陳見(jiàn)春
(益陽(yáng)市赫山區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,湖南益陽(yáng) 41300)
近些年,植物提取物作為替代抗生素的理想產(chǎn)品,在動(dòng)物養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用逐漸增多[1-2]。其中,大蒜素(ALLITRIDE,二烯丙基硫代亞磺酸酯或二烯丙基二硫醚C6H10S2O)是一種替抗效果較為理想的產(chǎn)品[3]。大蒜素具有安全、高效、綠色、無(wú)毒、低殘留、無(wú)耐藥性的特點(diǎn),廣泛地在畜禽生產(chǎn)中得到應(yīng)用[4-5]。大蒜素作為飼料添加劑添加在畜禽日糧中,可以起到抑菌、殺菌、調(diào)節(jié)免疫、增強(qiáng)抗氧化性能、提高生產(chǎn)性能、改善肉品質(zhì)等作用[6-7]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),大蒜素在巴馬小型豬生產(chǎn)中應(yīng)用,可以提高其生長(zhǎng)性能及免疫力,并能降低腹瀉率[8]。在蛋雞養(yǎng)殖生產(chǎn)中,使用適量的大蒜素可以提高蛋雞機(jī)體禽流感和新城疫抗體效價(jià),提高血清中免疫球蛋白含量[9]。肉雞養(yǎng)殖生產(chǎn)中使用適量的大蒜素可以提高其血清中免疫球蛋白A和免疫球蛋白G含量[10]。但目前,大蒜素在水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中的研究應(yīng)用并不多,尤其是在鯉(Cyprinuscarpio)機(jī)體方面的研究鮮有報(bào)道。鯉作為中國(guó)主要的水產(chǎn)養(yǎng)殖品種之一,養(yǎng)殖量大、適應(yīng)強(qiáng)、生長(zhǎng)快速、肉質(zhì)營(yíng)養(yǎng)豐富,研究大蒜素對(duì)其機(jī)體免疫力的影響尤為重要,尤其是在集約化養(yǎng)殖條件下,鯉易發(fā)生免疫低下、疾病頻發(fā)的狀況。因此,該試驗(yàn)研究不同水平的大蒜素對(duì)鯉機(jī)體免疫指標(biāo)的影響,并確定大蒜素的最適添加量,為大蒜素在鯉養(yǎng)殖生產(chǎn)中的高效利用提供參考。
大蒜素由商丘華康動(dòng)物藥業(yè)有限公司提供,其有效含量大于30%,無(wú)霉變、干燥、棕褐色產(chǎn)品。鯉購(gòu)自湖南益陽(yáng)市赫山區(qū)東湖漁場(chǎng)。
試驗(yàn)選擇600尾健康無(wú)病、體重相近(約5g)的鯉隨機(jī)分成4個(gè)處理組,每組150尾。各組分別飼喂添加含有0mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg大蒜素的試驗(yàn)餌料。試驗(yàn)周期為56d。試驗(yàn)結(jié)束,采集各組鯉血液,檢測(cè)各組血清中免疫指標(biāo)。試驗(yàn)鯉的基礎(chǔ)餌料配方見(jiàn)表1。
表1 試驗(yàn)鯉的基礎(chǔ)餌料配方
養(yǎng)殖過(guò)程中,試驗(yàn)的水溫約為23.5℃,pH值約為7.5,溶解氧大于5.5 mg/L,亞硝酸鹽低于0.12mg/L。每隔3d換水1次,每次換水量約為1/3。每隔3d對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境及試驗(yàn)水消毒1次。試驗(yàn)鯉每天飼喂2次,分別在8:30時(shí)和17:30時(shí)進(jìn)行,餌料的投喂量約為試驗(yàn)鯉體重的3%。
試驗(yàn)56d的最后1d,試驗(yàn)鯉禁止投喂12hrs后,每組選取15尾采集血液。試驗(yàn)鯉麻醉后,進(jìn)行采血,使用離心機(jī)離心,收集上層血清用于檢測(cè)免疫球蛋白M、白細(xì)胞介素-6、腫瘤壞死因子-α及補(bǔ)體含量。嚴(yán)格按照試劑盒(南京建成生物工程研究所)的說(shuō)明書進(jìn)行。
試驗(yàn)鯉的血清免疫指標(biāo)采用SPSS26進(jìn)行相關(guān)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析與處理,P<0.05表示數(shù)據(jù)具有顯著性差異。
不同水平的大蒜素對(duì)試驗(yàn)鯉機(jī)體免疫指標(biāo)的影響見(jiàn)表2。由表2數(shù)據(jù)可知,和對(duì)照組比較,在鯉的養(yǎng)殖生產(chǎn)中使用100mg/kg和200mg/kg的大蒜素可以顯著提高血清中免疫球蛋白M的水平(P<0.05),添加50mg/kg的大蒜素鯉魚血清免疫球蛋白M水平略有提高,但差異不顯(P>0.05);添加100mg/kg的大蒜素可以顯著降低鯉的血清中白細(xì)胞介素-6水平(P<0.05),而50mg/kg和200mg/kg的大蒜素對(duì)白細(xì)胞介素-6的影響未達(dá)到顯著性影響(P>0.05);大蒜素對(duì)鯉的血清中腫瘤壞死因子-α及補(bǔ)體水平為產(chǎn)生顯著性的影響(P>0.05)。
表2 不同水平的大蒜素對(duì)試驗(yàn)鯉魚機(jī)體免疫指標(biāo)的影響
機(jī)體血清中的免疫球蛋白M水平可以反映機(jī)體體液免疫功能的強(qiáng)弱,免疫球蛋白M可以抑制細(xì)菌、降低炎癥;血清的中促炎因子(白細(xì)胞介素-6和腫瘤壞死因子-α)水平升高代表機(jī)體出現(xiàn)炎癥,不利于機(jī)體的健康。該試驗(yàn)中,在鯉養(yǎng)殖中使用適量的大蒜素可以明顯地降低白細(xì)胞介素-6水平,提高免疫球蛋白M水平,表明大蒜素增強(qiáng)了鯉機(jī)體的體液免疫功能及細(xì)胞免疫功能,且大蒜素的最適添加水平為100mg/kg??凳珂耓11]研究發(fā)現(xiàn),在鯽的養(yǎng)殖生產(chǎn)中使用250mg/kg的大蒜素可以顯著提高鯽血清中補(bǔ)體C3的含量,過(guò)高水平的大蒜素則會(huì)抑制補(bǔ)體水平。宋文華[12]研究表明,在草魚生產(chǎn)中使用0.4%和0.8%的大蒜素可以提高草魚血清中補(bǔ)體C3水平,且提高了白細(xì)胞吞噬能力。以上研究結(jié)果均表明,在水產(chǎn)動(dòng)物養(yǎng)殖中使用適量的大蒜素可以機(jī)體的免疫功能,不同指標(biāo)的改善效果略有不同,可能與試驗(yàn)魚的品種及大蒜素的有效含量及添加水平不同有關(guān),但整體趨勢(shì)一致。大蒜素提高魚類機(jī)體免疫功能與其具有的抗菌、殺菌、抑菌功能有關(guān),通過(guò)抑制細(xì)菌在機(jī)體的繁殖生長(zhǎng),保證機(jī)體的免疫力不受影響。
該試驗(yàn)的研究結(jié)果表明,在鯉的養(yǎng)殖生產(chǎn)使用適量的大蒜素可以提高血清中免疫球蛋白M水平,降低促炎因子白細(xì)胞介素-6水平,且大蒜素的最適添加水平為100mg/kg。