基于MMP7/mTORC1信號(hào)通路探討小鼠膿毒癥急性腎損傷的分子機(jī)制*

丁 璐，柳紅英，王 卉，范桄溥

（1北京人民大學(xué)醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，北京 100044；2北京人民大學(xué)醫(yī)院心外科，北京 100044）

急性腎損傷（acute kidney injury，AKI）是膿毒癥患者常見的并發(fā)癥，會(huì)導(dǎo)致發(fā)病率和死亡率增加［1］。由于膿毒癥中AKI的病理生理學(xué)機(jī)制很復(fù)雜，目前尚無有效特定療法［2］。因此，早期發(fā)現(xiàn)AKI對(duì)于最終制定有效的干預(yù)措施至關(guān)重要。最近，研究報(bào)道基質(zhì)金屬蛋白酶7（matrix metalloproteinase 7，MMP7）是一種早期無創(chuàng)生物標(biāo)志物，可預(yù)測(cè)心臟術(shù)后患者的嚴(yán) 重AKI［3］。MMP7是一種 分泌型鋅 和 鈣依賴 性內(nèi)肽酶，其主要功能是通過消化酪蛋白、明膠、纖連蛋白和蛋白聚糖來分解細(xì)胞外基質(zhì)。MMP7還能夠切割其他底物，并在E-cadherin胞外域脫落、TNF-α釋放和其他蛋白酶的激活中發(fā)揮作用［4-5］。MMP7的這種能夠作用于大量底物的能力，使其成為控制廣泛生物過程（如組織重塑、細(xì)胞凋亡和炎癥）的潛在參與者［6］。然而，MMP7在膿毒癥AKI發(fā)病機(jī)制中的作用是完全未知的。在本研究中，我們觀察了MMP7在盲腸結(jié)扎穿孔（cecal ligation and perforation，CLP）小鼠中的變化，并使用內(nèi)源性MMP7缺失小鼠和外源性MMP7重組蛋白來分析MMP7在CLP介導(dǎo)的膿毒癥期間對(duì)腎損傷的作用。

材料和方法

1 動(dòng)物

從北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司［生成許可證號(hào)：SCXK（京）2016-0006］購(gòu)買SPF級(jí)、8周齡、雄性、具有C57BL/6J遺傳背景的MMP7敲除（MMP7-KO）小鼠（18～22 g），以及年齡和性別匹配的C57BL/6J小鼠（18～22 g）用作野生型（wild-type，WT）對(duì)照，共88只。

2 細(xì)胞、試劑和儀器

人近端腎小管上皮細(xì)胞系HKC-8購(gòu)自ScienCell Research。載體或MMP7重組蛋白購(gòu)自EMD Chemicals；HE染色試劑盒購(gòu)自Beyotime；兔抗中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin，NGAL）多克隆抗體購(gòu)自Invitrogen；HRP偶聯(lián)的Ⅱ抗購(gòu)自Jackson ImmunoResearch；DAB反應(yīng)緩沖液購(gòu)自武漢谷歌生物科技有限公司；原位細(xì)胞死亡檢測(cè)試劑盒和脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）購(gòu)自Sigma；抗Na+-K+-2Cl-共轉(zhuǎn)運(yùn)體2（Na+-K+-2Cl-cotransporter 2，NKCC2）抗體購(gòu)自Alpha Diagnostic International；抗Na+-Cl-共轉(zhuǎn)運(yùn)體（Na+-Cl-cotransporter，NCC）抗體購(gòu)自Biosciences；Alexa Fluor 594或Alexa Fluor 488偶聯(lián)的Ⅱ抗購(gòu)自Molecular Probes；四棱蓮凝集素染色的切片、熒光素標(biāo)記的四棱蓮凝集素、生物素化的Dolicos biflorus凝集素和熒光素avidin D購(gòu)自Vector Laboratories；蛋白提取試劑盒購(gòu)自TaKaRa；二辛可寧酸試劑盒購(gòu)自北京普利萊基因技術(shù)有限公司；聚偏氟乙烯膜購(gòu)自Bio-Rad；兔抗MMP7單克隆抗體、兔抗GAPDH多克隆抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的Ⅱ抗購(gòu)自Cell Signaling Technology；兔抗哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體1（mammalian target of rapamycin complex 1，mTORC1）多克隆抗體購(gòu)自Abcam。加熱墊購(gòu)自Physitemp Instruments；Vitros 250 Analyzer購(gòu) 自Johnson & Johnson；熒光顯微鏡購(gòu)自Hitachi。

3 主要方法

3.1 小鼠分組在實(shí)驗(yàn)1中，WT小鼠隨機(jī)分配到以下2組：假手術(shù)（sham）組和膿毒癥（CLP）組，每組18只。假手術(shù)組小鼠接受剖腹手術(shù)但沒有進(jìn)行CLP術(shù)；CLP組小鼠建立CLP模型。分別在術(shù)后0、3、6、18、24和48 h處死小鼠，每個(gè)時(shí)點(diǎn)各組選取3只。實(shí)驗(yàn)2檢驗(yàn)內(nèi)源性MMP7缺失對(duì)CLP誘導(dǎo)AKI的影響，分別將MMP7-KO小鼠和WT小鼠各自隨機(jī)分配到假手術(shù)組和CLP組，每組8只。在術(shù)后24 h處死小鼠。實(shí)驗(yàn)3檢驗(yàn)外源性MMP7對(duì)CLP誘導(dǎo)AKI的影響，MMP7-KO小鼠隨機(jī)分配到CLP+vector組和CLP+MMP7組，每組10只，在CLP術(shù)前24 h通過尾靜脈以0.4 mg/kg向小鼠注射載體或MMP7重組蛋白，術(shù)后24 h處死小鼠。

3.2 膿毒癥模型建立和標(biāo)本采集參照文獻(xiàn)方法建立CLP模型以誘發(fā)膿毒癥［7］。具體操作為：在用2%異氟醚麻醉的情況下，將動(dòng)物置于加熱墊上以將體溫保持在37℃。皮膚消毒后，在腹部中線切開1 cm，暴露盲腸。在遠(yuǎn)端和盲腸基部之間的中間結(jié)扎以誘導(dǎo)中度膿毒癥。在結(jié)扎部位和盲腸尖端之間用一根21G的針刺穿整個(gè)盲腸。少量糞便通過穿刺部位擠出。將盲腸放回腹部，用無菌6-0絲線縫合腹膜、筋膜和腹部肌肉組織。皮膚用金屬夾閉合。用0.25%布比卡因浸潤(rùn)至手術(shù)部位。手術(shù)后再次進(jìn)行皮膚消毒。對(duì)于接受手術(shù)的動(dòng)物，皮下注射50 mL/kg生理鹽水。假手術(shù)組的動(dòng)物接受相同的手術(shù)程序但沒有進(jìn)行CLP。使用代謝籠來監(jiān)測(cè)術(shù)后尿量，尿量＜0.5 mL/（kg·h）為少尿［8］。在預(yù)先指定的安樂死時(shí)間處死小鼠后，立即進(jìn)行了體內(nèi)雙側(cè)腎切除術(shù)，以盡量減少潛在的混雜缺血。一個(gè)腎臟立即在4%多聚甲醛中固定24 h，另一個(gè)放入液氮中保存。然后通過心臟穿刺對(duì)小鼠進(jìn)行放血，血液用于即時(shí)檢測(cè)。

3.3 血尿素氮和血清肌酐測(cè)量收集血液，在室溫下保持30 min，并分離血清（3 600×g，10 min）。在Vitros 250 Analyzer使用毛細(xì)管電泳測(cè)量血尿素氮和血清肌酐。結(jié)果以mg/dL表示。

3.4 腎損傷評(píng)估將腎組織用4%多聚甲醛固定，包埋在石蠟中，并以4 μm切片。按照標(biāo)準(zhǔn)程序使用HE染色試劑盒染色，具有以下組織病理學(xué)變化的腎小管被認(rèn)為受損：刷狀緣缺失、腎小管擴(kuò)張和破裂、管型形成和細(xì)胞溶解。以盲法檢查組織損傷，并以損傷小管的百分比評(píng)分：0表示無損傷；1表示＜25%；2表示25%～50%；3表示50%～75%；4表示＞75%。對(duì)于免疫組化染色，將石蠟包埋的腎切片與0.1 mmol/L Tris-EDTA緩沖液（pH 9.0）在100℃孵育15 min進(jìn)行抗原修復(fù)。冷卻至室溫后，將切片浸入0.3%過氧化氫中10 min以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性。隨后與5% BSA和0.1% Triton X-100孵育以減少非特異性結(jié)合后，室溫下NGAL抗體（1∶200稀釋）孵育1 h，然后用HRP偶聯(lián)的Ⅱ抗室溫下孵育1 h。將載玻片浸入DAB反應(yīng)緩沖液中，隨機(jī)選擇10～15個(gè)區(qū)域進(jìn)行量化。對(duì)于凋亡檢測(cè)，通過TUNEL法確定腎臟的細(xì)胞凋亡情況。使用原位細(xì)胞死亡檢測(cè)試劑盒進(jìn)行TUNEL測(cè)定，將載玻片脫蠟并在室溫下與蛋白酶K（20 g/L）一起孵育15 min，然后將載玻片與TUNEL反應(yīng)混合物在濕盒中室溫孵育1 h。此外，Hoechst 33342用于標(biāo)記細(xì)胞核。隨機(jī)選擇10～15個(gè)視野用于量化TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞。

3.5 免疫熒光8 μm冷凍切片用磷酸鹽緩沖液洗滌，用5% BSA/PBS封閉（室溫1 h），與Ⅰ抗（抗MMP7，1∶50；抗NKCC2或抗NCC，1∶200）在4℃下孵育過夜，并通過與Alexa Fluor 594或Alexa Fluor 488偶聯(lián)的Ⅱ抗（1∶500）檢測(cè)。在洗滌前，將用四棱蓮凝集素染色的切片與熒光素標(biāo)記的四棱蓮凝集素（1∶500）在室溫下孵育30 min。用生物素化的Dolicos biflorus凝集素（1∶400）染色的切片在4℃下孵育過夜，并通過熒光素avidin D（1∶500）檢測(cè)。

3.6 細(xì)胞和分組處理HKC-8細(xì)胞在含有10%FBS、1×105U/L青霉素和100 mg/L鏈霉素的RPMI-1640培養(yǎng)液中，于5% CO2、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。每3～4 d傳代一次，取第3代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。將細(xì)胞分為：對(duì)照（control）組、LPS組、LPS+vector組和LPS+MMP7組。除對(duì)照組外，各組細(xì)胞暴露于LPS（10 mg/L）中6 h。LPS+vector組和LPS+MMP7組在暴露于LPS前6 h，將細(xì)胞與vector或人MMP-7重組蛋白（25 nmol/L）孵育。

3.7 Hoechst 33342染色收集處理后的細(xì)胞，棄去培養(yǎng)液。在37℃、黑暗處用Hoechst 33342溶液（10 μL）浸泡10 min。隨后用PI（5 μL）在37℃對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色。在黑暗中持續(xù)10 min。用熒光顯微鏡觀察染色細(xì)胞的形態(tài)。

3.8 Western blot按照蛋白提取試劑盒說明書提取各組腎臟組織和細(xì)胞總蛋白，蛋白含量用二辛可寧酸試劑盒測(cè)定。提取的蛋白質(zhì)與上樣緩沖液充分混合，在100℃下煮沸10 min進(jìn)行變性，每個(gè)孔上樣30 μg樣品。接下來，蛋白質(zhì)通過10%SDS-PAGE轉(zhuǎn)移到聚偏氟乙烯膜上，并在含有5%脫脂牛奶的吐溫20的Tris緩沖鹽水中封閉1 h。隨后，將膜與抗MMP7、mTORC1或GAPDH抗體（1∶1 000）的Ⅰ抗一起孵育過夜，然后用相應(yīng)的辣根過氧化物酶標(biāo)記的Ⅱ抗（1∶1 000）孵育2 h。在暗處加入增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光溶液進(jìn)行顯色。以GAPDH為內(nèi)參照，用Cel-Pro Analyzer分析目標(biāo)條帶的灰度值。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0分析數(shù)據(jù)。所有數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示。通過雙向重復(fù)測(cè)量ANOVA分析來自不同組實(shí)驗(yàn)的測(cè)試數(shù)據(jù)。Shapiro-Wilk檢驗(yàn)用于確定數(shù)據(jù)的分布。由于所有數(shù)據(jù)均呈正態(tài)分布，因此采用單因素方差分析和Tukey檢驗(yàn)來分析數(shù)據(jù)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 CLP引起尿量、血尿素氮和血清肌酐的變化

與假手術(shù)組相比，CLP組在CLP后6 h內(nèi)尿量減少（P＜0.05），這種下降趨勢(shì)在后來的時(shí)點(diǎn)持續(xù)存在，并且在CLP 18 h后尿量均低于0.5 mL/（kg·h）。此外，與假手術(shù)組相比，CLP組血尿素氮水平在CLP后6 h顯著升高（7～69 mg/dL，P＜0.01）；CLP后血清肌酐也于CLP后24 h升高（P=0.05），并且在48 h時(shí)仍升高。見圖1。

2 CLP對(duì)腎臟中MMP7表達(dá)的影響

與假手術(shù)組相比，CLP后6 h腎臟組織中MMP7蛋白表達(dá)降低，這種降低持續(xù)到48 h，見圖2A。此外，免疫熒光染色顯示在假手術(shù)組小鼠的腎臟中，MMP7主要在腎皮質(zhì)中和Na+-Cl-協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白陽(yáng)性小管（遠(yuǎn)端回旋）中表達(dá)，在腎髓質(zhì)中的表達(dá)較少，見圖2B。

3 內(nèi)源性MMP7缺失加重CLP誘導(dǎo)的AKI

接下來我們利用內(nèi)源性MMP7缺失（MMP7-KO）小鼠研究MMP7在AKI發(fā)病機(jī)制中的作用，其中MMP7基因被全身敲除（圖3A）。MMP7-KO小鼠表型正常，沒有明顯的物理或形態(tài)學(xué)異常。在CLP后24 h，與WT CLP小鼠相比，MMP7-KO CLP小鼠腎臟表現(xiàn)出更嚴(yán)重的形態(tài)損傷，尤其是在腎皮質(zhì)和外髓質(zhì)表現(xiàn)出廣泛的小管損傷，包括刷狀緣丟失、管狀鑄型形成及細(xì)胞脫落到管狀腔中（圖3B）。MMP7-KO CLP組小鼠腎小管損傷病理評(píng)分、NGAL水平和TUNEL陽(yáng)性腎小管細(xì)胞顯著高于WT CLP組小鼠（P＜0.01），見圖3B～E。

Figure 1.CLP caused changes in urine output，blood urea nitrogen（BUN）and serum creatinine.Mean±SD.n=3.*P＜0.05，**P＜0.01 vs 0 h；#P＜0.05，##P＜0.01 vs sham group.圖1 CLP引起尿量、血尿素氮和肌酐的變化

Figure 2.CLP decreased MMP7 expression in mouse kidneys.A：Western blot detection of MMP7 protein expression in kidney tissues at different time points after CLP；B：representative images of co-staining with MMP7 antibody and nephron segmentspecific markers 24 h after CLP（scale bar=20 μm）.DBA：Dolichos biflorus agglutinin；LTA：Lotus tetragonolobus agglutinin；NCC：Na+-Cl-cotransporter；NKCC2：Na+-K+-2Cl-cotransporter 2.Mean±SD.n=3.**P＜0.01 vs sham group.圖2 CLP誘導(dǎo)的膿毒癥小鼠腎臟中MMP7的表達(dá)減少

4 MMP7在體外可減輕腎小管細(xì)胞凋亡

如圖4A所示，HKC-8在與LPS孵育后，檢測(cè)到大量細(xì)胞凋亡；而MMP7重組蛋白孵育在很大程度上減輕來自LPS誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。Western blot分析表明，LPS誘導(dǎo)了mTORC1表達(dá)，而MMP7可以抑制LPS誘導(dǎo)的mTORC1表達(dá)（圖4B）。然后我們探討了MMP7是否可以通過其蛋白水解活性直接消化mTORC1。在無細(xì)胞試管中將全長(zhǎng)mTORC1蛋白與MMP7一起孵育，如圖4C所示，MMP7能夠明顯切割mTORC1，產(chǎn)生分子量為18 kD的較小片段。此外，MMP抑制劑II（一種MMP7選擇性抑制劑）阻止了MMP7介導(dǎo)的mTORC1降解（圖4D）。

5 外源性MMP7對(duì)CLP誘導(dǎo)AKI的腎臟保護(hù)

為了進(jìn)一步證實(shí)MMP7在AKI中的作用，我們通過在MMP7-KO小鼠中注射外源性MMP7進(jìn)行了救援實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示小鼠腎組織中MMP7表達(dá)顯著增加（圖5A）。在CLP后1 d，與載體對(duì)照相比，接受外源性MMP7的MMP7-KO小鼠腎小管損傷病理評(píng)分、NGAL水平、TUNEL陽(yáng)性腎小管細(xì)胞和mTORC1蛋白表達(dá)顯著降低（P＜0.01），見圖5B～E。

討 論

在本研究中，我們使用體內(nèi)MMP7-KO小鼠作為研究對(duì)象，并采用CLP法誘導(dǎo)膿毒癥模型。與嚙齒動(dòng)物中使用的許多其他膿毒癥模型（例如內(nèi)毒素血癥）相比，CLP能更可靠地概括了人類疾病的許多方面［9］。此外，在代謝籠中單獨(dú)飼養(yǎng)小鼠可能會(huì)重現(xiàn)慢性日常壓力，這被證明是動(dòng)物膿毒癥建模的重要組成部分［10］。膿毒癥是一種異質(zhì)的臨床實(shí)體關(guān)于部位、物種和對(duì)感染的反應(yīng)，限制了所有標(biāo)準(zhǔn)化嘗試在體內(nèi)模擬該綜合征的適用性。盡管有這些限制，我們的研究結(jié)果在病理生理學(xué)上與大型哺乳動(dòng)物和人類患者的研究結(jié)果一致［11］。在此基礎(chǔ)上，我們調(diào)查了MMP7對(duì)膿毒癥期間AKI的影響。結(jié)果顯示，MMP7通過減輕腎小管細(xì)胞凋亡具有腎臟保護(hù)作用。此外，MMP7的腎保護(hù)機(jī)制可能與直接降解mTORC1有關(guān)。這些結(jié)果表明，MMP7可作為膿毒癥AKI的潛在治療靶點(diǎn)。

Figure 3.Endogenous MMP7 deletion（MMP7-KO）aggravated CLP-induced AKI.A：the protein levels of MMP7 in kidney tissues of wild-type（WT）and MMP7-KO mice；B：HE staining，NGAL immunohistochemical staining and TUNEL staining were used to assess renal pathology，tubular damage and tubular apoptosis after CLP，respectively（scale bar=50 μm）；C：pathological score of renal tubular injury；D：densitometry of NGAL signal after CLP；E：quantification of TUNEL-positive cells.Mean±SD.n=8.**P＜0.01 vs sham（WT）group；##P＜0.01 sham（MMP7-KO）group；△△P＜0.01 vs CLP（WT）group.圖3內(nèi)源性MMP7缺失（MMP7-KO）加重CLP誘導(dǎo)的AKI

Figure 4.MMP7 protected renal tubular cells from apoptosis by cleaving mTORC1 in vitro.A：Hoechst 33342/PI staining evaluated the effect of MMP7 recombinant protein on LPS-induced apoptosis of HKC-8 cells；B：representative Western blot showing the effect of MMP7 recombinant protein on LPS-induced mTORC1 protein expression in HKC-8 cells；C：representative SDS-PAGE showing that MMP7 directly degrades mTORC1；D：Western blot analysis showing mTORC1 and its degraded fragments after incubation with MMP7 in the absence or presence of MMP inhibitor II.Mean±SD.n=3.**P＜0.01 vs control group；##P＜0.01 vs LPS+vector group.圖4 MMP7在體外通過切割mTORC1減輕腎小管細(xì)胞凋亡

Figure 5.Renal protective effect of exogenous MMP7 on CLP-induced AKI.A：MMP7 recombinant protein up-regulated the protein level of MMP7 in kidney tissues of MMP7-KO mice；B：HE staining，NGAL immunohistochemical staining and TUNEL staining were used to evaluate the effects of MMP7 recombinant protein on renal pathology，renal tubular injury and renal tubular apoptosis in MMP7-KO mice after CLP，respectively（scale bar=50 μm）；C：pathological score of renal tubular injury；D：densitometry of NGAL signal；E：quantification of TUNEL-positive cells；F：Western blot showing the effect of MMP7 recombinant protein on mTORC1 protein expression in MMP7-KO mouse kidney tissues.Mean±SD.n=10.**P＜0.01 vs CLP+vector group.圖5外源性MMP7對(duì)CLP誘導(dǎo)AKI的影響

眾所周知，由于高能量消耗，近端腎小管上皮特別容易受到CLP損傷［12］。大量研究表明，在急性腎功能衰竭的病理生理學(xué)中，腎小管上皮從基底膜上脫落［13-14］。然而，并非所有從基底膜脫落的管狀細(xì)胞都是細(xì)胞壞死或凋亡性死亡，有些仍然存活。此外，腎小管上皮的連接不穩(wěn)定性會(huì)進(jìn)一步促進(jìn)腎損傷［15］。本研究證實(shí)了CLP后腎小管細(xì)胞凋亡顯著增加，并且腎小管中MMP7顯著下調(diào)。MMP7是一種鋅和鈣依賴性內(nèi)肽酶，它可以降解多種底物，例如細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞-細(xì)胞粘附蛋白，調(diào)節(jié)細(xì)胞遷移和炎癥反應(yīng)［16-17］。從腎上皮合成的MMP7減少可導(dǎo)致蛋白尿性慢性腎病中的腎素耗竭和腎小球通透性受損［18］。此外，MMP7的缺失還與AKI中幾種促炎細(xì)胞因子（如MCP-1、TNF-α和RANTES）的表達(dá)增加有關(guān)，它們調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和機(jī)體免疫參與AKI進(jìn)展［5］。與AKI患者尿液中MMP7降低一致［4］，本研究中CLP誘導(dǎo)的AKI模型中腎臟MMP7的表達(dá)顯著降低。MMP7蛋白主要定位于近端小管。這些結(jié)果表明AKI患者的尿MMP7減少最有可能與受傷的小管釋放減少有關(guān)。

mTORC1在腎臟疾病中的作用已被廣泛研究。用雷帕霉素抑制mTORC1可抑制TGF-β1誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化［19］。此外，腎組織中mTORC1的異常激活會(huì)導(dǎo)致一系列以細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和分化異常為特征的疾病，如PKD、腎細(xì)胞癌和腎小球硬化［20］。本研究在CLP誘導(dǎo)的AKI中觀察到MMP7的敲 除誘 導(dǎo)mTORC1表 達(dá)，表明MMP7抑制mTORC1介導(dǎo)的凋亡途徑。這一結(jié)論得到了幾條證據(jù)的支持。首先，MMP7的缺失會(huì)進(jìn)一步增加CLP誘導(dǎo)的腎小管凋亡細(xì)胞。其次，MMP7可以在非細(xì)胞系統(tǒng)中直接切割純化的mTORC1蛋白，證實(shí)了其通過蛋白水解降解破壞mTORC1的能力。第三，救援實(shí)驗(yàn)證實(shí)MMP7通過抑制MMP7缺失小鼠中的mTORC1活化來減輕CLP后的細(xì)胞凋亡。

總之，本研究表明，腎臟MMP7下調(diào)可促進(jìn)小鼠膿毒癥AKI發(fā)生發(fā)展。MMP7通過降解mTORC1減輕細(xì)胞凋亡，從而具有腎臟保護(hù)作用。因此，膿毒癥AKI后早期誘導(dǎo)MMP7可能是腎臟啟動(dòng)腎小管存活所必需的。