血清閉鎖蛋白和閉鎖小帶蛋白1表達(dá)與老年急性腦梗死患者認(rèn)知功能障礙的相關(guān)性

王景 董坤 陳海云 楊青蘭 (三亞中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，海南 三亞 572000)

急性腦梗死是由腦組織內(nèi)部缺血而引起的神經(jīng)功能障礙性疾病，多發(fā)于老年人，發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)，發(fā)病突然、進(jìn)展迅速、致殘致死率高，若未及時(shí)治療，往往可引發(fā)認(rèn)知功能障礙、偏癱等并發(fā)癥〔1～3〕。因此，及時(shí)對(duì)老年急性腦梗死患者認(rèn)知功能進(jìn)行有效評(píng)估對(duì)該病的治療及預(yù)后改善具有重大的指導(dǎo)意義。炎癥與急性腦梗死的發(fā)生密切相關(guān)，臨床上常通過檢測(cè)炎性因子監(jiān)測(cè)病情〔4,5〕。閉鎖蛋白(occludin)、閉鎖小帶蛋白(ZO)-1與細(xì)胞間緊密連接有關(guān)，在大多疾病的炎性反應(yīng)及免疫反應(yīng)中起重要作用，且與血管內(nèi)皮功能關(guān)系密切〔6,7〕。但關(guān)于血清occludin、ZO-1與老年急性腦梗死患者認(rèn)知功能障礙關(guān)系的研究鮮見報(bào)道。故本研究通過檢測(cè)老年急性腦梗死患者血清occludin、ZO-1水平，并初步探討其與認(rèn)知功能的相互關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年7月至2020年10月三亞中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科就診的老年急性腦梗死患者70例(觀察組)，平均腦梗死面積(4.1±0.4)cm2，腦梗死部位額葉27例，顳葉24例，其他位置19例，年齡60～73歲，平均(67.20±4.52)歲，其中男36例，女34例，平均心率(92.35±4.56)次/min，平均動(dòng)脈壓(97.54±4.82)mmHg，平均體重指數(shù)(21.85±2.35)kg/m2。另選取同期三亞中心醫(yī)院健康體檢者70例(對(duì)照組)，其中男39例，女31例，年齡60～72歲，平均(66.13±4.10)歲，平均心率(77.32±3.94)次/min，平均動(dòng)脈壓(85.67±4.96)mmHg，平均體重指數(shù)(22.17±2.42)kg/m2。急性腦梗死后認(rèn)知功能障礙：參照2006年美國(guó)國(guó)立神經(jīng)疾病和腦卒中研究所-加拿大腦卒中網(wǎng)(NINDS-CSN)〔8〕建立的關(guān)于血管源性認(rèn)知功能障礙的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者均符合《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南2018》〔9〕中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。②臨床資料完整。③發(fā)病48 h內(nèi)入院。排除標(biāo)準(zhǔn)：①急性腦梗死發(fā)病前即存在認(rèn)知功能障礙患者。②合并嚴(yán)重心理障礙、語(yǔ)言功能障礙、軀體疾病患者。③合并嚴(yán)重心、肝、腎等器官或內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病患者。④合并其他影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病或腦外傷史患者。⑤合并顱內(nèi)出血或有出血傾向患者。⑥合并血液系統(tǒng)疾病患者?；颊呒捌浼覍僦橥?，并簽署同意書。本研究經(jīng)三亞中心醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過。兩組年齡、性別及平均體重指數(shù)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。觀察組平均動(dòng)脈壓、平均心率明顯高于對(duì)照組(P<0.001)。

1.2血清occludin、ZO-1水平檢測(cè) 所有研究對(duì)象采集靜脈血5 ml，2 500 r/min離心10 min，取上層血清，-80℃保存。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清occludin、ZO-1水平，實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照occludin ELISA試劑盒(批號(hào)：JL19530-48T，上海江萊生物科技有限公司)、ZO-1 ELISA試劑盒(批號(hào)：ml058798，上海酶聯(lián)生物科技有限公司)說明書進(jìn)行。

1.3認(rèn)知功能障礙評(píng)估 研究對(duì)象均于發(fā)病48 h內(nèi)進(jìn)行認(rèn)知功能障礙評(píng)估。神經(jīng)功能缺損情況采用美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院腦卒中量表(NIHSS)評(píng)估，分值越高，神經(jīng)功能損傷越嚴(yán)重〔10〕。認(rèn)知功能障礙情況采用蒙特利爾認(rèn)知評(píng)價(jià)(MoCA)量表評(píng)估，總分30分，26分及以上為正常〔11〕。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)、Pearson相關(guān)分析，采用受試者工作特征(ROC)曲線分析血清occludin和ZO-1對(duì)老年急性腦梗死的診斷價(jià)值，采用Logistic回歸進(jìn)行影響因素分析。

2 結(jié) 果

2.1觀察組與對(duì)照組血清occludin、ZO-1水平比較 觀察組血清occludin、ZO-1水平明顯低于對(duì)照組(P<0.05)。見表1。

2.2觀察組與對(duì)照組NIHSS評(píng)分、MoCA評(píng)分比較 觀察組NIHSS評(píng)分明顯高于對(duì)照組，MoCA評(píng)分明顯低于對(duì)照組(P<0.05)。見表1。

表1 觀察組與對(duì)照組血清occludin、ZO-1、NIHSS評(píng)分、MoCA評(píng)分水平比較

2.3老年急性腦梗死患者血清occludin、ZO-1水平與NIHSS評(píng)分和MoCA評(píng)分的相關(guān)性 老年急性腦梗死患者血清occludin水平與NIHSS評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.594，P<0.001)，與MoCA評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.556，P<0.001)；血清ZO-1與NIHSS評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.560，P<0.001)，與MoCA評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.551,P<0.001)。

2.4血清occludin和ZO-1對(duì)老年急性腦梗死的診斷價(jià)值 血清occludin診斷老年急性腦梗死的曲線下面積為0.885(95%CI：0.824～0.945，P<0.001)，截?cái)嘀禐?1.152 ng/ml，敏感度為92.9%，特異度為77.1%。血清ZO-1診斷老年急性腦梗死的曲線下面積為0.666(95%CI：0.574～0.758，P<0.001)，截?cái)嘀禐?3.670 ng/ml，敏感度為81.4%，特異度為55.7%。血清occludin、ZO-1聯(lián)合診斷老年急性腦梗死的曲線下面積為0.928(95%CI：0.885～0.970，P<0.001)，敏感度為90.0%，特異性為84.3%。見圖 1。

圖1 血清occludin和ZO-1對(duì)老年急性腦梗死的診斷價(jià)值

2.5影響老年急性腦梗死患者認(rèn)知功能障礙的Logistic回歸分析 以血清occludin和ZO-1均值為

界限，分為高表達(dá)和低表達(dá)，以血清occludin和ZO-1表達(dá)水平為自變量，以老年急性腦梗死患者是否發(fā)生認(rèn)知功能障礙為因變量，進(jìn)行Logistic回歸分析，經(jīng)校正混雜因素后結(jié)果顯示，血清occludin和ZO-1低表達(dá)均為影響老年急性腦梗死患者認(rèn)知功能障礙的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表2。

表2 影響老年急性腦梗死患者認(rèn)知功能障礙的Logistic回歸分析

3 討 論

腦梗死多發(fā)于老年群體，致病原因復(fù)雜。急性腦梗死是多種外界、自身因素共同作用的結(jié)果，發(fā)病率、病死率、致殘率均較高，且隨著疾病的進(jìn)展，會(huì)引起一定程度的神經(jīng)功能損傷和認(rèn)知功能減退，患者預(yù)后差，極大地降低了生活質(zhì)量〔12，13〕。劉琦等〔14〕研究指出，與健康者比較，老年急性腦梗死患者NHISS評(píng)分明顯升高、MoCA評(píng)分明顯降低，患者認(rèn)知功能障礙程度較高。本研究結(jié)果提示老年急性腦梗死患者可能存在較嚴(yán)重的認(rèn)知功能障礙。

炎性反應(yīng)與急性腦梗死后繼發(fā)神經(jīng)損傷密切相關(guān)，炎性因子水平表現(xiàn)為明顯的升高趨勢(shì)，在認(rèn)知功能障礙發(fā)生及發(fā)展中發(fā)揮重要作用〔15,16〕。occludin、ZO-1均是緊密連接蛋白的主要成分。occludin能夠參與機(jī)體內(nèi)的炎性反應(yīng)和免疫反應(yīng)。ZO-1在調(diào)節(jié)細(xì)胞物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、細(xì)胞增殖分化等過程中發(fā)揮重要作用〔17,18〕。吳晌犢〔19〕研究表明，潰瘍性結(jié)腸炎患者血清occludin和ZO-1水平明顯降低，在該疾病的炎性反應(yīng)及免疫反應(yīng)中起重要作用。緊密連接是由跨膜蛋白、外周膜蛋白和細(xì)胞骨架蛋白等多種蛋白組成的復(fù)合體，構(gòu)成環(huán)繞細(xì)胞的線狀結(jié)構(gòu)，維持緊密連接的結(jié)構(gòu)和功能。緊密連接具有復(fù)雜架構(gòu)的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)，是形成血液與大腦之間血腦屏障的主要結(jié)構(gòu)成分〔20〕。occludin可調(diào)控緊密連接的通透性、維持細(xì)胞極性，表達(dá)于各種細(xì)胞和組織中，且表達(dá)量較其他血管內(nèi)皮細(xì)胞明顯升高，并具有調(diào)節(jié)血腦屏障功能的作用〔21〕。ZO-1表達(dá)于各種組織和細(xì)胞中，主要作用是維持細(xì)胞組織的連接性，與其同源異構(gòu)體ZO-2、ZO-3一起維持和調(diào)節(jié)上皮屏障功能，與血腦屏障損傷有著較為密切的關(guān)系，可作為血腦屏障破壞的標(biāo)志性蛋白〔22，23〕。相關(guān)研究指出，occludin、ZO-1相互作用有助于緊密連接屏障的調(diào)節(jié)，能夠調(diào)節(jié)血腦屏障的通透性，且二者表達(dá)量多少與血管的通透性增加與否密切相關(guān)〔24〕。

本研究結(jié)果表明血清occludin、ZO-1可能通過在機(jī)體炎性反應(yīng)和免疫反應(yīng)中發(fā)揮作用，進(jìn)而參與老年急性腦梗死的發(fā)病機(jī)制，并發(fā)揮其調(diào)節(jié)血腦屏障功能的作用，在老年急性腦梗死繼發(fā)認(rèn)知功能障礙的過程中承擔(dān)重要角色。本研究ROC曲線分析結(jié)果表明血清occludin、ZO-1水平對(duì)老年急性腦梗死具有一定的診斷價(jià)值，能夠在一定程度上提示該疾病的發(fā)生。二者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)老年急性腦梗死的診斷價(jià)值更高。本研究Pearson相關(guān)分析結(jié)果表明血清occludin、ZO-1水平變化與老年急性腦梗死患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙存在一定相關(guān)性，其水平降低提示老年急性腦梗死患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的風(fēng)險(xiǎn)較大，二者可能作為老年急性腦梗死診斷和評(píng)估認(rèn)知功能障礙的輔助指標(biāo)。本研究經(jīng)校正混雜因素后，Logistic回歸分析結(jié)果也進(jìn)一步說明血清occludin和ZO-1表達(dá)水平與老年急性腦梗死患者認(rèn)知功能障礙密切相關(guān)。