MUC16：腫瘤治療新靶點(diǎn)

高茹云 婁寧 韓曉紅 石遠(yuǎn)凱

粘蛋白16（mucin16, MUC16），又稱(chēng)癌抗原125（carbohydrate antigen 125, CA125）。Bast等[1]于1981年發(fā)現(xiàn)一種單克隆抗體OC125能與卵巢上皮癌細(xì)胞反應(yīng)，但是與正常組織不反應(yīng)，能與這種抗體反應(yīng)的抗原被稱(chēng)為CA125。2001年，Yin等[2]鑒定CA125的克隆結(jié)構(gòu)屬于MUC家族，將其命名為MUC16。自發(fā)現(xiàn)以來(lái)，CA125一直是卵巢癌臨床診斷和監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)的重要血清學(xué)標(biāo)志物。然而，由于生理狀態(tài)（如懷孕前3個(gè)月），非惡性疾?。ㄈ缱訉m內(nèi)膜異位癥和卵巢囊腫等婦科良性疾病）和其他非婦科惡性腫瘤也會(huì)導(dǎo)致血清CA125升高，CA125在卵巢癌的診斷和療效監(jiān)測(cè)中特異度較低[3]。研究發(fā)現(xiàn)，MUC16與多種腫瘤信號(hào)通路相關(guān)，在腫瘤免疫微環(huán)境中也起到重要作用，靶向MUC16的治療方式逐漸成為一個(gè)研究熱點(diǎn)。本文重點(diǎn)闡述MUC16在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用，關(guān)注其在腫瘤治療中的研究現(xiàn)狀，為后續(xù)靶向MUC16的腫瘤治療研究提供參考。

1 MUC16結(jié)構(gòu)與功能概述

MUC家族是一類(lèi)由上皮細(xì)胞產(chǎn)生的，大分子量、高度糖基化的蛋白家族，以串聯(lián)重復(fù)氨基酸序列為特征[4]，具有潤(rùn)滑、參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及形成化學(xué)屏障的功能。人類(lèi)MUC家族包含MUC1-MUC21，可以分為兩種類(lèi)型：①分泌型：包括MUC2、MUC6、MUC19等；②跨膜型：具有高度糖基化的胞外域、跨膜域和短的胞質(zhì)尾端，包括MUC1、MUC4、MUC16等[4]。分泌型粘蛋白可以形成物理屏障，作為一種黏液凝膠，為呼吸道和胃腸道上皮細(xì)胞提供保護(hù)，并構(gòu)成肝臟、乳房、胰腺和腎臟等器官的導(dǎo)管表面；跨膜型粘蛋白通過(guò)它們胞外域的O糖基化串聯(lián)重復(fù)序列形成棒狀結(jié)構(gòu)，構(gòu)建保護(hù)性的黏液凝膠層，黏液凝膠層可以擴(kuò)展到細(xì)胞表面100 nm以外，并且有大于10 nm的多糖萼[5]。

MUC16基因位于人類(lèi)染色體19p13.2上，由179 kb的基因組DNA編碼。它是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最大的粘蛋白，相對(duì)分子量為2,000 kDa-5,000 kDa。MUC16是一種I型跨膜蛋白，主要包含三個(gè)部分：N端結(jié)構(gòu)域，串聯(lián)重復(fù)結(jié)構(gòu)域（tandem repeat, TR）和C端結(jié)構(gòu)域。N端結(jié)構(gòu)域長(zhǎng)度約12,000個(gè)氨基酸；TR結(jié)構(gòu)域包含18個(gè)-60個(gè)可變數(shù)目的串聯(lián)重復(fù)序列，每個(gè)重復(fù)序列有156個(gè)氨基酸，包含56個(gè)海膽精子蛋白-腸激酶-聚集蛋白（sea urchin sperm,enterokinase and agrin, SEA）結(jié)構(gòu)域以及兩個(gè)錨蛋白域；C端結(jié)構(gòu)域由284個(gè)氨基酸組成，又可以分為細(xì)胞外部分（包含假定的裂解位點(diǎn)）、單次跨膜結(jié)構(gòu)域，細(xì)胞質(zhì)尾端［包含埃茲蛋白/根蛋白/膜突蛋白（ezrin/radixin/moesin,ERM）結(jié)合域和推定的核定位信號(hào)RRRKK］[3,4,6-9]。MUC16主要存在兩種糖基化形式：N-糖基化和O-糖基化，N端結(jié)構(gòu)域主要以O(shè)-糖基化為主，TR區(qū)域包含N-糖基化和O-糖基化，其豐富的絲氨酸和蘇氨酸殘基可能是糖基化的潛在位點(diǎn)[4,6]。MUC16常表達(dá)于眼表的角膜和結(jié)膜、呼吸道和女性生殖道黏膜上皮等部位，在水化、潤(rùn)滑上皮，作為屏障保護(hù)細(xì)胞免受侵害等方面發(fā)揮重要作用[10,11]。

2 MUC16在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用

MUC16在包括卵巢癌[1]、乳腺癌[12]、宮頸癌[13]、胰腺癌[14]、結(jié)直腸癌[15]在內(nèi)的多種腫瘤中表達(dá)異常升高，這種高表達(dá)與癌癥進(jìn)展、轉(zhuǎn)移以及患者的不良預(yù)后相關(guān)[14,16]。MUC16可以與多種腫瘤相關(guān)信號(hào)通路相互作用，能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、腫瘤遷移侵襲，表達(dá)MUC16的腫瘤細(xì)胞還可以通過(guò)與多種免疫細(xì)胞相互作用從而發(fā)生免疫逃逸。此外，MUC16高頻突變與腫瘤新生抗原形成、免疫細(xì)胞浸潤(rùn)及免疫檢查點(diǎn)抑制劑（immune checkpoint inhibitors, ICIs）療效相關(guān)，有望成為預(yù)測(cè)免疫治療療效的生物標(biāo)志物。

2.1 MUC16相關(guān)配體 在腫瘤研究中，MUC16相關(guān)配體主要有以下幾種：①半乳糖凝集素-1/3（galectin-1/3）：MUC16的核心N-糖基化和O-糖基化位點(diǎn)能與galectin家族的galectin-1[17]和galectin-3[18]結(jié)合，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖；②間皮素：MUC16與間皮素結(jié)合的親和力較高，可介導(dǎo)細(xì)胞粘附，促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移，這種結(jié)合也依賴(lài)于N-糖基化位點(diǎn)[19,20]；③唾液酸結(jié)合的免疫球蛋白樣凝集素-9（sialic acid-binding immunoglobulin-type lectins-9, Siglec-9）：MUC16可以結(jié)合表達(dá)在多種免疫細(xì)胞表面的抑制性受體Siglec-9，阻斷腫瘤細(xì)胞和免疫細(xì)胞的相互作用[21]；④選擇素：研究[22,23]發(fā)現(xiàn)MUC16是L-選擇素和E-選擇素的配體，可能與腫瘤轉(zhuǎn)移侵襲相關(guān)。

2.2 MUC16與腫瘤增殖

2.2.1 JAK2/STAT3信號(hào)通路 Janus激酶2（Janus kinase 2,JAK2）/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3, STAT3）信號(hào)通路是MUC16促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)增殖的一個(gè)重要通路。Batra的團(tuán)隊(duì)[12]通過(guò)免疫共沉淀（co-immunoprecipitation, Co-IP）驗(yàn)證了MUC16和JAK2之間的相互作用，并發(fā)現(xiàn)其可以通過(guò)激活STAT3和c-Jun介導(dǎo)乳腺癌增殖，并通過(guò)抑制腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體（tumour necrosis factor related apoptosis inducing ligand, TRAIL）途徑抑制乳腺癌細(xì)胞的凋亡。MUC16通過(guò)JAK2/STAT3通路促進(jìn)腫瘤增殖在宮頸癌、結(jié)直腸癌、胰腺癌和肺癌等腫瘤中也有報(bào)道[13,15,24,25]。

2.2.2 EGFR-PI3K-Akt信號(hào)通路 MUC16可以通過(guò)直接或間接方式激活表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor, EGFR）-磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3 kinase, PI3K）-蛋白激酶B（protein kinase B, PKB/Akt）信號(hào)通路促進(jìn)腫瘤增殖。Rao等[18]運(yùn)用免疫熒光定位和三重免疫沉淀的方法發(fā)現(xiàn)MUC16可以與EGFR以及整合素β1相互作用，且這一過(guò)程需要O-6-甲基鳥(niǎo)嘌呤-DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT）依賴(lài)的N-糖基化和MUC16的配體galectin-3參與。Stasenko等[26]進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，在MUC16高表達(dá)的腫瘤中，靶向galectin-3的抗體可以阻斷Akt和細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases, ERK）1/2磷酸化，進(jìn)而抑制乳腺癌生長(zhǎng)。Thomas等[14]在胰腺癌研究中發(fā)現(xiàn)，MUC16可以直接與EGFR相互作用激活腫瘤細(xì)胞中Akt和糖原合酶激酶3β（glycogen synthase kinase, GSK3β）致癌信號(hào)通路，增強(qiáng)惡性程度，促進(jìn)胰腺癌向侵襲性表型發(fā)展。

2.2.3 腫瘤代謝相關(guān)信號(hào)通路 MUC16也可以通過(guò)調(diào)節(jié)腫瘤代謝途徑促進(jìn)腫瘤增殖，這可能與腫瘤細(xì)胞的瓦氏效應(yīng)（Warburg effect）相關(guān)。Shukla等[27]在胰腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)，MUC16可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的代謝重編程，增加糖酵解，增強(qiáng)腫瘤活性和侵襲性，MUC16有可能通過(guò)哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）及其下游靶點(diǎn)細(xì)胞性骨髓細(xì)胞瘤病病毒癌基因（cellular myelocytomatosis viral oncogene, c-MYC）來(lái)調(diào)控葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（glucose transporter 1,GLUT1）以及己糖激酶II（hexokinase II,HK II）等基因表達(dá)，進(jìn)而調(diào)控代謝。Wang等[28]在卵巢癌研究中進(jìn)一步驗(yàn)證，MUC16可以基于對(duì)GLUT1表達(dá)的調(diào)控，來(lái)控制葡萄糖攝取，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤增殖。Fan等[29]也在膽囊癌的研究中發(fā)現(xiàn)，MUC16的C末端可以與果糖二磷酸醛縮酶C（aldolase C, ALDOC）結(jié)合，破壞ALDOC對(duì)葡萄糖缺乏的感知能力，進(jìn)而促進(jìn)膽囊癌細(xì)胞的葡萄糖攝取和糖酵解，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖。

2.3 MUC16與腫瘤遷移侵襲 腫瘤中MUC16高表達(dá)能促進(jìn)遷移侵襲。Miyajima團(tuán)隊(duì)[20]在卵巢癌研究中發(fā)現(xiàn)，MUC16可以通過(guò)與間皮素結(jié)合使腫瘤細(xì)胞粘附到間皮細(xì)胞上，進(jìn)而促進(jìn)卵巢癌的腹膜轉(zhuǎn)移。Patankar團(tuán)隊(duì)[19]進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)這一過(guò)程需要N-糖基化位點(diǎn)的參與。之后，Chen等[30]發(fā)現(xiàn)MUC16與間皮素的相互作用，可以通過(guò)激活基質(zhì)金屬蛋白酶-7（matrix metalloproteinase-7, MMP-7）來(lái)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲。在胰腺癌的研究中，Batra團(tuán)隊(duì)[31]通過(guò)Co-IP發(fā)現(xiàn)，MUC16還可以通過(guò)局部粘著斑激酶（focal adhesion kinase, FAK）介導(dǎo)的信號(hào)通路促進(jìn)胰腺癌的轉(zhuǎn)移。Wnt/β-catenin信號(hào)通路也是MUC16促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移的信號(hào)機(jī)制之一。Liu等[32]發(fā)現(xiàn)MUC16的C末端結(jié)構(gòu)域可以通過(guò)與β-catenin相互作用激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移。Giannakouros等[33]發(fā)現(xiàn)，MUC16的C末端可以通過(guò)抑制β-catenin的降解促進(jìn)E-cadherin介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞團(tuán)簇形成，在卵巢癌進(jìn)展中發(fā)揮關(guān)鍵作用。此外，Chen等[23]發(fā)現(xiàn)MUC16是L-選擇素和E-選擇素的配體，選擇素家族通過(guò)介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞上的選擇素配體與微血管中表達(dá)選擇素的內(nèi)皮細(xì)胞相互作用促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移，選擇素途徑也可能是MUC16參與腫瘤轉(zhuǎn)移的方式。

2.4 MUC16與腫瘤免疫 MUC16對(duì)腫瘤免疫具有雙重作用。一方面，MUC16可以通過(guò)與自然殺傷（natural killer,NK）細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞表面的抑制性受體結(jié)合，發(fā)揮抑制腫瘤免疫的作用；另一方面，MUC16促進(jìn)樹(shù)突狀細(xì)胞（dendritic cell, DC）成熟，MUC16突變產(chǎn)生的新生抗原能激活CD8+T細(xì)胞，并富集多種腫瘤浸潤(rùn)免疫細(xì)胞，發(fā)揮促進(jìn)腫瘤免疫的作用。

MCU16對(duì)腫瘤免疫的抑制作用主要表現(xiàn)在對(duì)固有免疫細(xì)胞的作用。Patankar團(tuán)隊(duì)[34]發(fā)現(xiàn)MUC16對(duì)NK細(xì)胞有較強(qiáng)的抑制作用，MUC16敲除的卵巢癌細(xì)胞更容易被NK細(xì)胞裂解，在NK細(xì)胞白血病細(xì)胞系（NK cell leukemia cell line, NKL）刺激下存活下來(lái)的腫瘤細(xì)胞表達(dá)更高水平的MUC16，這表明NKL選擇性裂解了MUC16低表達(dá)的腫瘤細(xì)胞[35]。之后他們進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，MUC16可以通過(guò)結(jié)合表達(dá)在B細(xì)胞、單核細(xì)胞及NK細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞表面的抑制性受體Siglec-9，促進(jìn)腫瘤免疫逃逸[21]。除了能抑制NK細(xì)胞的細(xì)胞毒效應(yīng)以及阻斷NK細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞的結(jié)合外，MUC16對(duì)巨噬細(xì)胞功能也有相應(yīng)的抑制作用[36]。

MUC16突變產(chǎn)生的新生抗原在腫瘤免疫中有著重要作用，這可能預(yù)示著MUC16可以作為基于腫瘤新抗原的個(gè)體化疫苗的潛在靶點(diǎn)。MUC16在泛腫瘤中突變頻繁，是突變頻率位居前三的基因之一[37]，但由于其體積較大，常被排除在顯著突變基因列表之外[38]。2017年，在一項(xiàng)針對(duì)胰腺癌長(zhǎng)期存活者（long-term survivor, LTS）的研究中，Balachandran等[39]發(fā)現(xiàn)MUC16突變產(chǎn)生的新生抗原是LTS長(zhǎng)期存活的原因。他們發(fā)現(xiàn)LTS主要與高質(zhì)量新生抗原的產(chǎn)生以及腫瘤CD8+T細(xì)胞高浸潤(rùn)有關(guān)，同時(shí)他們發(fā)現(xiàn)這些獨(dú)特的新抗原具有富集并激活CD8+T細(xì)胞的能力，進(jìn)而鑒定出MUC16是與LTS相關(guān)的獨(dú)特新抗原優(yōu)先富集的位點(diǎn)，他們將其稱(chēng)之為“熱點(diǎn)突變”。此后，MUC16高突變與免疫細(xì)胞、免疫相關(guān)通路以及ICIs療效之間的相關(guān)性漸漸在多項(xiàng)腫瘤的突變分析中被證實(shí)。MUC16高突變與腫瘤免疫相關(guān)性在黑色素瘤[40]、胃癌[41]、肝癌[42]、結(jié)腸癌[43]、宮頸癌[44]、子宮內(nèi)膜癌[45]等多種腫瘤的基因組突變分析中均有報(bào)道。Zhang等[46]在一項(xiàng)涉及30個(gè)實(shí)體瘤，涵蓋了9,850個(gè)樣本的mRNA表達(dá)譜的泛癌分析中發(fā)現(xiàn)，MUC16突變的腫瘤微環(huán)境中有更豐富的免疫細(xì)胞浸潤(rùn)，GSEA富集分析也證明了MUC16突變主要富集在免疫相關(guān)通路中，且MUC16的高突變預(yù)示了一個(gè)良好的ICIs治療應(yīng)答，有望成為預(yù)測(cè)免疫治療療效的生物標(biāo)志物。在另一項(xiàng)針對(duì)卵巢癌的研究中，Zhai等[47]發(fā)現(xiàn)MUC16可以促進(jìn)T細(xì)胞向CD8+T細(xì)胞轉(zhuǎn)化，并且顯著上調(diào)了DC的成熟分子CD80、CD83和CD86，這可能為基于DC的免疫療法應(yīng)用于臨床提供依據(jù)。

3 靶向MUC16的治療方式

MUC16在多種腫瘤中高表達(dá)，并且在腫瘤相關(guān)信號(hào)通路中有著顯著作用，是一個(gè)有潛力的腫瘤治療靶點(diǎn)。MUC16作為跨膜粘蛋白，其細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域可能成為抗體介導(dǎo)的治療方式的良好靶點(diǎn)，比如單克隆抗體、抗體偶聯(lián)藥物（antibody-drug conjugate, ADC）、嵌合抗原受體（chimeric antigen receptors, CARs）和雙特異性T細(xì)胞銜接體（bi-specific T-cell engagers, BiTEs）等。MUC16在腫瘤免疫中的作用也提示了開(kāi)發(fā)基于MUC16的個(gè)體化腫瘤新抗原疫苗的可能性。下面將詳細(xì)闡述目前靶向MUC16的治療方式的相關(guān)研究。

3.1 單克隆抗體 Oregovomab（OvaRex）是MUC16第一個(gè)應(yīng)用于臨床試驗(yàn)的單克隆抗體，其活性成分是鼠單克隆抗體mAb B43.13。mAb B43.13對(duì)CA125具有非常高的親和力（1.16×1010/m），雖然Oregovomab單藥治療未能顯示出顯著的臨床收益[48,49]，但Oregovomab聯(lián)合治療取得了有希望的結(jié)果。針對(duì)97例晚期卵巢癌患者的一項(xiàng)II期臨床試驗(yàn)[50]結(jié)果顯示，一線應(yīng)用卡鉑-紫杉醇化療聯(lián)合Oregovomab（carboplatin-paclitaxel chemotherapy plus four immunizations with oregovomab, CPO）比起單純卡鉑-紫杉醇化療（carboplatin-paclitaxel chemotherapy,CP），無(wú)進(jìn)展生存期（progression-free survival, PFS）有著顯著改善，分別為41.8個(gè)月（CPO）vs12.2個(gè)月（CP）（P=0.002,7, HR=0.46, 95%CI: 0.28-0.70）。另一項(xiàng)Oregovomab聯(lián)合卡鉑-紫杉醇化療的III期臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行之中（ClinicalTrials.gov Identifier: NCT04498117），Oregovomab聯(lián)合化療或可為晚期卵巢癌患者提供新的治療選擇。

MUC16的糖基化位點(diǎn)逐漸成為癌癥中一個(gè)有潛力的生物標(biāo)志物和靶向治療的位點(diǎn)。Olson等[51]研究發(fā)現(xiàn)，一種靶向MUC16糖基化位點(diǎn)的單克隆抗體mAb-AR-9.6，可以特異性結(jié)合MUC16的SEA結(jié)構(gòu)域5，抑制人類(lèi)表皮生長(zhǎng)因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2,HER2）型受體的磷酸化和下游AKT/GSK3β信號(hào)通路，進(jìn)而抑制腫瘤的致瘤活性和腫瘤生長(zhǎng)[14]，AR-9.6和MUC16的結(jié)合能力也在卵巢癌和胰腺癌細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)以及人源腫瘤組織來(lái)源移植瘤（patient-derived xenograft, PDX）小鼠模型體內(nèi)實(shí)驗(yàn)[52]中得到了驗(yàn)證，AR9.6有望成為一種新的抗MUC16單抗藥物。

3.2 ADC ADC包含單克隆抗體、連接子、細(xì)胞毒性藥物三部分，可以利用單克隆抗體的靶向特異性將細(xì)胞毒性藥物運(yùn)送到表達(dá)相應(yīng)抗原的腫瘤細(xì)胞所在的位置，達(dá)到治療目的。美國(guó)基因泰克公司開(kāi)展了兩項(xiàng)針對(duì)MUC16的ADC的I期臨床試驗(yàn)，RG-7458（DMUC-5754A）（ClinicalTrials.gov Identifier: NCT01335958）和RG-7882（DMUC-4064A）（ClinicalTrials.gov Identifier:NCT02146313）[53,54]，這兩項(xiàng)研究針對(duì)鉑類(lèi)耐藥的卵巢癌和不可切除的胰腺癌。研究結(jié)果顯示DMUC-5754A和DMUC-4064A具有可接受的安全性。DMUC-5754A應(yīng)答率為17%（5/29），包括1例完全緩解（complete response,CR）、4例部分緩解（partial response, PR）[53]。DMUC-4064A總臨床獲益率為42%（27/65），包括CR、PR和疾病穩(wěn)定（stable disease, SD）超過(guò)6個(gè)月的患者[54]。如何在保證安全性的基礎(chǔ)上提高療效是未來(lái)需要進(jìn)一步解決的問(wèn)題。

3.3 CARs CAR包含可以特異性識(shí)別腫瘤相關(guān)抗原（tumor-associated antigen, TAA）的單鏈抗體、跨膜結(jié)構(gòu)域和T細(xì)胞受體（T cell receptor, TCR）的胞內(nèi)激活結(jié)構(gòu)域，CAR能夠在不受主要組織相容性復(fù)合體（major histocompatibility complex, MHC）限制的情況下直接激活T細(xì)胞。早在2010年，Brentjens團(tuán)隊(duì)[55]就通過(guò)靶向MUC16抗原的嵌合抗原受體T細(xì)胞（chimeric antigen receptor T-cell, CAR-T）療法，成功根除小鼠卵巢癌。為了解決CAR-T細(xì)胞被腫瘤微環(huán)境抑制的問(wèn)題，他們進(jìn)一步開(kāi)發(fā)了一種能共表達(dá)白細(xì)胞介素12（interleukin 12,IL-12）的靶向MUC16表位的CAR-T，并在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中取得了良好的抗腫瘤效果[56]。目前，這種CAR-T療法治療MUC16表位陽(yáng)性的復(fù)發(fā)性實(shí)體瘤的I期臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行當(dāng)中（ClinicalTrials.gov identifier: NCT02498912）。此外，Li[57]在卵巢癌研究中發(fā)現(xiàn)，靶向細(xì)胞程序性死亡配體1（programmed cell death 1 ligand 1, PD-L1）和MUC16抗原的雙CAR-T細(xì)胞療法，與單獨(dú)靶向PD-L1或MU16的單CAR-T細(xì)胞療法相比療效提高了2倍-4倍。但CAT-T細(xì)胞療法仍存在脫靶、安全性不高等問(wèn)題，其在實(shí)體瘤中的應(yīng)用也有所限制，有待于進(jìn)一步的研究。

3.4 BiTEs BiTEs是一種以T細(xì)胞作為效應(yīng)細(xì)胞的雙特異性單鏈抗體，BiTEs具有兩個(gè)抗原結(jié)合部位，可以同時(shí)和T細(xì)胞表面的TCR復(fù)合物（一般為CD3）及腫瘤細(xì)胞表面的特定TAA結(jié)合[58]，從而有效地激活效應(yīng)T細(xì)胞來(lái)達(dá)到殺傷腫瘤細(xì)胞的目的。目前靶向MUC16的BiTEs已經(jīng)取得較好的抗腫瘤療效，且毒副作用較低，是一種有潛力的聯(lián)合抗腫瘤治療方式。美國(guó)再生元制藥公司（Regeneron Pharmaceuticals）開(kāi)發(fā)的靶向MUC16的BiTEs-REGN4018（MUC16/CD3 BiTE），能夠同時(shí)靶向MUC16陽(yáng)性的腫瘤細(xì)胞和表達(dá)CD3的T細(xì)胞，誘導(dǎo)多克隆T細(xì)胞激活。REGN4018在人源化的小鼠模型和食蟹猴模型中展現(xiàn)出良好的抗腫瘤能力和較小的毒性反應(yīng)，其與抗程序性死亡受體1（programmed cell death 1, PD-1）抗體聯(lián)用可以增強(qiáng)療效[59]，目前REGN4018單獨(dú)或聯(lián)合PD-1單抗治療復(fù)發(fā)卵巢癌患者的II期臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行當(dāng)中（ClinicalTrials.gov Identifier: NCT03564340）。該公司的另一種靶向MUC16的BiTEs-REGN-5668（MUC16/CD28）聯(lián)合REGN4018或PD-1單抗治療復(fù)發(fā)卵巢癌的研究也已經(jīng)進(jìn)入II期臨床試驗(yàn)（ClinicalTrials.gov Identifier:NCT04590326）。此外，Yeku等[60]的研究表明，MUC16/CD3 BiTE聯(lián)合抗PD-1或抗血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothlial growth factor, VEGF）均可增強(qiáng)療效，但聯(lián)合抗VEGF優(yōu)于聯(lián)合抗PD-1，相關(guān)結(jié)果有待于進(jìn)一步臨床試驗(yàn)的證實(shí)。

3.5 腫瘤疫苗 腫瘤疫苗是一種利用腫瘤抗原激活機(jī)體免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生抗腫瘤免疫反應(yīng)以控制或清除腫瘤的一種腫瘤免疫治療方法，主要分為：全細(xì)胞疫苗、多肽疫苗和核酸疫苗。MUC家族的MUC1是一種粘蛋白樣、糖基化的TAA，是設(shè)計(jì)和開(kāi)發(fā)腫瘤疫苗的熱門(mén)靶點(diǎn)之一，多項(xiàng)MUC1為靶點(diǎn)的腫瘤疫苗已經(jīng)進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段，但臨床試驗(yàn)效果不一[61]。部分MUC1疫苗沒(méi)有產(chǎn)生臨床有效的抗腫瘤免疫效應(yīng)，可能是因?yàn)門(mén)AA特異性T細(xì)胞受中樞和/或外周耐受的限制，TAA不能有效激活T細(xì)胞[62]。近年來(lái)，基于腫瘤新抗原的個(gè)體化腫瘤疫苗，由于特異性強(qiáng)、安全性高，已經(jīng)成為精準(zhǔn)醫(yī)療下的研究熱點(diǎn)。一項(xiàng)針對(duì)手術(shù)切除后的III期或IV期黑色素瘤患者的臨床試驗(yàn)（ClinicalTrials.gov Identifier: NCT01970358）[63]顯示，在6例接種個(gè)體化腫瘤新抗原疫苗的患者中，4例患者接種后25個(gè)月沒(méi)有復(fù)發(fā)，2例復(fù)發(fā)患者在接受了抗PD-1治療后腫瘤完全消退，且觀察到患者新抗原特異性T細(xì)胞庫(kù)的擴(kuò)增。另一項(xiàng)針對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的臨床試驗(yàn)（ClinicalTrials.gov Identifier: NCT02287428）[64]顯示個(gè)體化腫瘤新抗原疫苗可以改善低突變負(fù)荷和免疫“冷腫瘤”患者的免疫微環(huán)境。MUC16在泛腫瘤中高頻突變，是與長(zhǎng)期生存相關(guān)的高質(zhì)量新生抗原的富集位點(diǎn)，能促進(jìn)CD8+T細(xì)胞的富集和激活[39]，且與DC的成熟密切相關(guān)[47]，MUC16有望成為基于腫瘤新抗原的個(gè)體化疫苗的新靶點(diǎn)。

4 總結(jié)與展望

高度糖基化的粘蛋白MUC16在多種腫瘤中高表達(dá)，越來(lái)越多的研究表明MUC16在多種腫瘤相關(guān)信號(hào)通路中起到重要作用，但MUC16參與腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程的具體分子機(jī)制仍不明確，基于相關(guān)信號(hào)通路的藥物開(kāi)發(fā)有待于進(jìn)一步研究。目前靶向MUC16胞外表位的抗體介導(dǎo)的治療方式已經(jīng)取得一定成效，但還存在療效不佳、安全性不高等問(wèn)題，聯(lián)合其他藥物可能是較好的治療策略。MUC16高突變產(chǎn)生的新生抗原在腫瘤免疫中有著重要作用，針對(duì)MUC16新生抗原的個(gè)體化腫瘤疫苗及其他免疫療法可能成為一個(gè)新的研究方向。