海南地方習(xí)用藥材鷓鴣茶質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

吳坤林 劉洋洋 邱秀儒 邢益濤 卓進(jìn)盛 何明軍

（1. 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所海南分所/海南省南藥資源保護(hù)與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 海南?？?570311；2. 海南省中醫(yī)院 海南?？?570203）

鷓鴣茶[Mallotus furetianus(Bail) Muell-Arg]是大戟科野桐屬植物的干燥葉，又名山苦茶、五月茶、禾姑茶、毛茶等[1-2]。鷓鴣茶株高2~10 m，為常綠小灌木或小喬木[3]，多生長(zhǎng)在山林緩坡地帶或溝谷巖石灘邊緣[4]，主要分布于我國(guó)海南、廣東、廣西等?。▍^(qū)）及東南亞的中印半島和蘇門答臘島等地[5]，鷓鴣茶葉片干燥后香氣濃郁，是海南民間的一種具有濃郁地方特色和民族特色的代茶飲料植物和重要的藥用植物，在《海南植物志》[6]、《海南及廣東沿海島嶼植物名錄》[7]、《廣東植物志》[8]中均有記載。清代何克諫所著《生藥藥性備要·上卷》[9]對(duì)鷓鴣茶已有描述：“鷓鴣茶，味甘，香，性溫。散熱毒，止咳嗽，理痰火。治蛇咬傷，又名蛇總管。小葉的祛風(fēng)，治咳嗽膨脹，小兒五疳。其根，止牙痛”[10]。鷓鴣茶富含沒食子酸（gallic acid）、β-谷甾醇（β-sitosterol）、兒茶素（catechin）、咖啡酸（caffeic acid）、丹參素（tanshinol）、多糖和揮發(fā)油等物質(zhì)[11]。研究表明，鷓鴣茶提取物具有抗糖尿病、抗氧化、抗肥胖及抗炎等作用[12]，具有較高的藥用價(jià)值及食用價(jià)值。

目前鷓鴣茶的研究主要集中于其化學(xué)成分、藥理研究、資源分布、產(chǎn)品開發(fā)等方面[13-20]?！吨袊?guó)藥典》及地方藥材關(guān)于鷓鴣茶藥材標(biāo)準(zhǔn)尚未收錄。因此，為明確鷓鴣茶藥材質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)海南地方習(xí)用藥材鷓鴣茶的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究，為鷓鴣茶藥材的市場(chǎng)流通、臨床應(yīng)用及其深度開發(fā)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試材本試驗(yàn)用的10批次鷓鴣茶藥材樣品分別采自海南省的瓊中黎族苗族自治縣、白沙黎族自治縣、陵水黎族自治縣、萬(wàn)寧市等地，均為野生種，詳細(xì)信息見表1。

表1 十批鷓鴣茶藥材樣品及來(lái)源

鷓鴣茶對(duì)照藥材，于2021年12月01日來(lái)自海南省萬(wàn)寧市興隆，除去雜質(zhì)，曬干而得。原植物經(jīng)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所海南分所吳明松研究實(shí)習(xí)員鑒定為大戟科（Euphorbiaceae）野桐屬（Mallotus）植物山苦茶（Mallotus furetianus），憑證（臘葉）標(biāo)本保存于海南省中藥標(biāo)本館（?？谑兴幑人穆?號(hào)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所海南分所內(nèi)），批號(hào)為ZGC20211201WNXL1。鷓鴣茶基原植物和藥材如圖1。

圖1 鷓鴣茶基原植物及藥材

1.1.2 儀器與試劑儀器：CLPSE 80i 生物顯微鏡（日本尼康株式會(huì)社）、UV2450紫外可見分光光度計(jì)（日本島津制作所）、SX-G021-3馬弗爐（天津中環(huán)電爐股份有限公司）。

試劑：超純水、FAA固定液、二甲苯、中性樹膠、磷酸二氫鉀、戊二醛、水合氯醛、乙酸乙酯、石油醚、甲醇（均為國(guó)產(chǎn)分析純）。

1.2 方法

1.2.1 性狀檢定參照《中國(guó)藥典》[21]2020年版四部的性狀檢定方法，對(duì)10批鷓鴣茶藥材的性狀特征、表面色澤、質(zhì)地及氣味進(jìn)行檢定和描述。

1.2.2 鑒別

1.2.2.1顯微鑒別參照《中國(guó)藥典》[21]2020 年版四部的顯微鑒別法，將10批鷓鴣茶藥材粉碎，過(guò)四號(hào)篩；挑取少許粉末置載玻片上，滴加水合氯醛試液進(jìn)行透化，加蓋玻片，于生物顯微鏡下觀察鷓鴣茶藥材粉末的顯微結(jié)構(gòu)特征。

1.2.2.2薄層鑒別取鷓鴣茶粉末0.5，加20 mL甲醇，加熱，冷凝回流1 h，放冷，過(guò)濾并蒸干濾液，殘?jiān)? mL甲醇溶解，即得供試品溶液。另取鷓鴣茶對(duì)照藥材粉末0.5 g，根據(jù)上述方法制成對(duì)照品溶液。本試驗(yàn)采用的薄層色譜法參照《中國(guó)藥典》[21]2020年版四部通則0502試驗(yàn)。具體步驟：吸取供試品及對(duì)照品溶液各5 μL，分別點(diǎn)在同一硅膠G薄層板上，于乙酸乙酯-石油醚（1∶2）配制的展開劑中展開，取出晾干后，噴灑5%磷鉬酸乙醇，105 ℃加熱至斑點(diǎn)清晰，置日光下檢視。

1.2.3 水分、總灰分、浸出物的測(cè)定鷓鴣茶藥材的水分參照《中國(guó)藥典》[21]2020 年版四部通則0832項(xiàng)下的烘干法進(jìn)行測(cè)定；鷓鴣茶藥材的總灰分參照《中國(guó)藥典》[21]2020 年版四部通則2302項(xiàng)下的總灰分測(cè)定法進(jìn)行測(cè)定；鷓鴣茶藥材的浸出物參照《中國(guó)藥典》[21]2020年版四部通則2201項(xiàng)下水性浸出物熱浸法進(jìn)行測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

2.1 性狀

本品多呈不規(guī)整卷曲狀。完整者展平后呈卵形或長(zhǎng)圓狀卵形，長(zhǎng)4~9 cm，寬3~6 cm；上面淡綠色至黃綠色，下面淡灰綠色至淡黃綠色，先端漸尖，基部楔形，全緣，基出脈3條，主脈凸起于背面，側(cè)脈沿邊緣整齊網(wǎng)結(jié)；革質(zhì)，質(zhì)脆易碎；甘辛，香溫。

2.2 鑒別

2.2.1 顯微鑒別鷓鴣茶葉的橫切見圖2：上表皮細(xì)胞類方形，外被角質(zhì)層；下表皮可見非腺毛，多分布于葉脈表面。葉肉組織分化明顯，柵欄組織1列，主脈維管束外韌型，韌皮部窄。

圖2 鷓鴣茶葉橫切解剖面

鷓鴣茶粉末顯微鑒別見圖3：本品粉末呈黃綠色。下表皮細(xì)胞垂周壁稍彎曲，氣孔平軸式，氣孔下陷，副衛(wèi)細(xì)胞2個(gè)，非腺毛、星狀毛多見，星狀毛可有2~5分支，導(dǎo)管為螺紋導(dǎo)管和環(huán)紋導(dǎo)管，可見簇晶、小方晶。

圖3 鷓鴣茶粉末顯微鑒別

2.2.2 薄層鑒別將采用顯色劑顯色后的薄層板置于日光燈下直接檢視，除對(duì)照編號(hào)8外，其余9批鷓鴣茶供試品的薄層色譜中，在與鷓鴣茶對(duì)照藥材（編號(hào)8）色譜相應(yīng)的位置上，均顯示相同顏色的斑點(diǎn)，如圖4。

圖4 十批鷓鴣茶藥材的薄層色譜圖

2.3 水分、總灰分、浸出物的測(cè)定

10批鷓鴣茶樣品的水分、總灰分、浸出物測(cè)定結(jié)果見表2。10批鷓鴣茶的水分平均值為11.39%，其中采自白沙黎族自治縣牙叉鎮(zhèn)的鷓鴣茶水分最高（15.46%），采自瓊中黎族苗族自治縣的水分最低（8.84%）。10批鷓鴣茶的總灰分平均值為10.64%，其中采自瓊中黎族苗族自治縣的鷓鴣茶總灰分最高（11.71%），采自白沙黎族自治縣牙叉鎮(zhèn)的總灰分最低（8.01%）。10批鷓鴣茶的水溶性浸出物平均值為22.64%，其中采自瓊中黎族苗族自治縣的鷓鴣茶水溶性浸出物最高（26.20%），采自白沙黎族自治縣牙叉鎮(zhèn)的最低（21.28%）。

表2 10批鷓鴣茶藥材的水分、總灰分及浸出物值(n=3) 單位：%

3 討論

3.1 鷓鴣茶藥材的水分、總灰分及浸出物檢查項(xiàng)限值的確定

對(duì)來(lái)自海南4個(gè)市縣的10批鷓鴣茶樣品的水分、總灰度及浸出物含量進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示，10批鷓鴣茶藥材的水分為8.84%~15.64%，將10批鷓鴣茶的水分平均值乘以120%得13.66%，因此，擬規(guī)定鷓鴣茶藥材的水分不得超過(guò)15.0%。10批鷓鴣茶藥材的總灰分為 8.01%~ 11.71%，將10批鷓鴣茶的總灰分平均值乘以120%得12.76%，因此，擬規(guī)定鷓鴣茶藥材的總灰分不得超過(guò)13.0%。10批鷓鴣茶藥材的水性浸出物為21.28%~26.20%，將10批鷓鴣茶藥材的浸出物平均值乘以80%得18.11%，因此，擬規(guī)定鷓鴣茶藥材的水溶性浸出物不得少于18.0%。此外，鷓鴣茶樣品中的成分通過(guò)薄層鑒別法可以很好分離，提取方法簡(jiǎn)單、快捷，斑點(diǎn)清晰明顯，所用試劑普及，易于操作，準(zhǔn)確可靠，可作為鷓鴣茶藥材質(zhì)量控制的依據(jù)。

3.2 鷓鴣茶藥理作用及指標(biāo)成分

鷓鴣茶有明顯鎮(zhèn)痛作用，但較鹽酸嗎啡弱[16]。動(dòng)物試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，鷓鴣茶能顯著提高小鼠抗疲勞的能力[22]，且對(duì)大鼠膽囊肌條具有劑量依賴的收縮作用，可促進(jìn)大鼠膽汁分泌[23]。臨床研究表明，鷓鴣茶能明顯減輕非酒精性脂肪肝患者肝臟脂肪沉積和肝纖維化程度、改善肝功能，從而有效防治非酒精性脂肪肝[24]。茶多酚是鷓鴣茶提取物中重要的活性成分，是強(qiáng)抗氧化劑[25]，具有止渴提神、延緩衰老、抗腫瘤作用，且對(duì)微生物具有較強(qiáng)的抑制作用[26]。但目前對(duì)于鷓鴣茶多酚物質(zhì)種類及含量測(cè)定的研究較少，對(duì)于是否將鷓鴣茶多酚含量測(cè)定錄入標(biāo)準(zhǔn)制定，還需更多研究。

3.3 鷓鴣茶藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立為其質(zhì)控及監(jiān)管提供依據(jù)

鷓鴣茶是我國(guó)海南地區(qū)具有濃郁地方特色的茶種，以其獨(dú)特的香氣及解油膩、助消化、清熱解暑等功效廣受民眾歡迎[27]。過(guò)去的研究大多圍繞鷓鴣茶飲品開發(fā)展開[28]，馮禮明等[29]制定的《鷓鴣茶》食品安全地方標(biāo)準(zhǔn)，極大地規(guī)范了鷓鴣茶食品市場(chǎng)。近年來(lái)的研究主要聚焦于鷓鴣茶藥理活性及其藥物研發(fā)，鷓鴣茶利膽、保護(hù)血管、抗菌、抗炎、抗病毒、抗氧化等作用已被證實(shí)[30-32]。事實(shí)上，以鷓鴣茶為原料制成的利膽劑早已上市[33]，而目前鷓鴣茶作為藥材無(wú)統(tǒng)一質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，阻礙了鷓鴣茶藥材的市場(chǎng)流通。本研究對(duì)海南地方習(xí)用藥材鷓鴣茶藥材的性狀、顯微特征結(jié)構(gòu)、薄層色譜、水分、總灰分、浸出物等質(zhì)量指標(biāo)進(jìn)行研究，并制定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)確保海南地方習(xí)用藥材鷓鴣茶的市場(chǎng)流通、臨床用藥安全及其作為制劑原料的安全性、有效性和穩(wěn)定性具有一定的意義。