雞支原體病的診斷與防治體會

柳光明

（山東省棲霞市蛇窩泊畜牧獸醫(yī)站 265313)

支原體有20 多個血清型，但其中具有重要意義的是雞敗血支原體和雞滑液囊支原體，對火雞有意義是火雞支原體，雞敗血肢體病在國內(nèi)流行較廣泛，一般雞場都有此病存在，滑液囊支原體病雖有存在，但數(shù)量較少?；痣u支原體主要引起火雞竇炎。此病可通過種蛋傳遞，也可水平傳遞，有高感染率、低發(fā)病率的特點，雞感染后臨床癥狀不明顯，僅能靠血清學和細菌培養(yǎng)而證實雞被感染，飼養(yǎng)管理的好壞與此病有密切的關(guān)系，二者成正相關(guān)，因此，在飼養(yǎng)多年齡雞群的大型雞場中預防此病的發(fā)生很困難。

1 臨床癥狀

本病以冬春季節(jié)較為嚴重，特別是當環(huán)境條件變化和管理不善或有其他并發(fā)病時，發(fā)病率和死亡率有密切關(guān)系。幼雞臨床癥狀比較明顯，流漿性或黏性鼻液，咳嗽，有呼吸啰音，病雞無神閉眼，生長緩慢。成雞感染后的臨床癥狀不明顯，有的似幼雞癥狀，但甚輕微而易被忽略。成雞最明顯的癥狀是搖頭，當進入雞舍時，雞頭朝向來人方向抬起并左右搖動，然后呆立不動，此時若擊掌或作其他聲響，又從呆立狀態(tài)變?yōu)閾u頭。夜間病雞有呼吸啰音。產(chǎn)蛋量下降，下降幅度根據(jù)病情的嚴重程度而定，和有無并發(fā)病有很大差異，種蛋孵化的弱雛較多。病雞若有并發(fā)癥時死亡率增高，可達30%左右。一般10日齡內(nèi)雛雞對支原體病的易感性較大，若有某些病毒或細菌，如新城疫、傳染性支氣管炎或大腸桿菌病毒等侵入雞群時，或者是有某些不利因素，如營養(yǎng)缺乏、溫差較大、氨氣或灰塵過多，潮濕和擁擠等都可促使雞感染敗血支原體病。在發(fā)生并發(fā)癥時，病雞往往多表現(xiàn)出并發(fā)病的癥狀，支原體病的癥狀則被忽視。

2 病理診斷

有鼻炎癥狀的雞鼻腔有滲出物，眶下竇腫大附著黏液，氣囊變厚且混濁，氣囊上及肺部發(fā)現(xiàn)有干酪物，也可能發(fā)生某種程度的肺炎，嚴重的病例可能有纖維素性肝周炎和心外膜炎?；痣u鼻有竇炎變化，敗血支原體可引起雞與火雞的輸卵管炎，雞感染滑液囊支原體后常有關(guān)節(jié)炎和腱鞘炎的病理變化[1]。

3 實驗室診斷

分離病原菌并進行鑒定、確診。

3.1 支原體的分離和鑒定

3.1.1 采集病料

（1）活雞：由于支原體病是呼吸道疾病，并且雞群中多數(shù)雞常受感染，因此，可對外表健康的雞采取5～10 個氣管拭子，接種于液體培養(yǎng)內(nèi)。若有關(guān)節(jié)炎時，可用針頭插進滑液囊，抽取液體，若液體已干酪化時，可將局部消毒后切開，用濕棉拭干擦洗關(guān)節(jié)組織面，然后將棉拭接種于培養(yǎng)基內(nèi)。

（2）死雞采：若雞已死亡，可采取喉頭氣管氣囊的病灶部位或干酪物、鼻竇黏膜或雞胚的卵黃膜，分別接種于液體培養(yǎng)基內(nèi)。

3.1.2 培養(yǎng)基

支原體對培養(yǎng)基的要求較高，需要有10%～15%血清、滑液囊支原體尚需加輔酶才能生長。

3.1.3 分離培養(yǎng)

（1）將采集的病料接種肉湯后放37℃培養(yǎng)14d，若無生長時可廢棄。在培養(yǎng)過程中，若發(fā)現(xiàn)肉湯中有生長時(肉湯變混濁或pH 有改變)，則用吸管移植0.5～1.0mL 至5～10mL 肉湯中。瓶塞需用蠟封口或更換橡皮塞。如培養(yǎng)5d 尚無生長表現(xiàn)時，則可吸取一滴肉湯加入瓊脂平皿上。用鉑金鉺在平皿上涂布，也可以用取病料的棉拭在平皿上涂布。

（2）平皿應放在濕潤的容器內(nèi)或?qū)⑵矫笥媚z布密封，放37℃溫箱培養(yǎng)3～5d。在放大20～50 倍顯微鏡下，觀察有無支原體菌落出現(xiàn)。支原體的菌落很小，直徑約100～1000μm，中央隆起呈光滑型。初代培養(yǎng)物可能不出現(xiàn)此隆起中央，傳數(shù)代后即變?yōu)槊黠@，菌落可以用鉑金鉺移植，也可以用小手術(shù)刀連同瓊脂切取一小塊，一同接種至肉湯。平皿若觀察至21d 無菌落出現(xiàn)時停止觀察。

3.1.4 支原體的特性鑒定

支原體的菌落細小平滑，中央致密隆起(有人稱為臍形)，平皿上若有此種菌落時，很大可能性是支原體菌落，但它屬于哪一種支原體尚需作一些有關(guān)試驗對其特性進行鑒定。

3.1.5 支原體的快速鑒定

因支原體可凝集雞的紅細胞，利用紅細胞凝集抑制試驗可以快速鑒定培養(yǎng)物是否為支原體。采取或制作支原體(敗血或滑液囊支原體) 陽性血清，血清連續(xù)作倍量稀釋至32×，取2～32×稀釋的血清各1 滴，放在玻片上，然后取新鮮培養(yǎng)物在不同倍數(shù)的稀釋血清中各加1 滴，充分混合后再加5%紅細胞1滴，再進行混合，同時作陰性血清對照，若在16×以下稀釋的血清出現(xiàn)抑制紅細胞凝集者，則此培養(yǎng)物為支原體。

3.2 血清學診斷

雞感染支原體后，血清學呈現(xiàn)陽性反應，大約持續(xù)一個月左右時間會變陰性，血清學變陰性后，該雞并非已痊愈，支原體病的血清學診斷應從雞的群體診斷來考慮。

3.2.1 全血玻片凝集試驗

全血玻片凝集試驗抗原是一種用結(jié)晶紫，將支原體染成紫色的抗原。應用時，2 滴抗原加1 滴被檢雞血，混合后輕輕搖動，在2min 內(nèi)根據(jù)出現(xiàn)大塊凝集者和小凝集塊者來判定陰性陽性。

3.2.2 血清玻片凝集試驗

一滴抗原加一滴血清混合，判定方法與全血法相同。

3.2.3 支原體微量血凝抑制試驗

支原體可凝集雞的紅細胞，據(jù)此可制備支原體的血凝抗原，制備的抗原需進行滴定。試驗時用兩種濃度的抗原，一種是50μl 中含8 個血凝單位，另一種是50μl 中含4 個血凝單位。每份血清占用一排孔。在另一支小試管中制備1:5 血清稀釋液。按照順序在每個孔中加入不同數(shù)量的血凝單位抗原，配制0.5%雞紅細胞懸液，向所有孔各加入50μl 紅細胞液，充分震蕩后，放室溫約1h，然后判定結(jié)果。凝集抑制效價在4 個血凝單位抗原時，1∶80 或以上的效價為陽性，1∶40 效價為可凝，1∶20 或以下的效價為陰性[2]。

4 鑒別診斷

（1）應注意雞敗血支原體病與其他呼吸道病的區(qū)別，避免與新城疫、氣管炎、鼻炎或雞痘等相混，滑液囊支原體病的關(guān)節(jié)腫脹，易同病毒性關(guān)節(jié)炎或葡萄球菌病相混。可通過臨床觀察、病理剖檢、細菌培養(yǎng)和血清學反應加以區(qū)別。

（2）有時鼻腔內(nèi)漿液性分泌物和眼結(jié)膜內(nèi)的干酪物易同維生素A 缺乏癥相混，可通過其他部位的病理變化、細菌培養(yǎng)和補充維生素A 而加以區(qū)別。

5 防治方法

5.1 防止并發(fā)癥

支原體病當無并發(fā)癥時，仔雞和成年雞死亡率非常低。若遇到應激因素刺激，支原體迅速生長繁殖，從而使雞體抵抗力顯著降低。一旦有并發(fā)癥發(fā)生，支原體病易被忽略，雞的死亡率也因并發(fā)病而增加。此時針對并發(fā)病進行治療，效果往往不好，因此，在有支原體病的雞群中，治療并發(fā)病的同時要采取對支原體病的治療，這樣才能收到較好的治療效果。

5.2 減少對生產(chǎn)的影響

若有并發(fā)病發(fā)生時，死亡率可達10%～30%，雞蛋減產(chǎn)10%～40%，孵化率降低10%～20%，弱雛率升高至10%左右。日常為了預防和治療支原體病，所花費的藥物費也是相當可觀的。因此，對支原體病需采取有效的防治方法，這對養(yǎng)禽業(yè)生產(chǎn)和發(fā)展有重要意義。

5.3 嚴格執(zhí)行雞舍的衛(wèi)生防疫制度

應有二間更衣室，進入雞舍前，有條件的需經(jīng)過淋浴，然后進入內(nèi)部更衣室，更換衣服和鞋帽，洗手消毒后進入雞舍，不得進入其他非工作區(qū)。每天要清除雞糞，死雞要送往指定地點。離開雞舍吃午飯時應更換衣服。飼養(yǎng)員不能串舍或相聚聊天。

5.4 無支原體病雞群的建立和保持

在沒有支原體病種雞場購買雛雞。雛雞入舍前應將雞舍、用具徹底清洗和消毒，每棟雞舍為一隔離單位。經(jīng)常采血檢查雞群的健康狀況，1 日齡雛雞采血20 只，檢查有無母源抗體，以后每周采血20 只，檢查有無抗體。以雞舍為單位，雞群執(zhí)行全進全出計劃。

5.5 培育無病的健康雞群

（1）檢疫雞群，淘汰病弱雞。雞群可選用2～3 種抗支原體病藥物交替使用。做好種蛋處理，入孵前經(jīng)過甲醛蒸氣消毒，然后向蛋內(nèi)引進抗支原體藥物或加熱處理，將種蛋預先加熱至38～40℃，然后浸入0～4℃時泰樂菌素、四環(huán)素或1%鏈素的水溶液中，20～30min 后取出，晾干后孵化，要有專用的孵化器和出雛器。

（2）加強雛雞群的管理，每1000 只雛雞為一隔離雞群，有專門的飼養(yǎng)員和單獨的隔離雞舍。雞達到3 月齡時對雞群進行檢疫，每月1 次，連續(xù)3 次沒有發(fā)現(xiàn)陽性雞時可作為種雞群。

（3）應用此法培育無支原體病的雞群時，需同時分數(shù)群進行，分群數(shù)目多和雞群的雞數(shù)少時，則培育成功的機會增多。陰性雞群建成后，可以按無支原體病的雞群進行管理。

5.6 支原體陽性雞群的管理和用藥計劃

許多抗生素對支原體病都有治療效果，如泰樂菌素、鏈霉素、紅霉素和螺旋霉素等，但任何一種藥物都不能將此病治療，藥物僅可殺死在氣囊外的支原體，氣囊上或干酪物中的支原體在適當條件下會擴散至雞體的其他部位而發(fā)生感染，促使其活動的條件是前述的一些應激因素。因有這一特性，決定了支原體陽性雞群需要長期用藥。長期應用一種藥物易產(chǎn)生副作用，最好選用一種以上的有效藥物交替使用，一般雞場的用藥計劃如下，可任選其中之一[3]。

（1）將抗生素混在飼料中，每月的第1 周和第3 周投藥，全周用藥，可供選擇的抗生素有泰樂菌素，混在飼料中的含量為0.1%。金霉素、四環(huán)素和土霉素混在飼料中的含量為250g/t，飼料中加入0.4%對苯二甲酸可以提高其療效。多西環(huán)素混在飼料中的含量為0.01%～0.02%。新霉素為0.007%～0.014%。泰牧霉素為0.013%～0.025%。北里霉素為0.033%～0.05%。紅霉素為0.013%～0.025%。

（2）將抗生素混在飲水投給，用法按照飼料中的方法使用，只是用量減半。如泰樂菌素混在飼料中的含量為0.1%，混在飲水中的含量則為0.05%，其他抗生素的用量據(jù)此類推。

（3）將抗生素稀釋后進行肌肉注射，每月注射1 次，可供選擇的抗生素有泰樂菌素、鹽酸土霉素、紅霉素肌肉注射量均為每千克體重25mg。林可霉素、慶大霉素、卡那霉素肌肉注射量均為體重20mg/kg。壯觀霉素肌肉注射量為體重30mg/kg。鏈霉素、鹽酸金霉素肌肉注射量為體重40mg/kg。

（4）其他給藥途徑。滴鼻和氣霧有時也用于預防支原體病，如支原體陽性的雛雞群，在作新城疫免疫時，常用鏈霉素滴鼻來預防，用量按照1 日齡和7 日齡各用2000 和5000IU。氣霧時則用0.2g/m3，其他抗生素的用量可酌情增減。

（5）免疫。雛雞進場后，應按照防疫程序及時進行支原體菌苗滴鼻免疫，可有效抵抗支原體病毒的侵害。