZH2 抑制劑和PARP 抑制劑可能在調(diào)節(jié)腫瘤免疫微環(huán)境的過程中發(fā)揮協(xié)同作用。但Yang 等[31]研究發(fā)現(xiàn)，PARP抑制劑聯(lián)合EZH2抑制劑可促進(jìn)小鼠體內(nèi)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞向具有促腫瘤作用的M2型巨噬細(xì)胞分化，并促進(jìn)腫瘤新生血管生成。說明EZH2 抑制劑聯(lián)合PARP 抑制劑會對腫瘤微環(huán)境中的免疫細(xì)胞產(chǎn)生負(fù)面影響。一方面，EZH2 抑制劑可以促進(jìn)免疫細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境中的滲透，從而增強PARP 抑制劑的抗腫瘤效果。另一方面，這兩種藥物的聯(lián)合會擾亂腫瘤的免疫微環(huán)境。因此，在卵巢癌中，這兩種藥物的聯(lián)合應(yīng)用亟待進(jìn)一步研究。

3.2 EZH2 抑制劑的研發(fā)

目前一些小分子EZH2 抑制劑DZNep、SHR2554、CPI-169、CPI-1205、他澤司他（Tazemetostat）、伐美妥司他（Valemetostat）和GSK2816126 等在淋巴瘤、骨髓瘤、惡性胸膜間皮瘤、上皮細(xì)胞肉瘤、前列腺癌等腫瘤治療中已進(jìn)入臨床試驗階段。DZNep 是一種S-腺苷-L-同型半胱氨酸水解酶（S-adenosyl-L-homocysteine hydrolase，SAH）抑制劑，能夠通過增加SAH 的表達(dá)間接抑制EZH2 的表達(dá)，從而抑制依賴于腺苷-L-蛋氨酸的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶的活性[32]。與SAM 競爭的EZH2 抑制劑如CPI-1205 和GSK2816126 目前正在淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、前列腺癌等腫瘤中進(jìn)行臨床試驗。GSK2816126 對野生型和Y641 突變型EZH2具有相似的抑制效力[33]。此外，他澤司他因其出色的藥效和藥代動力學(xué)特性已被美國食品藥品管理局（Food and Drug Administration，F(xiàn)DA）批準(zhǔn)用于治療上皮樣肉瘤和濾泡性淋巴瘤[34]。目前臨床上尚無可用于治療卵巢癌的EZH2 抑制劑，在卵巢癌中EZH2 抑制劑還處于臨床前實驗階段。新型EZH2抑制劑SKLB-03220 對突變型EZH2顯示出良好的抑制活性，能夠通過抑制H3K27me3 對卵巢癌細(xì)胞表現(xiàn)出明顯的抗腫瘤作用[35]。此外，口服SKLB-0322 可以明顯抑制異種移植瘤模型中腫瘤生長?？梢奅ZH2 抑制劑是針對卵巢癌十分具有潛力的治療藥物，具有良好的應(yīng)用前景。

4 小結(jié)與展望

綜上所述，在卵巢癌中，EZH2 通常過表達(dá)，因此可能成為卵巢癌的治療靶點。目前針對EZH2的多種小分子抑制劑正在陸續(xù)開發(fā)。已研發(fā)的EZH2 抑制劑在動物實驗中的療效已得到了證實，但是在臨床試驗中的作用有待進(jìn)一步研究。靶向EZH2 或與其他治療方法聯(lián)合，是一種具有潛力的卵巢癌治療新策略。