脂肪干細胞及其衍生物促進糖尿病足再生修復的研究進展▲

黎洪棉 胡嘯昊,2 王溪月,2 盧國浩 韋燕琳 呂立文 梁安儒 盧東長城 黎君君*

(1 廣西醫(yī)學科學院·廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院科研實驗中心，廣西南寧市 530021；2 廣西醫(yī)科大學再生醫(yī)學與醫(yī)用生物資源開發(fā)應用協(xié)同創(chuàng)新中心，廣西南寧市 530021；3 廣西醫(yī)學科學院·廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院急診科，廣西南寧市 530021；4 廣西康久生物科技有限公司，廣西南寧市 530200；5 南寧維爾凱生物科技有限公司，廣西南寧市 530300)

隨著人們生活條件的改善和飲食結構的改變，我國糖尿病患者數(shù)量逐年增多。1980年的流行病學調查顯示，我國糖尿病的患病率約為0.67%[1]。隨后的40年間，我國糖尿病患者總數(shù)不斷上升，2021年的數(shù)據(jù)顯示我國糖尿病患者總數(shù)已增長至1.4億例，相較于2011年的9000萬例，增幅達56%，位居全球第一，形勢嚴峻[2]。

糖尿病足是糖尿病患者嚴重的常見并發(fā)癥之一，糖尿病患者有高達25%的機會發(fā)展為糖尿病足[3]，嚴重者將面臨截肢的風險。糖尿病引發(fā)的低位遠端截肢中，85%是由足部潰瘍導致[4]。截肢有大小之分，小截肢是在清除感染和壞死組織的同時，通過重建部分血管或肢體矯正，有限地切除部分組織；而大截肢分為低位截肢和高位截肢，當無法通過血管重建、藥物控制或小截肢控制病情發(fā)展時，需要通過大截肢治療。研究表明，因糖尿病足住院的患者截肢率為11.4%，其中小截肢率和大截肢率分別為5.4%和6.0%，而需要二次截肢的患者比例為17.9%[5]。因糖尿病屬于慢性進行性疾病，一些患者在糖尿病足初期癥狀較輕，缺乏日常護理意識，發(fā)病后不能及時就診，待病情進展為糖尿病足潰瘍期，或者伴隨骨髓炎后才前往醫(yī)院就診，造成治療難度加大[6]。而晚診晚治不僅導致患者的生活質量顯著降低，還會造成死亡率上升。糖尿病足創(chuàng)面難以愈合與內(nèi)源性因素如代謝狀況、血管、免疫功能、周圍神經(jīng)病變，以及外源性因素如感染、壓力、軟組織損傷等密切相關[7-8]。此外，許多潛在危險因素如年齡、吸煙、肥胖等，共同導致了糖尿病足創(chuàng)面難愈的復雜病理過程。既往治療糖尿病足的方法較為單一，病理過程復雜的糖尿病足難以獲得較好的療效，導致患者需反復接受治療，患者及家庭承受著極大的經(jīng)濟負擔[9]。

近年來干細胞治療作為一種新興的治療方法，逐漸應用于傷口愈合及組織修復治療中。脂肪干細胞(adipose-derived stem cell，ADSC)具有多向分化及自我更新的能力，且其大量存在于脂肪組織中，易于分離提取，具有較強的體外增殖及分泌促血管生長因子的能力，是治療糖尿病足理想的種子細胞[10]。同時，ADSC衍生物如外泌體與脂肪組織衍生物如基質血管成分凝膠被證實具有與ADSC相似的功能?；谏鲜鰞?yōu)勢，ADSC在糖尿病足的治療中具有廣闊的應用前景，有望成為治療糖尿病足的新策略。

1 ADSC與脂肪組織及其衍生物概述

1.1 ADSC的分離、提取及應用 2001年Zuk等[11-12]通過脂肪抽吸手術從脂肪組織中獲得脂肪組織提取物，發(fā)現(xiàn)脂肪組織提取物中的細胞具有多向分化潛能。次年，該研究團隊首次從脂肪組織提取物中分離提取出ADSC。ADSC按來源分類屬于成體干細胞，按功能分類屬于多能干細胞。相較于骨髓間充質干細胞，ADSC具有獲取容易、來源豐富、對機體損傷小等優(yōu)勢[13]。ADSC的經(jīng)典分離方法是用膠原酶消化脂肪抽吸物，進行過濾及離心后獲得基質血管成分，可進行傳代培養(yǎng)。ADSC具有多向分化潛能，可以分化成為成骨細胞、軟骨細胞、心肌細胞等，適合體外大規(guī)模培養(yǎng)及自體移植[14-16]。研究表明，ADSC在傷口愈合、免疫調節(jié)以及抗凋亡中均有調控作用[17]。此外，ADSC技術的發(fā)展也為促進整形美容領域的發(fā)展帶來了新思路，其能夠改善皮膚光老化造成的皺紋，同時促進成纖維細胞合成膠原[18-19]。綜上，ADSC已成為再生醫(yī)學領域中重要的種子細胞，將發(fā)揮越來越重要的作用。

1.2 ADSC外泌體 ADSC外泌體為包含mRNAs、miRNAs和蛋白質等多種生物分子的盤狀囊泡(直徑30～150 nm)。外泌體通過釋放蛋白質、脂質、DNA、RNA等在細胞間起到物質傳輸和通訊的作用[20-23]。目前最常見的ADSC外泌體的獲取方法是將ADSC的培養(yǎng)液進行超高速離心后純化提取。這種方法經(jīng)濟、實用且有效，能夠最大限度地避免外泌體在提取過程中受到機械損傷。研究表明，ADSC來源的外泌體具有修復組織的潛力[24]，對治療包括心、肝、神經(jīng)系統(tǒng)和腎臟在內(nèi)的各種疾病模型都有良好的效果[25-28]。與直接利用ADSC治療相比，ADSC外泌體可以有效避免移植細胞遭受免疫細胞吞噬、細胞存活數(shù)量有限、衰老導致的細胞功能喪失及療效不穩(wěn)定等問題。

1.3 基質血管成分凝膠(stromal vascular fraction-gel，SVFG) 脂肪組織來源的基質細胞混合物，即基質血管成分也具有與ADSC相似的生物學功能[29-30]。SVFG是通過簡單機械方法處理脂肪組織后獲取的一種可注射凝膠狀基質細胞復合物，由細胞外基質(extracellular matrix，ECM)和ADSC、內(nèi)皮細胞、周細胞、內(nèi)皮祖細胞、巨噬細胞、淋巴細胞等十多種細胞成分組成。在移植過程中，SVFG的ECM能夠防止機體免疫系統(tǒng)攻擊ADSC，為ADSC提供良好的生長環(huán)境。目前有較多關于SVFG治療多種臨床疾病取得良好療效的報道，例如利用SVFG面部填充改善軟組織缺損造成的外觀問題，在痤瘡病變真皮下注射SVFG可顯著減少痤瘡丘疹數(shù)量、改善鼻部增生性瘢痕，局部注射SVFG可促進慢性創(chuàng)面愈合等[31-33]。

2 ADSC與脂肪組織及其衍生物促進糖尿病足再生修復的機制

2.1 促進血管生成 ADSC在血管生成過程中起重要作用。2004年，Planat-Benard等[34]首次發(fā)現(xiàn)脂肪來源的譜系細胞和血管內(nèi)皮細胞具有相同的前體細胞，有分化為內(nèi)皮細胞表型、參與體內(nèi)血管形成的潛能。之后的研究證明，脂肪組織中的ADSC可以通過向血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞定向分化直接參與新生血管形成[35]。相較于骨髓來源干細胞，ADSC分化為內(nèi)皮細胞的能力更強[36]。將ADSC移植到損傷部位后，其分泌的細胞因子如血管內(nèi)皮生長因子、肝細胞生長因子、堿性成纖維細胞生長因子-2、基質細胞衍生因子-1促進了新的肉芽組織和血管生成[36-37]。Pu等[38]將ADSC及其外泌體注入缺血再灌注損傷的皮瓣，術后第5天，相較于未接受ADSC及其外泌體治療的組別，接受ADSC及其外泌體治療的組別皮瓣存活率和毛細血管密度獲得顯著提升，證明ADSC和外泌體可以促進血管生成，且該效應是通過STAT3磷酸化途徑致使白細胞介素-6表達實現(xiàn)的。此外，ADSC也可以作為輔助成分，與生長因子等成分同生物材料一起植入，起到促進受損傷的周圍血管的生成作用[39]。

2.2 調節(jié)炎癥反應 正常機體受到外界病原體入侵時會啟動炎癥反應防御機制，以便及時清除壞死組織。這一反應能減少組織損傷的進一步擴展，同時促進損傷組織的修復。慢性創(chuàng)面的愈合大致可以分為四個連續(xù)的過程：止血期、炎癥期、增生期和重塑期[40]。而糖尿病足的創(chuàng)面由于各種外源性和內(nèi)源性因素的影響，導致傷口停留在愈合的某個階段。糖尿病足創(chuàng)面停滯在炎癥期時，炎性細胞及炎癥因子的高表達會導致蛋白水解加劇，從而抑制創(chuàng)面愈合由炎癥期向下一階段前進，導致創(chuàng)面遷延難愈[20]。炎性細胞中的巨噬細胞在炎癥發(fā)展及消退過程中起重要作用[41]。巨噬細胞有M1和M2兩種表型，其中M1巨噬細胞起到促進炎癥的作用，而M2巨噬細胞則有抵抗炎癥的作用。白色脂肪組織中的M2巨噬細胞在肥胖人群中數(shù)量較多，且會向M1巨噬細胞極化。這些M1巨噬細胞會誘導一氧化氮合酶和腫瘤壞死因子-α表達，從而導致胰島素抵抗。

ADSC外泌體能夠減輕創(chuàng)面炎癥反應，從而促進傷口愈合。當ADSC外泌體被巨噬細胞吸收后，外泌體攜帶的活性信號轉導與轉錄激活因子-3會上調精氨酸酶-1的表達，促使M1巨噬細胞向M2巨噬細胞極化，從而減輕炎癥反應[42]。此外，ADSC可以通過抑制淋巴細胞、自然殺傷細胞等免疫細胞的成熟與增殖來降低免疫應答，起到促進傷口愈合的作用[43]。研究發(fā)現(xiàn)，ADSC具有下調炎性因子表達的功能。董瑤等[44]建立小鼠創(chuàng)面模型，并在創(chuàng)面周圍注射ADSC，發(fā)現(xiàn)在創(chuàng)面組織中許多促炎因子如單核細胞趨化蛋白-1、白細胞介素-6以及白細胞介素-1等表達下降，而抗炎因子如白細胞介素-10等表達上升。由此推斷ADSC可以減輕創(chuàng)傷部位的炎癥反應，進而促進創(chuàng)面愈合。糖尿病足創(chuàng)面會形成低氧的環(huán)境，而ADSC耐受低氧環(huán)境，并且能夠在低氧環(huán)境中釋放自由基清除劑、抗氧化物質、熱休克蛋白等物質，以清除受損組織微環(huán)境中的毒素[6，45]。Wang等[46]利用低氧環(huán)境下培養(yǎng)的ADSC所分泌的外泌體治療糖尿病小鼠，結果顯示，與正常環(huán)境下培養(yǎng)的ADSC外泌體相比，低氧環(huán)境下ADSC所分泌的外泌體具有下調炎癥因子白細胞介素-6表達的作用，并且這種下調作用要強于正常環(huán)境下培養(yǎng)的ADSC外泌體，由此推測在低氧環(huán)境下ADSC可能具有更好的抗炎效果。

2.3 調節(jié)成纖維細胞的增殖及遷移 成纖維細胞可以產(chǎn)生多種糖蛋白和細胞因子[47]，可以調控ECM的產(chǎn)生和降解過程。在創(chuàng)面愈合過程中，成纖維細胞可遷移至創(chuàng)面，通過有絲分裂大量增殖，促進毛細血管生成，形成新的血管網(wǎng)絡，恢復損傷部位的血供。成纖維細胞在創(chuàng)面愈合的第4～5天開始合成并分泌大量的膠原纖維和基質成分，與新生毛細血管、蛋白多糖、透明質酸、膠原和彈性蛋白等ECM成分共同形成肉芽組織取代血小板凝塊，填補傷口組織缺損，為表皮細胞的覆蓋創(chuàng)造條件[40]。因此成纖維細胞在創(chuàng)面修復過程中起到非常重要的作用。ADSC及其外泌體通過調節(jié)成纖維細胞的增殖和遷移，以及在創(chuàng)面愈合初期刺激膠原表達而促進了慢性創(chuàng)面的愈合。糖尿病足潰瘍創(chuàng)面的愈合時間較長，易導致瘢痕形成，愈合質量差[48-49]。ADSC外泌體可通過誘導人類成纖維細胞的增殖和遷移及膠原蛋白的合成來促進傷口愈合[19，50]。研究表明，應用ADSC外泌體治療創(chuàng)面，在創(chuàng)面愈合早期可促進成纖維細胞Ⅰ型、Ⅲ型膠原的形成，而在愈合晚期則會下調膠原的表達，以抑制瘢痕組織的生長[51]。Hu等[52]研究發(fā)現(xiàn)，ADSC外泌體被成纖維細胞攝入后，能刺激成纖維細胞中神經(jīng)-鈣黏素、細胞周期蛋白、增殖細胞核抗原以及Ⅰ型、Ⅲ型膠原基因的表達。Wang等[46]通過蛋白質印跡實驗發(fā)現(xiàn),與ADSC外泌體共同培養(yǎng)的成纖維細胞Ⅰ型、Ⅲ型膠原的表達水平顯著上調，且在低氧環(huán)境下培養(yǎng)的ADSC分泌的外泌體對成纖維細胞的上述作用更強。對正常和缺氧環(huán)境下培養(yǎng)的ADSC外泌體中的RNA進行高通量測序，并運用京都基因和基因組百科全書分析差異表達的基因比對，發(fā)現(xiàn)差異表達的基因富集于PI3K/Akt通路。使用PI3K/Akt抑制劑Ly294002對成纖維細胞進行預處理，發(fā)現(xiàn)在低氧環(huán)境下培養(yǎng)的ADSC外泌體誘導成纖維細胞增殖的效果減弱，提示在低氧環(huán)境下培養(yǎng)的ADSC外泌體調控成纖維細胞的增殖和遷移可能依賴于PI3K/Akt信號通路?；|金屬蛋白酶是以ECM為底物的蛋白酶，ADSC的蛋白提取物可以抑制成纖維細胞基質金屬蛋白酶-1的表達并上調成纖維細胞Ⅰ型膠原的表達，對ECM起到保護作用，進而促進創(chuàng)面愈合[49，53]。

2.4 促進創(chuàng)面再上皮化 創(chuàng)面愈合過程中的一個重要階段是創(chuàng)傷組織的再上皮化。糖尿病足創(chuàng)面的遷延不愈是由于再上皮化未發(fā)揮相應的作用。此外，大量免疫細胞如中性粒細胞、單核細胞及巨噬細胞等會集中在創(chuàng)面處，釋放水解酶和氧自由基，導致組織進一步損傷。因此，促進創(chuàng)面及時再上皮化對于創(chuàng)面愈合非常重要。纖連蛋白可作為趨化因子誘導上皮細胞、成纖維細胞等向傷口處運動，促進上皮組織再生。Zhao等[41]使用ADSC治療兔牙齦創(chuàng)面，發(fā)現(xiàn)創(chuàng)面中纖連蛋白的表達上調。角質形成細胞是表皮的主要成分，其可通過增殖、分化、遷移形成新的表皮，在上皮化過程中起關鍵作用。Sheng等[54]發(fā)現(xiàn)，移植的ADSC能夠促進表皮細胞的增殖，進而使皮膚創(chuàng)面的表皮在愈合過程中變厚。袁方等[55]將人表皮角質形成細胞與ADSC共同培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)ADSC可促進人表皮細胞遷移。ADSC不僅可以促進表皮細胞增殖和遷移，同時其自身也可以分化為表皮細胞促進創(chuàng)面再上皮化。趙京禹[56]利用免疫熒光染色檢測ADSC移植后的組織，發(fā)現(xiàn)ADSC可促進細胞角蛋白的表達，提示ADSC具有分化為表皮細胞，進而促進創(chuàng)面再上皮化的能力。邱堯等[57]在創(chuàng)面處理時局部注射ADSC，隨后觀察到ADSC分化為角質細胞。增殖細胞核抗原在細胞增殖的啟動中起重要作用，是反映細胞增殖狀態(tài)的良好指標。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，相比于單純將ADSC移植于小鼠創(chuàng)面，將ADSC與透明質酸一同移植于小鼠創(chuàng)面能較好地促進創(chuàng)面上皮化；術后15 d對創(chuàng)面皮膚的增殖細胞核抗原進行檢測，發(fā)現(xiàn)單純移植ADSC和ADSC與透明質酸聯(lián)合移植的表皮和真皮中均有較多的核抗原陽性增殖細胞，而ADSC與透明質酸聯(lián)合移植的增殖細胞核抗原的表達上調幅度高于單純移植ADSC，表明ADSC對表皮和真皮再生具有促進作用，并且在進行ADSC移植時添加透明質酸對表皮和真皮再生的促進效果更顯著[58]。

3 ADSC與脂肪組織及其衍生物治療糖尿病足的臨床應用

3.1 支架及仿生基質促進ADSC移植技術發(fā)展 提高間充質干細胞移植后的成活率是臨床醫(yī)生不斷追求的目標，仿生基質和支架的出現(xiàn)促進了干細胞技術的發(fā)展，支架可以作為一種結構基，供間充質干細胞附著、增殖及分化?，F(xiàn)階段常見的支架材料有人脫細胞真皮基質、纖維蛋白膠、絲素殼聚糖、透明質酸、Ⅰ型膠原、人脫細胞羊膜等。馬繼中[59]使用人脫細胞基質羊膜作為ADSC的支架，將支架復合ADSC移植于創(chuàng)面，結果顯示創(chuàng)面愈合速度顯著提高。糖尿病可能影響脂肪組織來源干細胞促進創(chuàng)面愈合的能力。Kim等[60]比較了正常ADSC和糖尿病患者來源ADSC促進小鼠糖尿病創(chuàng)面愈合的能力，結果顯示正常ADSC組的創(chuàng)面愈合率明顯高于糖尿病ADSC組。Laiva等[61]研究發(fā)現(xiàn)，使用一種新型的膠原蛋白-硫酸軟骨素支架(其攜帶有基質衍生因子-1α編碼基因的復合納米顆粒)，可促進糖尿病ADSC基質衍生因子-1α的表達，恢復ADSC的促血管生成能力。

3.2 ADSC聯(lián)合水凝膠移植技術 雖然ADSC已被廣泛地研究并應用于疾病的治療中，但ADSC容易受到微環(huán)境的影響，而ADSC結合水凝膠技術則為解決這一問題提供了方案。水凝膠包埋ADSC后可將ADSC攜帶至相應位置，同時為ADSC提供微環(huán)境保護。ECM是由細胞分泌到基質中的大分子組成的復雜網(wǎng)絡結構，在靜態(tài)下具有支撐、連接、保水、保護、抗壓縮等作用，在細胞的基本活動中發(fā)揮著重要的生物學功能。脫細胞外基質是細胞和抗原成分被去除的自然組織，其保留了原有的ECM結構，各種脫細胞外基質因免疫原性低、生物相容性好而成為常用的生物支架材料。Pu等[62]將人脫細胞脂肪組織加工成可注射的水凝膠，然后與ADSC均勻混合，成功制備了對溫度敏感、4℃液態(tài)、37℃半固態(tài)的人脫細胞脂肪組織水凝膠。將ADSC植入人脫細胞脂肪組織水凝膠后，細胞在凝膠層中的存活率高且生長良好。將含有ADSC的水凝膠注射到裸鼠皮下，15 min后取材，樣本顯示原位凝膠化。這些結果表明人脫細胞脂肪組織水凝膠可以為ADSC提供移植和生長的環(huán)境。林凱桑[63]將Pluronic F127水凝膠聯(lián)合ADSC移植于糖尿病大鼠潰瘍創(chuàng)面，發(fā)現(xiàn)相較于單純移植ADSC治療，使用ADSC聯(lián)合Pluronic F127水凝膠治療后的大鼠潰瘍創(chuàng)面愈合率及愈合速度明顯提高。以上結果表明，ADSC聯(lián)合水凝膠治療糖尿病足有很大潛力，但目前關于ADSC水凝膠的研究大多是動物實驗，臨床研究報道較少。

3.3 ADSC膜片移植技術 細胞片作為一種無支架的組織工程技術，可避免支架植入體內(nèi)發(fā)生的免疫排斥反應。將細胞在特殊培養(yǎng)基上培養(yǎng)，通過改變外界條件可使黏附在基底表面的細胞脫附，從而獲得細胞片[64]。目前已有眾多ADSC膜片應用于組織修復和皮膚創(chuàng)面愈合的相關研究。ADSC膜片的優(yōu)點在于可分泌多種細胞生長因子，能夠同時抑制炎癥進展、促進血管及上皮再生，避免了單細胞懸液注射后細胞易發(fā)生吸收和擴散，難以留存于治療部位的問題[65]，因此ADSC膜片有望成為治療糖尿病潰瘍創(chuàng)面的新方法。Hamada等[66]使用溫度敏感性培養(yǎng)系統(tǒng)制備ADSC膜片，并評估了ADSC膜片促進創(chuàng)面愈合的效果。結果顯示：將ADSC膜片與人工皮膚一起移植到糖尿病大鼠皮膚創(chuàng)面后，與未接受移植的大鼠相比，接受移植的大鼠皮膚創(chuàng)面血管密度增加、真皮增厚、創(chuàng)面愈合速度加快。Kato等[67]從正常大鼠腹股溝脂肪組織中獲取同種異體ADSC，并使用細胞片技術創(chuàng)建ADSC膜片，然后將其移植到Zucker糖尿病肥胖大鼠的全層皮膚缺損創(chuàng)面。結果顯示ADSC膜片分泌了大量的血管生長因子，同時移植的ADSC遷移到血管周圍區(qū)域，并進一步整合進了新構建的血管結構中。以上研究結果表明ADSC膜片可以直接或間接地促進糖尿病創(chuàng)面愈合。

4 展 望

糖尿病的患病率在全球范圍內(nèi)快速上升，迄今還未得到有效控制[68]。當前，全世界的糖尿病患者已增長到5.37億，形勢嚴峻[2]。糖尿病足作為糖尿病的常見并發(fā)癥，具有創(chuàng)面愈合緩慢，嚴重者甚至無法愈合的特點，給治療帶來了巨大的挑戰(zhàn)[69]。此外，糖尿病足患者5年內(nèi)死亡率是普通糖尿病患者的2.5倍[70]。糖尿病足的治療費用高昂，且單一的治療方法難以取得較好的治療效果，患者的復發(fā)率較高[71]，因此需要深入探討糖尿病足創(chuàng)面愈合的分子機制，尋找促進糖尿病足創(chuàng)面愈合的有效治療方法。

ADSC具有自我更新能力和分化潛能，同時能調節(jié)免疫、分泌多種細胞因子、促進血管生成。本研究團隊針對ADSC多向分化潛能及旁分泌功能進行了大量研究，成功誘導了ADSC的分化，如改良富血小板纖維蛋白可通過調節(jié)缺氧誘導因子-1和血管內(nèi)皮生長因子促進ADSC的旁分泌功能和增殖[72]；基質細胞衍生因子-1α修飾可促進大鼠ADSC的遷移能力；成纖維細胞生長因子誘導PI3K/Akt信號通路可促進乳房ADSC的增殖和成脂分化等[73]。上述研究優(yōu)化了ADSC的多向分化及旁分泌功能，為ADSC的研究及應用提供了新思路。

隨著研究的深入，不斷有文獻報道ADSC在糖尿病足的再生修復中的研究及應用，考慮到免疫排斥反應，目前大多數(shù)ADSC是從自體脂肪組織中提取而來。然而有研究顯示，使用同種異體的ADSC治療糖尿病足創(chuàng)面也能取得較好的療效，且未發(fā)現(xiàn)有免疫排斥及其他嚴重的不良反應，提示同種異體ADSC的治療效果可能不亞于自體ADSC[74]。與移植ADSC治療相比，ADSC外泌體具有不含活細胞、性質更穩(wěn)定、便于儲存、保質期長等優(yōu)點。同時，ADSC外泌體可以避免細胞治療帶來的相關問題。因此ADSC外泌體作為一種無細胞療法在組織修復再生方面具有廣闊的應用前景。

然而，ADSC在疾病的臨床治療中仍存在著一些安全問題，例如由于干細胞是未分化細胞，致瘤性的問題尚待解決；此外，為降低治療時可能出現(xiàn)的風險，如何最有效地提取ADSC，以何種方法儲存以保證ADSC良好的活性等問題還需進一步探討。綜上所述，ADSC治療糖尿病足創(chuàng)面有著巨大潛力，隨著技術的成熟和發(fā)展，ADSC必定會為更多的糖尿病足患者帶來福音。