保山市大棚辣椒人工雜交制種免打標(biāo)記技術(shù)

李志楊，李玉華，楊和團(tuán)，岳發(fā)偉，楊麗娟，藺應(yīng)達(dá)

（1.保山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，云南 隆陽區(qū) 678000；2.施甸縣農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，云南 施甸 678201）

辣椒（Capsicum annuum L.）為茄科辣椒屬1年生或有限多年生草本植物，果實(shí)富含維生素C。辣椒作為常異花授粉植物，繁殖系數(shù)大，開展辣椒雜種優(yōu)勢(shì)的研究對(duì)于辣椒育種有著重要的意義[1]。由于辣椒雜種優(yōu)勢(shì)非常明顯，大面積生產(chǎn)用種基本實(shí)現(xiàn)了雜交化。近年來，利用辣椒細(xì)胞質(zhì)雄性不育（CMS）三系雜交制種技術(shù)逐漸得到應(yīng)用，由于免去了人工去雄、雜交果實(shí)標(biāo)記等環(huán)節(jié)，大幅提高了制種效率，降低了制種成本。但由于辣椒細(xì)胞質(zhì)雄性不育三系配套制種技術(shù)要求高、難度大，很難普及，所以辣椒雜交制種不可避免的還是需要采用人工去雄、授粉完成。筆者以保山市大棚辣椒人工雜交制種為例，從制種基地選擇、育苗、定植、田間管理、免打標(biāo)記法人工去雄、種果采收及分揀等關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)進(jìn)行總結(jié)。

1 制種基地選擇

1.1 田塊選擇

優(yōu)先選擇土壤肥力中上等、土質(zhì)疏松、排灌方便、光照充足、前茬未種植過茄科作物的大棚田塊。

1.2 隔離條件

一是避免蟲媒傳播，在鋼架大棚的側(cè)窗和天窗加裝40目白色防蟲網(wǎng)，防止部分昆蟲傳粉及蟲害；二是避免風(fēng)媒傳粉，制種田與種植其他辣椒的地塊隔離距離要求在500 m以上[2]。

2 育苗

2.1 播種

一般安排在10月中下旬，父、母本同時(shí)播種，播種比例為1∶3。父本采用穴盤直播，每穴播種1～2粒；母本采用做墑露土直播，播種規(guī)格為10～12 g·m-2[3]。播種前用50%福美雙可濕性粉劑按種子重量的0.2%～0.3%拌種，播種后澆足水加蓋地膜增溫保濕。

2.2 苗期管理

播種后白天溫度控制在25～30℃，空氣濕度控制在70%～80%。待70%左右的種子出苗后撤去地膜，根據(jù)苗床墑情適量補(bǔ)充水分。出苗后父本作常規(guī)管理，母本苗齡達(dá)30～35 d，長至2～3片真葉時(shí)，進(jìn)行1次假植，將母本椒苗假植到72孔育苗盤中，假植操作全程在遮陰網(wǎng)下進(jìn)行，假植后少量澆水，待椒苗抽出新葉后撤去遮陰網(wǎng)，逐步加強(qiáng)通風(fēng)管理，定植前充分煉苗。母本假植有利于植株控旺、花期整齊。

3 整地起壟

前茬收獲結(jié)束后，清除田間雜草及地膜，深耕耙碎后以110 cm間距開溝，底肥溝施腐熟有機(jī)肥22500～30000 kg·hm-2、復(fù)合肥750 kg·hm-2，平溝后起壟理墑，壟高10～15 cm，壟面寬60 cm，壟溝寬50cm，在壟面孔口朝上鋪設(shè)微噴帶，覆膜后壓實(shí)待移栽。多年栽培的大棚，土壤易缺硼、缺鋅，在施基肥時(shí)可增施硼砂11.25～18.75 kg·hm-2、硫酸鋅26.25～30 kg·hm-2[4]。

4 定植

采用一壟雙行打孔“三角”種植模式，即在微噴帶兩側(cè)分別打孔形成“等腰三角形種植模式”[5]。為保證父母本花期充分相遇，父本比母本提前定植20～25 d，單棚單種，便于管理。一般父本苗齡在50～55 d，長至6～8片真葉時(shí)及時(shí)定植到大田內(nèi)，株行距為40 cm×40 cm，植4.5萬～4.7萬株·hm-2；母本假植后40～45 d定植到大田內(nèi)，株行距為35 cm×40 cm，植4.8萬～5.0萬株·hm-2。定植前用62.5 g·L-1精甲·咯菌腈懸浮種衣劑2000倍液蘸根，定植后澆少量定根水。

5 田間管理

5.1 定植后管理

定植后密閉大棚7～10 d，促進(jìn)緩苗。緩苗后檢查缺苗死苗情況，及時(shí)補(bǔ)栽并分析原因，有針對(duì)性地采取防治措施[2]。

5.2 溫濕度管理

緩苗后，要逐漸加強(qiáng)溫濕度管理，大棚內(nèi)的溫濕度管理可以通過通風(fēng)或閉棚來調(diào)節(jié)，白天溫度控制在22～30℃，空氣濕度控制在60%～75%，日落前關(guān)閉棚膜，土壤表層濕度以見濕不見干為宜?？茖W(xué)的通風(fēng)管理有利于辣椒植株控旺、生長矮壯、不易倒伏。

5.3 水肥管理

施肥采用膜下微噴灌溉水肥一體化技術(shù)，遵循重施底肥、苗期少施、中后期多施的原則[6]。緩苗后15～20 d，沖施礦源黃腐酸鉀7.5～15.0 kg·hm-2+枯草芽孢桿菌15 kg·hm-2，促進(jìn)椒苗生根；苗期根據(jù)苗情輕量追施提苗肥2～3次，用復(fù)合肥150～180 kg·hm-2+尿素90 kg·hm-2；授粉期間根據(jù)坐果情況追施壯果肥2～3次，追施大量元素水溶肥（20-20-20+TE）75～150 kg·hm-2+鈣鎂硼鐵鋅中微量元素水溶肥3.0～4.5 kg·hm-2。

5.4 整枝及中耕除草管理

整枝結(jié)合中耕除草同時(shí)進(jìn)行。待門椒以下最長側(cè)枝長至10～15 cm時(shí)，選擇天氣晴朗的上午進(jìn)行整枝，整枝時(shí)抹去門椒以下側(cè)枝和老葉[3]，同時(shí)人工拔除穴塘內(nèi)的雜草，除草后對(duì)辣椒植株根部進(jìn)行封穴培土，有利于增溫保墑，增強(qiáng)植株生長勢(shì)和抗逆性。

5.5 病蟲害防治

病蟲害防治應(yīng)遵循“預(yù)防為主，綜合防治”的原則[7]。預(yù)防性物理防治蟲害可選用防蟲網(wǎng)、殺蟲燈、黃藍(lán)板等；預(yù)防性化學(xué)防治可每間隔7～10 d交替噴施廣譜殺菌劑，如代森鋅、多菌靈等，同時(shí)搭配低濃度阿維菌素預(yù)防蟲害。

病害主要防治褐斑病、白粉病、炭疽病等。褐斑病可用75%百菌清可濕性粉劑400～500倍液或40%甲基硫菌靈懸浮劑500倍液噴霧防治；白粉病可用40%苯甲·吡唑酯或40%苯甲·嘧菌酯懸浮劑1500倍液噴霧防治；炭疽病可用10%苯醚甲環(huán)唑水分散顆粒劑800～1000倍液噴霧防治。

蟲害主要防治薊馬、白粉虱、蚜蟲、煙青蟲等。薊馬可用5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽微乳劑+20%啶蟲脒可溶液劑2000～2500倍液噴霧防治或60 g·L-1乙基多殺菌素30 g+5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽微乳劑2000～2500倍液噴霧防治；白粉虱、蚜蟲、煙青蟲等可用5%虱螨脲水乳劑+20%甲維·茚蟲威懸浮劑1500～2000倍液噴霧防治或1.8%阿維菌素乳油+24%螺蟲乙酯懸浮劑3000～4000倍液噴霧防治。相同防治效果藥物應(yīng)交替使用，可以提高防治效果[8]。

6 人工雜交制種

6.1 去雜去劣

為保證雜交種子純度和質(zhì)量，辣椒制種全生育期間去雜去劣不低于3次。授粉前對(duì)父、母本進(jìn)行去雜去劣，拔除雜株、劣株及可疑株；授粉時(shí)拔除母本無柱頭變異株；果實(shí)成熟前根據(jù)果實(shí)性狀去雜，采收前根據(jù)果形、果色再次進(jìn)行去雜；采種環(huán)節(jié)去除果柄時(shí)根據(jù)有無花萼區(qū)分果實(shí)是否授過粉，充分保證雜交種子純度。

6.2 父本采粉及花粉處理

授粉前1 d上午開始采集父本花粉，每天采集1次。采集標(biāo)準(zhǔn)為白熾燈泡狀，花冠充分發(fā)白，花瓣微裂至未完全開放的花蕾。徒手掐取出花藥，掐取花藥前先洗手，避免人為混雜，取出花藥后晾置在干燥的硫酸紙上自然散粉，晾置時(shí)避免陽光直射，散粉后用100目以上篩子篩出花粉，放置在一折為二的硫酸紙上備用。上述花粉采集法花粉活性一般在24～48 h，隔天用的花粉應(yīng)摻和新采集的花粉混用，以提高花粉活性。

6.3 授粉期間田間管理

授粉前1 d下午摘除母本已經(jīng)開放的花朵和已結(jié)的全部果實(shí)。授粉棚白天溫度控制在22～30℃，空氣濕度控制在60%～75%，日落前關(guān)閉棚膜。授粉前1～2 d母本進(jìn)行病蟲害防治1次，授粉期間一般不噴施農(nóng)藥，授粉結(jié)束后5～7 d進(jìn)行打頂處理，減少無效營養(yǎng)消耗，同時(shí)結(jié)合病蟲害防治。父本授粉期間只采花不留果，采花時(shí)順帶摘除已結(jié)的漿果，全生育期間及時(shí)防治病蟲害，授粉中后期進(jìn)行整枝打杈處理1次，摘除多余側(cè)枝，保留主干，充分保證供應(yīng)采粉花朵的質(zhì)量。

6.4 免打標(biāo)記法人工去雄授粉

人工去雄授粉宜選取二門斗及以上白熾燈泡狀，花冠發(fā)白，花瓣和花藥未裂開的花蕾。將篩好備用的花粉少量放置在餐勺底部，授粉時(shí)左手中指、無名指及小拇指握住餐勺勺部，拇指和食指捏緊花柄或花萼基部保持穩(wěn)定，右手以萼片上某一點(diǎn)為切入口順時(shí)針?biāo)喝ト炕ㄝ噙B同花冠和雄蕊，動(dòng)作要輕，不可掐壞漿果果皮，僅保留花柄和雌蕊，將裝有花粉的餐勺底部輕蘸柱頭，柱頭沾滿花粉，即完成授粉。授粉期間要求人工去雄時(shí)去除所有花萼連同花冠和雄蕊，其次是每天必須保證整個(gè)棚所有植株授粉1遍，授粉時(shí)遇到已經(jīng)開放的花朵和花瓣未裂開但花藥已裂開的花朵要及時(shí)掐除。一般集中授粉期30～35 d，以單株結(jié)果25～30個(gè)為宜。

7 果實(shí)采收及采種

授粉后65～70 d，果面深紅，果實(shí)充分成熟后即可分批次采收。采用大棚辣椒人工雜交制種免打標(biāo)記技術(shù)制種，經(jīng)過人工授粉成熟后的辣椒果實(shí)與自交成熟后的辣椒果實(shí)形態(tài)差異明顯，肉眼易識(shí)別。自交成熟后的辣椒果實(shí)保留完整的萼片，果柄端無凹陷；而經(jīng)過人工授粉成熟后的辣椒果實(shí)無萼片，且果柄端凹陷程度高。將采收的辣椒果實(shí)后熟2～3 d，取出后集中放置，以果柄端是否有花萼為標(biāo)準(zhǔn)，人工挑選出授過粉的果實(shí)再一次集中放置，結(jié)合采種環(huán)節(jié)去除果柄時(shí)再次檢查果實(shí)是否授過粉，最后將去除果柄的辣椒果實(shí)用專用的辣椒采種機(jī)械分離果肉和種子，再用清水漂洗取種。將取出的種子放置在溫室自然晾干，忌陽光直射；若遇陰雨天可采用白熾燈加熱等方式加速種子水分蒸發(fā)，避免種子萌發(fā)。種子干燥后，按照GB16715.3—2010瓜菜作物種子第3部分茄果類辣椒部分的要求去雜去劣，對(duì)合格的種子裝袋入庫儲(chǔ)存。

8 應(yīng)用分析與結(jié)論

2019—2020 年在保山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所科研示范基地采用該技術(shù)制種，制種面積0.07 hm2，選用5點(diǎn)取樣法觀察、取樣。結(jié)果表明，去萼片免打標(biāo)記法人工去雄授粉花朵的成活率為61.19%左右。2020—2021年播種取樣點(diǎn)混收的種子，種植面積0.1 hm2，定植株數(shù)4779株，經(jīng)采收期田間觀察統(tǒng)計(jì)得出，雜株總數(shù)為49株，雜株率為1.03%，種子純度為98.97%（≥96%），符合GB16715.3—2010瓜菜作物種子第3部分茄果類辣椒部分的要求。