實(shí)驗(yàn)室檢測在動物疫病防控中的應(yīng)用

李克麗

（南召縣動物疫病預(yù)防控制中心，河南 南召 474650）

1 國外獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測現(xiàn)狀

當(dāng)前，國外常見的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測流程如下：現(xiàn)場獸醫(yī)人員將病例提交到某大學(xué)獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室人員根據(jù)病例情況和病變情況選擇診斷方法，如常用的方法有血清學(xué)診斷、分子診斷、組織病理切片診斷、細(xì)菌學(xué)診斷、毒理和營養(yǎng)學(xué)、病毒學(xué)、臨床藥理學(xué)等，實(shí)驗(yàn)室對檢測結(jié)果進(jìn)行分析和總結(jié)，達(dá)成診斷結(jié)果，然后再向現(xiàn)場獸醫(yī)人員提供報(bào)告和建議，幫助養(yǎng)殖場戶疫病防控策略的制定，促進(jìn)企業(yè)的發(fā)展。

2 我國獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測現(xiàn)狀

我國獸醫(yī)檢測實(shí)驗(yàn)室的類別比較多，主要有以下五類。第一類是單純性的教學(xué)科研機(jī)構(gòu)，如大學(xué)和科研院所的一些獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室。在做科研的同時(shí)，也可以做一些研發(fā)。第二類是政府相關(guān)機(jī)構(gòu)，如省、市、縣區(qū)的動物疫控機(jī)構(gòu)，這些疫控機(jī)構(gòu)主要做一些重大動物疫病抗體和病原檢測。第三類是相關(guān)企業(yè)，主要是一些生物公司和疫苗廠家等，這些企業(yè)自身就有實(shí)驗(yàn)室，可以免費(fèi)為購買本企業(yè)產(chǎn)品的養(yǎng)殖場做檢測。第四類是豬場和相關(guān)的養(yǎng)殖集團(tuán)。2018年非洲豬瘟發(fā)生以來，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求有條件的養(yǎng)殖企業(yè)可以自建非洲豬瘟實(shí)驗(yàn)室。所以，我國很多有條件的養(yǎng)殖企業(yè)均有自己的實(shí)驗(yàn)室。第五類是第三方檢測機(jī)構(gòu)。這類檢測機(jī)構(gòu)主要協(xié)助疫控機(jī)構(gòu)和養(yǎng)殖企業(yè)檢測并收取一定的費(fèi)用。

我國獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室疾病診斷的流程如下：患病動物有兩種檢測方法，一種是微生物學(xué)方法，即采集患病動物的血液、糞便、尿液、組織、黏膜拭子。這些病料會被兵分兩路進(jìn)行檢測，一路是培養(yǎng)基培養(yǎng)，提純、分離鑒定和病原微生物的確定；另一路是用分子生物學(xué)方法直接鑒定，如免疫熒光抗體反應(yīng)、分子核酸雜交、PCR 等。另一種是免疫學(xué)方法，即收集血液樣品檢測疑似病原的抗體反應(yīng)，用ELISA 乳膠凝集的方法進(jìn)行抗體評價(jià)。檢測結(jié)果在反饋送檢人的同時(shí)，機(jī)構(gòu)會保存一份存檔。

3 細(xì)菌性疾病采樣及檢測

細(xì)菌性疾病有很多種，如呼吸系統(tǒng)細(xì)菌病原—支原體，發(fā)病動物通常表現(xiàn)為咳嗽，可能伴發(fā)有嚴(yán)重的肺炎，這主要以保育豬和生長育肥豬發(fā)病較多，如果懷疑是支原體感染，可采集病豬的肺臟和血清，所用檢測方法主要有PCR、支原體培養(yǎng)、熒光PCR、ELISA。呼吸系統(tǒng)細(xì)菌病原-多殺性巴氏桿菌，發(fā)病豬常表現(xiàn)為咳嗽和急性死亡。這種病主要危害保育豬和生長育肥豬，采集發(fā)病豬的肺臟具有重要的診斷意義，檢測方法主要有細(xì)菌培養(yǎng)和血清分型以及PCR。消化系統(tǒng)病原—大腸桿菌，發(fā)病豬表現(xiàn)為腹瀉、突然死亡、水腫，以哺乳和保育仔豬發(fā)病居多，采集發(fā)病豬的小腸、大腸、糞便拭子和腦具有診斷意義。檢測方法以PCR 為主。消化系統(tǒng)病原—勞森菌，感染后，發(fā)病豬主要表現(xiàn)為腹瀉、回腸壁增厚，以生長育肥豬感染居多，采集回腸和糞便具有診斷意義，檢測方法主要以熒光PCR為主。

4 病毒性疾病采樣及檢測

呼吸系統(tǒng)病毒，如豬圓環(huán)病毒II 型，發(fā)病豬常表現(xiàn)為生長緩慢、呼吸困難、淋巴結(jié)腫大、腹瀉、面色蒼白等，以保育豬和生長育肥豬發(fā)病居多，其中采集肺臟、脾臟、淋巴結(jié)、腎臟等具有診斷意義。檢測方法主要以熒光定量PCR和病毒分離為主。呼吸系統(tǒng)病毒—A型流感病毒，發(fā)病豬常表現(xiàn)為咳嗽、精神沉郁、呼吸困難、體溫增高、呈現(xiàn)突然暴發(fā)并快速傳播，以哺乳、保育和育肥豬發(fā)病居多，采集肺鼻拭子、血液和氣管等具有診斷意義。檢測方法主要以病毒分離、熒光定量PCR、測序?yàn)橹?。消化系統(tǒng)病毒—輪狀病毒和傳染性胃腸炎病毒，發(fā)病豬常表現(xiàn)為腹瀉、嘔吐、脫水，以哺乳期、保育期和生長育肥階段的豬發(fā)病為主，病料采集以大腸、小腸和糞便拭子為主，所用的檢測方法主要以PCR、病毒分離和測序?yàn)橹??！?/p>