一例犬多中心型淋巴瘤的診治

李汶珍 ，談 凱 ，於 敏

（1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇 泰州 225300；2.蘇州市姑蘇區(qū)卓越寵物醫(yī)院，江蘇 蘇州 215008）

犬淋巴瘤是指原發(fā)于犬淋巴結(jié)和結(jié)外組織處的淋巴細(xì)胞及其前體細(xì)胞的惡性腫瘤，是犬腫瘤中最常見(jiàn)的造血系統(tǒng)腫瘤之一[1]?？煞譃槎嘀行男汀⑾兰扒翱v膈型、皮膚型和結(jié)外型，80%以上的淋巴瘤為多中心型[2]。多中心型淋巴瘤的典型表現(xiàn)是淺表部位淋巴結(jié)進(jìn)行性腫大，按壓無(wú)痛感，觸摸有彈性且腫大位置會(huì)與周?chē)M織明顯游離[3]。對(duì)該病需通過(guò)病史調(diào)查、影像學(xué)檢查、實(shí)驗(yàn)室檢查以及采用分子診斷技術(shù)進(jìn)行診斷[4]，但是病理組織學(xué)方法仍然是確定腫瘤性質(zhì)的主要手段和金標(biāo)準(zhǔn)[5]。

1 病例介紹

2019年12月，本院收治一病犬，年齡為13歲，雌性。未經(jīng)絕育，體重7.9 kg，未經(jīng)驅(qū)蟲(chóng)，已免疫。主人發(fā)現(xiàn)其食欲不振，下頜及后肢有腫物，遂帶來(lái)醫(yī)院進(jìn)行檢查。

2 診斷

2.1 基礎(chǔ)體征檢查

經(jīng)檢查，患犬體溫為39.8℃，略高于正常體溫。呼吸次數(shù)為48次/min，呼氣較重，吸氣較急。心率為160次/min，略高于正常水平。多尿、精神沉郁、呼吸吃力。前肢內(nèi)側(cè)有明顯的皮下出血點(diǎn)，下頜淋巴結(jié)（圖1）、腘淋巴結(jié)明顯腫大且具有游離性。腹股溝淋巴結(jié)（圖2）和肩前淋巴結(jié)也明顯腫大。

圖1 下頜淋巴結(jié)腫大

圖2 腹股溝淋巴結(jié)腫大

2.2 血常規(guī)及生化學(xué)檢查

采集后肢靜脈血，分別進(jìn)行血常規(guī)、生化學(xué)檢查和C－反應(yīng)蛋白檢查，檢查結(jié)果見(jiàn)表1、表2。

表1 血常規(guī)檢查結(jié)果

表2 血液生化檢查結(jié)果

由表1可知，紅細(xì)胞比容、紅細(xì)胞、血紅蛋白、平均紅細(xì)胞體積、平均血紅蛋白量和血小板的數(shù)值均低于正常范圍，提示嚴(yán)重貧血，考慮非再生性貧血。單核細(xì)胞數(shù)量顯著增多，考慮炎癥。平均血小板體積為14.9 fL，略高于正常水平，考慮存在血小板凝集現(xiàn)象，懷疑為慢性DIC。

由表2可知，血液膽固醇數(shù)值明顯偏低，提示存在肝腎疾病或犬體自身內(nèi)分泌異常。堿性磷酸酶數(shù)值高于正常值，說(shuō)明肝臟部分（膽管系統(tǒng)）存在疼痛反應(yīng)。C-反應(yīng)蛋白數(shù)值明顯升高，提示存在明顯的全身炎性反應(yīng)。

2.3 B超檢查

對(duì)病犬全腹進(jìn)行超聲檢查，腹內(nèi)團(tuán)塊及異常典型聲像圖見(jiàn)圖3～圖6。

圖3 淋巴結(jié)腫大

圖4 腸系膜淋巴結(jié)群腫大

圖5 脾臟結(jié)節(jié)

圖6 肝臟結(jié)節(jié)

經(jīng)全腹彩超檢查，發(fā)現(xiàn)腹腔淋巴結(jié)腫大（圖3），腸系膜淋巴結(jié)群腫大（圖4），脾臟、肝臟出現(xiàn)腫大及結(jié)節(jié)（圖5、圖6），說(shuō)明全身淋巴器官均受到侵襲。

2.4 X光檢查

拍攝犬胸腹部正位與側(cè)位X線片，結(jié)果見(jiàn)圖7、圖8。

圖7 胸腹部右側(cè)位影像

圖8 胸腹部正側(cè)位影像

胸腹部正側(cè)位影像顯示，犬體內(nèi)無(wú)結(jié)石，脾臟、肝臟腫大，有淺表淋巴結(jié)，淺表淋巴結(jié)已腫大至可見(jiàn)程度。

2.5 FNA細(xì)胞學(xué)檢查

將5 mL注射器針頭插入腘淋巴結(jié)抽吸內(nèi)容物，在干凈的玻片上對(duì)抽出物進(jìn)行迪夫快速染色 （Diff-Quick Stain)，結(jié)果見(jiàn)圖9。鏡檢結(jié)果表明，絕大多數(shù)細(xì)胞表現(xiàn)為大淋巴細(xì)胞性，細(xì)胞質(zhì)具有明顯的嗜堿性，淋巴細(xì)胞增生且母細(xì)胞數(shù)量高于50%。

圖9 腘淋巴結(jié)穿刺鏡檢圖

2.6 組織病理學(xué)檢查

切除患犬一處完整的淋巴結(jié)，放置于中性福爾馬林中，按照常規(guī)石蠟切片制作步驟制作石蠟切片，結(jié)果見(jiàn)圖10。組織病理學(xué)檢查結(jié)果顯示，腫瘤細(xì)胞呈彌漫性、密集性增殖，淋巴結(jié)固有結(jié)構(gòu)消失。腫瘤細(xì)胞個(gè)體較大，呈多形性外觀，細(xì)胞間界限明顯。多數(shù)增殖細(xì)胞呈輕度嗜酸性或兩染性，細(xì)胞質(zhì)較正常細(xì)胞豐富。細(xì)胞核以圓形、類(lèi)圓形居多。

圖10 組織病理學(xué)鏡檢圖（HE，10×40）

2.7 免疫組織化學(xué)檢查

大多數(shù)腫瘤細(xì)胞呈CD79a染色陽(yáng)性（圖11），少量呈CD3染色陽(yáng)性（圖12），符合B細(xì)胞性淋巴瘤特征。

圖11 大多數(shù)腫瘤細(xì)胞呈CD79a染色陽(yáng)性

圖12 少量腫瘤細(xì)胞呈CD3染色陽(yáng)性

3 治療

經(jīng)臨床檢查、實(shí)驗(yàn)室檢查和免疫組織化學(xué)檢查，確診該犬患有多中心型B細(xì)胞淋巴瘤?？紤]到該腫瘤侵襲性較強(qiáng)，且綜合犬本身的身體狀況，最終選擇CHOP（環(huán)磷酰胺、多柔比星、長(zhǎng)春新堿和潑尼松）聯(lián)合化療方案。在使用該方案后的第一個(gè)化療周期內(nèi)，由于犬對(duì)藥物的敏感性較高，精神狀態(tài)明顯好轉(zhuǎn)，化療效果顯著，體表淋巴結(jié)明顯縮小。但也出現(xiàn)了一定的副作用，如掉毛以及化療第2天精神不濟(jì)、食欲下降等。經(jīng)過(guò)3輪化療，除出現(xiàn)掉毛現(xiàn)象外，未見(jiàn)其他不良反應(yīng)。

4 討論

在本病例中，病犬貧血、血小板減少、單核細(xì)胞增多、堿性磷酸酶升高，此與既往的研究結(jié)論相似，但并未出現(xiàn)高鈣血癥。

正常淋巴結(jié)主要由小淋巴細(xì)胞組成，其約占有核細(xì)胞總數(shù)的75%～85%。同時(shí)也存在少量中大淋巴細(xì)胞（主要是淋巴母細(xì)胞），漿細(xì)胞數(shù)量不超過(guò)3%。其余細(xì)胞為巨噬細(xì)胞和肥大細(xì)胞等，一般都少于1%[6]。細(xì)針穿刺細(xì)胞法（fine needle aspiration cytology，F(xiàn)NAC）是一種快速、敏感、微創(chuàng)的診斷技術(shù)，其采樣方式簡(jiǎn)單，費(fèi)用低[7]。

病理組織學(xué)檢查仍是診斷淋巴瘤最為有效和可靠的方法。已知淋巴細(xì)胞能表達(dá)多種抗原，如CD3、CD20、CD16、CD56、PCNA 和 mTOR 等[8]。 CD79a 能從B細(xì)胞分化的最初階段直至漿細(xì)胞階段予以全程表達(dá)，并且它在正常細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞的B細(xì)胞中均有表達(dá)，還與髓系及T細(xì)胞無(wú)交叉[9]。本病例通過(guò)免疫組織化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)腫瘤呈CD79a染色陽(yáng)性，少量呈CD3染色陽(yáng)性，故最終判定為B細(xì)胞淋巴瘤。