血筒化學(xué)成分、藥理作用及質(zhì)量控制研究進(jìn)展

陸曉珊， 胡勝濤， 唐 琳， 余黃合， 林 也， 張二兵， 張 逢， 劉樂平，嚴(yán)建業(yè)， 宋厚盼， 劉 良， 蔡 雄*， 王 煒*

[1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)中藥粉體與創(chuàng)新藥物省部共建國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(培育基地)，湖南 長(zhǎng)沙 410208；2.廣東藥科大學(xué)中藥學(xué)院，廣東 廣州 510006；3.湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410208；4.澳門科技大學(xué)中藥質(zhì)量研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，澳門 氹仔島 999078]

血筒是湘西北土家族傳統(tǒng)民族藥材，為五味子科南五味子屬植物異型南五味子Kadsuraheteroclita(Roxb.)Craib的藤莖[1]。根據(jù)土家族藥物分類法，將具有趕火敗毒、活血祛瘀、消腫止痛、祛風(fēng)除濕等作用的藥物稱為“七”類藥[1]，故血筒又稱“血七”，具有祛風(fēng)除濕、行氣止痛、活血散瘀的功效。血筒主產(chǎn)于我國(guó)西南部至南部，如云南、貴州、廣東、廣西、湖南等地。血筒在各地叫法不一，容易混淆，在廣東，稱為“廣東海風(fēng)藤”；在廣西，又名“地血香”“大飯團(tuán)”；在湖南稱為“血筒”。由于土家族沒有文字，土家族醫(yī)藥文化主要靠“口耳相傳”或“師徒制”傳承，造成藥材來源不清、同物異名或同名異物等現(xiàn)象，不利于土家族藥物在臨床、科研上的應(yīng)用。近年來，隨著國(guó)家對(duì)傳統(tǒng)醫(yī)藥的重視，土家族醫(yī)藥的發(fā)展也受到學(xué)術(shù)界廣泛關(guān)注，對(duì)血筒的研究也取得了一定的成果和進(jìn)展，尤其是對(duì)三萜類成分及其抗炎鎮(zhèn)痛作用的研究，血筒質(zhì)量評(píng)價(jià)的研究也成為重點(diǎn)。本文從血筒的化學(xué)成分、藥理作用、質(zhì)量控制這3個(gè)方面進(jìn)行系統(tǒng)綜述，以期對(duì)其深入研究提供參考。

1 化學(xué)成分

1.1 三萜類 三萜類是血筒抗HIV、抗炎鎮(zhèn)痛、抗腫瘤的主要活性成分，其主要結(jié)構(gòu)類型有環(huán)阿屯烷型和羊毛脂烷型。近年來，已從血筒中分離得到64個(gè)三萜類化合物，包括環(huán)阿屯烷型53個(gè)、羊毛脂烷型9個(gè)、齊墩果烷型1個(gè)、schiartane型三萜1個(gè)，具體見表1、圖1。

表1 血筒中三萜類化合物

1.2 木脂素類 木脂素類是血筒抗菌、抗病毒、抗血小板聚集的活性成分。根據(jù)不同骨架及結(jié)構(gòu)可分為聯(lián)苯環(huán)辛烯類、螺苯駢呋喃型聯(lián)苯辛烯類、二芳基丁烷類、苯基四氫萘類、四氫呋喃類等。目前，從血筒中分離得到59個(gè)木脂素類化合物，包括聯(lián)苯環(huán)辛烯類37個(gè)、螺苯駢呋喃型聯(lián)苯辛烯類12個(gè)、二芳基丁烷類3個(gè)、苯基四氫萘類3個(gè)和四氫呋喃類2個(gè)、其他類2個(gè)，具體見表2、圖2。

表2 血筒中木脂素類化合物

1.3 倍半萜類 血筒中倍半萜類化合物多以油狀存在，其相對(duì)構(gòu)型較多，通過X-ray晶體衍射確定新化合物6α,9α-dihydroxycadinan-4-en-3-one(124)的絕對(duì)構(gòu)型，這為倍半萜構(gòu)型的確定提供依據(jù)。此外，血筒中的倍半萜類成分有6α,9α,15-trihydroxycadinan-4-en-3-one(125)、(+)-3,11,12-trihydroxycalamenene(126)、(-)-3,10,11,12-tetrahydroxy-calamenene(127)、cryptomeridiol(128)、isoepicubenol(129)、1β,4β,7α-trihydroxyeudesmane(130)、cytochalasin H(131)[20]、guai-3-en-10-ol(132)[21]，具體見圖3。

1.4 其他 血筒中還含有揮發(fā)油、多糖、β-谷甾醇、胡蘿卜苷、槲皮素、二氫槲皮素等成分。血筒中的揮發(fā)油主要由萜烯和萜醇類成分組成，其中T-杜松醇(18.195%)和δ-杜松烯(11.485%)的含量最高，其次是α-沒藥醇、瓦倫烯、γ-杜松烯、橙花椒醇、α-胡椒烯、衣蘭油醇、α-衣蘭油烯等[22]。血筒中多糖主要由分子量約為40 kDa的多糖成分構(gòu)成，構(gòu)成多糖的單糖有D-葡萄糖、D-半乳糖、D-阿拉伯糖[23]。

2 藥理作用

2.1 抗炎鎮(zhèn)痛 血筒具有抗炎鎮(zhèn)痛作用，可用于治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，其發(fā)揮抗炎作用的成分為三萜類。鄧?guó)Q等[24]研究血筒總?cè)频逆?zhèn)痛作用，結(jié)果表明，血筒總?cè)茖?duì)小鼠的急性炎癥反應(yīng)和物理化學(xué)刺激引起的疼痛有抑制作用。血筒總?cè)瓶删徑饽z原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠的足腫脹疼痛，且可降低炎性細(xì)胞因子水平、抑制基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)活性，其抗炎機(jī)制可能是通過抑制細(xì)胞炎性因子和免疫應(yīng)答，減輕關(guān)節(jié)滑膜炎癥、減少骨破壞[25]。此外，血筒還可以抑制大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎模型發(fā)病率，與模型組比較，血筒組大鼠關(guān)節(jié)腫脹度降低，關(guān)節(jié)滑膜增生得到抑制，關(guān)節(jié)翳形成減少，關(guān)節(jié)軟骨破壞和骨侵蝕明顯改善[26]。血筒能夠降低腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細(xì)胞介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、白介素17A(IL-17A)、白介素17F(IL-17F)炎性因子水平，還能降低關(guān)節(jié)炎足趾組織MMP-1、MMP-3蛋白表達(dá)，升高TIMP-1蛋白表達(dá)[27]。

因此，血筒治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制可能是抑制致炎細(xì)胞因子產(chǎn)生，減少足組織炎性浸潤(rùn)，降低MMPs表達(dá)，減少骨和骨組織的破壞[28]。

2.2 肝保護(hù) 肝損傷與多種酶、自由基及脂質(zhì)過氧化相關(guān)，血筒醇提物可降低CCl4誘導(dǎo)大鼠急性肝損傷模型大鼠血清中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)的活性、升高肝組織中還原型谷胱甘肽(GSH)水平，提示血筒醇提物對(duì)肝損傷有保護(hù)作用，其保肝降酶作用機(jī)制可能是增強(qiáng)肝細(xì)胞抗自由基攻擊能力，從而起到保護(hù)肝臟的作用[29]。此外，血筒醇提物對(duì)D-半乳糖胺/脂多糖致小鼠急性肝損傷也有保護(hù)作用，其可以降低血清中ALT、AST活性，抑制丙二醛(MDA)和髓過氧化物酶(MPO)表達(dá)，減輕肝氧化應(yīng)激損傷，同時(shí)也通過抑制促炎癥因子TNF-α、IL-6的釋放，減輕炎癥反應(yīng)，起到保肝作用[30]。

2.3 其他 血筒具有抗病毒作用，對(duì)血筒已分離出的化合物進(jìn)行活性篩選，發(fā)現(xiàn)其中cycloartenone、heteroclialactone A、meso-dihydroguaiaretic acid對(duì)乙肝表面抗原HBsAg的抑制率分別是43%、52%、35%，具有抗乙肝病毒活性[17]。從血筒中分離得到的化合物heteroclitalactone D對(duì)人腫瘤細(xì)胞系HL-60有細(xì)胞毒性，其IC50值為6.76 μmol/L[2]；dihydroguaiaretic acid則對(duì)OVCAR、HT-29/A549細(xì)胞系有抑制作用，其IC50值為16.2～36.4 μmol/L[12]，表明血筒有抗腫瘤作用。此外，血筒還具有抗菌、抗脂質(zhì)過氧化、抗血小板聚集、抗老年癡呆、神經(jīng)保護(hù)等作用。

3 質(zhì)量控制

目前，2020年版《中國(guó)藥典》未收錄血筒，《廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》在“廣東海風(fēng)藤”項(xiàng)下收錄[31]，《廣西壯族自治區(qū)瑤藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》在“廣西海風(fēng)藤”項(xiàng)下收錄[32]，但僅對(duì)該藥材的性狀和理化鑒別有規(guī)定，對(duì)含量測(cè)定未有規(guī)定。Wang等[33]建立了一種簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確的HPLC法對(duì)血筒中6種主要成分同時(shí)定性定量分析，并且對(duì)比不同采收期這6種成分在藥材中的含量，其中5種三萜類成分在1月份含量最高，而另一種木脂素類成分則在8月份含量最高，這表明血筒中主要藥效成分含量隨季節(jié)變化而變化。高效凝膠滲透色譜(HPGPC)法可以測(cè)定血筒多糖的分子量及其分布，HPLC法可以準(zhǔn)確地測(cè)定其單糖的種類，方法簡(jiǎn)單可行，可用于控制血筒多糖的質(zhì)量[23]。對(duì)于揮發(fā)油類成分的質(zhì)量控制，焦豪妍等[34]建立了10批廣東地區(qū)不同產(chǎn)地的血筒揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜，標(biāo)定23個(gè)共有峰，各批次間相似度較低。此外，范衛(wèi)鋒等[35]建立了廣西地區(qū)產(chǎn)的12批血筒HPLC指紋圖譜，有11個(gè)共有峰，相似度在0.60以上，這表明不同產(chǎn)地血筒質(zhì)量差異較大?，F(xiàn)有的這些研究?jī)H針對(duì)某一地區(qū)的血筒建立指紋圖譜，不具備整體性，為保證血筒藥材質(zhì)量及用藥安全，仍需進(jìn)一步探索和完善對(duì)其質(zhì)量控制的研究及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定。

4 結(jié)語與展望

血筒具有廣泛的生物活性，且毒性較低，研究表明，血筒醇提物小鼠的最大耐受量為26 g/kg，相當(dāng)于成人1 d用量的253倍[26]，因此，高效、低毒的血筒具有極大的研究?jī)r(jià)值和應(yīng)用前景。但是，目前尚未有統(tǒng)一的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)對(duì)血筒質(zhì)量進(jìn)行控制，對(duì)血筒質(zhì)量評(píng)價(jià)的研究也較少，現(xiàn)有的研究也多是局限于對(duì)一個(gè)地區(qū)的藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)，且所建立的指紋圖譜未闡明色譜峰與化學(xué)成分對(duì)應(yīng)關(guān)系，難以從整體上控制血筒藥材質(zhì)量。因此，應(yīng)在現(xiàn)有的研究基礎(chǔ)上，進(jìn)一步深入探索，最好能對(duì)來自不同產(chǎn)區(qū)(道地產(chǎn)區(qū)、主產(chǎn)區(qū)、其他產(chǎn)區(qū))、不同產(chǎn)地的至少15批藥材進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)及定性定量分析，構(gòu)建中藥指紋圖譜識(shí)別模式，更全面、準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)血筒藥材質(zhì)量，為血筒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定奠定基礎(chǔ)。

土家族人民經(jīng)過千百年的摸索和實(shí)踐，積累了豐富的醫(yī)療和用藥經(jīng)驗(yàn)，也逐步形成了具有民族特色的土家族醫(yī)藥理論體系。但土家族醫(yī)藥知識(shí)僅在民族聚居區(qū)小范圍傳播，且缺乏專業(yè)性研究，僅靠經(jīng)驗(yàn)理論難以令人信服。因此，土家族醫(yī)藥的發(fā)展需要借助現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)及研究手段，結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論闡明中藥作用機(jī)理、明確中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，從而推動(dòng)中醫(yī)藥現(xiàn)代化進(jìn)程。與此同時(shí)，也要做好藥材資源合理開發(fā)利用和生態(tài)保護(hù)，確保土家族醫(yī)藥可持續(xù)發(fā)展。