FeNO、Eos、IgE對(duì)肺炎支原體感染伴發(fā)氣道高反應(yīng)患兒的臨床意義研究

梁建國(guó) 于?；?付紅娟 王小良 于瑞龍

（1.壽光市人民醫(yī)院兒科，山東 濰坊，262700；2.濰坊市婦幼保健院兒科，山東 濰坊，261000）

肺炎支原體（MP）是引發(fā)兒童呼吸道感染的一種主要病原體，其發(fā)病率僅次于病毒和細(xì)菌[1]。MP 感染后可導(dǎo)致MP肺炎的發(fā)生，同時(shí)還可導(dǎo)致下呼吸道感染相關(guān)疾?。ㄈ缰夤芟獾栏叻磻?yīng)性、氣道重塑、可逆性氣流阻塞是支氣管哮喘的病理生理特征。年齡較小的嬰幼兒在相關(guān)因素的刺激下，會(huì)出現(xiàn)胸悶、喘息、咳嗽等癥狀[2]。哮喘發(fā)生后，如無(wú)法及時(shí)有效地控制患兒癥狀，其機(jī)體正常生長(zhǎng)發(fā)育、運(yùn)動(dòng)功能等會(huì)受到不同程度影響，降低總體生活質(zhì)量。臨床研究數(shù)據(jù)表明，6～14 歲兒童支氣管哮喘發(fā)生率可高達(dá)3.4%，性別方面，與女性相比，男性的發(fā)病率更高，且與學(xué)齡期兒童相比，學(xué)齡前期兒童的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)更高[3]。近年來(lái)，臨床研究及報(bào)道結(jié)果均表明，MP 感染與兒童氣道高反應(yīng)、下呼吸道感染疾?。ǚ窝住⒅夤苎椎龋┑陌l(fā)生均存在相關(guān)性。本研究觀察MP 感染伴發(fā)氣道高反應(yīng)患兒呼出氣一氧化氮（FeNO）、血清免疫球蛋白 E（IgE）水平、外周血嗜酸性粒細(xì)胞（Eos）計(jì)數(shù)，探討這些指標(biāo)與MP 感染導(dǎo)致氣道高反應(yīng)的相關(guān)性，為早期預(yù)測(cè)與臨床干預(yù)治療提供依據(jù)，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021年3月～2022年3月在壽光市人民醫(yī)院診治的40 例MP 感染伴氣道高反應(yīng)性患兒作為Ⅰ組，選擇相同時(shí)間段在壽光市人民醫(yī)院診治的40 例MP 感染患兒作為Ⅱ組，選擇相同時(shí)間段在壽光市人民醫(yī)院接受健康體檢的40 名兒童作為Ⅲ組。三組研究對(duì)象的年齡、性別、體質(zhì)量、身高等資料對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），三組具備可比性。見(jiàn)表1。本研究在獲得壽光市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批基礎(chǔ)上實(shí)施，符合2013年修訂的《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)赫爾辛基宣言》要求。所有研究對(duì)象的監(jiān)護(hù)人對(duì)研究?jī)?nèi)容知情并且同意，并已簽署知情同意書(shū)。

表1 三組研究對(duì)象相關(guān)基礎(chǔ)資料比較 [（±s）/n（%）]

表1 三組研究對(duì)象相關(guān)基礎(chǔ)資料比較 [（±s）/n（%）]

組別例數(shù)性別（例）年齡（歲）體質(zhì)量（kg）身高（cm）男/女范圍均值范圍均值范圍均值Ⅰ組4017/233～75.14±1.1016～2519.53±2.5296～124118.37±2.84Ⅱ組4019/213～75.16±1.1215～2419.38±2.4295～126117.84±3.69Ⅲ組4021/193～75.18±1.1016～2619.48±2.8496～127118.15±2.74 χ2/t0.8020.0850.3410.159 P 0.6700.8020.7470.726

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)（第8 版）》[4]中MP 感染相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)：有明顯頭痛、發(fā)熱、咳嗽、喘鳴等癥狀和體征；血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示MP-IgM≥1 ∶160，或者急性期雙份血清特異性抗體的升高程度超過(guò)4 倍；②Ⅰ組同時(shí)符合《呼吸內(nèi)科學(xué)》[5]中氣道高反應(yīng)性診斷標(biāo)準(zhǔn)，表現(xiàn)出不同程度呼吸困難、咳嗽等癥狀，且肺部聽(tīng)診聞及哮鳴音；③具備良好依從性和相關(guān)檢查配合度。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)過(guò)相關(guān)臨床檢查明確診斷存在變應(yīng)性鼻炎等變應(yīng)性疾病患兒；②伴有自身免疫性疾病（Th2 免疫反應(yīng)、川崎病、濕疹等）患兒；③存在慢性活動(dòng)性肺部疾病（持續(xù)肺功能低下、肺結(jié)核等）患兒；④最近2 周內(nèi)用過(guò)支氣管擴(kuò)張劑、糖皮質(zhì)激素患兒；⑤伴有認(rèn)知障礙及精神性疾病患兒。

1.3 方法

檢查前準(zhǔn)備：檢查實(shí)施前，護(hù)理人員主要通過(guò)查閱病歷、與家屬溝通、詢(xún)問(wèn)等方式全面了解納入研究對(duì)象的相關(guān)基本信息，同時(shí)做好詳細(xì)記錄。護(hù)理人員仔細(xì)登記納入研究對(duì)象的年齡、性別、疾病史、癥狀、過(guò)敏史、病程等相關(guān)基礎(chǔ)資料。所有監(jiān)護(hù)人均自愿同意患兒接受FeNO 檢測(cè)以及Eos、IgE 檢測(cè)。相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)實(shí)施前先給家屬、年齡較大患兒簡(jiǎn)單講解檢查技術(shù)知識(shí)、基本操作流程、接受檢查過(guò)程中需要配合事項(xiàng)、檢查前后相關(guān)注意事項(xiàng)等。同時(shí)給予患兒心理疏導(dǎo)。護(hù)理人員以受檢者相關(guān)情緒狀況、年齡等為根據(jù)，選擇適當(dāng)?shù)恼Z(yǔ)言及表達(dá)方式開(kāi)展心理干預(yù)，給予情緒安撫，幫助其緩解負(fù)性情緒，保證其能夠良好配合相關(guān)檢查，避免檢查結(jié)果受到影響。檢查實(shí)施過(guò)程中詳細(xì)記錄相關(guān)測(cè)定數(shù)據(jù)。

檢查操作：采集受檢者清晨空腹?fàn)顟B(tài)下的外周靜脈血3 mL 作為待測(cè)樣本。完成相關(guān)檢測(cè)前將樣本處理后再行血常規(guī)檢測(cè)。測(cè)定應(yīng)用儀器為全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（生產(chǎn)企業(yè)：中山市創(chuàng)藝生化工程有限公司生產(chǎn)，型號(hào)：CYB-5200）。參照常規(guī)方法檢測(cè)外周靜脈血中所含Eos。同時(shí)采集外周靜脈血外送化驗(yàn)IgE 抗體，通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）進(jìn)行檢測(cè)。

FeNO 具體檢測(cè)方法如下：在患兒入院當(dāng)日實(shí)施FeNO 檢測(cè)。告知患兒監(jiān)護(hù)人患兒接受測(cè)定前4 h 避免劇烈運(yùn)動(dòng)，同時(shí)忌食菠菜、動(dòng)物內(nèi)臟等含氮高食物，檢測(cè)實(shí)施前2 h 禁飲可樂(lè)等刺激性飲料。通過(guò)電化學(xué)方法，采用納庫(kù)侖電量傳感器進(jìn)行FeNO 檢測(cè)，計(jì)量單位為 ppb?；純罕３肿?，放松身心狀態(tài)，正常深吸氣，一次性細(xì)菌、一氧化氮過(guò)濾器含于患兒口中，測(cè)定應(yīng)用工具為呼出氣NO，并測(cè)定深吸氣達(dá)肺總量，不屏氣，然后呼出肺內(nèi)氣體的流速保持在50 mL/s，使呼出氣具有穩(wěn)定性的平臺(tái)期，持續(xù)時(shí)間為10 s 左右，記錄測(cè)定結(jié)果。

外周血Eos、IgE 具體檢測(cè)方法如下：采集患兒5 mL 的靜脈血，將3 mL 血樣本放入EDTA－K2 真空負(fù)壓抗凝管，然后通過(guò)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（生產(chǎn)企業(yè)：Mindray 公司，型號(hào)：2000 型），同時(shí)應(yīng)用到該儀器配套的試劑盒進(jìn)行Eos 測(cè)定。將2 mL 血樣本送至檢驗(yàn)中心，進(jìn)行離心，取上清液，全自動(dòng)熒光酶免分析儀（生產(chǎn)企業(yè)：瑞典Phadia 公司，型號(hào)：1000 型）及該儀器配套試劑盒測(cè)定IgE 水平。指標(biāo)測(cè)定期間相關(guān)流程和操作均嚴(yán)格按照儀器、試劑盒規(guī)范實(shí)施。

1.4 觀察指標(biāo)

①觀察并比較三組FeNO 數(shù)值及血清IgE、Eos 計(jì)數(shù)測(cè)定結(jié)果。②觀察并比較MP 抗體高滴度、低滴度患兒FeNO數(shù)值以及血清IgE、外周血Eos 情況。單次血清抗體滴度≥1 ∶160 判定為高滴度，反之判定為低滴度。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

將收集到的資料錄入數(shù)據(jù)庫(kù)，采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料均先進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，以（±s）描述符合正態(tài)分布的計(jì)量資料，兩組間比較采用t 檢驗(yàn)，多組數(shù)據(jù)比較行方差分析；計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組FeNO 數(shù)值、血清IgE、外周血Eos 比較

Ⅲ組的FeNO 數(shù)值、血清IgE、外周血Eos 相比Ⅱ組、Ⅰ組均明顯更低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），Ⅱ組的FeNO數(shù)值、血清IgE、外周血Eos 比Ⅰ組明顯更低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

表2 三組FeNO 數(shù)值、血清IgE、外周血Eos 比較 （±s）

表2 三組FeNO 數(shù)值、血清IgE、外周血Eos 比較 （±s）

注：與Ⅲ組比較，aP<0.05；與Ⅱ組比較，bP<0.05。

組別 例數(shù) FeNO 數(shù)值（ppb）血清IgE（KU/L） 外周血Eos（×106/L）Ⅰ組4035.86±7.73ab350.57±47.73ab524.63±32.53abⅡ組4032.89±3.63a208.83±37.59a515.50±31.49aⅢ組4023.53±2.7292.96±20.63208.84±20.63 F 28.63649.37045.708 P<0.001<0.001<0.001

2.2 MP 抗體高滴度組、低滴度組各項(xiàng)指標(biāo)比較

IgE 抗體化驗(yàn)結(jié)果顯示，在Ⅰ組、Ⅱ組患兒中，MP 抗體低滴度患兒共有48 例，MP 抗體高滴度患兒共有32 例。比較結(jié)果顯示，MP 抗體高滴度組患兒的FeNO 數(shù)值及血清IgE 水平、外周血Eos 相比MP 抗體低滴度組患兒明顯更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表3。

表3 不同MP 抗體滴度組患兒各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果比較 （±s）

表3 不同MP 抗體滴度組患兒各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果比較 （±s）

組別例數(shù)FeNO 數(shù)值（ppb）外周血Eos（%）MP 抗體低滴度組4832.08±4.08 242.80±35.66 5.86±1.16 MP 抗體高滴度組3236.08±7.92 347.94±38.70 6.49±1.42 t 2.63012.2782.087 P 0.010<0.0010.040血清IgE（KU/L）

3 討論

MP 感染可導(dǎo)致下呼吸道發(fā)生感染，進(jìn)而損傷氣道黏膜屏障，導(dǎo)致過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生，使血清IgE 水平出現(xiàn)異常升高。IgE具有δ 鏈的特殊結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致其能親近同種細(xì)胞抗體，是參與鼻炎、哮喘等的主要抗體，且可激活Eos[6-7]。Eos 被過(guò)多激活后會(huì)沉積于氣道上皮內(nèi)部，嗜酸性粒堿性蛋白、陽(yáng)離子蛋白等炎癥因子的釋放可導(dǎo)致氣道上皮細(xì)胞遭受損傷，進(jìn)而提高炎癥因子水平，引發(fā)哮喘[8]。小兒支氣管哮喘與Eos 趨化因子表達(dá)的研究顯示，哮喘患兒的主要特點(diǎn)之一表現(xiàn)為Eos 浸潤(rùn)，并能釋放炎癥介質(zhì)，引發(fā)氣道高反應(yīng)，且該項(xiàng)指標(biāo)水平越高，哮喘越嚴(yán)重[9]。IgE 介導(dǎo)的非特異性炎癥反應(yīng)是兒童氣道高反應(yīng)性發(fā)生、下呼吸道感染可逆性氣道狹窄發(fā)生的主要病理基礎(chǔ)[10]。

FeNO 是氣道高反應(yīng)性發(fā)生早期評(píng)估和診斷的指標(biāo)[11-12]。FeNO 能夠誘發(fā)氣道高反應(yīng)可能與氣道炎癥存在聯(lián)系[13-14]。Tian J 等[15]針對(duì)5～6 歲支氣管哮喘患兒展開(kāi)研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)eNO 在氣道高反應(yīng)性反應(yīng)方面表現(xiàn)出良好敏感性，其數(shù)值越高提示氣道高反應(yīng)性越嚴(yán)重。IgE 屬于一種T 細(xì)胞調(diào)節(jié)下的免疫球蛋白，主要由B 細(xì)胞生成，引發(fā)呼吸道黏膜水腫，同時(shí)炎性介質(zhì)相關(guān)趨化因子能夠使氣道內(nèi)聚集大量的Eos，進(jìn)而使氣道出現(xiàn)炎癥反應(yīng)。Eos 計(jì)數(shù)屬于一項(xiàng)可敏感反映氣道高反應(yīng)性的指標(biāo)。過(guò)敏原Th2 細(xì)胞與MP 相互接觸后能夠?qū)е卵仔苑磻?yīng)被激活，刺激Eos 的分泌顯著增加，加快其浸潤(rùn)速度，因此外周血的Eos 計(jì)數(shù)會(huì)表現(xiàn)出顯著性升高，最終引發(fā)氣道高反應(yīng)性。本研究分別對(duì)健康兒童、MP 感染患兒、MP 感染伴氣道高反應(yīng)性患兒進(jìn)行FeNO 數(shù)值、血清IgE 水平、外周血Eos 測(cè)定，并做對(duì)比分析發(fā)現(xiàn)，MP 感染、MP 感染伴氣道高反應(yīng)性患兒的FeNO、Eos、IgE 相比健康兒童均明顯更高，同時(shí)MP 感染同時(shí)出現(xiàn)氣道高反應(yīng)性患兒的三項(xiàng)指標(biāo)相比MP感染患兒更高，MP 抗體高滴度組患兒三項(xiàng)指標(biāo)水平相比MP抗體低滴度組患兒均更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。從以上結(jié)果可知，MP 感染發(fā)生后，患兒FeNO 數(shù)值、血清IgE 水平、外周血Eos 計(jì)數(shù)均顯著增高。本研究通過(guò)分析FeNO 數(shù)值、血清IgE 水平、外周血Eos 在MP 感染引起氣道高反應(yīng)性的評(píng)估價(jià)值，為此類(lèi)疾病的評(píng)估和診斷提供了更加理想的方法，F(xiàn)eNO 數(shù)值、血清IgE 水平、Eos 計(jì)數(shù)三項(xiàng)指標(biāo)較易進(jìn)行檢測(cè)，因此可操作性較高。本研究對(duì)MP 感染所致氣道高反應(yīng)性及哮喘發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及疾病分級(jí)評(píng)估可能具有重要意義。MP 感染可通過(guò)血清IgE 誘發(fā)機(jī)體自身非特異性炎癥反應(yīng)，因此能夠?yàn)榛純簯?yīng)用糖皮質(zhì)激素吸入治療提供可靠參考依據(jù)。FeNO 數(shù)值、血清IgE 水平及Eos 計(jì)數(shù)均能夠作為MP 感染者氣道高反應(yīng)性的判定的有效預(yù)測(cè)指標(biāo)，通過(guò)行上述相關(guān)指標(biāo)水平測(cè)定能夠篩查出高危者，對(duì)疾病早期診斷、治療方案制訂均具有重要意義。

綜上所述，MP 感染伴發(fā)氣道高反應(yīng)發(fā)生后患兒的FeNO數(shù)值、血清IgE 水平、外周血EOS 會(huì)表現(xiàn)出顯著升高，且MP抗體滴度水平越高，各指標(biāo)升高程度越大。由此可推斷，F(xiàn)eNO 數(shù)值、血清IgE 水平、外周血EOS 測(cè)定在此類(lèi)疾病高危人群篩查中應(yīng)用具有一定價(jià)值，有望進(jìn)一步提高疾病早期篩查和診斷準(zhǔn)確率。