2018—2021 年天水及周邊地區(qū)家禽安卡拉病的流行病學(xué)調(diào)查

王玙 趙保生 成小莉

（甘肅省天水市動物疫病預(yù)防控制中心，甘肅天水 741000）

安卡拉病又稱心包積液—肝炎綜合征，是由腺病毒科、禽腺病毒屬的I 群禽腺病毒血清4 型（Fowl Adenovirus 4）所引起的一種以心包積液和肝炎為典型病理特征，兼具有肺水腫、腎水腫等病變的高度接觸性傳染病。該病潛伏期短、發(fā)病快，可以水平傳播，也可垂直傳播，主要侵害肝臟、脾臟、腎臟，病禽發(fā)病快，多以急性死亡為主[1]。該病的臨床表現(xiàn)為滲透壓減少，血管通透性增加，脾臟腫大，全身組織循環(huán)不暢，組織液聚集于心臟，進而引發(fā)心包積液[2]。主要感染3～5 周齡的肉雞，致死率高達80%，一般在感染后3 周開始出現(xiàn)死亡，第4 周死亡率達到最高，第5 周死亡率開始下降。1987 年首次發(fā)現(xiàn)于巴基斯坦卡拉奇靠近安卡拉的地方而得名，隨后在亞洲、歐洲和南美洲等地區(qū)流行[3]。1997 年，我國在肉雞上首次報道有該病發(fā)生，自2015 年以來，我國山東、江蘇、河南等9 個省的家禽相繼發(fā)生該病，并迅速在我國大范圍流行，嚴(yán)重威脅養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展[4]。根據(jù)不同國家的研究情況看，F(xiàn)ADV-4 是該病流行的主要血清型[5]。近幾年，禽流感、新城疫等疫情相對穩(wěn)定，但安卡拉、禽滑液囊炎等新發(fā)病越來越多，給養(yǎng)殖戶造成巨大的經(jīng)濟損失，不間斷的區(qū)域監(jiān)測十分重要。本研究連續(xù)3 年對天水及周邊地區(qū)家禽安卡拉病的流行情況展開調(diào)查，對部分養(yǎng)殖場發(fā)病家禽進行臨床觀察，對死亡家禽進行剖檢，觀察病理變化并采樣進行相應(yīng)的實驗室檢測，基本掌握了當(dāng)前家禽安卡拉病的基本流行情況，以期為當(dāng)?shù)丶仪莅部ɡ〉木C合防控提供對策和數(shù)據(jù)支撐。

1 流行病學(xué)調(diào)查

1.1 現(xiàn)場調(diào)查

自2017 年以來，天水及周邊成縣、禮縣等地區(qū)規(guī)模雞場發(fā)現(xiàn)少量雞只精神萎靡不振，雙翅耷拉，排黃色稀糞，伴有神經(jīng)癥狀，兩腿劃空，數(shù)分鐘內(nèi)死亡的病例，傳播速度快、死亡率高。2018 年后該病開始大面積流行，對養(yǎng)殖戶造成一定的恐慌和經(jīng)濟損失。本研究于2018 年6 月開始實地走訪家禽養(yǎng)殖場、部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)動物疫控與畜牧技術(shù)服務(wù)中心、獸藥店、種禽批發(fā)商，對家禽引種、免疫、禽只調(diào)運以及近幾年主要疫病和新發(fā)病的種類、發(fā)病原因、傳染源、傳播途徑等情況展開調(diào)查。

1.2 樣品采集

在實地走訪調(diào)查過程中，根據(jù)養(yǎng)殖場以往發(fā)病史和發(fā)病現(xiàn)狀隨機選擇93 個雞場、1 個鴨場、2 個信鴿場采集血液樣本1222 份，其中雞血液樣本1070 份（有疑似安卡拉臨床癥狀及發(fā)熱階段的病雞血液樣本144 份）、鴨子血液樣本90 份、信鴿血液樣本62 份，置4℃冰箱中過夜，自行析出血清后用移液槍吸取上層血清至另一個新的無菌EP 管中，做好標(biāo)記后置于-20℃保存，待檢。

1.3 實驗室檢測

1.3.1 試劑

FAVDⅠAb.ELISA 檢測試劑盒，美國KERNEL公司生產(chǎn)，批號 200212；禽腺病毒血清4 型核酸檢測試劑盒（熒光PCR 法），撫生實業(yè)公司生產(chǎn)，批號FADV420192201。

1.3.2 方法

首先通過ELISA 檢測方法對1222 血清樣本進行安卡拉病抗體檢測，以便對可能感染過安卡拉病毒的禽只和接種過安卡拉疫苗的禽只進行初步篩選，再采用熒光PCR 檢測方法對有疑似安卡拉臨床癥狀的144份病雞樣本和安卡拉抗體檢測呈陽性的23 份鴨子血清、14 份信鴿血清進行安卡拉病毒核酸檢測并確診。所有檢測方法均按著試劑盒說明書進行。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

利用Excel 對所有實驗室檢測結(jié)果根據(jù)不同檢測方法、動物種類、不同日齡進行統(tǒng)計。

2 調(diào)查結(jié)果

2.1 現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查基本情況

本研究現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查時間為2018 年6—2021年12 月，共計調(diào)查1080 個規(guī)模養(yǎng)殖場。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，天水地區(qū)家禽安卡拉病于2017 年開始零星發(fā)病，當(dāng)時由于缺少疫苗保護和有效的防控措施，加之混合感染普遍存在，2018—2019 年后開始大面積流行。通過查看免疫記錄和診療記錄，并經(jīng)養(yǎng)殖場人員證實，起初養(yǎng)殖戶主要通過注射法氏囊精制卵黃抗體和中藥來控制該病的發(fā)生，但由于安卡拉病毒持續(xù)在雞群內(nèi)潛伏感染，造成雞群隱性感染或帶毒傳播，使得該病的流行一直在擴大，加之該病傳染性強，死亡率高，給養(yǎng)殖戶造成很大的經(jīng)濟損失，2019 年后半年大多養(yǎng)殖戶開始接種市面上非法生產(chǎn)的腺病毒疫苗來控制該病，非法疫苗的接種對家禽安卡拉病的感染起到一定的保護作用。2020 年以來，安卡拉病得到一定的控制且無大面積流行，趨于平穩(wěn)勢態(tài)，但在一些養(yǎng)殖場仍有零星發(fā)生。

2.2 現(xiàn)場剖檢

在流行病學(xué)調(diào)查過程中，對發(fā)病當(dāng)天死亡雞只進行解剖，觀察到心包積有淡黃、透明的滲出液，呈膠凍狀，心肌柔軟（圖1a）；肝臟充血腫大、邊緣變圓、質(zhì)地變脆（圖1b）。

圖1 病死雞心臟解剖圖

2.3 傳染源和傳播途徑

經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，被污染的雞胚和種公雞精液是該病的主要傳染源。由于天水種雞場相對較少，養(yǎng)雞場雞苗主要從陜西、寧夏兩省引進，種源凈化管控措施不到位，導(dǎo)致該病傳入本地，使得垂直傳播成了主要傳播途徑。其次是場群內(nèi)患病雞、隱性帶毒雞、被污染的環(huán)境、飲水、飼料等形成的水平傳播。

2.4 實驗室檢測

2.4.1 雞安卡拉病檢測結(jié)果統(tǒng)計

通過LISA 檢測方法共檢測雞血清樣本1070 份（包括有安卡拉臨床癥狀及發(fā)熱階段的病雞樣本144份），結(jié)果顯示，2018—2021 年雞安卡拉抗體陽性率為23.68%～76.52%（平均為57.76%），場陽性率為33.33%～83.87%（平均為62.37%）；通過熒光PCR檢測方法對144 份病雞血清樣本進行安卡拉病毒核酸檢測，結(jié)果顯示，2018—2021 年雞安卡拉病毒核酸陽性率為12.5%～34.290%（平均為24.31%）、場陽性率為40.00%～66.67%（平均為47.83%）。具體數(shù)據(jù)見表1。

表1 2018-2021 年雞安卡拉病實驗室檢測結(jié)果

2.4.2 不同日齡肉雞和蛋雞安卡拉病毒核酸檢測統(tǒng)計

PCR 檢測結(jié)果顯示，45～130 日齡肉雞病毒核酸陽性率為29.73%，場陽性率為8.11%；130～450 日齡肉雞病毒核酸陽性率為17.14%，場陽性率為5.71%；45～130 日齡蛋雞病毒核酸陽性率為19.05%，場陽性率為9.52%；130～450 日齡蛋雞病毒核酸陽性率為21.43%，場陽性率為7.14%。具體數(shù)據(jù)見表2。

表2 不同日齡肉雞蛋雞安卡拉病毒核酸檢測結(jié)果

2.4.3 其他家禽安卡拉病檢測結(jié)果統(tǒng)計

通過LISA 檢測方法共檢測鴨子血清樣本90 份、信鴿血清樣本62 份，結(jié)果顯示，鴨子和信鴿安卡拉抗體陽性率分別為25.56%、22.58%，場陽性率分別為100%、50%；通過熒光PCR 檢測方法對安卡拉抗體檢測呈陽性的23 份鴨子血清樣本、14 份信鴿血清樣本進行病毒核酸檢測，結(jié)果顯示鴨子和信鴿安卡拉病毒核酸陽性率、場陽性率全部為0%。具體數(shù)據(jù)見表3。

表3 鴨子信鴿安卡拉病實驗室檢測結(jié)果

3 討論

本次流行病學(xué)調(diào)查及實驗室檢測證實了該病在天水及周邊地區(qū)規(guī)模養(yǎng)雞場普遍存在，主要傳染源為被污染的雞胚和種公雞精液。因此，該病的預(yù)防控制首先要確定種源安全，不要從疫區(qū)引進雞苗。其次要及時進行實驗室檢測，規(guī)模雞場在發(fā)病初期應(yīng)迅速送檢，通過實驗室檢測診斷盡快確診病因，對癥處理，以免延誤病情造成更大的損失。三是加強飼養(yǎng)管理，嚴(yán)格生物安全措施，進場車輛、物料、墊料、淘汰雞、籠具等嚴(yán)格執(zhí)行本場制定的消毒程序和方案，加強糞便無害化處理，有研究表明，40 日齡以內(nèi)的雞群是本病的高發(fā)雞群[6]，因此在雛雞飼養(yǎng)過程中要加加強該病的防控。四是選擇正規(guī)廠家的優(yōu)質(zhì)疫苗，2021年6 月，我國首個禽腺病毒病滅活疫苗（新流腺三聯(lián)滅活疫苗）獲批新獸藥證書，該疫苗的上市可為該地區(qū)家禽養(yǎng)殖業(yè)提供疫苗保障。

4 結(jié)論

該研究于2018—2021 年對1080 個規(guī)模養(yǎng)殖場開展現(xiàn)場走訪、實地勘察，對93 個不同規(guī)模雞場、1 個鴨場、2 個信鴿場的1222 份血清樣本進行實驗室檢測。調(diào)查結(jié)果顯示，該病在天水及周邊地區(qū)規(guī)模養(yǎng)雞場普遍存在，低日齡肉雞感染率高于蛋雞，隨著日齡增加，肉雞感染率降低，蛋雞感染率增加，鴨場和鴿子場尚未發(fā)現(xiàn)感染。