茶多酚聯(lián)合鹽酸米諾環(huán)素對(duì)牙周炎患者牙周指標(biāo)及齦溝液炎癥因子的影響*

馮輝， 陳一， 呂宗凱， 岳秋菊

(川北醫(yī)學(xué)院第二臨床醫(yī)學(xué)院 & 南充市中心醫(yī)院 口腔科， 四川 南充 637000)

牙周炎是臨床常見(jiàn)的牙周支持組織慢性炎癥性疾病，常由于牙齦炎未得到及時(shí)治療所致[1-2]。牙周炎的病理過(guò)程較復(fù)雜，目前尚未完全被闡釋，但可以明確的是厭氧菌在該病的發(fā)生、發(fā)展中起著關(guān)鍵的作用[3]。鹽酸米諾環(huán)素為一種新型廣譜抗生素，因滲透性好、脂溶性高的特點(diǎn)被用于牙周炎的治療，該藥局部用藥可變硬形成薄膜，其中一部分薄膜可與硬組織螯合之后緩慢釋放以維持局部的高濃度[4]。雖然鹽酸米諾環(huán)素抑菌作用較強(qiáng)，但其緩解炎癥反應(yīng)的效果有限，牙周炎患者局部炎癥反應(yīng)劇烈而容易出現(xiàn)局部腫脹、出血及疼痛等表現(xiàn)，因此改善局部炎癥反應(yīng)也是治療該病的目標(biāo)之一[5]。茶多酚為茶葉中的主要活性成分，有研究證實(shí)其有較強(qiáng)的抗炎、抗氧化作用[6]，但關(guān)于茶多酚聯(lián)合鹽酸米諾環(huán)素治療牙周炎的研究較少。本研究通過(guò)分析茶多酚聯(lián)合鹽酸米諾環(huán)素治療牙周炎治療效果，初探其作用機(jī)制，現(xiàn)將結(jié)果匯報(bào)如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2019年2月—2021年1月就診的牙周炎患者，要求符合輕中度牙周炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]，近3個(gè)月內(nèi)未使用過(guò)抗菌藥物或非甾體內(nèi)消炎藥，神志清醒、可配合進(jìn)行相關(guān)治療且獲患者知情同意，排除對(duì)治療藥物過(guò)敏者、合并有高血壓和糖尿病等系統(tǒng)疾病者、合并有其他部位感染者、孕婦和哺乳期婦女、接受過(guò)牙周治療者、有吸煙史及曾接受過(guò)牙周系統(tǒng)治療者。共納入牙周炎患者94例，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對(duì)照組，各47例，2組患者一般資料見(jiàn)表1。本研究已獲醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過(guò)(201914)。

1.2 治療方法

入院后2組牙周炎患者均常規(guī)給予齦上潔治、齦下刮治及控制菌斑等治療，并指導(dǎo)患者進(jìn)行正確刷牙，對(duì)照組牙周炎患者在此基礎(chǔ)上加以鹽酸米諾環(huán)素(日本Sunstar INC公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20100244)治療，患牙周圍齦上菌斑清除干凈后以生理鹽水沖洗、吹干，于探診深度≥3 mm的牙周袋內(nèi)注入鹽酸米諾環(huán)素軟膏直至注滿，1次/周；提醒患者注意用藥后30 min內(nèi)禁飲，不可漱口，用藥1 h后再漱口；觀察組牙周炎患者在對(duì)照組基礎(chǔ)上加以茶多酚治療，在鹽酸米諾環(huán)素給藥第2天使用0.4%茶多酚(廣東億超生物科技有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)G2130769)沖洗，10～15 mL/次，1次/周，以不損傷牙周組織為度。2組牙周炎患者連續(xù)治療8周后進(jìn)行療效評(píng)價(jià)，治療由2名具5年以上臨床經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)師完成。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1療效評(píng)價(jià) 參考文獻(xiàn)[8]方法評(píng)價(jià)2組牙周炎患者治療后療效，規(guī)定：顯效為疼痛、腫脹等牙周炎典型表現(xiàn)消失，牙周袋深度減少>2 mm，牙齦指數(shù)下降>1/2；有效為牙周炎典型表現(xiàn)有所緩解，牙周袋深度減少為>1～2 mm，牙齦指數(shù)下降為>1/3～1/2；無(wú)效為治療后癥狀未見(jiàn)改善甚至加重；顯效和無(wú)效合計(jì)為總有效[總有效率=(顯效例數(shù)+有效例數(shù))/總例數(shù)×100%]。

1.3.2牙周指標(biāo) 收集治療前及治療結(jié)束時(shí)2組牙周炎患者牙周指標(biāo)，包括探診深度、菌斑指數(shù)及探診出血指數(shù)。(1)采用鈍頭牙周探針?lè)謩e于舌側(cè)及頰側(cè)的近中、遠(yuǎn)、中4個(gè)區(qū)域進(jìn)行探診，記錄探診深度；(2)采用牙菌斑指示劑染色患者牙面，以染色情況進(jìn)行菌斑指數(shù)評(píng)價(jià)，規(guī)定牙面未出現(xiàn)明顯菌斑為0分，牙頸部牙齦邊緣有輕度染色為1分，牙頸部染色呈帶狀分布、寬度≤1 mm，牙菌斑分布寬度≥1 mm、但尚未達(dá)牙冠1/3為3分，牙菌斑面積占牙面的1/3～2/3為4分，菌斑面積超過(guò)牙面的2/3為5分；(3)采用探診法進(jìn)行齦溝出血指數(shù)評(píng)價(jià)，定義牙齦無(wú)紅腫等炎癥表現(xiàn)、探針輕觸牙齦后不出血為0分，齦緣及齦乳頭有輕度的紅腫等炎癥表現(xiàn)、探針輕探不出血為1分，牙齦出現(xiàn)顏色改變但未見(jiàn)有水腫、探診后可見(jiàn)有點(diǎn)狀出血為2分，牙齦有明顯的顏色改變并有輕度水腫的表現(xiàn)、探診后明顯出血且血溢于齦溝內(nèi)為3分，牙齦顏色變化明顯、探診出血且血液溢出齦溝為4分，牙齦出現(xiàn)明顯的顏色改變及腫脹、部分有潰瘍并伴有自動(dòng)出血為5分[9-11]。

1.3.3齦溝液炎癥因子 治療前及治療結(jié)束時(shí)以氣槍(廣州順源醫(yī)療科技有限公司)吹干2組牙周炎患者患牙牙面和周圍牙齦組織，于患者上、下頜兩側(cè)各選擇2個(gè)位點(diǎn)，以35號(hào)吸潮紙尖端插入患牙遠(yuǎn)中頰面齦溝至有阻力時(shí)停止，靜置30 s后取出，合并8個(gè)位點(diǎn)收集樣本后以離心提取法回收齦溝液，采用7180型全自動(dòng)生化分析儀(日本日立公司)對(duì)齦溝液中C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)、腫瘤壞死因子α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)及白細(xì)胞介素6(interleukin 6,IL-6)進(jìn)行檢測(cè)。

1.3.4不良反應(yīng)發(fā)生情況 收集治療期間2組牙周炎患者不良反應(yīng)發(fā)生情況，包括牙齦腫痛、皮疹、惡心嘔吐等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 一般資料

2組牙周炎患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，表1)，提示2組患者一般資料具可比性。

表1 對(duì)照組與觀察組牙周炎患者的一般資料比較Tab.1 Comparison of general data between control and observation

2.2 臨床療效

觀察組牙周炎患者總有效率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，表2)。

表2 對(duì)照組與觀察組牙周炎患者的療效[n(%)]Tab.2 Therapeutic efficacies of control and observation groups[n(%)]

2.3 牙周指標(biāo)

2組牙周炎患者治療結(jié)束后探診深度>4 mm位點(diǎn)占比、菌斑指數(shù)及探診出血指數(shù)均較治療前降低，且觀察組小于對(duì)照組，觀察組治療前后差值大于對(duì)照組(P<0.05或P<0.01，表3)。

表3 對(duì)照組與觀察組牙周炎患者的牙周指標(biāo)Tab.3 Periodontal indexes of control and observation

2.4 齦溝液中的炎癥因子水平

炎癥因子檢測(cè)結(jié)果顯示，治療結(jié)束后2組牙周炎患者齦溝液中CRP、TNF-α及IL-6水平均下降，且觀察組均低于對(duì)照組、治療前后差值觀察組更大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。見(jiàn)表4。

表4 對(duì)照組與觀察組牙周炎患者齦溝液中炎癥因子的水平Tab.4 Levels of inflammatory factors in gingival crevicular fluids between control and observation

2.5 不良反應(yīng)

對(duì)照組牙周炎患者治療期間出現(xiàn)不良反應(yīng)2例(4.26%，牙齦腫痛1例、皮疹1例)，觀察組出現(xiàn)不良反應(yīng)3例(6.38%，惡心嘔吐2例、牙齦腫痛1例)，2組牙周炎患者不良反應(yīng)檢出率比較、差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.211，P=0.646)。

3 討論

牙周炎為牙科常見(jiàn)病，主要是因菌斑微生物引起的牙周組織破壞性疾病，隨著病情的進(jìn)展可致牙槽嵴出現(xiàn)廢用性萎縮或吸收，使其高度、寬度及密度下降，最終引起患牙的松動(dòng)或脫落[12-13]。據(jù)調(diào)查，牙周炎致成人失牙的發(fā)生率遠(yuǎn)高于齲齒，該病已成為國(guó)內(nèi)成年人喪失牙齒的主要原因[14]。牙周炎不僅可對(duì)口腔健康造成嚴(yán)重的影響，該病的發(fā)生還與冠心病等心血管疾病的發(fā)生有密切的關(guān)系，因此研究牙周病的治療方法具有重要的意義。

鹽酸米諾環(huán)素軟膏是氨基烷基異丁烯酸共聚物、鹽酸二甲胺四環(huán)素及羥己基纖維素等組合而成，局部應(yīng)用可通過(guò)抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成而抑菌[15]。此外，鹽酸米諾環(huán)素局部使用后與水接觸可形成薄膜，該薄膜可與局部硬組織螯合而緩慢釋放，在一定時(shí)間內(nèi)維持較高的藥物濃度，降低給藥的頻率[16]。眾所周知，牙周袋的形成是牙周炎的重要病理改變之一，牙周袋內(nèi)存在有牙石、菌斑、脫落的上皮及白細(xì)胞等，白細(xì)胞壞死后可形成膿液，牙周袋壁組織在上述物質(zhì)刺激下可出現(xiàn)紅腫、出血等炎癥反應(yīng)，因此對(duì)于牙周炎的治療除局部使用藥物外還需進(jìn)行齦下刮治等物理治療[17]。

為加強(qiáng)對(duì)局部炎癥的控制，本研究在上述治療的基礎(chǔ)上加以茶多酚治療，結(jié)果顯示觀察組牙周炎患者總有效率高于對(duì)照組，觀察組牙周炎患者探診深度、菌斑指數(shù)及探診出血指數(shù)改善均優(yōu)于對(duì)照組，這可能與茶多酚具有較強(qiáng)的抗炎及抑制牙菌斑形成作用有關(guān)。茶多酚為茶葉中提取的多酚類物質(zhì)，研究顯示茶多酚可通過(guò)促進(jìn)牙周組織的修復(fù)而減輕炎癥對(duì)牙周膜的破壞，同時(shí)茶多酚可通過(guò)抑制成骨細(xì)胞中核因子κB受體活化因子配體 (receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)及IL-6 mRNA的表達(dá)而保護(hù)牙周組織[18]。關(guān)于茶多酚抑制牙菌斑形成目前認(rèn)為主要與以下幾方面因素有關(guān)[19-20]：(1)茶多酚可抑制葡萄糖基轉(zhuǎn)移膜的活性而影響葡聚糖形成，抑制細(xì)菌粘附；(2)茶多酚可與細(xì)菌表面脂磷壁酸起反應(yīng)而使細(xì)菌凝集，與其他抗菌藥物共同作用時(shí)可增強(qiáng)細(xì)菌清除作用；(3)茶多酚可與酚基及富脯蛋白形成氫鍵而抑制放線菌、變異鏈球菌等獲得性膜的形成；(4)茶多酚還可通過(guò)阻斷細(xì)胞糖蛋白樣聚葡萄糖結(jié)合位點(diǎn)而達(dá)到抑制葡聚糖誘導(dǎo)的細(xì)菌聚集及粘附作用。通過(guò)上述機(jī)制茶多酚可有效抑制細(xì)菌粘附，減少牙菌斑形成，降低牙菌斑指數(shù)。

進(jìn)一步對(duì)2組患者炎癥因子比較結(jié)果顯示，觀察組牙周炎患者治療后CRP、TNF-α及IL-6水平改善均優(yōu)于對(duì)照組，這可能與茶多酚抗炎作用較強(qiáng)有關(guān)，關(guān)于茶多酚降低炎癥細(xì)胞因子的水平可能與其可通過(guò)對(duì)以下炎癥信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路進(jìn)行調(diào)節(jié)有關(guān)[21-22]：(1)茶多酚可通過(guò)抑制核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)抑制其蛋白(inhibitor of NF-κB,IκB)的磷酸化而抑制NF-κB的激活，減少炎癥因子的產(chǎn)生；(2)茶多酚還可通過(guò)阻斷p38絲裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)、激活蛋白1(activator protein-1,AP-1)及NF-κB通路的活化而抑制蛋白激酶的磷酸化，起到抑制或緩解炎癥的作用；(3)茶多酚可抑制Toll樣受體下游髓樣分化因子(myeloid differentiation factor88,MyD88)及干擾素誘導(dǎo)型含TIR結(jié)構(gòu)域的接頭分子(TIR domain-containing adaptor inducing interferon-β,TRIF)通路的活化而抑制炎癥基因的表達(dá)；(4)茶多酚的抗炎作用還與其可有效清除體內(nèi)活性氧，抑制活性氧中間物的產(chǎn)生，減輕氧化損傷有關(guān)。

綜上所述，與單獨(dú)使用鹽酸米諾環(huán)素比較，茶多酚聯(lián)合鹽酸米諾較可提高牙周炎患者臨床療效，改善牙周指標(biāo)，降低齦溝液炎癥因子水平且不增加不良反應(yīng)發(fā)生率。