Nod樣受體蛋白3、酪氨酸激酶B受體與顱腦腫瘤術(shù)后伴抑郁的關(guān)系

趙運(yùn)杰

長垣市中醫(yī)醫(yī)院外二科，河南 新鄉(xiāng) 453400

顱腦腫瘤是發(fā)生在顱腔內(nèi)的神經(jīng)腫瘤，顱腦腫瘤發(fā)病率約在7～10/10萬，且多數(shù)為惡性腫瘤，可出現(xiàn)在任何年齡階段［1］。目前，針對顱腦腫瘤的治療方法主要以手術(shù)為主，但顱腦腫瘤患者術(shù)后多數(shù)會出現(xiàn)焦慮、緊張、恐懼的心理，嚴(yán)重影響患者的治療效果以及術(shù)后恢復(fù)效果，因此對于顱腦腫瘤患者術(shù)后的抑郁預(yù)測是較為重要的［2］。酪氨酸激酶B受體（tyrosine kinase receptor B，TrkB）可與血清腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子相結(jié)合，從而發(fā)揮生物學(xué)功能，對神經(jīng)元發(fā)揮保護(hù)的作用［3］。Nod樣受體蛋白3（NOD-like receptor protein 3，NLRP3）是具有特征性的炎性體，能夠在被激活后介導(dǎo)組織的炎性反應(yīng)［4］。有研究［5］發(fā)現(xiàn)炎癥反應(yīng)是抑郁癥生理學(xué)的潛在促進(jìn)因子。因此，本研究選取長垣市中醫(yī)醫(yī)院收治的60例行顱腦腫瘤術(shù)患者的臨床資料進(jìn)行分析，以研究NLRP3、TrkB與顱腦腫瘤術(shù)后伴抑郁的關(guān)系，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取2018年10月—2020年10月長垣市中醫(yī)醫(yī)院收治的60例行顱腦腫瘤術(shù)患者作為研究對象。術(shù)后采用漢密爾頓抑郁量表（hamilton depression scale，HAMD）評分進(jìn)行分組，總共17項(xiàng)，總分為35分，＜8分為正常，8～20分為可能存在抑郁癥，20～35分為確定存在抑郁癥，將得分＜8分的患者列入對照組（n=26），得分8～20分的患者列入抑郁組（n=34）。對照組26例，男12例，女14例；年齡24～71歲，平均年齡（50.21±5.98）歲；BMI指數(shù)18～22 kg/m2，平均BMI指數(shù)（20.23±1.04）kg/m2。抑郁組34例，男18例，女16例；年齡24～72歲，平均年齡（50.32±5.07）歲；BMI指數(shù)18～22 kg/m2，平均BMI指數(shù)（20.21±1.11）kg/m2。兩組患者性別、年齡、BMI指數(shù)等一般資料具有可比性（P＞0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：患者于樣本醫(yī)院接受顱腦腫瘤手術(shù)，患者精神意志正常可接受HAMD量表評分，患者年齡＞18歲。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：既往存在抑郁癥，患者家族存在抑郁癥病史，患者資料不完整。

1.2 方法

血清NLRP3、TrkB檢測方法：抽取患者空腹靜脈全血2.5 mL，高速離心分層，放入肝素抗凝管內(nèi)，采用3 000 r/min離心機(jī)進(jìn)行離心，10 min后分離血清，取上清液，送至檢驗(yàn)科。血清NLRP3選取杭州艾森生物科技有限公司的ACEA NovoCyte系列流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。在5 mL流式管內(nèi)加入適量細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液內(nèi)加入固定劑，在室溫孵育15 min，采用3 mL PBS洗滌1次，離心1 200～1 500 rpm 5 min，舍棄上清，震蕩，重新懸浮細(xì)胞。向細(xì)胞懸浮液內(nèi)加入破膜劑，加入20～50μL濃度為1：50的NLRP3I抗，加入Santa cruz公司的山羊抗兔FITC-II抗50μL，振蕩2 s在室溫內(nèi)孵育20 min，采用3 mL PBS洗滌，離心1 200～1 500 rpm 5 min，舍棄上清，重懸于BPS內(nèi)。隨后立即分析于0.5 mL的多聚甲醛固定液內(nèi)，在2～8℃內(nèi)避光儲存，在24 h內(nèi)分析。血清TrkB選取上海酶聯(lián)生物科技有限公司的ELISA試劑盒進(jìn)行檢測，首先將試劑搖勻，避免出現(xiàn)大量泡沫，根據(jù)待測樣品數(shù)量加入標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定板條數(shù)，標(biāo)本采用標(biāo)本稀釋液1∶1稀釋后滴入50μL反應(yīng)孔內(nèi)，加入稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品50μL，隨后加入50μL生物素標(biāo)記的抗體，蓋上模板，37℃下溫育1 h，甩去孔內(nèi)液體，每個(gè)孔加滿洗滌液，震蕩30 s，將洗滌液甩清并用吸水紙拍干，重復(fù)三次操作。每孔加入80μL親和鏈酶素-HRP，輕輕晃蕩搖勻，在37℃內(nèi)溫育30 min，甩去孔內(nèi)液體，每個(gè)孔加滿洗滌液，震蕩30 s，將洗滌液甩清并用吸水紙拍干，重復(fù)三次操作，每孔加入底物A和B50μL，輕輕晃勻，在37℃內(nèi)溫育10 min，取出酶標(biāo)板，并加入50μL終止液，隨后在450 nm波長對各個(gè)孔的OD值進(jìn)行測量。兩種指標(biāo)均為住院期間所測平均值。

1.3 觀察指標(biāo)

對比兩組患者血清NLRP3、TrkB水平；對血清NLRP3、TrkB與HAMD評分進(jìn)行相關(guān)性分析，同時(shí)采用ROC曲線分析血清NLRP3、TrkB對顱腦腫瘤患者合并抑郁的預(yù)測價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血清NLRP3和TrkB水平情況

實(shí)驗(yàn)組血清NLRP3顯著高于對照組，且實(shí)驗(yàn)組的血清TrkB低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者血清NLRP3和TrkB水平情況（±s）

表1 兩組患者血清NLRP3和TrkB水平情況（±s）

組別實(shí)驗(yàn)組（n=72）對照組（n=70）t值P值血清NLRP3（pg/mL）152.61±10.52 102.53±10.46 0.086 0.931血清TrkB（mg/mL）4.69±1.11 8.62±1.04 0.312 0.755

2.2 兩組患者HAMD評分情況

實(shí)驗(yàn)組HAMD評分為（15.61±1.04）分，對照組的HAMD評分為（4.53±1.46）分，實(shí)驗(yàn)組的評分高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=52.294，P＜0.05）。

2.3 血清NLRP3、TrkB與HAMD評分相關(guān)性分析

經(jīng)過相關(guān)性分析得出：血清NLRP3與HAMD評分呈正相關(guān)（r=0.622，P＜0.001），血清TrkB與HAMD評分評分呈負(fù)相關(guān)（r=-0.587，P＜0.001）。

2.4 血清NLRP3、TrkB對顱腦腫瘤患者合并抑郁的預(yù)測價(jià)值

通過ROC曲線得出：血清NLRP3、TrkB對顱腦腫瘤患者合并抑郁的預(yù)測靈敏度和特異度均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2、圖1。

圖1 血清NLRP3、TrkB對顱腦腫瘤患者合并抑郁的預(yù)測價(jià)值

表2 血清NLRP3、TrkB對顱腦腫瘤患者合并抑郁的預(yù)測價(jià)值

3 討論

顱腦腫瘤是目前臨床上較為多見的腫瘤，由于去發(fā)病位置特殊，所以，治療難度較大［6］。目前，主要采取手術(shù)治療，但更多的是對腦組織進(jìn)行保護(hù)，控制腦部或者脊髓血液失調(diào)的問題，但手術(shù)會對患者的精神狀況造成嚴(yán)重的影響，常?？砂橛薪箲]、抑郁的心理，對患者的術(shù)后效果造成嚴(yán)重的影響［7］。臨床上常采用HAMD量表進(jìn)行診斷，雖然效果較高，但是診斷不夠及時(shí)，可導(dǎo)致嚴(yán)重焦慮抑郁情緒，所以尋找較為敏感的血清指標(biāo)是較為重要的。近年來，尚無此方面的研究，本次研究首次研究血清NLRP3、TrkB與顱腦腫瘤術(shù)后伴抑郁的關(guān)系，為臨床的診治提供相關(guān)參考。

NLRP3是核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體的一種，具有自身固有免疫模式識別的受體，NLRP3炎癥體參與到人體免疫以及炎性反應(yīng)，包括內(nèi)、外源性多種信號均可激活NLRP3炎癥體，造成局部或者全身炎性反應(yīng)下游通道被激活［8］。本研究表示，相比于對照組，實(shí)驗(yàn)組血清NLRP3顯著更高，且血清NLRP3與HAMD評分呈正相關(guān)，表明血清NLRP3與患者抑郁程度呈明顯正相關(guān)。分析其原因：腦腫瘤患者術(shù)后因?yàn)橐钟舻臓顟B(tài)，產(chǎn)生心理應(yīng)激，而應(yīng)激反應(yīng)有可以誘導(dǎo)NLRP3炎癥體對糖皮質(zhì)激素抵抗進(jìn)行上調(diào)，加劇抑郁癥患者生物學(xué)異常，促進(jìn)炎性反應(yīng)。多項(xiàng)研究［9-10］表示，當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)慢性炎性反應(yīng)時(shí)，可激活內(nèi)源性損傷相關(guān)分子模式，激活NLRP3和凋亡相關(guān)半點(diǎn)樣蛋白相結(jié)合，進(jìn)而加劇炎性反應(yīng)，最終形成惡性循環(huán)。本研究表示，血清NLRP3對顱腦腫瘤患者合并抑郁的預(yù)測靈敏度和特異度均較高。TrkB是神經(jīng)營養(yǎng)因子的高親和受體，能夠相結(jié)合進(jìn)而起到營養(yǎng)神經(jīng)的效果，但是也需要先與TrkB相結(jié)合，產(chǎn)生生化反應(yīng)并啟動信息傳導(dǎo)［11］。Mao等［12］發(fā)現(xiàn)，腦卒中后抑郁組小鼠酪氨酸激酶受體B表達(dá)水平顯著高于正常組。本研究表示，相比于對照組，實(shí)驗(yàn)組血清TrkB顯著更低。這說明腦腫瘤手術(shù)后合并抑郁的患者的血清TrkB同樣會降低。本研究表示，血清TrkB與HAMD評分呈負(fù)相關(guān)，血清TrkB對顱腦腫瘤患者合并抑郁的預(yù)測靈敏度和特異度均較高。這也進(jìn)一步證明血清TrkB可以作為預(yù)測患者抑郁心理的標(biāo)志物。本研究將血清學(xué)指標(biāo)運(yùn)用于顱腦腫瘤術(shù)后伴抑郁患者當(dāng)中，并發(fā)現(xiàn)血清NLRP3、TrkB可以作為預(yù)測患者抑郁心理的標(biāo)志物。但本研究可能因?yàn)椴±占^少以及并未進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測的因素，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)可能存在一定的偏差性，以后應(yīng)擴(kuò)大病例的收集以及增加對于血清的動態(tài)監(jiān)測，以使研究更加充分。

綜上所述，顱腦腫瘤術(shù)后伴抑郁患者血清NLRP3明顯升高，血清TrkB明顯降低，同時(shí)血清NLPR3和TrkB與患者抑郁程度具有明顯相關(guān)性，并且對于顱腦腫瘤術(shù)后伴抑郁具有一定的預(yù)測價(jià)值。