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    乳酸菌發(fā)酵番茄醬的加工工藝研究

    2023-01-05 14:39:08武進(jìn)雨季小康趙蘇源姚沛琳
    農(nóng)產(chǎn)品加工 2022年22期
    關(guān)鍵詞:菊芋番茄醬酸乳

    武進(jìn)雨,季小康,趙蘇源,姚沛琳

    (宿州學(xué)院生物與食品工程學(xué)院,安徽宿州 234000)

    0 引言

    番茄醬作為番茄的濃縮產(chǎn)物其營(yíng)養(yǎng)成分更易被人體吸收[1-2]。其中的番茄紅素具有很多抗氧化能力極強(qiáng)的活性物質(zhì),其抗氧化能力可以達(dá)到β -胡蘿卜素的2.0~3.2 倍。番茄紅素還可以預(yù)防癌癥,如前列腺癌、乳腺癌等[3-4]。番茄紅素如今在食品與醫(yī)療方面?zhèn)涫荜P(guān)注,在醫(yī)藥、功能食品、化妝品等行業(yè)得到了廣泛應(yīng)用[5-6]。

    乳酸菌是一類能運(yùn)用可發(fā)酵碳水化合物產(chǎn)出大量乳酸細(xì)菌的通稱。乳酸菌對(duì)保護(hù)人體有很大益處,可以提高乳酸菌在腸道中的含量,減少有害菌群數(shù)量,調(diào)整腸道菌群比例,保護(hù)人體腸道菌群的平衡和正常生理功能[7-9]。目前,我國(guó)關(guān)于番茄類的產(chǎn)品主要以初加工為主,如番茄醬、番茄汁等,缺乏深加工,特別是利用乳酸菌制得發(fā)酵番茄醬的研究較少。因此,采用乳酸菌發(fā)酵番茄醬能夠綜合乳酸菌和番茄醬兩者的優(yōu)點(diǎn)。

    試驗(yàn)以新鮮番茄為原材料,添加具有益生元功能的菊芋作為輔料,采用人工接種乳酸菌的發(fā)酵形式發(fā)酵番茄醬,通過(guò)響應(yīng)面法優(yōu)化番茄醬的發(fā)酵工藝,為乳酸菌發(fā)酵型番茄醬的生產(chǎn)提供一定的理論研究基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    1.1.1 原料

    選擇鮮紅飽滿、色澤均勻、無(wú)蟲(chóng)害的番茄作為原材料;以外觀均勻、成熟新鮮、無(wú)霉變及腐敗變質(zhì)的菊芋為輔料;冰糖,食鹽,以上材料均購(gòu)自宿州市特爾惠超市。

    發(fā)酵菌種:嗜酸乳桿菌CICC20250,植物乳桿菌CICC21805,以上菌種均由宿州學(xué)院生物與食品工程學(xué)院保藏。

    1.1.2 試劑

    MRS 培養(yǎng)基;氫氧化鈉、酚酞,國(guó)藥集團(tuán)提供。

    1.2 設(shè)備

    GI100T 型高壓滅菌鍋,致微(廈門)儀器有限公司產(chǎn)品;SW-CJ-1CU 型超凈工作臺(tái),蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司產(chǎn)品;1-1SPK 型小型臺(tái)式冷凍離心機(jī),美國(guó)Sigma 公司產(chǎn)品;SHP-400ε型恒溫培養(yǎng)箱,上海三發(fā)科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 乳酸菌菌懸液的制備

    從保菌管內(nèi)分別吸取嗜酸乳桿菌CICC20250 和植物乳桿菌CICC21805 菌液100 μL,接種到10 mL MRS 液體培養(yǎng)基中,于37 ℃下靜置培養(yǎng)12 h,連續(xù)活化2 次,離心得菌體,用生理鹽水洗滌3 次,最后用等體積生理鹽水重懸作為后續(xù)發(fā)酵種子液[10]。

    1.3.2 發(fā)酵番茄醬的制備

    將新鮮的番茄用水洗干凈,熱燙除去果皮,打漿;新鮮的菊芋用熱水蒸煮,去皮,打漿。番茄漿和菊芋漿按照不同比例進(jìn)行混合,然后加入3%的食鹽,6%的冰糖,4%的成品番茄醬,進(jìn)行熬制,裝入玻璃罐中,于85 ℃下水浴加熱15 min,進(jìn)行巴氏殺菌,冷卻后再接入制備好的乳酸菌菌懸液,混勻,發(fā)酵[11]。

    1.3.3 單因素試驗(yàn)

    (1)不同發(fā)酵劑的影響。依次采用嗜酸乳桿菌CICC20250、植物乳桿菌CICC21805、嗜酸乳桿菌CICC20250∶植物乳桿菌CICC21805=1∶1 這3 種發(fā)酵劑,以總酸度為考核指標(biāo),確定最佳的接菌種類。

    (2)接菌量的影響。將乳酸菌分別按照0,0.5%,1.0%,1.5%,2.0%的比例接種到番茄醬里進(jìn)行發(fā)酵,以總酸度為考核指標(biāo),確定最佳接菌量。

    (3)菊芋添加量的影響。菊芋分別按照0,5%,10%,15%,20%的添加量加入到番茄醬里,每組都分別接2%的嗜酸乳桿菌,于37 ℃下靜置培養(yǎng)10 d,以總酸度為考核指標(biāo),確定最佳的菊芋添加量。

    (4)發(fā)酵溫度的影響。按照菊芋的添加量為10%,接入2%的嗜酸乳桿菌,分別置于26,30,34,37,42 ℃的培養(yǎng)箱里,靜置培養(yǎng)10 d,以總酸度為考核指標(biāo),確定最佳的發(fā)酵溫度。

    (5)發(fā)酵時(shí)間的影響。按照菊芋添加量為10%,接入2%的嗜酸乳桿菌CICC20250,置于37 ℃恒溫的培養(yǎng)箱中,分別在5,10,15,20,25,30 d 后進(jìn)行取樣,以總酸度為考核指標(biāo),確定最優(yōu)發(fā)酵時(shí)間。

    1.3.4 總酸度的測(cè)定

    酸堿中和測(cè)定法,計(jì)算番茄醬的總酸度可以參考國(guó)標(biāo)GB/T 12456—2008 食品總酸的測(cè)定[12]。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

    2.1.1 不同發(fā)酵劑對(duì)乳酸菌發(fā)酵番茄醬品質(zhì)的影響

    不同發(fā)酵劑對(duì)發(fā)酵番茄醬總酸度的影響見(jiàn)圖1。

    圖1 不同發(fā)酵劑對(duì)發(fā)酵番茄醬總酸度的影響

    由圖1 可知,當(dāng)植物乳桿菌和嗜酸乳桿菌以1∶1混合時(shí),總酸度為37.05 mol/L。因此,在后面的研究中,用嗜酸乳桿菌和植物乳桿菌的相同比例混合菌種進(jìn)行番茄醬的發(fā)酵。結(jié)合總酸的指標(biāo),可以得到發(fā)酵劑的最優(yōu)選取種類是嗜酸乳桿菌CICC20250∶植物乳桿菌CICC21805 為1∶1 混合。

    2.1.2 不同接菌量對(duì)乳酸菌發(fā)酵番茄醬品質(zhì)的影響

    不同接菌量對(duì)發(fā)酵番茄醬總酸度的影響見(jiàn)圖2。

    圖2 不同接菌量對(duì)發(fā)酵番茄醬總酸度的影響

    由圖2 可知,隨著接菌量的增加發(fā)酵番茄醬的總酸度呈上升趨勢(shì),當(dāng)接菌量為1%時(shí)達(dá)到峰值。由此可以得到,發(fā)酵時(shí)選取1%的接菌量最為適宜。

    2.1.3 菊芋添加量對(duì)乳酸菌發(fā)酵型番茄醬品質(zhì)的影響

    菊芋添加量對(duì)發(fā)酵番茄醬的影響見(jiàn)圖3。

    圖3 菊芋添加量對(duì)發(fā)酵番茄醬的影響

    菊芋塊莖含有豐富的氨基酸、糖類、維生素等,具有較強(qiáng)的耐貯藏性,是提取高純低聚糖的最佳原料,其作為益生元的研究較多,可促進(jìn)益生菌的增長(zhǎng)[13]。由圖3 可知,隨著菊芋添加量的增大,番茄醬的總酸度逐漸增大,初始值酸度的增長(zhǎng)值隨菊芋質(zhì)量分?jǐn)?shù)不是特別明顯,當(dāng)達(dá)到5%以后酸度明顯上升,當(dāng)添加量達(dá)到15%時(shí),酸度達(dá)到峰值,再繼續(xù)添加總酸度明顯下降,說(shuō)明此時(shí)乳酸菌已受到抑制,菊芋添加過(guò)多,可以得出結(jié)論,菊芋最優(yōu)添加量應(yīng)在15%附近。

    2.1.4 發(fā)酵溫度對(duì)乳酸菌發(fā)酵番茄醬品質(zhì)的影響

    發(fā)酵溫度也是影響試驗(yàn)結(jié)果的主要因素之一,若番茄醬中的發(fā)酵溫度太低,會(huì)使發(fā)酵菌液易感染雜菌,產(chǎn)酸程度太低而直接影響產(chǎn)品品質(zhì),甚至可能會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品周期延長(zhǎng),若番茄醬的發(fā)酵溫度太高則可能會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)酸速度過(guò)快,雖然縮短了時(shí)間但是發(fā)酵風(fēng)味物質(zhì)會(huì)減少,對(duì)食物自身的品質(zhì)會(huì)產(chǎn)生一定影響,因此選擇合適的發(fā)酵溫度是很重要的條件[14]。

    發(fā)酵溫度對(duì)發(fā)酵番茄醬總酸度的影響見(jiàn)圖4。

    圖4 發(fā)酵溫度對(duì)發(fā)酵番茄醬總酸度的影響

    由圖4 可知,番茄醬的總酸度隨著發(fā)酵溫度的增長(zhǎng)總體呈先上升后下降趨勢(shì),當(dāng)34 ℃時(shí)達(dá)到峰值,但是若發(fā)酵溫度持續(xù)增加,超過(guò)峰值后,酸度會(huì)逐漸下降,可能會(huì)使產(chǎn)品中的有機(jī)酸分解,以至于酸度下降,導(dǎo)致產(chǎn)品的風(fēng)味有不好的改變,因此應(yīng)將發(fā)酵溫度控制為30~34 ℃。

    2.1.5 發(fā)酵時(shí)間對(duì)發(fā)酵番茄醬品質(zhì)影響的試驗(yàn)結(jié)果

    發(fā)酵時(shí)間對(duì)發(fā)酵型番茄醬總酸度的影響見(jiàn)圖5。

    由圖5 可知,總酸度隨著發(fā)酵時(shí)間的改變效果也較為顯著,起初因?yàn)榘l(fā)酵時(shí)間短,番茄醬的風(fēng)味還沒(méi)有形成,所以風(fēng)味酸味都不顯著,隨著時(shí)間的增加酸度逐漸增加,發(fā)酵時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也會(huì)導(dǎo)致酸度過(guò)大使番茄醬風(fēng)味變質(zhì),由變化曲線可得發(fā)酵時(shí)間最適宜的為25 d,總酸度為40.3 mol/L。

    圖5 發(fā)酵時(shí)間對(duì)發(fā)酵型番茄醬總酸的影響

    2.2 乳酸菌發(fā)酵番茄醬的加工工藝優(yōu)化響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    2.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用Design Expert 8根據(jù)Box-bnheken Design 試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,主要是發(fā)酵溫度(A)、菊芋質(zhì)量分?jǐn)?shù)(B)、接菌量(C)3 個(gè)影響因素,響應(yīng)值仍選用總酸度(Y),利用響應(yīng)面法進(jìn)行中心組合設(shè)計(jì)試驗(yàn)[15]。

    發(fā)酵番茄醬工藝響應(yīng)面試驗(yàn)因素與水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。

    表1 發(fā)酵番茄醬工藝響應(yīng)面試驗(yàn)因素與水平設(shè)計(jì)

    2.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)果

    根據(jù)Box-bnhenken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理進(jìn)行優(yōu)化試驗(yàn)。

    Box-behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表2。

    通過(guò)選用Box-beheken 響應(yīng)面分析法對(duì)試驗(yàn)結(jié)果擬合的模型進(jìn)行方差分析,響應(yīng)面數(shù)據(jù)的回歸分析[13](見(jiàn)表2)。通過(guò)軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行多元回歸擬合,得到響應(yīng)面擬合方程:

    式中:Y——番茄醬總酸度,mol/L。

    由表2 可知,回歸方程中各因素對(duì)總酸度影響的顯著性可以通過(guò)F 檢驗(yàn)來(lái)判斷。若p 值越小,則可以說(shuō)明對(duì)應(yīng)變量的顯著性越高[16]。該模型的F 值是36.52,大于0.01 水平上的F 值,且p<0.001,表明該回歸模型極顯著,在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有意義。失擬項(xiàng)F=2.56,p=0.192 8>0.05,不顯著,說(shuō)明該模型與實(shí)際的擬合情況比較好,回歸方程不失擬,能充分反映實(shí)際情況,所以可以選用回歸方程代替試驗(yàn)真實(shí)點(diǎn)對(duì)發(fā)酵番茄醬的試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行預(yù)測(cè)分析。另外,通過(guò)分析可以得到,各因素中的一次項(xiàng)A、B,二次項(xiàng)A2、B2、C2對(duì)發(fā)酵番茄醬的總酸度影響極顯著,AB 項(xiàng)對(duì)發(fā)酵番茄醬的總酸度影響顯著,AC 項(xiàng)對(duì)發(fā)酵番茄醬的總酸度影響極顯著,BC 項(xiàng)對(duì)發(fā)酵番茄醬的總酸度影響不顯著。

    表2 Box-behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)果

    響應(yīng)面方差分析結(jié)果見(jiàn)表3。

    番茄醬的總酸度影響顯著(p<0.05),由表3 可知,各因素對(duì)發(fā)酵番茄醬的總酸度影響程度排序?yàn)榫沼筇砑恿浚景l(fā)酵溫度>接菌量。

    表3 響應(yīng)面方差分析結(jié)果

    2.2.3 響應(yīng)曲面分析

    通過(guò)分析模型的響應(yīng)面和相應(yīng)的等高線,可以得到兩兩交互作用的結(jié)果,并且通過(guò)驗(yàn)證模型預(yù)測(cè)的最優(yōu)值,可以確定生產(chǎn)研究發(fā)酵番茄醬的最佳工藝參數(shù)[14]。

    發(fā)酵溫度與菊芋添加量交互作用的響應(yīng)面圖見(jiàn)圖6,發(fā)酵溫度與菊芋添加量交互作用的等高線圖見(jiàn)圖7,發(fā)酵溫度與接菌量交互作用的響應(yīng)面圖見(jiàn)圖8,發(fā)酵溫度與接菌量交互作用的等高線圖見(jiàn)圖9,菊芋添加量與接菌量交互作用的響應(yīng)面圖見(jiàn)圖10,菊芋添加量與接菌量交互作用的等高線圖見(jiàn)圖11。

    由圖6 可知,響應(yīng)面曲線A 的弧度比B 的弧度陡,由圖7 可知,A 方向的等高線密度低于B 方向,則表明發(fā)酵溫度相比菊芋添加量,菊芋添加量對(duì)番茄醬總酸度的影響更顯著。等高線呈橢圓形,則說(shuō)明發(fā)酵溫度與菊芋添加量的交互作用顯著。

    圖6 發(fā)酵溫度與菊芋添加量交互作用的響應(yīng)面圖

    圖7 發(fā)酵溫度與菊芋添加量交互作用的等高線圖

    由圖8 可知,響應(yīng)面曲線A 的弧度比C 弧度陡,由圖9 可知,A 方向等高線密度高于C 方向,說(shuō)明發(fā)酵溫度對(duì)發(fā)酵番茄醬總酸度的影響高于接菌量,等高線呈橢圓形,表明發(fā)酵溫度與接菌量的交互作用極顯著。

    圖8 發(fā)酵溫度與接菌量交互作用的響應(yīng)面圖

    圖9 發(fā)酵溫度與接菌量交互作用的等高線圖

    由圖10 可知,響應(yīng)面曲線B 的弧度比C 的弧度陡,由圖11 可知,等高線B 的密度高于等高線C,說(shuō)明菊芋添加量對(duì)發(fā)酵番茄醬總酸度的影響高于接菌量,等高線呈橢圓形,表明菊芋添加量與接菌量的交互作用不顯著。

    圖10 菊芋添加量與接菌量交互作用的響應(yīng)面圖

    圖11 菊芋添加量與接菌量交互作用的等高線圖

    為了驗(yàn)證調(diào)配發(fā)酵番茄醬加工工藝模型方程的合適性,通過(guò)Design Expert 8 設(shè)計(jì)可以得到最終的優(yōu)化條件為A=29.17,B=8.81,C=209.27,即得到的試驗(yàn)最優(yōu)組合為發(fā)酵溫度29.17 ℃,菊芋用量8.81 g,接菌量209.27 μL。此時(shí),模型預(yù)測(cè)發(fā)酵型番茄醬的總酸度最大值為38.97 mol/L,考慮到實(shí)際因素,對(duì)上述優(yōu)化條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整,調(diào)整后的工藝條件為發(fā)酵溫度30 ℃,菊芋用量10 g,接菌量200 μL。在該條件下進(jìn)行3 次平行試驗(yàn),結(jié)果表明,其平均值為35.45 mol/L。與預(yù)測(cè)值較為接近,由此可以得到該模型的擬合度較好,最終的優(yōu)化試驗(yàn)還是較為成功。因此,響應(yīng)面法優(yōu)化發(fā)酵型番茄醬的加工工藝條件可以采取。

    模型驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。

    表4 模型驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果/ mol·L-1

    3 結(jié)論

    通過(guò)單因素試驗(yàn),確定了發(fā)酵菌種類型、接菌量、菊芋質(zhì)量分?jǐn)?shù),發(fā)酵溫度和發(fā)酵時(shí)間5 個(gè)因素的最優(yōu)水平值,最優(yōu)發(fā)酵種類是嗜酸乳桿菌CICC20250 植物乳桿菌CICC21805 同比例混合,最優(yōu)接菌量為1%,最佳發(fā)酵時(shí)間為25 d,確定了影響因素對(duì)發(fā)酵型番茄醬的總酸度影響程度為菊芋添加量>發(fā)酵溫度>接菌量。通過(guò)進(jìn)一步的響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn),確定了發(fā)酵溫度、菊芋添加量、接菌量的最優(yōu)參數(shù),結(jié)合實(shí)際情況,最終得到結(jié)果為發(fā)酵溫度30 ℃,菊芋添加量15%,接菌量1%,在該條件下的發(fā)酵型番茄醬色澤誘人、酸甜適中、發(fā)酵風(fēng)味濃厚、口感香醇。

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