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    山西蘑菇新紀錄:櫟樹圓頭傘和白漏斗辛格杯傘

    2022-11-28 11:50:58張澤乾董淑英白艷玲
    食用菌 2022年6期
    關(guān)鍵詞:歷山圓頭櫟樹

    劉 虹 張澤乾 董淑英 白艷玲

    (1山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西功能食品研究院,山西太原 030031;2忻州市科技發(fā)展戰(zhàn)略研究所,山西忻州 034000)

    近年來,筆者在山西省各地調(diào)查大型野生真菌資源多樣性,多次到中條山東段歷山區(qū)域進行考察[1?6]。歷山位于山西省南部垣曲縣、翼城縣、陽城縣和沁水縣交界處,面積2.48 萬hm2,屬中條山脈,海拔2 358 m,是國家級自然保護區(qū),也是山西省溫帶向亞熱帶過渡的區(qū)域。該地區(qū)自然條件優(yōu)越,雨量充沛,植物多樣性豐富,分布有櫟類為主的落葉闊葉林以及油松林等暖溫性植被,有“山西神農(nóng)架”和“華北九寨溝”之稱。

    2019 年8 月筆者在歷山中村林場櫟樹Quercusspp.林內(nèi)發(fā)現(xiàn)2種蘑菇,這2種蘑菇此前未見有在山西省發(fā)現(xiàn)的報道。顯微鏡觀察以及ITS 片段的比對分析證實這2 種蘑菇分別為櫟樹圓頭傘Descolea quercinaJ.Khan&Naseer 和白漏斗辛格杯傘Singero?cybe alboinfundibuliformis(Seok et al)Zhu L.Yang et al.。其中,櫟樹圓頭傘為中國新紀錄物種,白漏斗辛格杯傘為山西新記錄物種,現(xiàn)報告如下。

    1 材料與方法

    1.1 標本采集

    研究引證的櫟樹圓頭傘Descolea quercina和白漏斗辛格杯傘Singerocybe alboinfundibuliformis野生子實體于2019 年8 月采自山西省中條山脈南部歷山國家級自然保護區(qū),采集標本各2份,采集地生態(tài)環(huán)境為多種櫟樹Quercusspp.構(gòu)成的樹林地。每份標本均制備兩份材料,一份取新鮮的子實體經(jīng)50 ℃恒定溫度烘干(約12 h),放入自封袋中保存,用作憑證標本;另一份取黃豆粒大小新鮮子實體組織塊,用硅膠干燥保存,后續(xù)進行分子系統(tǒng)學(xué)研究。研究憑證標本(表1)分別保藏于首都師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院標本館(BJTC)和山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西功能食品研究院標本館(HSA)。

    1.2 形態(tài)學(xué)鑒定方法

    野外記錄物種宏觀特征,包括擔子果的形狀、大小、表面狀態(tài),菌蓋大小、形狀、顏色,菌肉顏色、氣味,菌柄長度、顏色等特征。顯微結(jié)構(gòu)采用奧林巴斯光學(xué)顯微鏡(Olympus BX51),在400~1 000 倍下進行顯微結(jié)構(gòu)觀察。先用鑷子夾取子實體干標本部分組織于載玻片上,用刀片徒手切取相應(yīng)組織薄片,滴加5%氫氧化鉀溶液使組織吸水復(fù)原,蓋上蓋玻片,在光學(xué)顯微鏡下觀察擔子果的孢子、擔子、囊狀體顯微結(jié)構(gòu)特征,記錄菌絲有無鎖狀聯(lián)合以及囊狀體、擔子、擔孢子大小等微觀特征;采用梅氏(Melzer’s reagent)試劑檢測擔孢子壁有無嗜藍和淀粉質(zhì)反應(yīng)。擔孢子大小測量按每份子實體測量50個擔孢子,統(tǒng)計測量數(shù)值。物種形態(tài)特征鑒定,櫟樹圓頭傘參考Khan 等(2017)[7],白漏斗辛格杯傘參考Seok等(2009)[8]。

    1.3 DNA序列測定和比對

    將物種擔子果烘干,切取少量放于1.5 mL的EP管中,管中放置提前滅菌的直徑為3 mm 的小鎢珠,在球磨儀(Mixer Mill MM301,Retsch,Haan,德國)中將標本研磨成粉末狀(45 s,30 Hz,2~4 次),采用改良的CTAB 方法提取基因組DNA[9]。干標本總DNA提取后,擴增核糖體DNA 內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(Internal transcribed spacer,ITS)片 段 ,PCR 擴 增 引 物 為ITS1f/ITS4。ITS 的擴增條件:在 94 ℃下預(yù)變性3 min,隨后在 94 ℃變性 30 s,55 ℃退 45 s,72 ℃延伸1 min,35 個循環(huán),最后 72 ℃延伸10 min。PCR 產(chǎn)物經(jīng)北京中科希林生工生物技術(shù)有限責任公司純化、測序和編輯,經(jīng)手工校對后獲得的序列提交到NCBI數(shù)據(jù)庫,采用BLAST工具在NCBI數(shù)據(jù)庫進行比對。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 ITS-DNA比對結(jié)果

    研究櫟樹圓頭傘樣本2 份、白漏斗辛格杯傘樣本2 份(表1),進行測序,提取DNA?ITS 分子片段。將分子片段用BLAST 工具在NCBI 數(shù)據(jù)庫上進行比對,結(jié)果見表2。

    表1 研究樣本的信息

    表2 研究樣本ITS片段在NCBI上的比對結(jié)果

    研究樣本提取的ITS 片段在NCBI 數(shù)據(jù)庫用BLAST 工具比對表明:樣本LH743、樣本XYYM066與櫟樹圓頭傘Descolea quercina模式標本序列相似度高達99.0%,且形態(tài)特征與原始描述完全吻合,證實這兩份山西樣本為櫟樹圓頭傘,為中國新紀錄物種。

    樣本XYYM036、LH718 與白漏斗辛格杯傘Singerocybe alboinfundibuliformis發(fā)表新種的原始描述完全吻合,樣本序列和目標序列相似度高達99.9%,結(jié)果證實研究引證的采自山西歷山的這兩份樣本為白漏斗辛格杯傘,為山西新紀錄物種。

    2.2 形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果

    2.2.1 櫟樹圓頭傘

    子實體中大型,氣味清淡。菌蓋直徑5~8 cm,初鐘形,后漸變?yōu)榘肭蛐位虮獍肭蛐危醒胗袝r稍凸起,橄欖綠褐色或黃褐色帶橄欖綠色調(diào),表面具淺黃褐色纖毛狀鱗片;邊緣有明顯或不明顯放射狀條紋。菌肉厚2~4 mm,黃褐色。菌褶成熟時黃褐色,較密,直生。菌柄長4~7 cm,直徑0.8~1.5 cm,圓柱狀,中空,黃褐色,菌環(huán)以上表面光滑,菌環(huán)以下表面有纖維狀鱗片。菌環(huán)膜質(zhì),上位,黃褐色,上表面有明顯的放射狀條紋,下表面近平滑。擔子(25~40)μm×(8.0~12.5)μm,棒狀,4 孢子,基部有鎖狀聯(lián)合。擔孢子(11~13)μm×(6.5~8.5)μm,檸檬形,兩邊具突出的小尖,銹褐色,表面具疣狀或短脊狀凸起。緣囊體棒狀,有時頂部具小尖,(40~50)μm×(10.0~12.5)μm。側(cè)囊體與緣囊體相似,有時頂部具小尖,部分小尖頂部膨大呈小球形,(40~50)μm ×(10~15)μm。菌髓菌絲近平行排列,具鎖狀聯(lián)合。菌蓋皮層菌絲近柵欄狀排列,細胞棒狀、近棒狀或梭形,(20~30)μm ×(10~15)μm,細胞壁明顯褐色,具鎖狀聯(lián)合。

    研究引證標本在形態(tài)上高度吻合櫟樹圓頭傘Descolea quercina的特征[10],ITS 比對與其模式標本NR154047 序列相似度達99%以上,支持形態(tài)鑒定結(jié)果。

    2.2.2 白漏斗辛格杯傘

    子實體小至中型,初期無味,成熟時有令人不悅的刺鼻味道。菌蓋直徑2~5 cm,薄,深漏斗狀,中央部分下陷至空心菌柄的基部,初期白色,成熟后變?yōu)闇\黃褐色或粉紅褐色;邊緣具有透明的放射狀條紋,幼時稍內(nèi)卷,成熟后多呈波浪狀。菌褶白色或乳白色,較窄,稀疏。菌柄長3~6 cm,粗4~8 mm,中空,細圓柱狀,表面光滑,白色或乳白色。擔子棒狀(20~30)μm×(4~6)μm,四小梗,基部具鎖狀聯(lián)合。擔孢子(6.0~7.5)μm×(4~5)μm,橢圓形,無色,光滑,非淀粉質(zhì)。菌蓋皮層菌絲近平行排列,菌絲薄壁,直徑2.5~5.0μm,具鎖狀聯(lián)合,間有膨大細胞(vesicles),達(20~50)μm×(5.0~12.5)μm,薄壁,無色。

    引證標本形態(tài)特征吻合白漏斗辛格杯傘的原始描述[11],ITS 比對結(jié)果顯示山西標本提取的ITS 片段和白漏斗辛格杯傘的可信序列JX514126、JX514132(QIN 等,2014)[7]同源性均超過99%,支持標本屬于白漏斗辛格杯傘。

    圖1 櫟樹圓頭傘Descolea quercina生態(tài)照

    圖2 白漏斗辛格杯傘Singerocybe alboinfundibuliformis 生態(tài)照

    3 結(jié)論與討論

    櫟樹圓頭傘Descolea quercina在分類上隸屬于擔子菌門Basidiomycota,傘菌綱Agaricomycetes,傘菌目Agaricales 糞銹傘科Bolbitiaceae 環(huán)鱗傘屬Descolea。

    櫟樹圓頭傘是近年在巴基斯坦北部被發(fā)現(xiàn)的一個新物種[10],其主要識別特征為菌蓋橄欖綠褐色及菌環(huán)表面具明顯條紋的中大型子實體,此外生長在櫟樹林也是重要的參考特征之一。櫟樹圓頭傘在中國是首次記錄。圓頭傘屬Descolea成員主要分布在南半球,已知物種全部為菌根菌,寄主植物也多數(shù)屬南半球本土物種(Nothofagaceae)[8],北半球物種相對較為罕見。此前中國已知該屬物種有兩個,分別為黃環(huán)圓頭傘Descolea flavoannulata(Lj.N.Vas‐siljeva)E.Horak 和珍貴圓頭傘Descolea pretiosaE.Horak,分布于東北和華中地區(qū)[9,12?13]。櫟樹圓頭傘食毒不詳。

    白漏斗辛格杯傘Singerocybe alboinfundibulifor?mis隸屬于蘑菇目Agaricales,目前科地位未定(In‐certae sedis),辛格杯傘屬(囊泡杯傘屬)Singerocybe。白漏斗辛格杯傘最早以Clitocybe alboinfundibulifor?misSeok,Yang S.Kim,K.M.Park,W.G.Kim,K.H.Yoo&I.C.Park 為名發(fā)現(xiàn)于韓國[11],不久后分子數(shù)據(jù)分析支持重組為現(xiàn)名[7]。白漏斗辛格杯傘可能是一個亞洲物種,已知分布包括中國東北[14]、華北(本研究)及西南地區(qū)[15],泰國北部也有發(fā)現(xiàn)[16]。山西省僅見于南部中條山脈東段歷山區(qū)域,處于東北偏西南溫帶森林大通道上。山西產(chǎn)的白漏斗辛格杯傘成熟時氣味濃烈,這種氣味在該種原始記錄及其他產(chǎn)區(qū)未有記載[11,13],但在 NCBI 數(shù)據(jù)庫中 ITS 片段比對分析支持其為同一個物種,這種氣味差異可能是不同環(huán)境或者不同的發(fā)育階段等因素所致。有文獻記載該物種可食[17]。

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