關(guān)于藥物異煙肼分析方法的教學(xué)討論

蘇倩倩 高 珣 馬衛(wèi)興

(江蘇海洋大學(xué) 藥學(xué)院，江蘇 連云港,222005)

異煙肼的化學(xué)名稱(chēng)是4-吡啶基甲酰肼，是一種抗結(jié)核桿菌的藥物，主要用于肺結(jié)核病的治療[1]。異煙肼含量測(cè)定方法是藥物異煙肼分析的教學(xué)內(nèi)容，也是制劑質(zhì)量控制的重要組成部分，因此在異煙肼分析方法教學(xué)中深入討論異煙肼分析方法的原理非常必要。本文從異煙肼分子的分離性質(zhì)、紫外光譜性質(zhì)、紅外光譜性質(zhì)、氧化還原性質(zhì)、縮合性質(zhì)和電荷轉(zhuǎn)移性質(zhì)深入討論異煙肼分析方法的來(lái)源，為藥物分析學(xué)習(xí)者釋疑解惑。

1 分離性質(zhì)

中國(guó)藥典(2020版)制定了異煙肼含量測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)分析方法-高效液相色譜法(HPLC)，以填充劑十八烷基硅烷鍵合硅膠作為分離用固定相材料，以體積比為85∶15的用磷酸調(diào)pH值至6.0的0.02 mol/L磷酸氫二鈉溶液-甲醇混合溶液作為流動(dòng)相，進(jìn)樣體積10 μL，采用紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為262 nm[2]。

2 紫外光譜性質(zhì)

異煙肼是具有吡啶基的雜環(huán)共軛體系分子，能在近紫外區(qū)吸收紫外光，異煙肼水溶液在263 nm的波長(zhǎng)處有最大吸收，可以建立紫外光譜測(cè)定異煙肼含量的分析方法，工作曲線(xiàn)線(xiàn)性范圍10～30 mg/L，平均回收率為99.2%，RSD為1.67%，用于測(cè)定異煙肼片的含量，方法簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確[3]。

3 紅外光譜性質(zhì)

異煙肼是具有吡啶基和甲酰肼的雜環(huán)共軛體系分子，能在紅外區(qū)吸收紅外光，結(jié)合數(shù)據(jù)處理技術(shù)，可以建立近紅外光譜測(cè)定異煙肼含量的分析方法，用于測(cè)定異煙肼片中異煙肼含量，所測(cè)結(jié)果相對(duì)誤差≤±0.8%，說(shuō)明近紅外光譜法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，其優(yōu)勢(shì)是這是一種無(wú)損檢測(cè)分析技術(shù)[4]。

4 氧化還原性質(zhì)

氧化劑能與異煙肼的酰肼基發(fā)生氧化還原反應(yīng)，利用這種性質(zhì)，可以建立氧化還原滴定法、可見(jiàn)光度法、原子吸收光度法、共振光散射法、化學(xué)發(fā)光分析法、電化學(xué)分析法用于測(cè)定異煙肼含量的分析方法。

基于溴酸鉀與異煙肼在鹽酸介質(zhì)中發(fā)生氧化還原反應(yīng)，2005版中國(guó)藥典制定了溴酸鉀滴定測(cè)定異煙肼含量的標(biāo)準(zhǔn)分析方法，采用基準(zhǔn)試劑溴酸鉀配制標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定劑，過(guò)量的溴酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液與溶液中提前加入的1滴甲基橙指示劑發(fā)生氧化還原反應(yīng)使甲基橙的偶氮基氧化斷裂而褪色，以褪色指示滴定終點(diǎn)，根據(jù)溴酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定劑消耗的實(shí)際體積計(jì)算異煙肼含量[5]。

某些氧化性金屬離子(如Cu2+、Ag+和Fe3+)能與異煙肼發(fā)生氧化還原反應(yīng)，基于此可建立異煙肼的分析方法。如異煙肼可將Cu2+還原成Cu+，而新生的Cu+與新亞銅試劑發(fā)生絡(luò)合顯色反應(yīng)生成黃色絡(luò)合物陽(yáng)離子，其在454 nm處有最大吸收，測(cè)定異煙肼的線(xiàn)性范圍為0.1～1.8 μg/mL，用于異煙肼片中異煙肼的含量測(cè)定[6]。又如異煙肼可將Ag+還原成Ag單質(zhì)沉淀，將析出的單質(zhì)Ag用硝酸溶解，采用原子吸收分光光度法測(cè)定Ag，實(shí)現(xiàn)原子吸收分光光度測(cè)定異煙肼的含量，測(cè)定波長(zhǎng)328.1 nm，檢測(cè)限是0.29 μg/mL，用于異煙肼片劑及血清中異煙肼的含量測(cè)定[7]。再如異煙肼在一定條件下可以將Fe3+還原成Fe2+，而剩余的Fe3+可與4-(2-吡啶偶氮)-間苯二酚形成有色配合物產(chǎn)生共振光散射光譜，由于Fe3+的減少而導(dǎo)致共振光散射光譜強(qiáng)度降低，建立了共振光散射測(cè)定異煙肼含量的分析方法，測(cè)定在325 nm 處，工作曲線(xiàn)線(xiàn)性0.05～0.30 μg/mL，用于異煙肼片的測(cè)定，結(jié)果與藥典法(2005版，溴酸鉀滴定法)一致[8]。

某些氧化劑(如KIO4和鐵氰化鉀)能與異煙肼發(fā)生氧化還原反應(yīng)產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象，基于此建立化學(xué)發(fā)光分析測(cè)定異煙肼的方法。如在NaOH堿性介質(zhì)中，KIO4可以直接氧化異煙肼產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，結(jié)合流動(dòng)注射分析技術(shù)，可直接利用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定異煙肼[9]。同理，鐵氰化鉀在堿性介質(zhì)中也能直接氧化異煙肼產(chǎn)生很強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光，從而實(shí)現(xiàn)異煙肼的定量分析，該方法測(cè)定的異煙肼線(xiàn)性范圍為0.05～6.0 mg/L，檢出限為2×10-2mg/L，該法可用于異煙肼片劑及針劑中異煙肼的含量測(cè)定[10]。

異煙肼能在多壁碳納米管-石墨烯納米復(fù)合物修飾的玻碳電極上發(fā)生氧化反應(yīng)，導(dǎo)致氧化峰電流升高，建立線(xiàn)性?huà)呙璺矞y(cè)定異煙肼的方法，線(xiàn)性范圍為1.0×10-7～1.0×10-4mol/L，可用于測(cè)定注射液中異煙肼的含量[11]。

5 縮合性質(zhì)

羰基試劑糠醛能與異煙肼的酰肼基上伯氨基發(fā)生縮合反應(yīng)，具有縮合性質(zhì)。異煙肼與糠醛縮合反應(yīng)生成異煙腙或糠醛縮異煙肼Schiff堿[12]，在315 nm 處有最大吸收峰，與異煙肼本身的吸收峰不同，因此可用紫外光度法進(jìn)行定量分析。

6 電荷轉(zhuǎn)移性質(zhì)

異煙肼是具有吡啶基和甲酰肼的雜環(huán)共軛體系分子，其吡啶氮原子與酰肼基上伯氨基氮原子能作為電子給予體與電子接受體試劑發(fā)生電荷轉(zhuǎn)移反應(yīng)形成電荷轉(zhuǎn)移配合物，具有電荷轉(zhuǎn)移性質(zhì)[13,14]。利用這種性質(zhì)，可以建立荷移分光光度法測(cè)定異煙肼含量的分析方法。

總之，異煙肼分子具有多種性質(zhì)，如分離性質(zhì)、紫外光譜性質(zhì)、紅外光譜性質(zhì)、氧化還原性質(zhì)、縮合性質(zhì)和電荷轉(zhuǎn)移性質(zhì)，幫助藥物分析學(xué)習(xí)者理解依據(jù)這些性質(zhì)所開(kāi)發(fā)的異煙肼分析方法原理，為未來(lái)開(kāi)發(fā)異煙肼分析新方法提供思路。