• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    杜泊羊連續(xù)超數(shù)排卵間隔時(shí)間對(duì)排卵效果的影響

    2023-01-17 14:19:54徐振朋陳大勇何輝杰仇春娟王秀蓮張澤文
    中國(guó)畜禽種業(yè) 2022年12期
    關(guān)鍵詞:供體肉羊母羊

    付 樂,于 濤,徐振朋,陳大勇,何輝杰,仇春娟,王秀蓮,張澤文

    (1.烏蘭察布市農(nóng)林科學(xué)研究所,內(nèi)蒙古烏蘭察布 012000;2.內(nèi)蒙古賽諾種羊科技有限公司,內(nèi)蒙古烏蘭察布 012000;3.烏蘭察布市畜牧工作站,內(nèi)蒙古烏蘭察布 012000;4.涼城縣六蘇木鎮(zhèn)人民政府,內(nèi)蒙古烏蘭察布 013750)

    內(nèi)蒙古地區(qū)肉羊存欄量、產(chǎn)肉量常年居全國(guó)前列,多年來(lái)形成具有蒙古羊血統(tǒng)的多個(gè)優(yōu)質(zhì)肉羊品種,為了加快利用引進(jìn)品種改良本地品種的生長(zhǎng)速度及產(chǎn)肉性能等性狀,以超數(shù)排卵與胚胎移植技術(shù)(multiple ovulation and embryo transfer,MOET)為核心的現(xiàn)代化生物繁育技術(shù)是一條高效途徑,并已成為擴(kuò)繁良種和保護(hù)瀕危物種的有力輔助技術(shù)[1,2]。其中,超數(shù)排卵是胚胎移植等胚胎生物工程技術(shù)的重要環(huán)節(jié),其目的是通過(guò)對(duì)動(dòng)物注射外源性促性腺激素盡可能地收獲更多胚胎,誘導(dǎo)胚胎移植或者使懷胎數(shù)量達(dá)到最大,提高優(yōu)良母畜的繁殖能力,從而可以在短時(shí)期內(nèi)大幅度地增加優(yōu)良個(gè)體母畜和公畜的后代數(shù)量,迅速擴(kuò)大良種畜群,加速育種和品種改良工作[3,4]。在肉羊胚胎移植中,超數(shù)排卵的效果直接影響肉羊胚胎移植的成敗。影響超排的因素分為動(dòng)物因素和環(huán)境因素,動(dòng)物因素主要包括個(gè)體的遺傳特性(品種)、年齡、生理狀態(tài)、營(yíng)養(yǎng)狀況等,環(huán)境因素則包括外源性激素(質(zhì)量、用量、方案)、季節(jié)、連續(xù)處理的間隔等[5,6]。有研究指出激素制劑中FSH/LH(促卵泡激素/促黃體素)比例、給藥途徑、劑量和頻率等不同,肉羊個(gè)體對(duì)超排處理的反應(yīng)也不同,具體影響程度和變化都需進(jìn)一步研究。因此,在胚胎移植產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)中不斷地摸索與研究各種內(nèi)源因素與外源因素對(duì)胚胎移植效果的影響,發(fā)現(xiàn)不同影響因素對(duì)超數(shù)排卵的作用,進(jìn)而完善改進(jìn)超數(shù)排卵技術(shù)方案,對(duì)提高單只羊的出胚率和胚胎移植效率,降低胚胎生產(chǎn)損失,加速生產(chǎn)性能改良,提高肉羊生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)效益有重要意義。超排過(guò)程中外源激素和手術(shù)等因素的刺激使供體的重復(fù)利用受到了限制,因此,如何減少重復(fù)超排過(guò)程中對(duì)供體的刺激與損傷,提高重復(fù)超排的有效率,最大限度地利用優(yōu)秀供體的繁殖機(jī)能,是做胚胎移植技術(shù)產(chǎn)業(yè)化特別關(guān)注的研究領(lǐng)域,也是行業(yè)今后研究的一個(gè)重點(diǎn)方向。本試驗(yàn)以杜泊綿羊?yàn)檠芯繉?duì)象,初步探索研究連續(xù)超排次數(shù)、重復(fù)超排時(shí)間間隔對(duì)供體母羊排卵效果的影響,為胚胎移植產(chǎn)業(yè)化合理安排生產(chǎn)、降低生產(chǎn)成本并提高效率以及科學(xué)利用引進(jìn)品種肉羊改良本土品種提供參考。

    1 試驗(yàn)材料

    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

    本試驗(yàn)供體羊來(lái)自四子王旗查干補(bǔ)力格蘇木巴音嘎查賽諾種羊場(chǎng)的純種杜泊母羊,年齡1.5 周歲左右,臨床健康,生殖器官無(wú)異常供體母羊60 只,體重均為55~60kg。供體公羊?yàn)楣痉N公羊特一級(jí)純種杜泊。試驗(yàn)于2018 年6 月—2019 年12 月進(jìn)行。

    1.2 試驗(yàn)藥品

    孕酮海綿栓孕酮(CIDR)由新西蘭輝瑞公司生產(chǎn);孕馬血清促性腺激素(PMSG)為內(nèi)蒙古松山獸藥廠生產(chǎn);促卵泡激素(FSH)、氯前列烯醇鈉(PG)為上海計(jì)劃生育生物研究所生產(chǎn);促黃體素(LH)為寧波第一激素廠生產(chǎn);體外培養(yǎng)試劑除特殊標(biāo)注外皆由Sigma 公司生產(chǎn)。

    2 方法

    2.1 試驗(yàn)分組

    本試驗(yàn)供體羊共計(jì)60 只,試驗(yàn)分為3 組,每組20 只,分別為間隔60d 組、間隔90d 組、間隔120d組。分別間隔每60、90、120d 超排一次,連續(xù)超排4次,重復(fù)超排母羊不變,試驗(yàn)過(guò)程中對(duì)輸卵管嚴(yán)重粘連的母羊,下次超排時(shí)剔除不用,讓其自然繁殖。

    2.2 超數(shù)排卵和配種處理方法

    所選擇的供體母羊在同一日早上7:00 放入陰道海綿栓1 枚,同時(shí)配置有潤(rùn)滑劑與土霉素源粉,在放置海綿栓的第10d 晚上7:00 開始超數(shù)排卵(開始放栓第一天為0d),用連續(xù)遞減超排法,超排3d 注射FSH共計(jì)6 次,每天2 次,間隔12h 給藥一次,在注射FSH 第5 次時(shí)去掉海綿栓,用400IU 青霉素混合500mL 生理鹽水,每只羊10mL 沖洗陰道,并同時(shí)注射PG 1mL/只,第13 天試驗(yàn)羊只空腹24h,第14 天上午用試情公羊試情,發(fā)情母羊立即注射LH 280IU/只,并選用配種公羊進(jìn)行配種,采用腹腔鏡輸精法在子宮角處輸精,每只羊0.4mL(兩側(cè)各0.2mL),精液稀釋至2~4 倍。

    2.3 胚胎收集

    在供體羊發(fā)情后36~48h 從輸卵管收集胚胎。手術(shù)前空腹24h,可以少量飲水,供體羊視體重而定,每千克體重肌注0.03~0.05mL 2%靜松靈;局部注射鹽酸利多卡因2.5mL/只。將母羊放到手術(shù)架上仰臥保定。在供體羊離乳房前端約2cm 處,腹中線的兩側(cè)均可,用手術(shù)刀將手術(shù)部位縱向切開6~8cm 長(zhǎng)的刀口,用6~8#頭皮針從子宮輸卵管接合部的子宮端導(dǎo)入到輸卵管峽部,將導(dǎo)卵管從輸卵管喇叭口插入3~4cm,導(dǎo)卵管遠(yuǎn)端與玻璃平皿相接,將5mL 沖胚液緩緩?fù)瞥?,胚胎即通過(guò)輸卵管回收于玻璃平皿中。另一側(cè)操作同上。把盛有沖胚回收液的玻璃皿放在立體顯微鏡下,仔細(xì)檢查,不可遺漏,將檢出的胚胎放入盛有保存液的培養(yǎng)皿中,待移植,沖胚完畢后,在子宮角和輸卵管處涂抹適量的普魯卡因青霉素,用30~35℃的生理鹽水將子宮和卵巢沖洗干凈,將250mL 的甲硝唑灌入腹腔。供、受體母羊創(chuàng)口采用三層縫合法。腹膜、肌肉和皮膚分層縫合。每縫好一層涂抹適量青鏈霉素溶液,以防創(chuàng)口感染。手術(shù)后供體母羊再進(jìn)行輸液加強(qiáng)護(hù)理。

    2.4 飼養(yǎng)管理

    所有的供體母羊及種公羊,全部為放牧+舍飼,每天按照放牧?xí)r間放牧并根據(jù)營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)給足量精補(bǔ)料和苜蓿,提供充足的清潔飲水,防疫、驅(qū)蟲、藥浴每年春秋各進(jìn)行一次。

    2.5 數(shù)據(jù)處理與分析

    所有數(shù)據(jù)使用SPSS 12.0 統(tǒng)計(jì)軟件的t 檢驗(yàn)方法,以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

    3 結(jié)果與分析

    3.1 時(shí)間間隔60d 連續(xù)超排結(jié)果

    當(dāng)供體母羊連續(xù)超排間隔60d 時(shí),隨著超排次數(shù)的增加,處理供體數(shù)量減少,其中第3 次超排淘汰的2 只供體母羊與第4 次超排淘汰的1 只供體母羊,均為輸卵管粘連嚴(yán)重,淘汰出試驗(yàn)組,每次處理供體羊均100%發(fā)情受孕。隨著超排次數(shù)的增加,回收胚胎數(shù)量和可用胚胎數(shù)量呈逐漸下降趨勢(shì),組內(nèi)各次,回收胚胎數(shù)量和可用胚胎數(shù)量相比較下降顯著(P<0.05);受體羊兩側(cè)排卵點(diǎn),隨著超排次數(shù)的增加,呈逐漸下降趨勢(shì),每一次超排后的排卵點(diǎn)與前一次相比較差異顯著(P<0.05)。平均每次每只供體羊能夠出胚胎數(shù)6.1,排卵點(diǎn)為11.23 個(gè)(表1)。

    表1 時(shí)間間隔60d 連續(xù)超排結(jié)果

    3.2 時(shí)間間隔90d 連續(xù)超排結(jié)果

    由表2 可見,當(dāng)供體母羊連續(xù)超排間隔90d 時(shí),隨著超排次數(shù)的增加,處理供體數(shù)量不變,且每次處理供體羊100%發(fā)情受孕。隨著超排次數(shù)的增加,回收胚胎數(shù)量和可用胚胎數(shù)量呈逐漸下降趨勢(shì),組內(nèi)各次,回收胚胎數(shù)量和可用胚胎數(shù)量相比較顯著差異(P<0.05),受體羊兩側(cè)排卵點(diǎn),隨著超排次數(shù)的增加,呈逐漸下降趨勢(shì),經(jīng)顯著性分析,每一次超排后的排卵點(diǎn)與前一次相比較差異顯著(P<0.05)。平均每次每只供體羊能夠出胚胎數(shù)6.7 個(gè),平均每次每只供體羊排卵點(diǎn)為14.56 個(gè)。

    表2 時(shí)間間隔90d 連續(xù)超排結(jié)果

    3.3 時(shí)間間隔120d 連續(xù)超排結(jié)果

    由表3 可見,當(dāng)供體母羊連續(xù)超排間隔120d 時(shí),隨著超排次數(shù)的增加,處理供體數(shù)量不變,且每次處理供體羊100%發(fā)情受孕。數(shù)據(jù)用SPSS12.0 軟件分析處理,進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。隨著超排次數(shù)的增加,回收胚胎數(shù)量和可用胚胎數(shù)量呈逐漸下降趨勢(shì),組內(nèi)各次,回收胚胎數(shù)量和可用胚胎數(shù)量相比較顯著差異(P<0.05),受體羊兩側(cè)排卵點(diǎn),隨著超排次數(shù)的增加,呈逐漸下降趨勢(shì),經(jīng)顯著相分析,每一次超排后的排卵點(diǎn)與前一次相比較差異顯著(P<0.05)。平均每次每只供體羊能夠出胚胎數(shù)6.76 個(gè),平均每次每只供體羊排卵點(diǎn)為14.15。

    表3 時(shí)間間隔120d 連續(xù)超排結(jié)果

    3.4 不同超排間隔對(duì)重復(fù)超排效果的影響

    由表4 可知,與超排間隔60d 組相比,超排間隔60d 組和120d 組可回收胚胎數(shù)量、可用胚胎數(shù)量和排卵點(diǎn)數(shù)量均增加;且超排間隔60d 組回收胚胎數(shù)量、可用胚胎數(shù)量及排卵點(diǎn)數(shù)量明顯少于間隔90d 組和間隔120d 組(P<0.05),間隔90d 組和間隔120d組之間則變化不顯著(P>0.05)。

    表4 不同超排間隔對(duì)重復(fù)超排效果的影響

    4 討論

    4.1 超排重復(fù)次數(shù)對(duì)超排的影響

    一般認(rèn)為對(duì)于同一供體,只要操作得當(dāng),重復(fù)超排數(shù)次之間留有一定的時(shí)間間隔,重復(fù)超排的效果并不隨著超排次數(shù)的增加而降低[7,8]。但也有研究表明首次超排與重復(fù)超排的胚胎回收率和獲卵數(shù)各有不同[9]。尹峰[10]對(duì)3 組不同周齡的東北細(xì)毛羊幼母羔的超排效果進(jìn)行比較,結(jié)果首次超排的獲卵數(shù)均明顯多于重復(fù)超排。辛英霞等發(fā)現(xiàn)對(duì)同一批絨山羊分別間隔0d、300d、60d 連續(xù)進(jìn)行3 次超數(shù)排卵,然后收集胚胎,結(jié)果顯示前2 次的平均采胚數(shù)和平均有效胚胎數(shù)均較高,第三次則明顯下降(P<0.05)[11]。另有文獻(xiàn)報(bào)道,肉羊做胚胎移植時(shí),在FSH 保持不變的條件下,隨超排次數(shù)增加,超排回收胚胎數(shù)量、排卵點(diǎn)呈現(xiàn)顯著下降趨勢(shì)[12]。本試驗(yàn)也是在保持肉羊超排中使用的FSH 劑量不變的條件下,其他飼養(yǎng)管理、手術(shù)條件一致的情況下,研究連續(xù)重復(fù)超排對(duì)超數(shù)排卵的影響。試驗(yàn)結(jié)果顯示,各試驗(yàn)組組內(nèi),隨著超排重復(fù)次數(shù)不斷增加,回收胚胎數(shù)量和可用胚胎數(shù)量及排卵點(diǎn)均呈逐漸下降趨勢(shì)(P<0.05)。趙霞等[13]對(duì)20 頭波爾山羊以45d 為間隔實(shí)施超排處理,結(jié)果顯示前2 次超排所獲得的平均可用胚胎數(shù)差異不顯著,而第二次超排效果顯著優(yōu)于第三次超排,研究表明,這可能是由于隨著超排次數(shù)的增加以及外源激素的連續(xù)使用,供體羊的卵巢對(duì)激素的反應(yīng)可能會(huì)有減弱的趨勢(shì),進(jìn)而引起發(fā)育的卵泡數(shù)和排卵數(shù)有所下降。一般來(lái)說(shuō),經(jīng)過(guò)多次超排處理的母羊超排效果比較穩(wěn)定,但并不是隨著超排次數(shù)越多其超排的效果就越好,多數(shù)羊經(jīng)過(guò)幾次超排處理后,其超排效果會(huì)逐漸降低。一般認(rèn)為,連續(xù)超排反應(yīng)的降低和肉羊?qū)に禺a(chǎn)生的抗體有關(guān),Valasi 等[14]研究表明,卵巢對(duì)激素的反應(yīng)性降低是導(dǎo)致重復(fù)超排所獲卵母細(xì)胞數(shù)量下降的主要原因。同時(shí)在重復(fù)超排過(guò)程中,多次超排處理也可能會(huì)對(duì)卵巢和子宮造成損傷,降低超排效果[15,16]。所以我們?cè)趯?shí)際胚胎移植生產(chǎn)中做連續(xù)超排時(shí),并不能不考慮連續(xù)超排次數(shù)這一因素,進(jìn)行連續(xù)超排時(shí)需要根據(jù)供體羊的胚胎移植次數(shù)和營(yíng)養(yǎng)狀況不斷調(diào)整FSH 的使用劑量,同時(shí)要注意減輕手術(shù)對(duì)母羊的損傷,降低手術(shù)粘連和對(duì)卵巢的損傷程度,提高供體的超排利用效率,達(dá)到理想的超排效果。本試驗(yàn)因?yàn)槭中g(shù)和術(shù)后護(hù)理不當(dāng)?shù)仍?,造成輸卵管?yán)重粘連而淘汰。

    4.2 超排時(shí)間間隔對(duì)超排的影響

    在發(fā)情周期的不同時(shí)期進(jìn)行超排處理,超排效果不一樣。且超排處理對(duì)母羊會(huì)產(chǎn)生較大的應(yīng)激,超排間隔時(shí)間過(guò)短時(shí),供體的生殖系統(tǒng)和內(nèi)分泌的自我調(diào)節(jié)功能不能完全恢復(fù),重復(fù)超排效果不穩(wěn)定,超排間隔時(shí)間過(guò)長(zhǎng)時(shí),盡管能消除外源激素對(duì)卵巢刺激產(chǎn)生的影響,但會(huì)降低供體母羊的利用率[17]。適宜的超排時(shí)間間隔對(duì)超排效果以及后續(xù)胚胎移植效率有一定影響。對(duì)供體牛來(lái)說(shuō),一般同一供體個(gè)體超排間隔至少在60d 以上超排處理效果好。本試驗(yàn)是在保持肉羊超排中使用的FSH 劑量不變的條件下,其他飼養(yǎng)管理、手術(shù)條件一致的情況下,研究改變連續(xù)超排的時(shí)間間隔(間隔期分別為60、90、120d)對(duì)超數(shù)排卵的影響。試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,間隔60d 組供體羊平均每次可用胚胎數(shù)6.10 枚/只,平均每次排卵點(diǎn)為11.23 個(gè)/只;間隔90d 組供體羊平均每次可用胚胎數(shù)6.70 枚/只,平均每次排卵點(diǎn)為14.56 個(gè)/只;間隔120d 組供體羊平均每次可用胚胎數(shù)6.76 枚/只,平均每次排卵點(diǎn)為14.15 個(gè)/只。數(shù)據(jù)分析顯示,試驗(yàn)間隔60d 組回收胚胎數(shù)量、可用胚胎數(shù)量及排卵點(diǎn)數(shù)量比間隔90d 組和間隔120d 組明顯減少,間隔90d 組和間隔120d 組之間變化不顯著。表明超排時(shí)間間隔較長(zhǎng)利于超數(shù)排卵的數(shù)量與質(zhì)量。這可能與試驗(yàn)的供體羊機(jī)體需要時(shí)間修復(fù)和機(jī)體對(duì)激素產(chǎn)生了抗體有關(guān)。但在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中,超排時(shí)間間隔太長(zhǎng)影響經(jīng)濟(jì)效益和性能改良速度。所以在肉羊胚胎產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)中,結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)效益,要求超數(shù)排卵效果達(dá)到最佳的同時(shí)又要保證肉羊生產(chǎn)效益,這就需要研究確定適合本品種的超排間隔時(shí)間,或者通過(guò)讓母羊超排后正常懷孕產(chǎn)羔一次,恢復(fù)供體母羊的生殖系統(tǒng),以保證供體母羊的正常繁殖和優(yōu)秀供體重復(fù)利用。本研究結(jié)果表明,杜泊母羊超數(shù)排卵最佳時(shí)間間隔為90d。

    另外需要注意的是,采用手術(shù)法收集胚胎,除了考慮供體羊連續(xù)超排對(duì)激素產(chǎn)生抗體外,更重要的是要考慮連續(xù)手術(shù)對(duì)母羊生殖系統(tǒng)的損傷,這也是造成供體母羊超排胚胎數(shù)量下降的主要原因,嚴(yán)重者會(huì)發(fā)生粘連,失去正常的繁殖能力。手術(shù)中,操作要輕柔,盡量避免卵巢、輸卵管、子宮體的牽拉損傷和出血,防止粘連,降低手術(shù)對(duì)超排的影響。

    5 結(jié)論

    肉羊進(jìn)行連續(xù)超數(shù)排卵,隨著超排次數(shù)的增加,回收胚胎數(shù)量和可用胚胎數(shù)量及排卵點(diǎn)個(gè)數(shù)呈逐漸下降趨勢(shì),需根據(jù)供體羊的胚胎移植次數(shù)和營(yíng)養(yǎng)狀況不斷調(diào)整FSH 的使用劑量,保證超數(shù)排卵的效果;另超數(shù)排卵間隔較長(zhǎng)有利于超數(shù)排卵的數(shù)量與質(zhì)量,杜泊羊超排最少間隔90d 最佳。

    猜你喜歡
    供體肉羊母羊
    母羊不同時(shí)期的飼養(yǎng)管理
    繁殖期母羊的飼養(yǎng)管理
    肉羊的飼養(yǎng)管理
    肉羊育肥技術(shù)的要點(diǎn)
    肉羊人工授精技術(shù)
    基礎(chǔ)母羊的飼養(yǎng)管理
    母羊的幾個(gè)常見疾病
    不同氫供體對(duì)碳納米管負(fù)載鈀催化劑催化溴苯脫溴加氫反應(yīng)的影響
    肉羊舍飼快速育肥技術(shù)
    高齡供體的肝移植受者生存分析
    免费在线观看影片大全网站| 手机成人av网站| 午夜免费鲁丝| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 18禁黄网站禁片午夜丰满| 欧美在线一区亚洲| 国产伦理片在线播放av一区| 亚洲 国产 在线| a级毛片黄视频| 久久国产精品人妻蜜桃| 久久久久视频综合| 无人区码免费观看不卡 | 精品国产国语对白av| 老司机福利观看| 99国产精品一区二区蜜桃av | 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 中国美女看黄片| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 欧美精品一区二区大全| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 午夜福利欧美成人| 亚洲全国av大片| 美女视频免费永久观看网站| 麻豆成人av在线观看| 999精品在线视频| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 天堂8中文在线网| 国产男女内射视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 久久青草综合色| 丰满迷人的少妇在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 精品一区二区三区四区五区乱码| 桃红色精品国产亚洲av| 电影成人av| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲九九香蕉| 成年人免费黄色播放视频| 久久久欧美国产精品| 亚洲第一av免费看| 丁香六月天网| 极品少妇高潮喷水抽搐| 久久人人97超碰香蕉20202| 悠悠久久av| 久久久久久免费高清国产稀缺| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲av片天天在线观看| 丁香六月欧美| 精品国产乱子伦一区二区三区| 欧美大码av| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 国产一区二区 视频在线| 精品午夜福利视频在线观看一区 | 国产精品电影一区二区三区 | 高清在线国产一区| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 99热网站在线观看| 国产成人免费观看mmmm| 首页视频小说图片口味搜索| 老司机午夜福利在线观看视频 | 欧美乱码精品一区二区三区| 国产高清国产精品国产三级| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 美女扒开内裤让男人捅视频| 久久久久国产一级毛片高清牌| 亚洲免费av在线视频| 黄片大片在线免费观看| 大型av网站在线播放| 国产成人精品无人区| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 男女之事视频高清在线观看| 天天操日日干夜夜撸| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产一区二区激情短视频| 十八禁网站免费在线| 国产av一区二区精品久久| 国产又色又爽无遮挡免费看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产在线观看jvid| 精品视频人人做人人爽| 搡老岳熟女国产| 国产野战对白在线观看| 午夜视频精品福利| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 亚洲专区国产一区二区| 女同久久另类99精品国产91| 黄色 视频免费看| 成人国产一区最新在线观看| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 丝瓜视频免费看黄片| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲熟女毛片儿| 国产片内射在线| 国产国语露脸激情在线看| 18在线观看网站| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 黄色片一级片一级黄色片| 丰满饥渴人妻一区二区三| 老司机在亚洲福利影院| 久久国产精品影院| 成人特级黄色片久久久久久久 | 国产成人系列免费观看| 欧美精品高潮呻吟av久久| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 精品一品国产午夜福利视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 老汉色av国产亚洲站长工具| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 免费高清在线观看日韩| 99精国产麻豆久久婷婷| 1024视频免费在线观看| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 69精品国产乱码久久久| 三上悠亚av全集在线观看| 一区二区三区国产精品乱码| 亚洲免费av在线视频| 三级毛片av免费| 男人操女人黄网站| 日韩有码中文字幕| 中文欧美无线码| 99国产精品一区二区蜜桃av | 国产精品国产高清国产av | 免费不卡黄色视频| 狠狠狠狠99中文字幕| 18禁美女被吸乳视频| 久久久久久久久久久久大奶| 日本a在线网址| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 丝袜美腿诱惑在线| 午夜福利在线免费观看网站| 人妻一区二区av| 他把我摸到了高潮在线观看 | 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲天堂av无毛| 欧美精品一区二区免费开放| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 桃红色精品国产亚洲av| av不卡在线播放| 乱人伦中国视频| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 日本a在线网址| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产三级黄色录像| 欧美黑人精品巨大| 午夜福利欧美成人| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产又爽黄色视频| 久久天堂一区二区三区四区| h视频一区二区三区| 人妻 亚洲 视频| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 无遮挡黄片免费观看| 精品一区二区三卡| 午夜免费成人在线视频| 一个人免费看片子| 免费少妇av软件| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 国产xxxxx性猛交| 亚洲欧美色中文字幕在线| 欧美+亚洲+日韩+国产| 97在线人人人人妻| 天天影视国产精品| 国产又色又爽无遮挡免费看| av在线播放免费不卡| 丁香六月天网| 欧美变态另类bdsm刘玥| 黄片小视频在线播放| 99在线人妻在线中文字幕 | 丰满饥渴人妻一区二区三| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 色尼玛亚洲综合影院| 中文字幕人妻熟女乱码| 亚洲伊人久久精品综合| 欧美日韩视频精品一区| 免费人妻精品一区二区三区视频| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲五月婷婷丁香| 中文字幕色久视频| 欧美中文综合在线视频| 欧美大码av| 国产av国产精品国产| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 91精品国产国语对白视频| 色视频在线一区二区三区| av国产精品久久久久影院| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 亚洲av片天天在线观看| 国产欧美亚洲国产| 午夜免费成人在线视频| 老熟女久久久| 巨乳人妻的诱惑在线观看| av线在线观看网站| videos熟女内射| 久久亚洲精品不卡| 一区福利在线观看| 两个人免费观看高清视频| 国产精品免费一区二区三区在线 | 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| aaaaa片日本免费| 国产极品粉嫩免费观看在线| 操美女的视频在线观看| 欧美中文综合在线视频| 国产免费视频播放在线视频| 高清欧美精品videossex| 欧美精品啪啪一区二区三区| 国产精品熟女久久久久浪| 九色亚洲精品在线播放| 老司机靠b影院| 99国产极品粉嫩在线观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 高清视频免费观看一区二区| 免费高清在线观看日韩| cao死你这个sao货| 两性夫妻黄色片| 色婷婷av一区二区三区视频| 91麻豆av在线| 久久午夜综合久久蜜桃| 脱女人内裤的视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 手机成人av网站| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 老汉色∧v一级毛片| av天堂在线播放| 考比视频在线观看| 视频区欧美日本亚洲| 国产精品av久久久久免费| 最新的欧美精品一区二区| 亚洲天堂av无毛| 人妻久久中文字幕网| 淫妇啪啪啪对白视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 热re99久久国产66热| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 国产日韩欧美在线精品| 91精品三级在线观看| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 免费观看a级毛片全部| 女人精品久久久久毛片| www.熟女人妻精品国产| 久久青草综合色| 欧美人与性动交α欧美软件| 午夜两性在线视频| 成人av一区二区三区在线看| 新久久久久国产一级毛片| 少妇被粗大的猛进出69影院| 午夜福利,免费看| 丝袜美腿诱惑在线| 日韩大码丰满熟妇| 欧美激情高清一区二区三区| 啪啪无遮挡十八禁网站| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 精品国产乱码久久久久久小说| 中文字幕色久视频| 国产高清国产精品国产三级| 一区二区三区乱码不卡18| 一区二区三区国产精品乱码| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 午夜视频精品福利| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 天堂中文最新版在线下载| 69av精品久久久久久 | 国产精品电影一区二区三区 | 中文字幕色久视频| 99精品在免费线老司机午夜| 精品卡一卡二卡四卡免费| 97人妻天天添夜夜摸| 蜜桃国产av成人99| 欧美黑人精品巨大| 五月开心婷婷网| 人成视频在线观看免费观看| 日韩有码中文字幕| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 青青草视频在线视频观看| 美国免费a级毛片| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| av欧美777| 亚洲av电影在线进入| 视频在线观看一区二区三区| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 色综合欧美亚洲国产小说| 日本av手机在线免费观看| 午夜激情久久久久久久| 正在播放国产对白刺激| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 久久久久网色| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲专区中文字幕在线| 中文字幕制服av| 在线观看一区二区三区激情| 一二三四社区在线视频社区8| 一夜夜www| 亚洲五月婷婷丁香| 日韩中文字幕视频在线看片| 久久青草综合色| 久久久久网色| 精品亚洲成国产av| 99精品欧美一区二区三区四区| 麻豆av在线久日| 一本色道久久久久久精品综合| 国产成人av激情在线播放| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 极品少妇高潮喷水抽搐| 天天添夜夜摸| 超色免费av| 国产亚洲欧美精品永久| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲五月色婷婷综合| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 日韩有码中文字幕| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产精品一区二区精品视频观看| 新久久久久国产一级毛片| 19禁男女啪啪无遮挡网站| a在线观看视频网站| 狂野欧美激情性xxxx| 大片免费播放器 马上看| 黄色 视频免费看| av在线播放免费不卡| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产单亲对白刺激| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 国产高清视频在线播放一区| 久久毛片免费看一区二区三区| 久久狼人影院| 亚洲av欧美aⅴ国产| 99热网站在线观看| 美女福利国产在线| 午夜精品国产一区二区电影| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 久久人妻熟女aⅴ| 99riav亚洲国产免费| 国产单亲对白刺激| 中文字幕人妻熟女乱码| av一本久久久久| 一二三四在线观看免费中文在| 国产在线观看jvid| 黄频高清免费视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| netflix在线观看网站| 蜜桃国产av成人99| 亚洲av美国av| 亚洲精华国产精华精| 一级片'在线观看视频| 成人永久免费在线观看视频 | 18禁美女被吸乳视频| 99热国产这里只有精品6| 脱女人内裤的视频| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 搡老岳熟女国产| 亚洲av电影在线进入| 在线观看免费午夜福利视频| 窝窝影院91人妻| 在线观看66精品国产| 国产不卡一卡二| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 黄色片一级片一级黄色片| 黄色丝袜av网址大全| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 我的亚洲天堂| 黄色成人免费大全| 精品一区二区三卡| 亚洲精品美女久久av网站| 日本av免费视频播放| av天堂久久9| 亚洲色图av天堂| 国产主播在线观看一区二区| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 亚洲国产av新网站| 精品国产国语对白av| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 国产精品九九99| 日本一区二区免费在线视频| 精品高清国产在线一区| 久久国产精品影院| 在线观看一区二区三区激情| 成年人免费黄色播放视频| 制服诱惑二区| 黑人欧美特级aaaaaa片| 另类精品久久| 久久av网站| 国产黄频视频在线观看| 最近最新中文字幕大全电影3 | 欧美久久黑人一区二区| 美国免费a级毛片| 新久久久久国产一级毛片| 久久久国产精品麻豆| 午夜老司机福利片| 丰满迷人的少妇在线观看| 少妇 在线观看| avwww免费| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 99久久精品国产亚洲精品| 中文字幕av电影在线播放| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 久久毛片免费看一区二区三区| 1024视频免费在线观看| 国产片内射在线| 在线观看66精品国产| 国产又色又爽无遮挡免费看| 日本a在线网址| 99热网站在线观看| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产成人系列免费观看| 交换朋友夫妻互换小说| 老司机福利观看| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 在线永久观看黄色视频| cao死你这个sao货| 免费av中文字幕在线| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 精品一区二区三卡| 满18在线观看网站| 国产成人啪精品午夜网站| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| av在线播放免费不卡| 99riav亚洲国产免费| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 少妇被粗大的猛进出69影院| bbb黄色大片| 国产精品国产高清国产av | 一个人免费看片子| 桃红色精品国产亚洲av| 久久热在线av| 老汉色∧v一级毛片| 午夜福利,免费看| 久久久国产成人免费| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 欧美精品亚洲一区二区| 啦啦啦免费观看视频1| 国产精品av久久久久免费| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 两个人看的免费小视频| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 精品欧美一区二区三区在线| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 欧美变态另类bdsm刘玥| 欧美日韩视频精品一区| 脱女人内裤的视频| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 国产激情久久老熟女| 97人妻天天添夜夜摸| 十八禁网站网址无遮挡| 欧美黄色淫秽网站| 五月天丁香电影| 久久天堂一区二区三区四区| 视频在线观看一区二区三区| 午夜成年电影在线免费观看| 久热爱精品视频在线9| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 免费人妻精品一区二区三区视频| 黑人操中国人逼视频| 国产xxxxx性猛交| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 女人久久www免费人成看片| 国产一区二区在线观看av| 国产在视频线精品| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 18在线观看网站| 美女福利国产在线| 日本五十路高清| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产高清国产精品国产三级| 丝袜在线中文字幕| 国产在线视频一区二区| 中文字幕人妻熟女乱码| 又黄又粗又硬又大视频| 亚洲,欧美精品.| 电影成人av| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产成人系列免费观看| 视频在线观看一区二区三区| 脱女人内裤的视频| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲国产欧美在线一区| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲人成伊人成综合网2020| 国产欧美日韩精品亚洲av| 一进一出抽搐动态| 超碰成人久久| 欧美激情 高清一区二区三区| 热99re8久久精品国产| 97人妻天天添夜夜摸| 女人久久www免费人成看片| av又黄又爽大尺度在线免费看| 精品国产亚洲在线| 精品久久久久久久毛片微露脸| 夫妻午夜视频| 欧美日韩黄片免| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产一区二区 视频在线| 国产男靠女视频免费网站| a在线观看视频网站| 亚洲专区字幕在线| 两个人免费观看高清视频| 18在线观看网站| 欧美黄色淫秽网站| 我的亚洲天堂| 老熟妇乱子伦视频在线观看| www.自偷自拍.com| 欧美黄色片欧美黄色片| 亚洲精品自拍成人| 亚洲avbb在线观看| 少妇 在线观看| 日本精品一区二区三区蜜桃| 久久久国产一区二区| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲国产av影院在线观看| 丝袜在线中文字幕| 黄片大片在线免费观看| 国产亚洲av高清不卡| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 91大片在线观看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 免费观看人在逋| 淫妇啪啪啪对白视频| 日韩视频在线欧美| 一进一出抽搐动态| 国产亚洲av高清不卡| 久久久国产精品麻豆| www.精华液| 久久久久久人人人人人| 电影成人av| 国产亚洲精品一区二区www | 久久国产精品影院| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 久久久久久久久免费视频了| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 国产黄色免费在线视频| 午夜福利影视在线免费观看| 十八禁网站网址无遮挡| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 自线自在国产av| 欧美日韩成人在线一区二区| 亚洲一区中文字幕在线| 91成年电影在线观看| 欧美中文综合在线视频| 一边摸一边做爽爽视频免费| 久久久水蜜桃国产精品网| 人妻久久中文字幕网| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 又大又爽又粗| 手机成人av网站| 人妻一区二区av| 亚洲avbb在线观看| 无遮挡黄片免费观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 夜夜爽天天搞| 无限看片的www在线观看| 在线天堂中文资源库| 欧美精品av麻豆av| 精品视频人人做人人爽| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 国产单亲对白刺激| 亚洲精品中文字幕在线视频| 中国美女看黄片| 美国免费a级毛片| www.999成人在线观看| 精品久久久久久电影网| 日本黄色视频三级网站网址 | 日韩制服丝袜自拍偷拍| 日韩大码丰满熟妇| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 亚洲人成77777在线视频| 欧美久久黑人一区二区| 在线永久观看黄色视频| 亚洲成国产人片在线观看| 亚洲国产成人一精品久久久| a在线观看视频网站| 99九九在线精品视频| 午夜福利在线免费观看网站| 黄色毛片三级朝国网站| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 黄色毛片三级朝国网站| 十八禁网站网址无遮挡| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 在线观看一区二区三区激情| 老司机午夜十八禁免费视频| 三上悠亚av全集在线观看| 男人操女人黄网站| 日韩中文字幕欧美一区二区| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 女人久久www免费人成看片| 99精品在免费线老司机午夜| 欧美黑人欧美精品刺激| 国产97色在线日韩免费| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 亚洲精品自拍成人| 国产亚洲精品一区二区www | 亚洲 国产 在线| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 欧美日韩av久久| 国产成人精品无人区|