麻豎毛天牛不同蟲態(tài)對松褐天牛腫腿蜂寄生成功率和子代發(fā)育的影響

唐艷龍，王麗娜，賈結(jié)利，康 奎，曾伯平，魏 可

(1.遵義師范學(xué)院生物與農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，貴州省赤水河流域動物資源保護(hù)與應(yīng)用研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 貴州 遵義 563002；2.中國林業(yè)科學(xué)研究院森林生態(tài)環(huán)境與自然保護(hù)研究所，國家林業(yè)和草原局森林保護(hù)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 北京 100091)

腫腿蜂屬膜翅目（Hymenoptera）青蜂總科（Chrysidoidea）腫腿蜂科（Bethylidae），是我國林木蛀干類天牛和吉丁蟲等害蟲生物防治中應(yīng)用廣泛的一類寄生性天敵昆蟲[1]。其中管氏腫腿蜂（Sclerodermus guani）已有40余年的研究和應(yīng)用歷史，是防治松褐天牛（Monochamus alternatus）和雙條杉天牛（Semanotus bifasciatus）的重要天敵[2]。我國是世界上少數(shù)將腫腿蜂類寄生蜂應(yīng)用到林木蛀干害蟲防治的國家[3]，除管氏腫腿蜂外，川硬皮腫腿蜂（S.sichuanensis）[4]和白蠟吉丁腫腿蜂（S.pupariae）[5]也在近年有較多應(yīng)用，前者多被用于防治松褐天牛，后者多被用于防治白蠟窄吉?。ˋgrilus planipennis）、栗山天牛（Massicus raddei）和光肩星天牛（Anoplophora glabripennis）等害蟲。松褐天牛腫腿蜂（S.alternatusi）是近年來發(fā)現(xiàn)的腫腿蜂新種，原始種群發(fā)現(xiàn)于自然被寄生的松褐天牛低齡幼蟲體上[6]，其個(gè)體較管氏腫腿蜂和川硬皮腫腿蜂更大，雌蜂多具翅。目前，松褐天牛腫腿蜂已被用于松褐天牛[7-8]和光肩星天牛[9]的生物防治。

腫腿蜂均屬多寄主型寄生蜂[10]，已報(bào)道自然寄主以天牛類、吉丁蟲類和象甲類蛀干害蟲為主。在腫腿蜂的繁育中，原始記錄的自然寄主均可用于繁蜂。一些替代寄主，如黃粉蟲（Tenebrio molitor）[11]、意大利蜜蜂（Apis mellifera）[12]、大理竊蠹（Ptilineurus marmoratus）[13]、玉米螟（Pyrausta nubilalis）[14]、紅鈴蟲（Pectinophora gossypiella）[15]、大袋蛾（Clania vartegata）[16]等也有被報(bào)道用于繁蜂。事實(shí)上，以上各種被報(bào)道的替代寄主除黃粉蟲在腫腿蜂的繁育中會被使用外，大多數(shù)并不常用。在腫腿蜂的繁育中，目前常用的寄主有黃粉蟲、青楊天牛（Saperda populnea）、雙條杉天牛和麻豎毛天牛（Thyestilla gebleri）。黃粉蟲主要被用于繁育管氏腫腿蜂和川硬皮腫腿蜂[11,17]，青楊天牛主要被用于繁育管氏腫腿蜂[18]，雙條杉天牛主要被用于繁育管氏腫腿蜂[3]，白蠟吉丁腫腿蜂和松褐天牛腫腿蜂多用麻豎毛天牛繁育[8]。上述除黃粉蟲的幼蟲不能被腫腿蜂寄生，需以蛹用于繁蜂，其他替代寄主多以幼蟲用于繁蜂。在上述幾種常用的繁蜂寄主中，麻豎毛天牛個(gè)體較大，可提供的營養(yǎng)更多，單頭寄主可育得腫腿蜂數(shù)較其他幾種寄主更多，是當(dāng)前繁育腫腿蜂最主要替代寄主[5]。然而，當(dāng)前并沒有人工飼料可用于飼養(yǎng)麻豎毛天牛。寄主的獲取方式主要為每年幼蟲越冬前（9—10月）大量低溫儲存帶蟲的麻根，需要繁蜂時(shí)再從麻根中剝?nèi)√炫Ｓ紫x。在長期儲存麻根的過程中會面臨幼蟲化蛹的情況。對于已經(jīng)化蛹的麻豎毛天牛，是否還能用于腫腿蜂繁育？若用于繁育腫腿蜂，繁蜂效率如何？母蜂的寄生行為、子代發(fā)育情況是否較用麻豎毛天牛幼蟲作寄主時(shí)有差異？均未見評估和報(bào)道。探清這些問題是進(jìn)一步篩選替代寄主和實(shí)現(xiàn)寄主資源利用最大化的基礎(chǔ)。本研究以松褐天牛腫腿蜂和麻豎毛天牛為研究對象，分析和評價(jià)分別以麻豎毛天牛幼蟲和蛹繁蜂時(shí)，松褐天牛腫腿蜂的寄生行為、繁蜂效率是否存在差異，以期為松褐天牛腫腿蜂的繁育和替代寄主資源的利用策略提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)ハx及繁育條件

松褐天牛腫腿蜂建群種采自昆明市西南林業(yè)大學(xué)后山（25°03′ N，102°42′ E），供試蜂為在實(shí)驗(yàn)室用麻豎毛天牛幼蟲傳代繁殖的種群。傳代繁殖的方法為將建群蜂接種至松褐天牛低齡幼蟲繁育得到腫腿蜂的初始實(shí)驗(yàn)室種群，隨后用麻豎毛天牛幼蟲作寄主續(xù)代繁殖腫腿蜂。續(xù)代繁殖中，接蜂方式為1頭母蜂接種至1頭寄主，飼養(yǎng)條件為27 ℃，RH=60%～70%，L∶D=8∶16 h。當(dāng)每一代子代蜂羽化后挑選3日齡的雌蜂繼續(xù)接種，獲得實(shí)驗(yàn)室連續(xù)傳代種群。

供試寄主為麻豎毛天牛幼蟲和蛹。選取健康的麻豎毛天牛老熟幼蟲，置于人工氣候箱中培養(yǎng)至化蛹。選擇蛹齡為1～2 d、體質(zhì)量為220±20.0 mg的麻豎毛天牛蛹和體質(zhì)量較蛹相對一致的天牛老熟幼蟲各30頭作為繁蜂寄主。將麻豎毛天牛蛹和幼蟲單頭裝入玻璃指形管內(nèi)（直徑=1.0 cm，高=5.0 cm），隨后接入1頭3日齡且已交配的松褐天牛腫腿蜂雌蜂（腫腿蜂雌雄蜂一般在羽化后1～2 d內(nèi)即完成交尾），并用脫脂棉將指形管口塞緊，飼養(yǎng)條件同上。

1.2 寄生行為和子代發(fā)育記錄

自接蜂時(shí)起，每隔12 h記錄1次松褐天牛腫腿蜂對寄主的麻痹情況、初始產(chǎn)卵時(shí)間，初孵幼蟲出現(xiàn)時(shí)間，繭蛹出現(xiàn)時(shí)間和子代羽化時(shí)間，以此統(tǒng)計(jì)松褐天牛腫腿蜂的寄生率、產(chǎn)卵前期和子代發(fā)育歷期。寄生率為麻痹寄主且產(chǎn)卵母蜂的數(shù)量占處理數(shù)的比率。產(chǎn)卵前期為接蜂至觀察到第1粒卵的間隔時(shí)期。子代發(fā)育歷期共包括卵期、幼蟲期、蛹期和幼期歷期。其中，卵期為產(chǎn)下第1粒卵至初孵幼蟲出現(xiàn)的間隔時(shí)期；幼蟲期為第1頭初孵幼蟲至繭出現(xiàn)的間隔時(shí)期；蛹期為繭出現(xiàn)至第1頭子代蜂羽化的間隔時(shí)期；幼期歷期為產(chǎn)卵至羽化的間隔時(shí)期。子代蜂完全羽化后，統(tǒng)計(jì)寄生不同蟲態(tài)麻豎毛天牛的松褐天牛腫腿蜂的子代羽化率和子代雌雄個(gè)體數(shù)量。子代羽化率為被寄生的寄主中最終有腫腿蜂子代羽化的比率。依據(jù)子代雌雄個(gè)體數(shù)量計(jì)算雄性比，即雄蜂占子代總數(shù)的比率。

1.3 數(shù)據(jù)分析

Fisher's精確檢驗(yàn)用于比較松褐天牛腫腿蜂寄生不同蟲態(tài)麻豎毛天牛的寄生率和子代羽化率。松褐天牛腫腿蜂寄生不同蟲態(tài)麻豎毛天牛的產(chǎn)卵前期、子代發(fā)育歷期、子代數(shù)量和雄性比用單因素方差分析檢驗(yàn)處理間差異。經(jīng)正態(tài)性和方差同質(zhì)性檢驗(yàn)，產(chǎn)卵前期、子代發(fā)育歷期、子代數(shù)量滿足正態(tài)分布且方差齊性，其均直接用原始數(shù)據(jù)進(jìn)行差異性檢驗(yàn)。子代性比經(jīng)反正弦化后滿足正態(tài)分布和方差齊性，轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)用于差異性檢驗(yàn)。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)用SPSS 20完成。

2 結(jié)果與分析

2.1 麻豎毛天牛不同蟲態(tài)對松褐天牛腫腿蜂寄生效果的影響

麻豎毛天牛老熟幼蟲和蛹均可被松褐天牛腫腿蜂寄生。所有的供試天牛幼蟲均被成功寄生，4頭天牛蛹未被寄生，松褐天牛腫腿蜂對不同蟲態(tài)的麻豎毛天牛的寄生率無顯著差異（χ2=4.286，df=1，P=0.112）（表1）。在全部被寄生的30頭麻豎毛天牛幼蟲中，有93.33%的寄主成功育出子代蜂；被寄生的26頭天牛蛹中可育出子代蜂的比例為57.69%。用麻豎毛天牛幼蟲繁育松褐天牛腫腿蜂時(shí)，子代蜂羽化率顯著高于用麻豎毛天牛蛹繁蜂（χ2=9.926，df=1，P=0.003）（表1）。

表1 松褐天牛腫腿蜂對不同蟲態(tài)麻豎毛天牛的寄生效果Table 1 Successful parasitization and progeny emergence of Sclerodermus alternatusi on different stage of Thyestilla gebleri

2.2 寄生不同蟲態(tài)麻豎毛天牛時(shí)松褐天牛腫腿蜂雌蜂的產(chǎn)卵前期

用麻豎毛天牛幼蟲和蛹繁育松褐天牛腫腿蜂時(shí)，母蜂產(chǎn)卵前期無顯著差異（F=1.560，df=1,54，P=0.217）。在所有供試腫腿蜂中，雌蜂的產(chǎn)卵前期為6～8 d，其中絕大多數(shù)雌蜂產(chǎn)卵前期為6 d，少部分為7 d或8 d。當(dāng)寄主為麻豎毛天牛幼蟲時(shí)，松褐天牛腫腿蜂的產(chǎn)卵前期平均為6.63 d；寄主為麻豎毛天牛蛹時(shí)，產(chǎn)卵前期平均為6.43 d（圖1）。

圖1 松褐天牛腫腿蜂寄生不同蟲態(tài)麻豎毛天牛的產(chǎn)卵前期Fig.1 The pre-oviposition period of Sclerodermus alternatusi female on different stage of Thyestilla gebleri

2.3 寄生不同蟲態(tài)麻豎毛天牛時(shí)松褐天牛腫腿蜂子代的發(fā)育歷期

從表2可知，在不同蟲態(tài)麻豎毛天牛上發(fā)育的松褐天牛腫腿蜂子代的卵期、幼蟲期、蛹期及幼期歷期均無顯著差異（卵期：F=1.542，df=1,54，P=0.220；幼蟲期：F=0.989，df=1,41，P=0.325；蛹期：F=0.472，df=1,41，P=0.496；幼期歷期：F=2.562，df=1,41，P=0.117）。當(dāng)用麻豎毛天牛幼蟲和蛹分別繁育松褐天牛腫腿蜂時(shí)，子代蜂的卵期分別平均為4.34 d和4.57 d，幼蟲期平均為8.34 d和8.52 d，蛹期平均為19.89 d和20.07 d，幼期歷期平均為32.61 d和33.40 d。

表2 松褐天牛腫腿蜂寄生不同蟲態(tài)麻豎毛天牛時(shí)子代發(fā)育歷期Table 2 Developmental durations of Sclerodermus alternatusi progeny on different stage of Thyestilla gebleri

2.4 寄生不同蟲態(tài)麻豎毛天牛時(shí)松褐天牛腫腿蜂子代的數(shù)量和性比

從表3可以看出，當(dāng)用麻豎毛天牛幼蟲和蛹分別繁育松褐天牛腫腿蜂時(shí)，單頭寄主可育出的子代雌蜂數(shù)量差異顯著（F=7.511，df=1,41，P=0.009），其中單頭麻豎毛天牛幼蟲育出的子代雌蜂數(shù)平均為39.50頭，顯著高于單頭麻豎毛天牛蛹育出雌性子代的30.80頭。然而，麻豎毛天牛幼蟲和蛹育出的雄性子代數(shù)量無顯著差異（F=2.254，df=1,41，P=0.141），單頭麻豎毛天牛幼蟲育出的平均雄性子代數(shù)為1.96頭，單頭麻豎毛天牛蛹育出的為1.40頭。在麻豎毛天牛幼蟲和蛹上育出的子代總數(shù)分別為41.18頭和32.20頭，前者顯著高于后者（F=7.850，df=1,41，P=0.008）。由圖2可知，用麻豎毛天牛幼蟲和蛹繁蜂時(shí)，子代蜂雄性比亦無顯著差異（F=0.346，df=1,41，P=0.560）。寄主為麻豎毛天牛幼蟲時(shí)，平均子代雄性比為5.00%；寄主為天牛蛹時(shí)，平均子代雄性比為4.45%。

表3 松褐天牛腫腿蜂寄生不同蟲態(tài)麻豎毛天牛的子代數(shù)量Table 3 Progeny number of Sclerodermus alternatusi on different stage of Thyestilla gebleri

圖2 松褐天牛腫腿蜂寄生不同蟲態(tài)麻豎毛天牛時(shí)子代雄性比Fig.2 Male proportion of Sclerodermus alternatusi progeny on different stage of Thyestilla gebleri

3 討論

作為多寄主型寄生蜂的代表，腫腿蜂的自然寄主包括天牛類、吉丁類、小蠹類、象甲類等[8]。在非選擇條件下，其還可以寄生鞘翅目黃粉甲的蛹[11,17]、膜翅目蜜蜂的蛹[12,15]、鱗翅目玉米螟幼蟲[14]、紅鈴蟲幼蟲[15]和大袋蛾幼蟲[16]等。腫腿蜂在自然林分的環(huán)境極為復(fù)雜，需首先定位受害的樹木，再搜索樹木中的寄主，進(jìn)而將寄主刺蜇麻痹后，才能完成產(chǎn)卵寄生過程[19]。上述過程對于無翅的腫腿蜂雌蜂而言（大多數(shù)腫腿蜂雌蜂無翅，僅依靠爬行尋找寄主）需耗費(fèi)大量的能量，許多雌蜂在未找到寄主前就已耗盡能量[20]。當(dāng)搜索到害蟲后，并沒有過多的機(jī)會去再次進(jìn)行寄主選擇。因此，多寄主型的生活史策略成為其獲得最大適合度的重要途徑。

腫腿蜂的多寄主性不僅體現(xiàn)在寄主種類的多樣性，也體現(xiàn)在可寄生的寄主蟲態(tài)的多樣性。當(dāng)以天牛類和吉丁類作為寄主時(shí)，腫腿蜂既能寄生幼蟲態(tài)寄主，也可以寄生蛹態(tài)寄主[8]。前期對光肩星天牛生物防治的研究中觀察到白蠟吉丁腫腿蜂可寄生光肩星天牛蛹，并完成生活史[5]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，麻豎毛天牛幼蟲和蛹均可被松褐天牛腫腿蜂寄生，且子代蜂可在兩種不同蟲態(tài)的寄主上完成生活史。松褐天牛腫腿蜂分別接種至麻豎毛天牛幼蟲和蛹時(shí)，腫腿蜂對兩種蟲態(tài)寄主的寄生率無顯著差異。以上結(jié)果首先表明腫腿蜂具備麻痹制服這兩種蟲態(tài)天牛的能力。其次，從母蜂產(chǎn)卵決策角度表明其認(rèn)為麻豎毛天牛蛹和幼蟲一樣，均具備提供子代蜂完整發(fā)育的營養(yǎng)需求，即兩種蟲態(tài)的寄主對母蜂的產(chǎn)卵決策無影響。然而，母蜂在麻豎毛天牛幼蟲或蛹體表產(chǎn)卵后，可成功育出子代蜂的天牛幼蟲顯著多于天牛蛹的數(shù)量。在試驗(yàn)過程中我們發(fā)現(xiàn)，當(dāng)以麻豎毛天牛蛹為寄主時(shí)，腫腿蜂幼蟲容易霉變和死亡，即較多子代蜂不能完成幼蟲期，造成最終能羽化出蜂的寄主數(shù)較被寄生數(shù)大大降低。我們分析，腫腿蜂幼蟲主要依靠寄主血淋巴和脂肪體所提供的營養(yǎng)而發(fā)育，而麻豎毛天牛化蛹初期其體內(nèi)呈液態(tài)的組織增多，子代蜂幼蟲因這一原因難以持續(xù)發(fā)育至成熟。同時(shí)，在麻豎毛天牛幼蟲上發(fā)育最終所獲得的雌性子代蜂數(shù)量也顯著高于以麻豎毛天牛蛹作寄主的處理，同樣也表明了天牛幼蟲提供了更大的寄主適合度。雖然在麻豎毛天牛幼蟲和蛹上育得的腫腿蜂子代雌蜂差異顯著，但在兩種蟲態(tài)寄主上育得的子代雄蜂數(shù)無顯著差異。通常，母蜂產(chǎn)卵時(shí)會對寄主質(zhì)量進(jìn)行評價(jià)，當(dāng)寄主質(zhì)量較差時(shí)，母蜂會選擇產(chǎn)出更多的雄性后代，因?yàn)樾坌院蟠诎l(fā)育過程中受寄主質(zhì)量變差的負(fù)面影響較雌性后代更弱[21-22]。本研究中幾乎一致的子代雄蜂數(shù)進(jìn)一步佐證了母蜂產(chǎn)卵時(shí)其所評價(jià)兩種蟲態(tài)寄主的質(zhì)量無差異，麻豎毛天牛蛹所帶來的腫腿蜂適合度降低主要因其不適于幼蜂發(fā)育。對抑性寄生蜂而言，子代發(fā)育歷期與寄主大小緊密相關(guān)，通常在體型大的寄主上會因可獲得的凈營養(yǎng)更多使發(fā)育歷期延長，以此獲得體型更大的子代成蜂[22-23]。松褐天牛腫腿蜂是典型的抑性寄生蜂，本研究中2組寄主的體質(zhì)量一致，故子代蜂各時(shí)期發(fā)育歷期未表現(xiàn)出顯著差異?；谝陨辖Y(jié)果，作者認(rèn)為，對松褐天牛腫腿蜂繁育而言，麻豎毛天牛幼蟲更適合作為繁蜂寄主。然而，若麻豎毛天牛幼蟲在長期的低溫儲存中不可避免地存在一定比例的化蛹，仍建議將其用于繁蜂，這樣可獲得近60%的繁蜂成功率，可最大限度地避免寄主浪費(fèi)。

此外，在應(yīng)用腫腿蜂防治天牛類蛀干害蟲時(shí)，以往主要在天牛幼蟲期使用，較少有在天牛蛹期釋放應(yīng)用的案例。本研究結(jié)果表明，利用腫腿蜂防治天牛類害蟲，也可以嘗試在蛹期釋放。腫腿蜂雌蜂搜尋到寄主后，雌蜂需取食寄主血淋巴補(bǔ)充營養(yǎng)后產(chǎn)卵[24]，這一過程會直接致死寄主。即便是寄生天牛蛹后子代蜂的發(fā)育效率降低，但母蜂完成寄生實(shí)際也達(dá)成了害蟲防治的目的。不過，許多天牛幼蟲化蛹前，會將蛹室和蛀道內(nèi)的蟲糞排出，這可能會降低腫腿蜂對寄主的搜索效率，因?yàn)榇品渫ǔＰ枰揽考闹飨x糞所攜帶的化學(xué)信息來定位寄主[25]。同時(shí)，天牛在化蛹前會用細(xì)的木絲堵塞蛀道與蛹室，在林間究竟有多少比例的腫腿蜂能進(jìn)入蛹室致死天牛蛹，需更多觀察和研究。

4 結(jié)論

（1）松褐天牛腫腿蜂可寄生麻豎毛天牛幼蟲和蛹并完成生活史，對兩種蟲態(tài)的天牛的寄生率無顯著差異，但以天牛幼蟲作寄主時(shí)可育出子代蜂的寄主比例顯著高于以天牛蛹作寄主的處理。

（2）以麻豎毛天牛老熟幼蟲和蛹繁蜂時(shí)，母蜂產(chǎn)卵前期、子代蜂卵期、幼蟲期和蛹期均無顯著差異。以天牛幼蟲作寄主時(shí)，可獲得的子代蜂總數(shù)和雌蜂數(shù)更多。寄生不同蟲態(tài)的麻豎毛天牛時(shí)，子代蜂性比均為顯著的偏雌特征，子代雄蜂數(shù)和雄性比例無顯著差異。

（3）利用麻豎毛天牛蛹繁育松褐天牛腫腿蜂，可獲得近60%的繁蜂成功率，但其繁蜂效率低于麻豎毛天牛老熟幼蟲。