BRD4功能及其抑制劑研究進(jìn)展

田杰怡，吳燾

(江蘇省腫瘤發(fā)生與干預(yù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 南京 210009)

0 引言

關(guān)于BRD4的研究源遠(yuǎn)流長(zhǎng)，從最初的只被鑒定為一種細(xì)胞周期控制蛋白，而對(duì)其是否具有其他功能尚不明確，到如今BRD4的不同亞型被證明在調(diào)節(jié)與腫瘤發(fā)生相關(guān)的基因轉(zhuǎn)錄中具有相反的活性，這反映出BRD4作為一個(gè)藥物研究靶點(diǎn)的重要性和其小分子抑制劑開發(fā)的可觀前景。

1 結(jié)構(gòu)和功能

BRD4即溴結(jié)構(gòu)域蛋白4，和BET家族的其他幾位成員一樣，具有較為保守的結(jié)構(gòu)：都有兩個(gè)BRD和一個(gè)末端結(jié)構(gòu)域。

其中，BD1和BD2與乙酰化識(shí)別有關(guān)。兩者相互串聯(lián)，它們不僅與啟動(dòng)子和超增強(qiáng)子區(qū)域結(jié)合以調(diào)節(jié)基因表達(dá)，而且在幾種人類癌癥中促進(jìn)轉(zhuǎn)錄。通過抑制BRD4，超增強(qiáng)子區(qū)域和癌基因的目標(biāo)啟動(dòng)子之間的通信通路可以縮短，SEs和目標(biāo)啟動(dòng)子之間的通信變得快捷，導(dǎo)致癌基因表達(dá)的細(xì)胞受到特異性抑制，最終導(dǎo)致癌細(xì)胞的死亡。

2 BRD4在癌癥中的作用及重要性

由于細(xì)胞的表觀遺傳狀況因譜系的不同會(huì)有很大差異，轉(zhuǎn)錄共激活因子如BET在不同種的癌癥中也可能會(huì)有不同的靶點(diǎn)，這有可能影響B(tài)ET抑制劑的活性和作用機(jī)制。

2.1 肺癌

BRD4作為BET家族中被廣泛研究的一員，主要在轉(zhuǎn)錄調(diào)控中發(fā)揮作用。Lockwood及其團(tuán)隊(duì)用BET抑制劑JQ1治療了一組肺腺癌(LAC)細(xì)胞株，發(fā)現(xiàn)其中一個(gè)亞組對(duì)BET抑制敏感。與血液瘤相比，JQ1通過一種獨(dú)立于c-Myc下調(diào)的機(jī)制抑制LAC細(xì)胞。通過基因表達(dá)譜的分析，他們發(fā)現(xiàn)JQ1以劑量依賴性的方式抑制致癌轉(zhuǎn)錄因子FOSL1及其靶基因[1]。而在小細(xì)胞肺癌(SCLC)中，Lenhart和伙伴們發(fā)現(xiàn)50%的SCLC中存在ASCL1過表達(dá)現(xiàn)象，JQ1處理雖對(duì)c-Myc蛋白表達(dá)沒有影響，但會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄因子ASCL1的下調(diào)。BET溴結(jié)構(gòu)域抑制劑JQ1通過隔離BRD4來阻止其與ASCL1增強(qiáng)子的對(duì)接來抑制SCLC，同時(shí)，染色質(zhì)免疫沉淀研究，即COIP實(shí)驗(yàn)，也證實(shí)了BRD4與ASCL1增強(qiáng)子的結(jié)合[2]。其實(shí)，也有研究者認(rèn)為c-Myc是SCLC中JQ1作用的功能靶標(biāo)，c-Myc在晚期SCLC中的高表達(dá)以及預(yù)后較差與BRD4相關(guān)[3]。

除了JQ1之外，其他的溴結(jié)構(gòu)域抑制劑在肺癌中的功能作用也在被研究，而且令人驚訝的是，BRD4的功能也許不止于目前人們已經(jīng)有所了解的轉(zhuǎn)錄調(diào)控、修復(fù)一同維持端粒的穩(wěn)定性等等，還發(fā)揮著轉(zhuǎn)錄之外的作用。比如，溴結(jié)構(gòu)抑制劑ABBV-075 通過誘導(dǎo)caspase-3/7活性，造成SCLC細(xì)胞的凋亡。有研究表明，ABBV-075對(duì)促凋亡蛋白BIM的表達(dá)有微弱的促進(jìn)作用，并抑制抗凋亡蛋白BCL2的表達(dá)。此外，BET抑制增加了BCL2-BIM復(fù)合物，從而引發(fā)細(xì)胞凋亡。除此之外，同時(shí)使用BET抑制劑和BCL2抑制劑venetoclax (ABT-199)處理細(xì)胞的時(shí)候，不論體外和體內(nèi)都可以觀察到很強(qiáng)的協(xié)同作用[4]。

在肺癌當(dāng)中，非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)里目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)致癌驅(qū)動(dòng)突變，這使得分子靶向治療變得可行。而與之相反但的是，SCLC與目前的靶向致癌突變無關(guān)，相反，它主要與TP53和RB1的失活、c-Myc表達(dá)的上調(diào)、以及異常組蛋白修飾相關(guān)。這些發(fā)現(xiàn)表明，表觀遺傳的失調(diào)也許在這種癌癥的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用[5-8]。在過去的30年里，標(biāo)準(zhǔn)化療聯(lián)合放療一直是SCLC的典型治療選擇。SCLC患者一般對(duì)初始治療反應(yīng)良好，然而大多數(shù)患者最終死于復(fù)發(fā)性疾病。所以，小細(xì)胞肺癌(SCLC)迫切需要新的治療策略，除了單獨(dú)使用JQ1之外，其聯(lián)合治療方案在近幾年也收獲了許多新思路。比如：在肺癌中(小細(xì)胞肺癌與肺腺癌)，JQ1與HDAC6 的抑制劑ACY-1215 的聯(lián)合治療可以顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)。值得注意的是，ACY-1215目前正在多個(gè)臨床研究中測(cè)試用于多發(fā)性骨髓瘤和淋巴瘤的治療，而JQ1由于其毒性，在臨床研究中使用受到限制。結(jié)合ACY-1215和JQ1可以做到在當(dāng)前SCLC和既往NSCLC的治療中使用較低劑量的JQ1。優(yōu)化劑量的ACY-1215和/或JQ1結(jié)合不同的給藥方法，很可能可以在毒性降低的情況下獲得類似或更好的治療結(jié)果，這些發(fā)現(xiàn)可以轉(zhuǎn)化為SCLC患者[9]。溴結(jié)構(gòu)域抑制劑與PD-1抗體可以協(xié)同治療KRAS突變的肺腺癌患者。實(shí)際上，KRAS突變?cè)诖蠹s30%的人類肺腺癌中存在，盡管近期靶向治療的進(jìn)展顯示出了很大的希望，但KRAS的有效靶向治療方案仍未出現(xiàn)[10]。KRAS突變體難愈的原因是免疫抑制機(jī)制，如腫瘤中抑制性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的出現(xiàn)增加，腫瘤浸潤(rùn)性T細(xì)胞抑制性受體PD-1的表達(dá)升高。使用BET抑制劑治療血液系統(tǒng)惡性腫瘤是有益的，并且它們?cè)诜切〖?xì)胞肺癌(NSCLC)模型中具有treg破壞作用。通過PD-1抗體阻斷靶向PD-1抑制信號(hào)在肺癌中也有實(shí)質(zhì)性的治療效果，盡管這些結(jié)果局限于少數(shù)患者。于是，Adeegbe假設(shè)BET溴化域抑制劑JQ1可以與PD-1阻斷劑協(xié)同作用，促進(jìn)肺癌的抗腫瘤反應(yīng)。結(jié)果顯示，兩者聯(lián)用的確具有協(xié)同作用，腫瘤浸潤(rùn)性treg的數(shù)量也得到減少。

2.2 乳腺癌

三陰性乳腺癌通常具有較強(qiáng)的侵襲性，Andrieu及其團(tuán)隊(duì)報(bào)道了一個(gè)包括BRD4和Jagged1/Notch1 (配體/受體對(duì))的信號(hào)通路，該通路在維持三陰性乳腺癌的遷移和侵襲中發(fā)揮重要作用。他們首先通過Transwell實(shí)驗(yàn)，分別用(S)或(R)-JQ1預(yù)處理人乳腺癌細(xì)胞株3小時(shí)，然后用系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)試。其中，(S)-JQ1是一種廣譜的BET -溴化域抑制劑，靶向BRD2, BRD3和BRD4，以非活性對(duì)映體(R)-JQ1作為陰性對(duì)照。緊接著，他們?cè)趯?duì)照組和BRD4缺失的乳腺癌細(xì)胞株中進(jìn)行了基因表達(dá)分析，并選擇了一組涉及遷移和入侵調(diào)控的46個(gè)基因。他們發(fā)現(xiàn)，在MDA-MB-231細(xì)胞中，敲除BRD4可導(dǎo)致7個(gè)基因表達(dá)顯著改變，其中下調(diào)量最大的基因是JAG1，它編碼Notch受體家族的典型配體Jagged1蛋白。進(jìn)一步的，他們發(fā)現(xiàn)BRD4可以調(diào)節(jié)控制Jagged1蛋白表達(dá)以及Notch1的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，但是BRD2和BRD3并不具備這項(xiàng)能力。BRD4能夠抑制Notch1的活性，阻礙乳腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移。以往研究表明，BET抑制劑會(huì)抑制BCL-2或BCL-XL的蛋白表達(dá)，而三陰性乳腺癌中BET抑制劑誘導(dǎo)凋亡的關(guān)鍵靶點(diǎn)是MCLL[11]?；诎┌Y基因組圖譜(TCGA)數(shù)據(jù)集，歐陽和他的團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)一些自噬相關(guān)蛋白，例如AMPK在乳腺癌中顯著下調(diào)?；诿庖吖渤恋韺?shí)驗(yàn)的結(jié)果，BRD4可能與AMPK存在相互作用，進(jìn)而引起其下調(diào)，反之，BRD4抑制劑能夠誘導(dǎo)AMPK調(diào)節(jié)自噬相關(guān)的細(xì)胞凋亡[12]。

2.3 白血病

在AML細(xì)胞中，已經(jīng)有豐富的研究表明BRD4是其不同亞型的重要治療靶點(diǎn)。小分子抑制劑，如JQ1和I-BET，可以破壞 BRD4向染色質(zhì)的招募，導(dǎo)致關(guān)鍵癌基因的下調(diào)，特別是細(xì)胞-骨髓細(xì)胞增生癥癌基因c-Myc、BCL2和CDK6。這導(dǎo)致P21腫瘤抑制因子的重新激活，導(dǎo)致許多(但不是全部)血液細(xì)胞系和惡性原發(fā)細(xì)胞的細(xì)胞周期停滯和凋亡，特別是那些MLL基因重排的細(xì)胞[13-16]。Stewart及其伙伴的研究首次表明JQ1對(duì) (OCI)-AML3細(xì)胞系具有活性，該細(xì)胞系攜帶了一些在AML中高度發(fā)生的基因突變。據(jù)了解，這些基因通常與一些低風(fēng)險(xiǎn)的疾病相關(guān)。他們發(fā)現(xiàn)，與其他已知的激活P53的化合物聯(lián)合治療，即組蛋白去乙?；?HDAC)抑制劑，Nutlin-3和羅紅霉素，都可以增強(qiáng)JQ1在OCI-AML3細(xì)胞的藥效，表明JQ1誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡是通過P53介導(dǎo)的途徑，似乎涉及一種caspase 3/7依賴機(jī)制。此外，我們發(fā)現(xiàn)BRD4與激活的P53相關(guān)，這表明JQ1抑制BRD4可能導(dǎo)致染色質(zhì)招募P53失敗，導(dǎo)致DNA損傷無法修復(fù)、細(xì)胞周期阻滯乃至細(xì)胞死亡等等。研究人員發(fā)現(xiàn)當(dāng)用組蛋白去乙?；?HDAC)抑制劑，NUTLIN-3和化療藥多柔比星和JQ1聯(lián)用時(shí)，后者的藥效都得到增強(qiáng)。這些化合物對(duì)P53活化的誘導(dǎo)證明了JQ1可使AML細(xì)胞對(duì)P53介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡敏感。在進(jìn)一步的研究中，實(shí)驗(yàn)人員們發(fā)現(xiàn)BRD4與乙酰化的p53相關(guān)，但這種相互作用并不會(huì)被JQ1所抑制，這表明二者之間的這種蛋白-蛋白相互作用并不涉及乙?；嚢彼崤c溴結(jié)構(gòu)域相互結(jié)合。相反，他們認(rèn)為在OCI-AML3細(xì)胞中，當(dāng)JQ1激活P53后，可以不依賴于c-Myc阻止BRD4介導(dǎo)的P53被招募到染色質(zhì)靶點(diǎn)，從而導(dǎo)致細(xì)胞周期阻滯和凋亡[17]。根據(jù)最近的報(bào)道，Huang認(rèn)為BRD4的激活與NPMc+和AML細(xì)胞的自噬存在相關(guān)。為了證實(shí)這一猜想，該團(tuán)隊(duì)對(duì)BRD4對(duì)自噬過程中幾個(gè)關(guān)鍵基因的表達(dá)的調(diào)節(jié)作用。已知活性氧的過度生成可激活自噬[18-21]。ROS生成增加可能是由于氧化代謝引起的ROS過度生成和/或Nrf2介導(dǎo)的抗氧化防御能力下降。先前的一項(xiàng)研究表明，BRD4抑制Nrf2介導(dǎo)的抗氧化基因表達(dá)，很可能是通過增強(qiáng)Nrf2泛素連接酶Keap1的表達(dá)，從而增加ROS水平。本研究中對(duì)BRD4在自噬激活過程中，對(duì)一系列重要基因包括ATG3、ATG7和CEBPβ的調(diào)控作用進(jìn)行了詳細(xì)討論[22][23]。

自BRD4作為表觀遺傳調(diào)控因子被發(fā)現(xiàn)以來，關(guān)于它的靶基因及相關(guān)的信號(hào)通路的研究層出不窮。最近的研究提出了一種模型，BRD4作為支架，通過蛋白-蛋白直接相互作用招募多種調(diào)節(jié)蛋白，如造血轉(zhuǎn)錄因子CEBPβ[24]。

通過BRD4- CHIP -Seq對(duì)BRD4進(jìn)行全基因組檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)BRD4定位于CEBPβ的啟動(dòng)子和增強(qiáng)子區(qū)域，并與其他幾個(gè)自噬相關(guān)基因存在相互作用，表明CEBPβ在自噬中起著不可或缺的作用。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，CEBPβ缺失后Atg3和Atg7表達(dá)顯著減少。這些數(shù)據(jù)與Roe等人獲得的數(shù)據(jù)一起表明，BRD4作為上游調(diào)控因子，負(fù)責(zé)將CEBPβ招募到核心基因中，使某些細(xì)胞類型實(shí)現(xiàn)自噬[25]。另外值得注意的是，Jang的團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)促生存自噬是AML LSCs對(duì)JQ1耐藥的機(jī)制之一。靶向AMPK/ULK1通路或抑制自噬可能是對(duì)抗AML和其他類型癌癥對(duì)BET抑制劑耐藥性的有效治療策略[26]。

2.4 肝癌

肝細(xì)胞癌(HCC)是第五大常見癌癥，也是癌癥相關(guān)人類死亡的第二大原因[27][28]。有研究發(fā)現(xiàn)，在HepG2細(xì)胞中，JQ1會(huì)抑制c-Myc蛋白表達(dá)，誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯在G1期，引起P27上調(diào)，還能阻止BCL2L11蛋白的表達(dá)。引入3‘-UTR突變體BRD4可阻斷miR-608誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞中的c-Myc下調(diào)和增殖抑制[29]。

3 抑制劑種類

表觀遺傳蛋白一直以來都是藥物研究過程中值得關(guān)注的重要靶點(diǎn)。迄今為止，關(guān)于已有的表觀遺傳蛋白的研究結(jié)果大多聚焦在染色質(zhì)修飾酶這一部分，即所謂的表觀遺傳“書寫者”和“橡皮擦”。而與組蛋白結(jié)合有關(guān)的相關(guān)蛋白的有效抑制劑一直沒有被系統(tǒng)地描述過。

3.1 非選擇性抑制劑

JQ1可以說是最早的BRD4小分子抑制劑，它通過競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合乙酰賴氨酸識(shí)別基序發(fā)揮作用。JQ1和BRD4蛋白之間的這種競(jìng)爭(zhēng)作用，在依賴BRD4的癌細(xì)胞系中可以產(chǎn)生特異性的抗增殖作用。

Filippakopoulos的團(tuán)隊(duì)進(jìn)行了差示掃描熒光法(DSF)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，(+)-JQ1 JQ1的結(jié)合是具有一定而選擇性的。因?yàn)橹挥蠦ET家族溴結(jié)構(gòu)域的熱穩(wěn)定性得到顯著提高，而BET家族以外的溴域沒有。與之相比，其異構(gòu)體與任何溴域都沒有明顯的相互作用。除此之外，他們還明確了JQ1的結(jié)合方式，他與乙酰賴氨酸的結(jié)合類似于在乙酰賴氨酸復(fù)合物中觀察到的相互作用，即三唑環(huán)與進(jìn)化保守的天冬酰胺(BRD4中的Asn140和BRD2中的Asn429)形成氫鍵[30]。但由于JQ1有很多的副作用以及容易產(chǎn)生耐藥性，目前它主要作為化學(xué)探針探究BRD4的機(jī)制與功能。

近幾年，不斷有研究團(tuán)隊(duì)嘗試對(duì)它的結(jié)構(gòu)進(jìn)行優(yōu)化，或者提出新穎的聯(lián)合治療策略來對(duì)它的藥效進(jìn)行改善。比如：用氯原子取代苯環(huán)對(duì)位后，可以同時(shí)減小不良反應(yīng)并提高對(duì)BRD4的選擇性[31]。另外，如果用一些極性基團(tuán)取代側(cè)鏈的取代基替，可以顯著增高其活性，如化合物OTX-015，目前已獲批進(jìn)入臨床Ⅰ期試驗(yàn)階段[32]。

而且自最初的報(bào)道以來，除JQ1之外，還有報(bào)道其他幾種具有不同化學(xué)型的，但具有類似的結(jié)合親和力、選擇性譜和細(xì)胞活性的強(qiáng)效選擇性BET抑制劑。更重要的是，超過12種溴化域BET抑制劑已經(jīng)進(jìn)入臨床試驗(yàn)[33-36]。

3.2 雙重抑制劑

隨著第一個(gè)BET溴化域小分子抑制劑JQ1的開發(fā)，人們能夠證明通過與BRD4結(jié)合來取代染色質(zhì)中的BRD4可以中斷該蛋白的生物學(xué)功能。最初，Ember和伙伴們?cè)诶肂RD4的第一個(gè)溴域?qū)っ敢种苿┪膸?kù)進(jìn)行共結(jié)晶篩選的過程中，識(shí)別并表征了14種激酶抑制劑(10種不同的化學(xué)支架)作為KAc結(jié)合位點(diǎn)的配體。其中，PLK1抑制劑BI2536和JAK2抑制劑TG101209對(duì)BRD4表現(xiàn)出最強(qiáng)的抑制潛能，對(duì)BET溴化域具有較高的選擇性。比較結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)，KAc結(jié)合位點(diǎn)的激酶鉸鏈結(jié)合支架具有明顯不同的結(jié)合模式，這也提示了BET蛋白是多種激酶抑制劑的潛在脫靶蛋白。除了KAc識(shí)別功能，含BRD的蛋白也被認(rèn)為是非典型激酶，Ember和伙伴們發(fā)現(xiàn)強(qiáng)有力的周期蛋白依賴激酶(CDK)抑制劑dinaciclib結(jié)合到BRDT-1的KAc識(shí)別位點(diǎn)，它們與激酶抑制劑相互作用的潛力被發(fā)現(xiàn)。通過對(duì)BI2536和TG101209與BRD4的不同結(jié)合模式的研究，KAc位點(diǎn)為激酶抑制劑的鉸鏈結(jié)合組提供了主要的錨點(diǎn)得以確證。這一發(fā)現(xiàn)促使他們提出假設(shè)，即普通激酶抑制劑(“鉸鏈結(jié)合劑”)具有以前未被認(rèn)識(shí)到的潛力作為BET蛋白抑制劑。而以上的這些發(fā)現(xiàn)又為合理設(shè)計(jì)下一代BET選擇性和雙活性BET激酶抑制劑提供了一個(gè)新的結(jié)構(gòu)框架。

隨后有研究報(bào)道，雙PI3K-BRD4抑制劑可以阻斷C-MYC癌基因的表達(dá)，同時(shí)在體內(nèi)顯著抑制肝細(xì)胞癌和神經(jīng)母細(xì)胞瘤中的癌細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。這暗示了，也許重要的細(xì)胞周期調(diào)節(jié)劑Polo樣激酶1 (Polo-like kinase 1, PLK1) 可以與BET在包括前列腺癌和急性髓細(xì)胞白血病在內(nèi)的多種癌癥中產(chǎn)生協(xié)同抑制作用，無疑為開發(fā)有效抑制BRD4和PLK1的雙抑制劑化合物提供了可能性。除此之外，后續(xù)發(fā)現(xiàn)的多種激酶抑制劑，包括PLK1抑制劑，BI-2536，和JAK2抑制劑，TG101209對(duì)BET蛋白家族表現(xiàn)出中等至優(yōu)異的抑制活性，這些化合物可以等效地靶向激酶和BET蛋白。張煒教授團(tuán)隊(duì)通過對(duì)小分子化合物BI2536進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，得到了能同時(shí)有效抑制BRD4/PLK1的雙抑制劑化合物UMB160以及能選擇性抑制PLK1的化合物UMB131[37-42]。

對(duì)所有BRD4配體配合物的分析和與現(xiàn)有激酶抑制劑配合物的比較表明，激酶抑制劑對(duì)KAc位點(diǎn)的四種一般結(jié)合模式。根據(jù)各自鉸鏈結(jié)合基團(tuán)建立的相互作用模式，抑制劑被分為N型，PZA型(如：GW612286X和BI2536)，ZA型(如：化合物SB251527和SB284847B)，Ⅰ型(如：化 合 物SB610251B、SB614067R和SB202190、LY294002)[43][44]。

3.3 選擇性BD1/2抑制劑

前文所描述的第一代BET抑制劑做到了特異性抑制BET家族，不作用于其他溴結(jié)構(gòu)域。但是在BET家族內(nèi)部的特異性無法達(dá)到。目前研究已知，有兩個(gè)可以特異性抑制BD1或BD2的抑制劑，分別是：RVX-208 and ABBV744。

研究表明，處于穩(wěn)定狀態(tài)時(shí)的基因表達(dá)主要需要BD1，而炎癥刺激誘導(dǎo)的基因表達(dá)需要所有BET蛋白的BD1和BD2的參與。而在很大程度上，BD1抑制劑可以產(chǎn)生的效用和廣譜的 BET抑制劑相似，而BD2抑制劑主要在炎癥和自身免疫性疾病中扮演重要角色。

研究者們通過熱變性評(píng)估RVX-208的結(jié)合發(fā)現(xiàn)，與JQ1一樣，RVX-208增加了所有BET 溴結(jié)構(gòu)域的Tm值卻沒有與其他6個(gè)蛋白(CREBBP、p300等)的溴域結(jié)合，這表明RVX-208的結(jié)合對(duì)BET蛋白的溴域具有選擇性。

ABBV-744，這是一種具有類藥物特性的BET家族蛋白BD2結(jié)構(gòu)域的強(qiáng)效選擇性抑制劑。ABBV-744有效抑制了BET家族蛋白的BD2結(jié)構(gòu)域，與BRD2、BRD3和BRD4的BD1結(jié)構(gòu)域相比，ABBV-744的選擇性超過290倍，與BRDt的BD1結(jié)構(gòu)域相比，ABBV-744的選擇性超過95倍。

4 總結(jié)

BET抑制劑開啟了癌癥治療中表觀遺傳藥物的新時(shí)代。隨著時(shí)間推移，來自BET抑制劑I/II期研究的臨床數(shù)據(jù)積累得也越發(fā)豐富。雖然BET抑制劑在表現(xiàn)出強(qiáng)有力的抗腫瘤活性，但其毒性應(yīng)謹(jǐn)慎管理。而耐藥性和毒性的存在也表明需要開發(fā)耐受良好的BET抑制劑，并在不超過毒性閾值的情況下最大化臨床療效。

除了已經(jīng)描述的BET抑制劑，當(dāng)前的技術(shù)進(jìn)步導(dǎo)致了替代BET抑制劑分子的發(fā)展。含有JQ1抑制劑和聚合物化合物作為載體的納米顆粒具有更高的等離子體穩(wěn)定性，克服了JQ1半衰期短的局限性。這些裝載jq1的納米顆粒在體外和體內(nèi)均對(duì)TNBC具有活性。新技術(shù)導(dǎo)致BET-PROTACS的發(fā)展，這是一種針對(duì)結(jié)合BRD4并導(dǎo)致其蛋白酶體降解的嵌合分子的蛋白水解技術(shù)[45]。

總的來說，對(duì)BET抑制的廣泛關(guān)注導(dǎo)致了通過間接途徑產(chǎn)生BET蛋白抑制的非常規(guī)藥物的開發(fā)。