太子參脫毒種參的繁育技術(shù)規(guī)程

李曉紅，胡雪華，李 利，陳成弟

（1.井岡山大學(xué)，江西 吉安 343009；2.吉安市青原區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，江西 吉安 343000；3.吉安市富榮生態(tài)農(nóng)業(yè)有限公司，江西 吉安 343000）

太子參是石竹科（Caryophyllaceae）多年生草本植物異葉假繁縷（Pseudostellaria heterophylla（Miq）Pax ex Pax et Hoffm.）的干燥塊根，又名孩兒參、童參、四葉參，是中國聞名的道地中藥材。

太子參味甘、性平、微苦，具有補(bǔ)氣益血、健脾、生津潤肺之功效[1]，臨床常用于心悸自汗，體倦乏力，脾虛食少，氣陰不足，肺燥干咳等癥[2]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，太子參富含氨基酸[3]、多糖[4]、苷類、磷脂類[5]、環(huán)肽類[6-7]、揮發(fā)油等多種有效成分[8]，具有增強(qiáng)機(jī)體、免疫促進(jìn)、鎮(zhèn)咳、抗菌、抗病毒等多種生物活性[9]，廣泛用于止咳、改善心肺功能、治療糖尿病、抗疲勞、抗氧化等方面[10]。除此之外，太子參還具有增強(qiáng)免疫功能和抗疲勞、抗應(yīng)激、延長壽命、清除超氧自由基的功效[11-12]。除食用、藥用外，太子參在保健食品、化妝品等方面也有廣泛應(yīng)用[13]。

隨著太子參應(yīng)用不斷被開發(fā)，市場需求量大大增加，太子參的種植面積也不斷擴(kuò)大，種植產(chǎn)量與質(zhì)量成為占領(lǐng)市場的前提。太子參以人工栽培為主，由于太子參種子不易收集且有休眠現(xiàn)象，發(fā)芽率低，生產(chǎn)中通常采用塊根進(jìn)行無性繁殖，長期無性繁殖容易累積病毒，導(dǎo)致病毒病頻發(fā)，太子參品種退化，產(chǎn)量和品質(zhì)下降[14]，生產(chǎn)成本增加，嚴(yán)重影響太子參種植收益，這已成為太子參產(chǎn)業(yè)發(fā)展的一道難題。

對于太子參病毒至今尚無有效的化學(xué)藥劑進(jìn)行防治，利用生物技術(shù)手段可對太子參進(jìn)行種質(zhì)脫毒改良、品種復(fù)壯、規(guī)?；N。其中，組織培養(yǎng)就是其中一種快速有效的方法，具有周期短、脫毒率高、出苗整齊等優(yōu)點。因此，建立脫毒種生產(chǎn)體系，生產(chǎn)脫毒種參，是去除太子參病毒最直接有效的手段。本規(guī)程規(guī)范太子參脫毒組培苗及脫毒種參的繁育技術(shù)，以進(jìn)一步提升太子參種參質(zhì)量，為太子參的種植提供優(yōu)質(zhì)種源，從而保障太子參種植產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。

1 范圍

本規(guī)程規(guī)定了太子參脫毒組培苗規(guī)范化生產(chǎn)技術(shù)。

2 引用標(biāo)準(zhǔn)

《環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB 3095—2012）[15]，《農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》（GB 5084—2021）[16]，《土壤環(huán)境質(zhì)量農(nóng)用地土壤污染風(fēng)險管控標(biāo)準(zhǔn)（試行）》（GB 15618—2018）[17]，《綠色食品 肥料使用準(zhǔn)則》（NY/T 394—2013）[18]，《農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則（九）》（GB/T 8321.9—2009）[19]。

3 太子參脫毒組培苗的培養(yǎng)

3.1 外殖體的處理與消毒

選擇帶健壯芽頭、體肥個大的太子參，放置于1～4 ℃環(huán)境中冷藏，打破休眠，待太子參的芽頭萌動后，切取萌發(fā)芽頭作為外殖體。將萌發(fā)芽頭用自來水沖洗干凈后晾干，置于超凈工作臺上，依次用酒精浸泡30 s，0.1%升汞浸泡7～8 min，其間不斷攪動，浸泡之后用無菌水沖洗4～5 次，然后轉(zhuǎn)入無菌培養(yǎng)皿中的濾紙上備用。

3.2 太子參莖尖的誘導(dǎo)

將上述處理過的外殖體置于體視鏡下，在無菌環(huán)境下，剝?nèi)〈笮?.5 mm 左右的莖尖，并將莖尖接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)基為MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/LNAA+30 g/L 蔗糖+5.5 g/L 瓊脂粉，pH 值為5.8。培養(yǎng)溫度為（20±1）℃，光照強(qiáng)度為1 000 lx，光照周期為10 h/d，培養(yǎng)20～25 d 后，太子參莖尖萌發(fā)，再過10 d左右長出2～4 cm 組培苗。

3.3 病毒檢測

將上述莖尖誘導(dǎo)出的組培苗葉片，提取出RNA，利用RT-PCR 法檢測病毒，去除帶病毒的幼苗，將無病毒苗進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)。

3.4 組培苗的增殖培養(yǎng)

將檢測無毒的組培苗接種于增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基為MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA+30 g/L蔗糖+5.5 g/L 瓊脂粉，pH 值為5.8。培養(yǎng)溫度為（20±1）℃，光照強(qiáng)度為2 000～2 500 lx，光照周期為12 h/d，待太子參苗長至6～8 cm 后，將其切成4～5 段，再轉(zhuǎn)接于上述增殖培養(yǎng)基中，重復(fù)以上增殖步驟，直至獲得足夠數(shù)量的組培苗。

4 組培苗馴化

煉苗：由于太子參很容易生根，增殖苗已長出大量根，因此可將長至6～8 cm 的增殖苗直接進(jìn)行瓶內(nèi)煉苗。先將瓶苗進(jìn)行部分遮光，移至溫度（25±1）℃的潔凈環(huán)境中，然后逐步提高光強(qiáng)，15 d 后松開瓶蓋1～2 d，再半打開瓶蓋1～2 d，最后完全打開瓶蓋放置3～4 d，期間滴入符合上述標(biāo)準(zhǔn)的灌溉水，以防干燥，然后取出組培苗，放入清水盆中，小心洗去植株根部殘留的培養(yǎng)基，栽種于苗床，進(jìn)行瓶外煉苗。

瓶外煉苗環(huán)境條件符合《環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB 3095—2012）、《農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》（GB 5084—2021）以及《土壤環(huán)境質(zhì)量 農(nóng)用地土壤污染風(fēng)險管控標(biāo)準(zhǔn)（試行）》（GB 15618—2018）。栽種基質(zhì)選用保水保肥力強(qiáng)、透氣性好的弱酸性基質(zhì)，如草碳和蛭石按體積比為2∶1 或草炭和珍珠巖3∶1 配制，用800～1 000 倍液的甲基托布津或95%敵克松300～500 倍液噴霧殺菌，1 d 后淋透水。苗床搭成塑料拱棚，以保溫保濕，外面還可搭建遮陽網(wǎng)和防蟲網(wǎng)，防強(qiáng)光直射和防蟲。溫度保持在15～25 ℃，期間同時注意通風(fēng)。在苗床上培養(yǎng)60 d，即可移植至大田種植。

5 組培苗移栽及種參的繁育

5.1 種植基地的選擇

太子參為多年生草本，一個生長周期為120 d 左右，一般秋天播種，冬天生根，春天發(fā)芽，夏天枯苗采收。喜溫暖濕潤氣候，適宜溫度為10～25 ℃，較為耐寒，忌夏日高溫和強(qiáng)光暴曬，氣溫高于30 ℃，植株生長停滯，不耐旱澇。喜肥沃疏松、含有豐富腐殖質(zhì)、弱酸性砂質(zhì)土壤，忌黏土，耕作層宜在30 cm 左右。選地需考慮以上太子參的生長特性，選擇排水良好、土壤肥沃疏松的陰濕環(huán)境。同時，為避免病毒傳染，周圍不能種植花葉病毒寄主，如煙草、番茄、白菜等十字花科類植物，所選地塊最好進(jìn)行水旱輪作，改善土壤的理化性狀，消除有毒物質(zhì)，增加肥力。

太子參脫毒種的擴(kuò)繁，環(huán)境條件除要符合以上生長習(xí)性外，還要遠(yuǎn)離市區(qū)，周圍10 km 無污染源，空氣、水質(zhì)和土壤同時也要符合以下標(biāo)準(zhǔn)：《環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB3095—2012），《農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》（GB 5084—2021），《土壤環(huán)境質(zhì)量 農(nóng)用地土壤污染風(fēng)險管控標(biāo)準(zhǔn)（試行）》（GB 15618—2018）。

5.2 整地、施基肥

先將所選地塊深翻兩次，整成寬1.5 m、高30 cm的畦，開排水溝寬30 cm，長畦中間開溝斷開，利于操作和排水。在整地過程中噴灑敵克松可濕性粉劑600 倍液進(jìn)行土壤消毒。在栽種前撒施基肥，基肥以有機(jī)肥為主，施腐熟廄肥22 500 kg/hm2、碳酸氫銨600 kg/hm2、氮磷鉀復(fù)合肥450 kg/hm2左右。

5.3 移栽

在2 月中下旬，土溫達(dá)到15 ℃以上，經(jīng)馴化后的組培苗可以移栽到整好的田地。移栽時，將馴化苗根系包裹著基質(zhì)一并放入種植穴中央，覆土和基質(zhì)齊平，壓實，株距12 cm，行距15 cm，最后輕灑定根水，以防沖倒幼苗。

6 田間管理

6.1 中耕鋤草

采用人工除草，嚴(yán)禁使用除草劑。生長期除草3次，第一次于3 月上旬待移栽成活后，用鏟子松土，深度3 cm，破除板結(jié)，鏟除雜草；第二次鋤草于4 月中旬，淺鋤表土，防止動根傷苗；第三次鋤草于5 月中旬，封壟前拔除大草，畦面停止除草，防止傷害苗和塊根，同時在封壟前拔除病株、弱株，并燒毀。

6.2 肥水管理

太子參喜濕怕澇，在整個生長期內(nèi)，雨季到來時應(yīng)時刻關(guān)注排水溝，確保雨水通暢排出。遇干旱時要合理澆灌，若土壤含水量低，不利于中根生長，因此要及時澆水促進(jìn)根系生長和膨大。太子參喜肥，除施基肥之外，還要追肥兩次，追肥符合《綠色食品 肥料使用準(zhǔn)則》（NY/T 394—2013）。

第一次追肥在3 月上旬，結(jié)合中耕除草進(jìn)行，沿太子參的行間均勻地將肥料撒于行內(nèi)，用小鋤頭輕輕松土，將肥料蓋入土內(nèi)，注意不要把肥料撒在葉片上，避免灼傷葉片，選擇在早晨露水干后為宜。第二次追肥在4 月中下旬，塊根膨大期，用磷酸二氫鉀75 kg/hm2，配成0.5%溶液進(jìn)行葉面噴施，7～10 d 噴施1 次，一般2～3 次即可，早晚噴施。

6.3 病蟲害防治

太子參主要病害有葉斑病、病毒病、白絹病、紫紋羽病和根腐病。病毒病是主要病害，但因種苗經(jīng)過組培脫毒已經(jīng)不帶病毒，只要在種植管理方面做好消毒和隔離，基本不會感染病毒病。其他幾種病害由各種菌類引起，可選用低毒、無殘留的農(nóng)藥防治。用藥符合《農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則（九）》（GB/T 8321.9—2009），保證藥材重金屬含量、有機(jī)氯含量不超標(biāo)，并且以預(yù)防為主。例如發(fā)生病蟲害可以選用適量低毒、無殘留的農(nóng)藥，最好采用生物防治。

太子參蟲害有蠐螬、螻蛄、地老虎等，幼蟲會為害塊根或咬斷根莖。防治可用燈光誘殺，用桐子餅+生物農(nóng)藥制成毒餌誘殺，也可用順式氯氰菊酯兌水1 000倍進(jìn)行噴灑。

除用藥防治病蟲害外，還應(yīng)合理進(jìn)行地肥水管理，保持土壤濕潤，但不積水；生長期增施磷鉀肥提高植株抗病能力；及時地清理焚燒病株、殘株和雜草，保持田畦干凈；深翻土壤、做好土壤消毒；采取建立隔離帶以及生物防治等措施，都能夠很好地預(yù)防和控制病蟲害發(fā)生。

7 采挖

一般商品參在6 月下旬至7 月初采挖，在植株高溫枯萎、塊根停止生長時即可收獲。種參一般在10 月底采挖，選擇晴天采收，用四齒鈀細(xì)心挖起，深度一般為10 cm 左右，不宜過深，抖掉泥土，去除莖葉，注意不要碰傷芽頭，保持參體完整。采挖后的脫毒種參稍晾干，在11 月初就可作種種下去。

8 結(jié)束語

經(jīng)后期用脫毒組培苗繁育得到的種參和自留種參在同樣條件下種植，試驗對比發(fā)現(xiàn)：脫毒種參苗期的生長勢旺，葉片碧綠伸展，無病斑，高溫枯萎期推后，參體均勻肥大，色澤金黃。自留種苗期葉片卷縮，病斑嚴(yán)重，植株矮小，夏季早早枯萎，并且參體大小不均，細(xì)長無光澤。經(jīng)隨機(jī)取樣測產(chǎn)，脫毒種參比自留種參所產(chǎn)商品參產(chǎn)量高出50%以上，而生產(chǎn)成本可以節(jié)約30%，大大提高了種植收益，以上各方面都突顯出脫毒種的優(yōu)勢。

脫毒種應(yīng)用對太子參生產(chǎn)和生態(tài)環(huán)境的保護(hù)以及食品安全方面意義非凡。隨著綠色產(chǎn)業(yè)興起，脫毒種的推廣應(yīng)用勢在必行，不僅是太子參，其他農(nóng)作物一樣。太子參脫毒種參繁育技術(shù)規(guī)程的建立引領(lǐng)著健康科技產(chǎn)業(yè)發(fā)展。