玉米須中的酰胺類化合物

楊伊妮，劉博,2，王金蘭,2，時(shí)志春,2，李軍,2，趙明,2，王偉明,2，張樹軍,2

玉米須中的酰胺類化合物

楊伊妮1，劉博1,2，王金蘭1,2，時(shí)志春1,2，李軍1,2，趙明1,2，王偉明1,2，張樹軍1,2＊

（1.齊齊哈爾大學(xué) 化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院，黑龍江 齊齊哈爾 161006；2.黑龍江省工業(yè)大麻加工技術(shù)創(chuàng)新中心，黑龍江 齊齊哈爾 161006）

通過重結(jié)晶、硅膠柱色譜及高效液相色譜等手段從干燥玉米須甲醇提取液正丁醇萃取物中分離得到5個(gè)酰胺類化合物。分析化合物核磁數(shù)據(jù)及與相關(guān)文獻(xiàn)對(duì)照鑒定化合物結(jié)構(gòu)分別是：尿嘧啶(1)、順-對(duì)羥基肉桂酸酰對(duì)羥基苯乙胺(2)、反-對(duì)羥基肉桂酸酰對(duì)羥基苯乙胺(3)、反-阿魏酸酰對(duì)羥基苯乙胺(4)、順-阿魏酸酰對(duì)羥基苯乙胺(5)。其中化合物3～5為首次從該植物中分離得到。

玉米須；酰胺；肉桂酸；阿魏酸

玉米須（）是玉蜀黍的花柱和柱頭，又名包谷須，是一味常用的中草藥，具有抗癌、降血糖血脂、治療糖尿病、保護(hù)肝腎、抗氧化、抗菌消炎等功效[1-2]。玉米須中主要含有多糖、黃酮、甾醇、有機(jī)酸、皂苷等多種活性成分[3]。有文獻(xiàn)[4]報(bào)道，玉米須正丁醇萃取物具有較好的生物活性，然而其化學(xué)成分尚不明確。為進(jìn)一步有效開發(fā)利用玉米須資源，本文對(duì)玉米須正丁醇萃取物進(jìn)行研究，分離純化出5個(gè)酰胺類化合物。分析化合物核磁數(shù)據(jù)及與相關(guān)文獻(xiàn)對(duì)照鑒定其結(jié)構(gòu)分別是：尿嘧啶(1)、順-對(duì)羥基肉桂酸酰對(duì)羥基苯乙胺(2)、反-對(duì)羥基肉桂酸酰對(duì)羥基苯乙胺(3)、反-阿魏酸酰對(duì)羥基苯乙胺(4)、順-阿魏酸酰對(duì)羥基苯乙胺(5)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料與儀器

玉米須在2019年10月于黑龍江省齊齊哈爾市購買。原料鑒定人是齊齊哈爾大學(xué)沙偉教授。標(biāo)本（No-Sm20191001）在齊齊哈爾大學(xué)天然產(chǎn)物研究室收藏。

HITACHI L-7100反相高效液相色譜儀，日本日立公司；AV-600核磁共振波譜儀，Bruke公司；X-6顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀，北京泰克儀器有限公司；HANGPING JA2003電子天平，上海精科實(shí)業(yè)有限公司；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠；200～300目柱層析用硅膠，青島海洋化工廠；薄層層析硅膠板，20cm×20cm，煙臺(tái)化工廠分廠；Inertsil PREP-ODS 250mm×10mm不銹鋼柱，日本島津公司。

1.2 分離和純化

玉米須曬干后，稱取19.7kg。量取90.0L甲醇，將原料在常溫下浸泡3d，而后過濾，操作重復(fù)3次。將浸提液合并，濃縮至小體積。加水混懸分散，依次用正己烷，乙酸乙酯和正丁醇萃取3次，合并相同溶劑萃取液，減壓濃縮至恒重，稱量正己烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取物質(zhì)量分別是400.0g、127.5g和60.8g。取正丁醇萃取物21.6g，繼而采取柱層析法分離，依次用(乙酸乙酯)∶(甲醇) = 9∶1（11.0L），8∶2（2.0 L），5∶5（3.0L），0∶1（2.0L）洗脫，經(jīng)TLC檢測(cè)合并相同流分，濃縮得到5個(gè)組分（F1～F5）。F2（329.1mg）經(jīng)重結(jié)晶得到化合物1（3.2mg）。F1（4.9 g）用(二氯甲烷)∶(甲醇) = 95∶5（5.0 L），8∶2（3.5 L），5∶5（2.0 L），0∶1（0.8 L）洗脫，合并相同流分，濃縮得到7個(gè)組分（F1-1～F1-7）。F1-5 （1.2 g）用(二氯甲烷)∶(甲醇) = 95∶5（2.5 L），6∶4（2.0 L），0∶1（0.6 L）洗脫，合并相同流分，濃縮得到3個(gè)組分（F1-5-1～F1-5-3）。F1-5-1（214.3mg）用RP-HPLC分離（流動(dòng)相為(甲醇)∶(乙腈)∶(水) = 25∶15∶60，流速4 mL/min），得到8個(gè)組分（F1-5-1-1～F1-5-1-8）。F1-5-1-5（4.9 mg）用RP-HPLC純化（流動(dòng)相為(甲醇)∶(乙腈)∶(水) = 23∶7∶70，流速4 mL/min），得到化合物2（2.9 mg，R= 30.0 min）。F1-5-1-6（6.5 mg）用RP-HPLC純化（流動(dòng)相為(甲醇)∶(乙腈)∶(水) = 23∶7∶70，流速4 mL/min）后，得到化合物4（4.5 mg，R= 35.0min）。F1-5-1-8（16.5 mg）用RP-HPLC純化（流動(dòng)相為(甲醇)∶(乙腈)∶(水) = 25∶10∶65，流速4 mL/min）后，得到化合物3（2.7 mg，R= 19.4 min）與化合物5（2.1 mg，R= 31.5 min）。

2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末（CH3OH）；mp: 111～112℃;1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 11.01 (1H, s, -NH), 10.81 (1H, s, -NH), 7.38 (1H, d,= 7.6 Hz, H5), 5.44 (1H, d,= 7.6 Hz, H6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]基本一致，鑒定化合物1為尿嘧啶。

化合物2：無色蠟狀物；1H-NMR(600 MHz, DMSO-6): 9.65 (1H, br s, -OH), 9.20 (1H, br s, -OH), 8.07 (1H, t,= 6.6Hz, -NH),7.60 (2H, d,= 9.0 Hz, H5,9), 7.36 (2H, q,= 6.4 Hz, H6,8), 7.00(2H, t,=8.0Hz, H4′,8′), 6.69(2H, q,= 7.8 Hz, H5′,7′), 6.49 (1H, d,= 13.2 Hz, H3), 5.80 (1H, d,=12.6 Hz, H2), 3.27 (2H, t,= 7.8 Hz, H1′), 2.59 (2H, br s, H2′);13C-NMR(150MHz, DMSO-6): 166.7 (C1), 158.6(C7), 156.2(C6′), 137.1(C3),132.3(C5,9), 129.8 (C4′,8′), 129.9(C4), 126.6(C3′), 120.9(C2), 115.6(C5′,7′), 115.3(C6,8), 40.9(C1′), 34.7(C2′),。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]基本一致，故鑒定化合物2為順-對(duì)羥基肉桂酸酰對(duì)羥基苯乙胺。

化合物3：白色無定形粉末；mp: 261～262℃;1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 2.62 (2H, m, H2′), 3.25 (2H, m, H1′), 6.40 (1H, d,= 15.6 Hz, H2), 6.70 (2H, d,= 8.4 Hz, H5′,7′), 6.82 (2H, d,= 8.4 Hz, H6,8), 6.98 (2H, d,= 8.4 Hz, H4′,8′), 7.32 (1H, d,= 15.6 Hz, H3), 7.38 (2H, d,= 8.1 Hz, H5,9), 8.07 (1H, br s, -NH), 9.70 (1H, br s, -OH);13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 34.7 (C2′), 41.1 (C1′), 115.5 (C5′,7′), 116.1 (C6,8), 119.4 (C2), 127.2 (C4), 129.7 (C4′,8′), 129.8 (C5,9), 129.9 (C3′), 160.0 (C7), 139.3 (C3), 155.9 (C6′), 166.6 (C1)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]基本一致，故鑒定化合物3為反-對(duì)羥基肉桂酸酰對(duì)羥基苯乙胺。

化合物4：白色無定形粉末；mp: 81～83℃;1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 2.63 (2H, t,= 7.8 Hz, H2′), 3.31 (2H, m, H1′), 3.73 (3H, s, -OCH3), 6.43 (1H, d,= 15.6 Hz, H2), 6.67 (2H, d,= 7.8 Hz, H5′,7′), 6.79 (1H, d,= 8.1 Hz, H8), 6.99 (1H, d,= 8.1 Hz, H9), 7.00 (2H, d,= 8.4 Hz, H4′,8′), 7.09 (1H,br s, H5), 7.29 (1H, d,= 15.6 Hz, H3), 8.01 (1H, br s, -NH), 9.41 (1H, br s, -OH);13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 34.4 (C2′), 40.6 (C1′),111.7 (C5), 114.8 (C5′,7′), 115.0 (C8), 121.0 (C2), 121.5 (C9), 126.8 (C4), 129.4 (C4′,8′), 129.5 (C3′), 136.7 (C3), 146.8 (C6), 147.3 (C7), 155.6 (C6′), 166.1 (C1), 55.4 (-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[6]基本一致，故鑒定化合物4為反-阿魏酸酰對(duì)羥基苯乙胺。

化合物5：無色蠟狀物；1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 2.61 (2H, t,= 7.8 Hz, H2′), 3.28 (2H, m, H1′), 3.73 (3H, s, -OCH3), 5.76 (1H, br s, H2), 6.50 (1H, d,= 13.2 Hz, H3), 6.66 (2H, d,=8.4 Hz, H5′,7′), 6.72 (1H, d,= 8.4 Hz, H8), 6.98 (2H, d,= 7.5 Hz, H4′,8′), 7.10 (1H, d,= 8.4 Hz, H9), 7.69 (1H, s, H5), 8.11 (1H, br s, -NH), 9.28 (1H, br s, -OH), 9.18 (1H, br s, -OH);13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 34.7 (C2′), 41.1 (C1′), 114.6 (C5), 115.3 (C8), 115.5 (C5′,7′), 121.4 (C2), 124.7 (C9), 127.2 (C4), 129.8 (C4′,8′), 129.9 (C3′), 137.2 (C3), 147.2 (C6), 148.2 (C7), 156.1 (C6′), 166.6 (C1), 55.9 (-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[8]基本一致，故鑒定化合物5為順-阿魏酸酰對(duì)羥基苯乙胺。

3 結(jié)論

本研究從玉米須正丁醇萃取物中分離鑒定了5個(gè)酰胺類化合物?；衔?是合成氟尿嘧啶的主要原材料，而氟尿嘧啶是治療癌癥最常見的藥物[9]。有研究表明化合物3對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG-2具有很好的細(xì)胞毒活性[10]。而化合物4對(duì)人肺癌細(xì)胞A549與白血病癌細(xì)胞K562具有較好的細(xì)胞毒活性[11]。本實(shí)驗(yàn)為首次從玉米須中分離得到具有一定生物活性的酰胺類化合物，這對(duì)開拓玉米須酰胺類化合物在醫(yī)藥研究領(lǐng)域市場具有相當(dāng)?shù)臐撛趦r(jià)值，同時(shí)也為玉米須的綜合利用提供了一定的化學(xué)基礎(chǔ)。

[1] 黃俊文，倪賀，陽成偉，等. 玉米須活性成分提取及其保健機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 食品工業(yè)科技，2021, 42(8): 388-395.

[2] 尚浩南，陳珺明，阮君，等. 玉米須防治代謝綜合征的藥理研究進(jìn)展[J]. 中藥新藥與臨床藥理，2019, 30(10): 1273-1276.

[3] 張琳，姜文鑫，岳婧婧，等. 玉米須研究進(jìn)展[J]. 食品研究與開發(fā)，2016, 37(22): 218-221.

[4] 關(guān)海寧，刁小琴，喬秀麗，等. 玉米須中不同極性多酚體外抗氧化活性比較研究[J]. 食品研究與開發(fā)，2019, 40(12): 46-50.

[5] 馬楠，鄭鑫，楊虹，等. 金花葵根部化學(xué)成分研究[J]. 沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2018, 35(12): 1003-1006, 1015.

[6] 王金蘭，李靈娜，賀禮東，等. 牽牛全草的化學(xué)成分研究[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2007(3): 427-429.

[7] 郭志琴，郭強(qiáng)，朱枝祥，等. 藏藥多刺綠絨蒿的化學(xué)成分研究[J]. 中國中藥雜志，2014, 39(7): 1152-1156.

[8] 管惠娟，張雪，屠鳳娟，等. 鐵皮石斛化學(xué)成分的研究[J]. 中草藥，2009, 40(12): 1873-1876.

[9] 劉寧，梁蘭蘭，李淑芳，等. 氧化苦參堿對(duì)小鼠肉瘤和肝癌的體內(nèi)外抗腫瘤作用[J]. 癌變·畸變·突變，2021, 33(06): 426-429, 434.

[10] 徐博倫，陳佳倩，羅德志，等. 香港瓜馥木生物堿類化合物的細(xì)胞毒活性[J].南昌大學(xué)學(xué)報(bào)（理科版），2020,44(06):570-578.

[11] TIANJ L, LIANG X, GAO P Y, et al. Two new alkaloids fromand their cytotoxic activities[J]. Journal of Asian Natural Products Research, 2014, 16(3): 259-264.

Amide compounds from

YANGYi-ni1，LIU Bo1,2，WANG Jin-lan1,2，SHI Zhi-chun1,2，LI Jun1,2，ZHAO Ming1,2，WANG Wei-ming1,2，ZHANG Shu-jun1,2＊

(1.College of Chemistry and Chemical Engineering, Qiqihar University, Heilongjiang Qiqihar 161006, China 2.Heilongjiang Industrial Hemp Processing Technology Innovation Center, Heilongjiang Qiqihar 161006, China)

Five compounds were separated from n-BuOH fraction of the methanol extract ofby separation methods, such as recrystallization, silica gel column chromatography and RP-HPLC. By analysis the NMR data and compared with the relevant literature, the structures of compounds were identified as uracil(1), N-p-hydroxy-cis-coumaroyltyramine(2), N-p-hydroxy-trans-coumaroyltyramine(3), N-trans-feruloyltyramine(4), N-cis-feruloyltyramine(5). Compounds 3～5 were isolated from this genus for the first time.

；amide；cinnamic acid；ferulic acid

2021-11-25

黑龍江省屬高等學(xué)?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)項(xiàng)目（135309301，135109207）

楊伊妮（1996-），女，黑龍江綏化人，在讀碩士，主要從事天然產(chǎn)物化學(xué)研究，914207332@qq.com。

張樹軍（1964-），男，遼寧凌源人，教授，博士，主要從事天然產(chǎn)物化學(xué)研究，shjzhang2005@126.com。

R284.1

A

1007-984X(2022)03-0067-03