臨沂市奶山羊鮮精人工授精技術(shù)應(yīng)用

劉利祥

山東省臨沂市莒南縣畜牧發(fā)展促進(jìn)中心，山東臨沂 276600

0 引言

山東省作為北方主要的奶山羊產(chǎn)業(yè)帶，具有較好的產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢和集群效應(yīng)，而臨沂市地處魯東南地區(qū)，是淮海經(jīng)濟(jì)區(qū)四市之一的農(nóng)業(yè)大市，擁有豐富的農(nóng)業(yè)及養(yǎng)殖資源，具有較好的光熱及水土條件，適合發(fā)展畜牧養(yǎng)殖業(yè)[1]。臨沂地屬沂蒙山區(qū)，農(nóng)作物秸稈較多，且多年以前就是山羊飼養(yǎng)大區(qū)，但當(dāng)?shù)厣窖蚨酁榈彤a(chǎn)普通山羊，生長緩慢且養(yǎng)殖效益低下。為了促進(jìn)奶山羊養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，近年來引進(jìn)了關(guān)中奶山羊和薩能奶山羊等優(yōu)質(zhì)品種來改善當(dāng)?shù)氐哪躺窖蚱贩N，在增加農(nóng)民受益的同時(shí)，科學(xué)利用臨沂地區(qū)的秸稈廢棄物作為飼料，減少焚燒而帶來的大氣污染，從而達(dá)到生態(tài)環(huán)保及綠色循環(huán)利用[2]。

近年來，臨沂市開始大力發(fā)展奶山羊養(yǎng)殖業(yè)，而保證臨沂奶山羊的良種繁育則成了發(fā)展產(chǎn)業(yè)重要的一環(huán)，只有保證奶山羊品種的優(yōu)良特性，才能促進(jìn)臨沂奶山羊產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展和穩(wěn)步前進(jìn)。人工授精技術(shù)作為近代養(yǎng)殖畜牧業(yè)的一項(xiàng)重要技術(shù)，目前已被廣泛運(yùn)用于各種家畜的繁殖中，通過人工輔助授精后，不僅能夠有效提高奶山羊的繁殖速率，還能夠提高優(yōu)質(zhì)公山羊的利用率，有助于提高羊群的品種質(zhì)量[3]。人工授精技術(shù)主要通過陰道內(nèi)輸精、子宮頸口輸精、子宮體內(nèi)輸精和腹腔鏡等方式，通常情況下，鮮精或者液態(tài)狀況下保存的精液大多通過陰道或者子宮頸口授精，而經(jīng)過冷凍保存后解凍的精子則需要加大授精量并在子宮體內(nèi)授精或者腹腔鏡人工授精，避免由于精子解凍后活性不足而導(dǎo)致授精失敗[4]。所以，選擇合適的授精方式有利于提高成功率，但也要注意精子質(zhì)量的選擇和稀釋保存的正確操作，避免精子失活。因此，提高對人工授精技術(shù)過程的了解，對實(shí)現(xiàn)奶山羊養(yǎng)殖業(yè)高效生產(chǎn)具有重要意義。

1 奶山羊的養(yǎng)殖現(xiàn)狀及繁殖特性

山羊奶具有較高的營養(yǎng)價(jià)值，其脂肪含量低，蛋白質(zhì)含量高，具有豐富的酪蛋白和低聚糖，對提高免疫力、改善腸道健康、防止動(dòng)脈粥樣硬化及降低血壓方面有著良好作用，是優(yōu)質(zhì)的乳類資源。隨著奶羊養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，截至2018年，我國奶羊的養(yǎng)殖數(shù)量達(dá)到了900 萬只，產(chǎn)奶量達(dá)到了200 萬t，具有較大的市場前景[5]。在奶山羊的生長過程中，性成熟和體成熟并不同步，當(dāng)性成熟時(shí)，機(jī)體的發(fā)育尚未完善，此時(shí)不適合配種，否則會(huì)影響各個(gè)器官臟器的發(fā)育，所以通常在10～12月齡，體重＞30 kg時(shí)方可進(jìn)行配種。奶山羊一年四季皆可發(fā)情，且發(fā)情頻率較高，發(fā)情周期為24 d左右，發(fā)情持續(xù)期為1～2 d，懷孕后，奶山羊的妊娠大約在150 d，還要根據(jù)預(yù)產(chǎn)期提前做好接產(chǎn)工作[6]。目前國內(nèi)大多數(shù)養(yǎng)殖戶在給奶山羊配種時(shí)通常選擇8～10月，此時(shí)奶山羊配種后分娩的幼羊體重大，存活率高，生長發(fā)育速度快，若結(jié)合人工授精技術(shù)，1 頭公羊可配種50～80 頭母羊，大大提高了配種效率。

2 人工授精的相關(guān)保障機(jī)制

為了更好地推動(dòng)臨沂市奶山羊人工授精的應(yīng)用推廣，除了需要相關(guān)經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員及專家的支撐以外，還應(yīng)當(dāng)建立相應(yīng)的山羊人工授精站，覆蓋到全市的相關(guān)養(yǎng)殖點(diǎn)。人工授精站點(diǎn)應(yīng)當(dāng)具備相應(yīng)的建設(shè)及配套設(shè)施，如種公羊圈舍、待配種母羊圈舍、精液采集室、精液檢測室、輸精室等相關(guān)房舍，同時(shí)配備顯微鏡、冰箱、采精器、干燥箱及保溫消毒設(shè)備等器材，以做好消毒滅菌工作，避免疾病傳播；同時(shí)，還應(yīng)展開人工授精相關(guān)技術(shù)培訓(xùn)，規(guī)范授精過程中的精液采集、檢測、輸精及配種登記相關(guān)技術(shù)操作要點(diǎn)，全面提高奶山羊人工授精技術(shù)人員的專業(yè)水平；制定相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，匯總奶山羊的優(yōu)質(zhì)精液信息，經(jīng)與人工授精站確認(rèn)后可進(jìn)行精液的精準(zhǔn)運(yùn)輸，總體協(xié)調(diào)規(guī)劃，達(dá)到高效分配的作用。

3 人工授精技術(shù)的具體操作及技術(shù)要點(diǎn)

母羊的生殖結(jié)構(gòu)相對復(fù)雜，其陰道長達(dá)7 cm，并且有頸環(huán)結(jié)構(gòu)阻止精液的正常進(jìn)入，從而使精子無法順利到達(dá)輸卵管的壺腹部。鮮精或者液態(tài)臨時(shí)保存的精子活性較高，可通過屏障而順利授精，凍精的活性較低，需要加大劑量，但會(huì)造成成本的增加。臨沂市地區(qū)交通便利，配套運(yùn)輸設(shè)備完善，因此建議選擇活精進(jìn)行人工授精。

3.1 促進(jìn)母羊的同期發(fā)情

母羊個(gè)體不同，發(fā)情期也存在差異，而在羊的生產(chǎn)過程中，通常會(huì)使用外源激素改變母羊的生殖生理周期，使其群體在同一時(shí)期發(fā)情，方便授精的統(tǒng)一操作[7]。通常采用孕酮陰道海綿栓、孕馬血清促性腺激素和前列腺素進(jìn)行復(fù)配使用，不僅經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，且實(shí)用價(jià)值較高，但要注意定時(shí)定量的多次注射，才能夠穩(wěn)定發(fā)揮作用[5]。此外，其他調(diào)節(jié)發(fā)情期的方法也被延伸出，如在采用陰道栓和孕馬血清促性腺激素的基礎(chǔ)上，和促卵泡激素、促黃體素或者褪黑激素等外源激素復(fù)配，劑量上的選擇要根據(jù)環(huán)境條件及母羊體質(zhì)的不同進(jìn)行選擇，從而促使母羊群體的發(fā)情期一致，在相同的時(shí)間排卵。

3.2 精液采集的前期準(zhǔn)備

首先，要選擇優(yōu)質(zhì)的種公羊，進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)教和準(zhǔn)備工作。在采精前，可每天按摩或者溫水擦洗種公羊的睪丸1 次，每次10～15 min，增強(qiáng)精子的分泌能力；保持公羊具有較強(qiáng)的性欲，每天采精次數(shù)保持在1～2 次，每連續(xù)采精3 d后需休息1 d，或者1 次/d，連續(xù)5 d后休息1 d，增加采精量，提高種羊的利用效率；采精前還應(yīng)用溫水將種公羊的陰莖包皮擦洗干凈，同時(shí)將多余的毛發(fā)剪短，避免精子污染。其次，提前將使用的器械和相關(guān)操作室進(jìn)行消毒處理；提前將假陰道、采精杯、開膣器、鑷子、輸精管等器械用75%乙醇溶液消毒，再用生理鹽水沖洗后備用；在采精前后，操作室可噴灑高錳酸鉀溶液（1%）進(jìn)行消毒處理，室內(nèi)溫度控制在（21±3）℃即可；可選擇無病且處于發(fā)情期的母羊作為臺(tái)羊，因?yàn)榧倥_(tái)羊或者未發(fā)情的母羊會(huì)降低種公羊的性欲，為后續(xù)操作增加難度。第三，假陰道的安裝工作，安裝完成后要檢查內(nèi)部是否有損壞或漏洞，將內(nèi)胎安置后，要保證不出現(xiàn)褶皺，松緊度合適，光滑面干凈；裝好后先用75%乙醇溶液進(jìn)行消毒，再用生理鹽水清洗，裝上集精瓶，調(diào)節(jié)好閥鈕后用凡士林（滅菌處理）涂抹在內(nèi)胎的1/3處，從注水口注入50～55 ℃的溫水150 mL，再從活塞處吹入氣體至口部內(nèi)胎呈三角形裂隙即可，使假陰道內(nèi)的溫度保持在40～42 ℃最佳[6]。

3.3 精液的采集及檢查

將臺(tái)羊固定后，將種公羊牽至臺(tái)羊旁，當(dāng)公羊爬向臺(tái)羊身上時(shí)，迅速將假陰道靠近臺(tái)羊的臀部，使其角度與臺(tái)羊陰道角度相同，用手引導(dǎo)陰莖迅速進(jìn)入到假陰道中，當(dāng)公羊出現(xiàn)前沖動(dòng)作時(shí)，代表射精結(jié)束，此時(shí)豎起采精瓶并送到檢測室檢測。首先可通過肉眼觀測精液的色澤、氣味和數(shù)量，正常的精液呈顯乳白色或者乳酪色的混合液，肉眼可見精子呈現(xiàn)云霧狀翻動(dòng)，氣味無味或者略帶腥味，若精液帶有腐臭味或呈現(xiàn)其余顏色，則不能用于后續(xù)授精；其次，可在37 ℃下利用顯微鏡對精子的活性進(jìn)行檢測，活性＞0.8時(shí)配種效果最佳；同時(shí)對精子的密度進(jìn)行檢測，當(dāng)在600倍數(shù)的顯微鏡下，精子填滿整個(gè)視野，且精子的間隙不足1 個(gè)精子的長度時(shí)為最佳。

3.4 精液的稀釋及保存

為了達(dá)到精子的最大化利用，通常需將精子進(jìn)行稀釋后保存使用，稀釋液通常采用0.9%的生理鹽水、乳汁稀釋液或者葡萄糖卵黃稀釋液。當(dāng)取精后馬上使用時(shí)，可用0.9%的生理鹽水進(jìn)行稀釋，且稀釋倍數(shù)要＜2倍；當(dāng)需保存6～8 h時(shí)，可采用乳汁稀釋液，將新鮮的牛乳或者羊乳脫脂后過濾高溫消毒，冷卻至30 ℃左右時(shí)，用中間位置的乳液作為稀釋液，避免上層和底部的乳液存在污染，稀釋倍數(shù)在2～4倍即可；而葡萄糖卵黃稀釋液有增加營養(yǎng)的作用，主要操作為在100 mL的蒸餾水中加入3 g的葡萄糖和1.4 g的檸檬酸鈉，過濾后高溫消毒，冷卻后加入新鮮的卵黃和青霉素，此方法可作7倍以下的稀釋使用，稀釋后的精液可在2～4 ℃的恒溫箱中保存2～3 d。

3.5 授精

授精前要確認(rèn)母羊處于發(fā)情期，判斷的標(biāo)準(zhǔn)為精神亢奮、鳴叫不停，外陰紅腫且流出濃稠黏液，將陰道張開后可觀察到陰道潮紅，子宮頸口張開且分泌有透明液體，且公羊會(huì)主動(dòng)以臀部靠近，此時(shí)可判斷為處于發(fā)情狀態(tài)[8]。

授精時(shí)要提前將發(fā)情母羊的外陰部消毒，并用生理鹽水沖洗干凈，將母羊保持前身低后身高的姿勢，用經(jīng)生理鹽水處理后的開膣器順著陰部方向插入到陰道的深部，感覺接觸到子宮頸部后，稍微拉出一點(diǎn)并90°扭轉(zhuǎn)開開膣器，當(dāng)找到子宮頸口后，將輸精器的前端慢慢插入子宮頸0.5～1.0 cm處后，將精液緩慢推入，輸精完成后等待母羊的子宮頸口收縮再將羊緩慢放下，對于個(gè)別陰道狹窄無法伸開膣器的母羊，可使用雙倍的精子量在陰道處進(jìn)行授精。

4 人工授精存在的的誤區(qū)

4.1 種羊個(gè)體精液的差異

種公羊的個(gè)體不同，其精液的質(zhì)量也存在差異，在相同的保存條件下，精液活性的保存時(shí)間也不相同。某些機(jī)體強(qiáng)壯種公羊的精子經(jīng)稀釋后，可在38 ℃存活48 h左右，而相同處理的公羊精子可能只存活24 h，這就要求盡量選用體質(zhì)強(qiáng)健的種公羊，并根據(jù)機(jī)體精子保存時(shí)間的不同而進(jìn)行精確使用，避免長期儲(chǔ)存后精子失活。

4.2 輸精深度、次數(shù)和劑量的認(rèn)知誤區(qū)

有的技術(shù)人員錯(cuò)誤地認(rèn)為，子宮頸口輸精的受精率比陰道輸精高，所以推測輸精時(shí)，越深入越好。但其實(shí)母羊的子宮頸口為波浪狀且為螺旋形管腔，子宮體為梨形管腔，深度只有3 cm左右，當(dāng)輸精器過深時(shí)，容易造成子宮頸口出血而流入子宮腔內(nèi)，血液中的白細(xì)胞對精子具有一定的吞噬作用，從而影響人工授精的成功率，所以使用鮮精授精時(shí)，通常選擇0.5～1.0 cm為最佳深度[9]。

同樣，有部分技術(shù)人員片面地認(rèn)為輸精的次數(shù)和母羊的配種受精率成正比，次數(shù)越多成功率約高。但其實(shí)鮮精在母羊體內(nèi)的存活時(shí)間大約為12 h，輸精的次數(shù)要取決于精子在體內(nèi)的存活時(shí)間，因此鮮精的輸精次數(shù)通常要間隔12 h以上。若在短時(shí)間內(nèi)大量重復(fù)輸精，不僅會(huì)浪費(fèi)精液，還容易造成子宮頸口和生殖器官的破損出血，不僅不利于授精，而且還容易引發(fā)多種疾病。輸精量也并不是越多越好，子宮頸口能夠容納的精液空間不大，輸精過多后會(huì)導(dǎo)致精液流入陰道，造成浪費(fèi)，同時(shí)也有研究證明，過多的輸精劑量與授精成功率影響不大，鮮精不低于20 00 萬個(gè)即可[9]。

4.3 精子的活性認(rèn)知誤區(qū)

精子的活力主要是指在精液中呈直線運(yùn)動(dòng)的精子的數(shù)量所占總精子的比例，雖然說精子活力是影響其受胎率的必要條件，但還受到精子的畸形率和存活時(shí)間的影響。隨著批次的不同，可能這一時(shí)間段精子的活性較好，但下一段時(shí)間就會(huì)成批量死亡，造成精子活力明顯下降，所以需進(jìn)行多種因素的協(xié)同觀察，對精子質(zhì)量進(jìn)行嚴(yán)格把控。

5 注意事項(xiàng)

授精過程中要嚴(yán)格消毒，避免由于環(huán)境污染等原因而導(dǎo)致受胎率下降。相關(guān)器械消毒后，要保持與精液相近的溫度（15～25 ℃），同時(shí)每次輸完1 只母羊后要將器械再次沖洗消毒，避免交叉感染，相關(guān)技術(shù)人員也應(yīng)當(dāng)做好個(gè)人衛(wèi)生，佩戴長臂的手套；合理控制發(fā)情期，對于母羊的外陰部位也要采用清水或者低濃度的高錳酸鉀溶液進(jìn)行消毒處理[10]；注入精液的過程應(yīng)當(dāng)緩慢，注入后也應(yīng)當(dāng)注意避免精液回流，若發(fā)生精液回流現(xiàn)象則需要重新輸精；要注重母羊的健康飼喂，當(dāng)機(jī)體營養(yǎng)不良或者過肥時(shí)，容易導(dǎo)致受胎率下降，因此要控制母羊體重在適宜的范圍內(nèi)，有助于授精成功[11]。

6 總結(jié)

隨著奶山羊養(yǎng)殖體系的不斷完善，奶山羊的數(shù)量也在不斷增多，傳統(tǒng)的自然交配繁殖模式已不適合用于實(shí)際養(yǎng)殖，因此推廣簡單快捷的高效擴(kuò)增技術(shù)十分關(guān)鍵。奶山羊的人工授精技術(shù)不僅能夠提高山羊的受胎率，增強(qiáng)生產(chǎn)效率，還可以帶來較高的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。但是該技術(shù)受到母羊的發(fā)情排卵、采精方式、精子保存、輸精方式、羊機(jī)體狀況和環(huán)境等因素的影響，因此掌握正確的技術(shù)操作，才能促進(jìn)良種奶山羊的繁殖改良。總之，鮮精人工授精技術(shù)的推廣，有助于臨沂地區(qū)優(yōu)良奶山羊品種的迭代，增強(qiáng)種羊的覆蓋面積，促進(jìn)資源的合理分配，提高當(dāng)?shù)啬躺窖蝠B(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益，推動(dòng)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。