益生菌制劑產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵因素探究

◎ 庾慶華，祝麗君，陳東波

（迪輔樂(lè)生物（上海）有限公司 微生物免疫代謝實(shí)驗(yàn)室，上海 200335）

目前，我國(guó)成年人心血管疾病、腸炎和抑郁等疾病逐漸增多，嬰幼兒濕疹、腸絞痛和腹瀉等疾病頻發(fā)，給醫(yī)療系統(tǒng)和患者家庭帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。食物來(lái)源、生活方式、生態(tài)環(huán)境等隨著現(xiàn)代化進(jìn)程在逐漸改變，如高油脂類(lèi)食物、抗生素、防腐劑和熬夜的生活習(xí)慣等，嚴(yán)重影響腸道菌群的穩(wěn)態(tài)，造成腸道菌群紊亂。腸道菌群在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中不斷適應(yīng)個(gè)體和自然選擇，直接影響腸道內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)，與人們的眾多生理功能息息相關(guān)[1]。

最新研究證實(shí)，腸道菌群可通過(guò)腸-腦軸、腸-肺軸、腸-乳腺軸等參與調(diào)控宿主的代謝、免疫、內(nèi)分泌等生理過(guò)程，從而影響肥胖、糖尿病、脂肪肝、心血管、自身免疫、炎癥性、精神和癌癥等疾病的風(fēng)險(xiǎn)。益生菌作為腸道的共生菌群，可調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)、菌群結(jié)構(gòu)，維護(hù)腸黏膜屏障通透性，是目前用于調(diào)節(jié)腸道菌群失調(diào)的主要方法[2]。益生菌制劑產(chǎn)品屬于前沿高科技生物制品，目前我國(guó)市場(chǎng)上存在核心菌株模糊不清、菌株號(hào)標(biāo)識(shí)不清和益生菌性能不確定等諸多問(wèn)題，給消費(fèi)者選購(gòu)帶來(lái)諸多疑惑[3]。

1 益生菌制劑產(chǎn)品的分類(lèi)

1.1 按照益生菌菌種分類(lèi)

國(guó)家發(fā)布的《可用于食品的菌種名單》中用于食品益生菌的微生物大約有數(shù)十種，包括雙歧桿菌屬、乳桿菌屬、鏈球菌屬、乳球菌屬、丙酸桿菌屬、片球菌屬、明串球菌屬和葡萄球菌屬。

1.2 按照益生菌發(fā)酵性能分類(lèi)

在食品行業(yè)，益生菌可被用于發(fā)酵風(fēng)味食品，如酸奶、泡菜、乳酸酒、釀造酒和食醋等。此外，益生菌還可作為食品補(bǔ)充劑添加到食品中，如奶粉、糖果和果蔬汁等[4]。

1.3 按照益生菌成分分類(lèi)

①單純活菌制劑。②活菌制劑配合其他有益成分，如DHA 等。③單株益生菌。④多種益生菌的組合，協(xié)同發(fā)揮作用。

2 益生菌制劑的常見(jiàn)劑型

益生菌制劑產(chǎn)品劑型主要以粉劑、顆粒劑、膠囊和片劑等固體形式居多[5]。目前，市場(chǎng)上益生菌制劑產(chǎn)品配方相似度高，缺乏足夠的創(chuàng)新性及差異性。因此，油滴劑等新型制劑的出現(xiàn)對(duì)于益生菌市場(chǎng)的創(chuàng)新發(fā)展至關(guān)重要。

2.1 粉劑益生菌制劑

益生菌粉劑的制作工藝通常是將益生菌菌液進(jìn)行高度濃縮，收集益生菌菌體，將離心后的菌體加入凍干保護(hù)劑進(jìn)行冷凍干燥獲得菌粉，制作成益生菌制劑產(chǎn)品。粉劑益生菌具有易生產(chǎn)、方便儲(chǔ)存和好吸收的優(yōu)勢(shì)，但如果包裝儲(chǔ)存不當(dāng)，就容易受潮，很大程度上影響益生菌的活性和產(chǎn)品質(zhì)量[6]。

2.2 顆粒劑益生菌制劑

顆粒劑益生菌制劑通常是由凍干菌粉與淀粉、蔗糖粉和麥芽糊精等輔料經(jīng)過(guò)粉碎、混合、制粒、干燥和包裝等制成[6]。顆粒劑易潮解，因此需注意產(chǎn)品的溶解性。此外，如沖飲使用，水的溫度、放置時(shí)間也會(huì)影響益生菌的活菌數(shù)。

2.3 膠囊益生菌制劑

膠囊益生菌制劑分為硬膠囊和軟膠囊，益生菌硬膠囊和軟膠囊劑型外觀整潔，可掩蓋成品的不適味道，但膠囊劑型的食品給人們一種“保健藥”的感覺(jué)，增加消費(fèi)者的心理壓力。

2.4 片劑型益生菌制劑

益生菌片劑是將益生菌與賦形劑混合，通過(guò)粉末直接壓片法或濕法制粒技術(shù)獲得。片劑對(duì)于消費(fèi)者來(lái)說(shuō)易食用、攜帶方便，但對(duì)于嬰幼兒和牙齒不好的老年人來(lái)說(shuō)不易咀嚼。

2.5 滴劑型益生菌制劑

滴劑型益生菌制劑的生產(chǎn)工藝復(fù)雜，對(duì)生產(chǎn)廠家的工藝要求較高。如果使用水質(zhì)溶劑，最好低溫運(yùn)輸和保存，且益生菌在水環(huán)境中易失活，并不是合理的劑型；但選擇高品質(zhì)的食物用油，如葵花籽油，可將氧氣和水與益生菌菌體隔離，即使在常溫也能長(zhǎng)時(shí)間保存活菌數(shù)，是目前較為理想的益生菌制劑劑型。

3 影響益生菌制劑產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵因素

3.1 益生菌制劑劑型的選擇

目前常用的益生菌通常都是厭氧菌或兼性厭氧菌，如雙歧桿菌、乳酸桿菌和戊糖片球菌等，低氧或無(wú)氧的環(huán)境是決定益生菌制劑產(chǎn)品在貨架儲(chǔ)存期內(nèi)質(zhì)量的重要因素。此外，大部分益生菌制劑產(chǎn)品是口服的腸內(nèi)益生菌，被人體攝入后，益生菌的數(shù)量和活性均會(huì)被體內(nèi)環(huán)境影響，如胃酸、消化酶和食糜的流動(dòng)速率都會(huì)影響益生菌的定植效果。因此，良好的劑型是決定益生菌制劑產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵因素。益生菌通常被添加到食品基質(zhì)、口服補(bǔ)液和食品中，以顆粒、膠囊、片劑的形式存在于食品市場(chǎng)[7]。大多數(shù)益生菌產(chǎn)品以膠囊或小袋的形式存在，如果產(chǎn)品封閉性差，則難以保證產(chǎn)品中益生菌與氧氣絕對(duì)隔離。油滴劑型益生菌由于油黏度高的天然屬性，食用油形成薄膜后能阻擋空氣、水等外界物質(zhì)接觸益生菌菌體，有力保障了益生菌制劑的產(chǎn)品質(zhì)量。

3.2 益生菌菌量和活菌數(shù)

目前公認(rèn)且權(quán)威的有關(guān)益生菌的定義是2001 年聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè)組織和世衛(wèi)組織提出的“當(dāng)攝入足夠數(shù)量時(shí)，對(duì)宿主產(chǎn)生健康益處的活體微生物”[8]。2014 年6 月，國(guó)際益生菌與益生元科學(xué)聯(lián)合會(huì)發(fā)布的關(guān)于益生菌的共識(shí)中也突出強(qiáng)調(diào)了益生菌的3 個(gè)核心特征，分別是足夠數(shù)量、活菌狀態(tài)以及有益健康功能[9]。益生菌的定義也得到了歐洲食品與飼料菌種協(xié)會(huì)（EFFCA）、加拿大衛(wèi)生部（Health Canada）、世界胃腸病學(xué)組織（WGO）和歐洲食品安全局（EFSA）等相關(guān)組織和機(jī)構(gòu)的認(rèn)可。

我國(guó)《益生菌類(lèi)保健食品申報(bào)與評(píng)審規(guī)定（試行）》中規(guī)定，活菌類(lèi)益生菌保健食品在其保質(zhì)期內(nèi)活菌數(shù)目不得少于106CFU·mL-1（或CFU·g-1）；2021 年11月，中國(guó)食品工業(yè)協(xié)會(huì)發(fā)布的《益生菌食品》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，即食型益生菌食品在保質(zhì)期內(nèi)的活菌數(shù)量不得少于107CFU·g-1。因此，益生菌制劑產(chǎn)品的菌量和貨架期內(nèi)的活菌數(shù)是產(chǎn)品的核心指標(biāo)。益生菌能否發(fā)揮益生效果與每天的攝入量有密切聯(lián)系，當(dāng)足夠數(shù)量的益生菌到達(dá)腸道才會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生有益效果。臨床醫(yī)學(xué)研究證實(shí)每天攝取量大于109CFU的益生菌活菌數(shù)，會(huì)體現(xiàn)良好的生物學(xué)效應(yīng)，如改善抗過(guò)敏和腸絞痛等癥狀[10-12]。

3.3 益生菌制劑菌株特異性

2013 年，世界胃腸病學(xué)組織發(fā)布了有關(guān)益生菌和益生元的全球指南，并確認(rèn)益生菌的功效具有菌株特異性和劑量特異性[13]。國(guó)家發(fā)布的《可用于食品的菌種名單》和《可用于保健食品的益生菌菌種名單》尚未確定菌株水平，但臨床試驗(yàn)表明，如果產(chǎn)品中每一種菌株的含量都不適宜身體的健康發(fā)展，無(wú)論加入多少種不同的菌株對(duì)人體都沒(méi)有好處[14]。益生菌種屬差異大，即使同種不同株的益生菌，其菌體結(jié)構(gòu)、代謝產(chǎn)物成分也不完全相同，生物學(xué)功效也不完全一致。最近一項(xiàng)醫(yī)學(xué)研究結(jié)果顯示，嬰兒每日攝入鼠李糖乳桿菌LGG 及動(dòng)物雙歧桿菌乳亞種BB-12，持續(xù)6 個(gè)月，可顯著降低嬰兒的濕疹發(fā)病率[15]。因此，良好的益生菌制劑產(chǎn)品中的益生菌需第三方機(jī)構(gòu)鑒定、保藏，提供益生菌的菌株號(hào)。

3.4 益生菌制劑產(chǎn)品需開(kāi)展醫(yī)學(xué)臨床功能驗(yàn)證

益生菌的功效發(fā)揮應(yīng)以活菌為先決條件，但益生菌的功能應(yīng)建立在科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)呐R床試驗(yàn)評(píng)價(jià)和循證醫(yī)學(xué)證據(jù)的基礎(chǔ)上。體外試驗(yàn)結(jié)果不能全面反映益生菌的作用，動(dòng)物試驗(yàn)可作為參考，但需要更深入全面的人體或臨床試驗(yàn)予以確認(rèn)[16]。此外，值得重點(diǎn)關(guān)注的是益生菌菌株并不等同于益生菌制劑產(chǎn)品，菌株與輔料的配合是否合理可能會(huì)影響菌株的臨床效果。因此，對(duì)推薦使用的益生菌制劑產(chǎn)品開(kāi)展臨床醫(yī)學(xué)研究更為合理。益生菌制劑產(chǎn)品開(kāi)展臨床醫(yī)學(xué)研究需要投入大量時(shí)間和金錢(qián)，且存在失敗風(fēng)險(xiǎn)，而我國(guó)大部分益生菌企業(yè)起步較晚，科研投入不夠。因此，消費(fèi)者在選擇益生菌制劑時(shí)，可優(yōu)先考慮已開(kāi)展臨床醫(yī)學(xué)研究且結(jié)果為正面評(píng)價(jià)的產(chǎn)品。

3.5 益生菌制劑的生產(chǎn)工藝問(wèn)題

在目前的工業(yè)化生產(chǎn)中，益生菌菌粉的生產(chǎn)主要采取大罐液體發(fā)酵法，該法適于工業(yè)化生產(chǎn)，便于無(wú)菌操作，但成本高。益生菌制劑產(chǎn)品應(yīng)選擇優(yōu)勢(shì)明顯且對(duì)人體不會(huì)產(chǎn)生任何危害的輔料，輔料不能掩蓋產(chǎn)品的腐敗變質(zhì)、產(chǎn)品本身或加工過(guò)程中的質(zhì)量缺陷，或以摻假、偽造為目的，選擇輔料應(yīng)符合《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》（GB 2760—2014）及有關(guān)規(guī)定。采購(gòu)原料應(yīng)向供應(yīng)商索要益生菌菌種的檢驗(yàn)報(bào)告（國(guó)外供應(yīng)商還需提供出入境貨物檢驗(yàn)檢疫證明）、生產(chǎn)工藝參數(shù)、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、原料供應(yīng)商資質(zhì)以及其他要求提供的資料信息，確保產(chǎn)品質(zhì)量[17]。

4 正確選擇益生菌制劑產(chǎn)品

4.1 清晰標(biāo)注益生菌菌株號(hào)

益生菌菌株號(hào)是保證益生菌制劑產(chǎn)品有效體現(xiàn)益生作用的基礎(chǔ)，常見(jiàn)的乳雙歧桿菌和短雙歧桿菌等益生菌都在國(guó)家發(fā)布的《可用于食品的菌種名單》中。實(shí)際上，同種不同株的益生菌生物學(xué)功能差異較大，只有確定菌株號(hào)才能明確益生菌的功效。丹麥科漢森的乳雙歧桿菌Bb-12 菌株具有良好的胃酸膽汁耐受能力，在食品工業(yè)中已經(jīng)應(yīng)用了30 多年，相關(guān)研究文獻(xiàn)發(fā)表了200 多篇，臨床研究證明乳雙歧桿菌Bb-12菌株可增強(qiáng)胃腸道屏障功能，有效改善兒童濕疹等過(guò)敏癥狀[18-19]；日本森永的短雙歧桿菌M-16V 菌株可有效改善嬰兒的過(guò)敏性鼻炎和哮喘等呼吸道問(wèn)題，同時(shí)促進(jìn)嬰兒出生后腸道黏膜免疫系統(tǒng)和全身免疫系統(tǒng)發(fā)育成熟[20-21]。近期國(guó)際著名的學(xué)術(shù)期刊Frontiers in Pediatrics 發(fā)表的研究證實(shí)，戊糖片球菌CECT 8330 和長(zhǎng)雙歧桿菌CECT 7894 聯(lián)合使用可有效緩解中國(guó)嬰兒腸絞痛癥狀[10]。

4.2 保證高水平益生菌的活菌數(shù)量

選購(gòu)益生菌產(chǎn)品時(shí)需注意，生產(chǎn)時(shí)添加足夠數(shù)量的益生菌并不代表整個(gè)貨架期內(nèi)益生菌的活菌數(shù)穩(wěn)定不變。聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè)組織和世衛(wèi)組織將益生菌明確定義為活的微生物，當(dāng)攝入足夠數(shù)量時(shí)，會(huì)對(duì)宿主產(chǎn)生健康益處。足夠數(shù)量且活體微生物對(duì)于益生菌制劑產(chǎn)品的質(zhì)量至關(guān)重要。臨床醫(yī)學(xué)研究中常規(guī)選用的益生菌菌量基本維持在每人每天攝入109CFU 及以上水平，才能展現(xiàn)益生菌的良好生物學(xué)功能[10-12]。實(shí)際上，雙歧桿菌等益生菌偏好厭氧或低氧的環(huán)境，生產(chǎn)和儲(chǔ)存不當(dāng)會(huì)嚴(yán)重影響益生菌的活菌數(shù)。此外，益生菌在保存期內(nèi)最好不要接觸水，產(chǎn)品受潮也會(huì)影響活菌數(shù)量。目前市場(chǎng)上油滴劑益生菌制劑產(chǎn)品，如選擇高品質(zhì)的葵花籽油，可以很好地將益生菌與氧氣和水隔離，能夠有效地保障益生菌在銷(xiāo)售期內(nèi)的高活菌數(shù)。

4.3 已通過(guò)臨床醫(yī)學(xué)研究且有正面評(píng)價(jià)

消費(fèi)者選購(gòu)益生菌制劑產(chǎn)品時(shí)更多的是希望產(chǎn)品中的益生菌能對(duì)機(jī)體產(chǎn)生益處。同種不同株的益生菌生物學(xué)功能有所差別，體外試驗(yàn)和動(dòng)物試驗(yàn)可以作為參考，但不能作為判斷益生菌在人體內(nèi)的益生作用的依據(jù)。因此，科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)呐R床醫(yī)學(xué)研究是保證益生菌制劑產(chǎn)品能否發(fā)揮益生功效的基礎(chǔ)。鼠李糖乳桿菌LGG 能有效調(diào)整人體腸道菌群結(jié)構(gòu)，分析結(jié)果顯示LGG可減少大便次數(shù)，輔助兒童急性腹瀉的治療[22]。鼠李糖乳桿菌GG 和乳雙歧桿菌Bb-12 菌株聯(lián)合使用或可恢復(fù)營(yíng)養(yǎng)不良兒童的腸道菌群，并減少腹瀉[23]。植物乳桿菌組合CECT7527、7528 和7529 可有效降低高血脂患者的血清膽固醇含量，減少炎癥反應(yīng)，改善心血管健康[24-25]。植物乳桿菌CECT 7315 和CECT 7316 聯(lián)合使用可刺激T 輔助淋巴細(xì)胞和抗原呈遞細(xì)胞的增加，增強(qiáng)免疫功能[26]。日本森永的長(zhǎng)雙歧桿菌BB536 可改善腸道菌群失調(diào)和潰瘍性結(jié)腸炎患者病理癥狀，并具有調(diào)節(jié)免疫功能的作用[27-28]。

4.4 獲得菌株持有者授權(quán)且通過(guò)第三方實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

益生菌菌株性能是保障益生菌制劑產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵基礎(chǔ)，同一菌株依托不同生產(chǎn)廠商的發(fā)酵設(shè)備和工藝技術(shù)，獲得的菌株性能可能不完全相同。此外，為確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性和可靠性，益生菌制劑產(chǎn)品不僅需要生產(chǎn)廠商出廠的質(zhì)量報(bào)告，還應(yīng)具備第三方CMA或CNAS等資質(zhì)認(rèn)證機(jī)構(gòu)的安全檢測(cè)報(bào)告。因此，建議消費(fèi)者選購(gòu)獲得益生菌菌株持有者授權(quán)，且通過(guò)第三方安全檢測(cè)的益生菌制劑產(chǎn)品，對(duì)于保護(hù)消費(fèi)者權(quán)益更有保障。

5 益生菌制劑產(chǎn)品選購(gòu)應(yīng)避免的雷區(qū)

5.1 認(rèn)為多喝酸奶補(bǔ)充腸道益生菌

酸奶等飲品中的益生菌含量不僅有限，且多來(lái)源于動(dòng)物[29]。益生菌產(chǎn)生功效的基礎(chǔ)是保持活性，酸奶從制作到消費(fèi)者食用需經(jīng)過(guò)生產(chǎn)、物流、銷(xiāo)售等漫長(zhǎng)的過(guò)程，溫度等環(huán)境變化會(huì)影響益生菌的活性。此外，發(fā)酵過(guò)程中過(guò)高的溫度并不適宜益生菌的良好生長(zhǎng)。目前市場(chǎng)中的酸奶和乳酸飲料為了改善口感，通常大量加入糖和甜味劑，甚至增稠劑、色素、香精等成分。

5.2 認(rèn)為益生菌是活的，不容易死

益生菌是活的微生物，但儲(chǔ)存或使用不當(dāng)會(huì)造成益生菌制劑產(chǎn)品中活菌數(shù)量快速下降。市售的粉劑益生菌通常不能用溫度過(guò)高的水或飲料去沖兌，高溫會(huì)快速殺死大部分益生菌。目前常規(guī)選用的益生菌多為雙歧桿菌和乳酸桿菌，屬于厭氧或兼性厭氧菌，應(yīng)避免與空氣長(zhǎng)時(shí)間接觸。粉劑益生菌在沖泡后與空氣中的氧氣接觸，會(huì)造成雙歧桿菌屬益生菌易失活。此外，延長(zhǎng)食用時(shí)間也會(huì)影響益生菌活力。油滴劑益生菌制劑因油的隔離而避免氧氣對(duì)活菌量的影響，是較為理想的選擇。

5.3 認(rèn)為益生菌制劑產(chǎn)品越復(fù)雜越好

益生菌制劑產(chǎn)品發(fā)揮益生作用的基礎(chǔ)是優(yōu)良的益生菌菌株，基于對(duì)嬰幼兒食用安全的考慮，最好選擇少量純凈自然或已研究證實(shí)有助于嬰幼兒健康發(fā)育的食品添加劑，避免因成分復(fù)雜造成嬰幼兒過(guò)敏和腹瀉的風(fēng)險(xiǎn)。

5.4 認(rèn)為益生菌制劑有成癮性

成癮性屬于精神類(lèi)疾病，常見(jiàn)于藥物和煙酒成癮等，主要特征是對(duì)藥物等的使用無(wú)法自控，戒斷后對(duì)藥物等產(chǎn)生強(qiáng)烈的渴望并出現(xiàn)戒斷癥狀。專(zhuān)業(yè)級(jí)益生菌制劑產(chǎn)品選用的菌株通常從人體中獲取，菌株自身就是人類(lèi)菌群組成的一部分，通過(guò)維護(hù)腸道菌群穩(wěn)態(tài)和調(diào)控免疫功能等發(fā)揮益生作用，不存在成癮一說(shuō)。部分消費(fèi)者停用益生菌制劑后發(fā)現(xiàn)腸胃等問(wèn)題重現(xiàn)，很可能是由不合理的生活方式造成，如吸煙、喝酒和高脂高鹽飲食。最新研究發(fā)現(xiàn)，益生菌制品本身不僅不存在成癮性的問(wèn)題，益生菌活菌還可通過(guò)腸道菌群代謝通路影響腦-腸軸調(diào)控神經(jīng)系統(tǒng)，將是今后治療煙酒和藥物成癮的潛在方式[30]。因此，消費(fèi)者可放心選用高活菌量的專(zhuān)業(yè)級(jí)益生菌制劑產(chǎn)品。

6 結(jié)語(yǔ)

目前過(guò)敏和腸炎等眾多疾病需長(zhǎng)期使用化學(xué)藥物或激素治療，絕大多數(shù)患者仍存在病情易復(fù)發(fā)、難以徹底治愈的問(wèn)題；且藥物長(zhǎng)期使用給患者帶來(lái)的副作用也值得重視。益生菌制劑產(chǎn)品可調(diào)整人體免疫和腸道等健康，將是人類(lèi)未來(lái)健康管理的優(yōu)先選擇方式。目前我國(guó)大多數(shù)益生菌制劑產(chǎn)品缺乏創(chuàng)新性，缺少自主研發(fā)創(chuàng)新，且產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊。選擇功能有效的益生菌制劑產(chǎn)品，需要消費(fèi)者掌握一定的專(zhuān)業(yè)知識(shí)，更需益生菌制劑產(chǎn)品公司嚴(yán)格把控益生菌制劑的產(chǎn)品質(zhì)量，尤其在劑型研究上更要有所創(chuàng)新。目前，油滴劑型益生菌對(duì)于益生菌活菌保存具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，將是未來(lái)益生菌制劑產(chǎn)品的潛力劑型。