細(xì)胞治療在肝臟常溫機(jī)械灌注中的應(yīng)用

劉一霆，邱濤，周江橋（武漢大學(xué)人民醫(yī)院器官移植科，湖北 武漢 430060）

肝移植是目前終末期肝病治療的最佳選擇［1］，但器官短缺導(dǎo)致超過(guò)11%的患者因肝臟失代償和死亡而失去移植機(jī)會(huì)［2］。因此人們嘗試使用邊緣供肝、活體供肝、劈離肝或通過(guò)改善邊緣供肝進(jìn)行移植，從而增加可用的肝移植數(shù)量［2-3］。肝缺血/再灌注損傷（ischemia reperfusion injury，IRI）是肝移植過(guò)程中固有的一部分，在邊緣供肝中表現(xiàn)更為嚴(yán)重［4］。IRI 通過(guò)損傷肝細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和膽管細(xì)胞等肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞從而引起微循環(huán)衰竭和炎癥免疫反應(yīng)，最終導(dǎo)致移植物功能障礙和缺血性膽道病變［5-6］。由于邊緣器官的大量使用，近年來(lái)細(xì)胞治療聯(lián)合常溫機(jī)械灌注應(yīng)用于肝移植研究中，成為目前研究熱點(diǎn)，本文將介紹此領(lǐng)域的最新進(jìn)展。

1 常溫機(jī)械灌注的介紹

Starzl 等［7］率先將機(jī)械灌注應(yīng)用于肝移植。機(jī)械灌注（machine perfusion，MP）能夠持續(xù)地給器官灌注，為細(xì)胞代謝提供足夠的底物和氧氣，并在灌注期間持續(xù)監(jiān)測(cè)器官活力，限制缺血/再灌注損傷，并可能改善移植術(shù)后的預(yù)后，有益于保護(hù)邊緣供肝［8-10］。 常 溫 機(jī) 械 灌 注（normothermic machine perfusion，NMP）在37℃的條件下可以提供更多的氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，更有利于保護(hù)邊緣供肝。2018 年，Nasralla 等［11］以NMP 作為保肝方法進(jìn)行220 例肝臟移植，進(jìn)行了首項(xiàng)國(guó)際性、多中心、隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)，比較肝移植中的NMP 和靜態(tài)冷保存（static cold storage，SCS）。研究表明，與SCS 相比，NMP 具有明顯的益處，既可以改善肝移植的結(jié)果，又可以降低器官丟棄率。這表明了NMP 更有利于邊緣供肝的保護(hù)，已經(jīng)成為替代SCS 的一種方法［12］。此外NMP 的應(yīng)用還可以降低風(fēng)險(xiǎn)，此前未使用的高危肝應(yīng)用于臨床成為可能［13］。

NMP 還可以用于動(dòng)態(tài)給藥或基因治療，進(jìn)一步改善移植結(jié)果，治療藥物包括間充質(zhì)干細(xì)胞、血管擴(kuò)張劑、抗炎藥、抗感染藥、siRNA 以及脫脂藥等［14］。最新的研究證明，利用原位常溫肝機(jī)械灌注，肝移植保存的安全時(shí)間可延長(zhǎng)至1 周，保存時(shí)間的延長(zhǎng)可能將增加細(xì)胞治療的機(jī)會(huì)，擴(kuò)大治療的范圍，促進(jìn)邊緣供肝的再生修復(fù)［15］。近年來(lái)，將細(xì)胞療法遞送至靶位點(diǎn)可降低不良反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)，聯(lián)合細(xì)胞治療來(lái)減輕移植物損傷和免疫排斥反應(yīng)逐漸成為新的研究熱點(diǎn)， 調(diào)節(jié)性樹(shù)突狀細(xì)胞、調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）、多能成體干細(xì)胞（multipotent adult progenitor cells，MAPCs）等被用于誘導(dǎo)免疫耐受的研究并取得了良好的結(jié)果，這些細(xì)胞亞群具有抗炎和促再生活性，有助于減少IRI［16-17］。 目前在肝移植中引起較大關(guān)注的有MSCs、MAPCs 等。

2 間充質(zhì)干細(xì)胞與多能成體祖細(xì)胞的介紹

1968 年，F(xiàn)riedenstein 等［18］最先在骨髓中分離出MSCs。此后人們?cè)谥窘M織和臍帶血等人體的其他組織細(xì)胞中相繼分離出了MSCs。根據(jù)來(lái)源不同，MSCs 可以命名為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone-marrow mesenchymal stem cells， BMMSCs）、脂 肪 間 充 質(zhì) 干細(xì)胞、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞等。不同來(lái)源的MSCs 在分化能力和增殖速度方面有差異， 但它們表達(dá)的細(xì)胞膜表面抗原卻基本一致。根據(jù)國(guó)際細(xì)胞治療學(xué)會(huì)（International Society for Cellular Therapy，ISCT） 的鑒定標(biāo)準(zhǔn)， 人MSC 具備多種特征：① 在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下具有塑料表面黏附性；② 表達(dá)特定細(xì)胞表面標(biāo)志物CD105、CD73、CD90， 同時(shí)不表達(dá)CD45、CD34、CD14 或CD11b 、CD79α 或CD19 以及HLA-DR；③ 能夠在體外定向誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和軟骨細(xì)胞［19］。

MAPCs 也屬于MSC 家族，并且顯示出更高的增殖能力和更大的分化潛能。MAPCs 首先由Balkrishna 等［20］于2002 年從小鼠骨髓中分離出來(lái)。研究表明MAPCs 不僅可以減弱 CD8 +細(xì)胞毒性 T 淋巴細(xì)胞功能的誘導(dǎo)和抑制性 T 淋巴細(xì)胞的增殖，而且可能抑制正在進(jìn)行的免疫反應(yīng)，以及其具有非免疫原性，可以減弱IRI，這些都為MAPCs 用于移植物抗宿主模型中并且進(jìn)行抗炎治療提供依據(jù)［21］。

3 細(xì)胞治療在肝臟常溫機(jī)械灌注中的應(yīng)用

MSCs 由于具有促肝細(xì)胞再生、抗炎、抗纖維化以及免疫調(diào)節(jié)等能力，目前已用于各種肝病治療。鑒于 MSCs 的自我更新能力及其在組織工程和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的治療潛力，MSCs 被認(rèn)為是理想的移植細(xì)胞來(lái)源［22］。目前的證據(jù)表明，基于 MSC 的療法及其促再生作用主要依賴于MSCs 的旁分泌作用。趨化因子過(guò)表達(dá)能夠促進(jìn)MSCs 增殖并遷移到受損組織，而旁分泌因子（包括趨化因子、細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子）的大量分泌會(huì)刺激附近的細(xì)胞進(jìn)行組織修復(fù)，從而發(fā)揮MSCs 的抗凋亡、抗炎、抗纖維化和血管生成作用［23］。最近Monique 等［24］首次實(shí)現(xiàn)了通過(guò)30 min 體外低溫充氧機(jī)灌注將旁分泌活性人間充質(zhì)干細(xì)胞（paracrine active human mesenchymal stem cells，hMSC）遞送至肝移植物，在組織學(xué)和RNA 表達(dá)分析中證實(shí)了hMSC 在整個(gè)肝移植物中的傳遞，且在輸注后的4 h 常溫機(jī)械灌注過(guò)程中能夠保留旁分泌功能，人類特異性白細(xì)胞介素-6 和白細(xì)胞介素-8 的水平增加。這是第一份報(bào)告顯示 hMSC 在肝機(jī)械灌注模型中可以有效傳遞，也證明hMSC 在常溫灌注過(guò)程中具有再生和免疫調(diào)節(jié)作用。

3.1 BMMSCs 聯(lián)合NMP 減少肝組織損傷：研究顯示， 大鼠熱缺血時(shí)間超過(guò)45 min 時(shí)， 術(shù)后受體的生存時(shí)間大幅縮短， 而熱缺血60 min 時(shí)， 供肝已經(jīng)發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)損傷［25］。研究者利用熱缺血45 min 的邊緣供肝，將NMP 與BMMSCs 相結(jié)合，得到較好的結(jié)果［26］。最近Yang 等［27］使用IAR20 細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷模型進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)表明與SCS 相比，NMP （P）組和NMP 結(jié)合BMMSCs（BP）組，肝功能和肝組織損傷明顯改善，肝細(xì)胞凋亡和氧化應(yīng)激得到了降低，并且改善了肝細(xì)胞線粒體損傷，且BP組明顯優(yōu)于P 組。進(jìn)一步研究結(jié)果顯示NMP 聯(lián)合BMMSCs 的保護(hù)作用可能是通過(guò)抑制JNK-NF-κB通路降低氧化應(yīng)激，促進(jìn)AMPK 活化，從而減少線粒體損傷，提高線粒體功能，進(jìn)而更好的改善供肝質(zhì)量。此外該研究者的另一個(gè)實(shí)驗(yàn)中，在大鼠胸主動(dòng)脈取心臟死亡器官捐獻(xiàn)（donation after circulatory death，DCD）供肝，建立大鼠NMP 系統(tǒng)并進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)，與NMP （P） 組相比，BMMSCs 結(jié)合NMP （BP）組能顯著抑制肝內(nèi)巨噬細(xì)胞活化和細(xì)胞間黏附，改善內(nèi)皮損傷，顯著改善內(nèi)皮素1-一氧化氮平衡和微循環(huán)灌注［28］。Cao 等［29］的最近一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)表明，NMP 聯(lián)合BMMSCs 可以通過(guò)下調(diào)細(xì)胞內(nèi)活性氧和游離Fe2﹢的水平，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)大鼠DCD 供肝的保護(hù)作用。這些無(wú)疑證明了BMMSCs 聯(lián)合NMP 的可行性，更好的降低氧化應(yīng)激，保護(hù)線粒體功能，改善供肝的微循環(huán)。研究表明，MSC 具有分化為肝細(xì)胞樣細(xì)胞的潛力［30］。在肝損傷的情況下，BMMSCs 可定向分化為肝細(xì)胞，HGF 和半乳糖聚集素-3 均能夠更好地促進(jìn)這一過(guò)程。最近，研究者將二者相結(jié)合，在大鼠模型中獲得理想的結(jié)果［31］。是否可將它們聯(lián)合機(jī)械灌注應(yīng)用到邊緣供肝的再生修復(fù)，這可能為未來(lái)細(xì)胞治療在肝臟機(jī)械灌注的研究提供了一些新思路。

3.2 血 紅 素 加 氧 酶（heme oxygenase，HO-1）/BMMSCs 聯(lián)合NMP 減少肝組織損傷：HO-1 是一種有效的細(xì)胞保護(hù)酶，可以抗氧化和抗凋亡，有助于減少細(xì)胞損傷，調(diào)節(jié)免疫力，延長(zhǎng)BMMSCs 的存活時(shí)間并增強(qiáng)其活性［32］。此前的研究表明MSC 衍生的白介素-6 和肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（hepatocyte growth factor，HGF）抑制單核細(xì)胞成熟為樹(shù)突狀細(xì)胞，并將活化的 CD4 T 細(xì)胞從 Th1 轉(zhuǎn)變?yōu)?Th2 表型。MSC還通過(guò)分泌HO-1 和吲哚胺 2，3-雙加氧酶來(lái)抑制CD8 T 細(xì)胞的增殖，并提高CD4 T 細(xì)胞從 Th1 轉(zhuǎn)變?yōu)?Th2 的表型［22，33］。 HO-1 表達(dá)上調(diào)已被報(bào)道在促進(jìn)肝細(xì)胞增殖中起關(guān)鍵作用，He 等［34］的研究證明了抑制HO-1 可以通過(guò)下調(diào)HGF-Akt 軸來(lái)減弱低溫機(jī)器灌注（hypothermic machine perfusion， HMP）誘導(dǎo)的與增殖相關(guān)的肝臟恢復(fù)效應(yīng)，來(lái)減弱肝臟的再生功能。

由于了解了HO-1 的作用，科學(xué)家們嘗試將HO-1 同BMMSCs 和NMP 相結(jié)合，以期待更好的改善供肝質(zhì)量。最近Cao 等［35］就利用轉(zhuǎn)染HO-1 基因，建立了NMP 體系并進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯 示HO-1 修 飾 的BMMSCs（HO-1/BMMSCs）聯(lián)合NMP 組轉(zhuǎn)氨酶水平降低，減少肝組織損傷，并且發(fā)現(xiàn)肝臟形態(tài)完整，生存時(shí)間延長(zhǎng)，血清和肝臟促炎細(xì)胞因子水平降低。與BMMSCs 聯(lián)合NMP 組、NMP 組以及SCS 組相比，HBP 組可以更有效地降低HMGB1 在肝組織中的水平，并且降低TLR4 通路相關(guān)分子的表達(dá)。因此HO-1 可以通過(guò)HMGB1 表達(dá)和TLR4 通路來(lái)抑制炎癥反應(yīng)并減少肝臟損害，從而加強(qiáng)了BMMSCs 聯(lián)合NMP 對(duì)DCD 供肝的保護(hù)作用。

Cao 等［36］的 最 新 一 項(xiàng) 研 究 探 討 了HO-1/BMMSCs 聯(lián)合NMP 對(duì)DCD 肝移植后膽管損傷的修復(fù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，HBP 組的肝功能和膽管組織學(xué)得到改善，細(xì)胞凋亡減少，同時(shí)細(xì)胞增殖活躍。損傷部位出現(xiàn)大量再生細(xì)胞，缺損膽管上皮得到修復(fù)。膽道周圍腺（peribiliary glands，PBGs）擴(kuò)張，PBG 細(xì)胞增殖，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子高表達(dá)，具有干/祖細(xì)胞生物標(biāo)志物的膽道祖細(xì)胞比例增加。而阻斷Wnt 信號(hào)通路可顯著抑制HO-1/BMMSCs 對(duì)膽管損傷的修復(fù)作用。因此HO-1/BMMSCs 聯(lián)合NMP 可以促進(jìn)PBGs 中膽道祖細(xì)胞的激活，從而通過(guò)Wnt 信號(hào)通路修復(fù)DCD 肝移植膽道損傷。HO-1/BMMSCs 和NMP 的結(jié)合有利于更好地減少肝組織損傷，克服了BMMSCs 的短生存時(shí)間，提高了供體肝臟的質(zhì)量和術(shù)后存活率，HO-1 的應(yīng)用為未來(lái)臨床中緩解肝臟移植前的IRI 以及修復(fù)移植后的膽道損傷提供了新思路。

3.3 細(xì)胞外囊泡（extracellular vesicles ，EVs）聯(lián)合NMP 減少肝組織損傷：近年來(lái)，間充質(zhì)干細(xì)胞衍生的細(xì)胞外囊泡作為基于MSC 療法的替代療法引起了人們的關(guān)注。EVs 是源于肝臟不同細(xì)胞的膜性囊泡。EVs 包括外泌體和微泡，含有mRNA、 miRNA和生長(zhǎng)因子等，具有抗原呈遞作用，在肝臟不同細(xì)胞類型之間傳遞信息方面具有關(guān)鍵作用。EVs 可以改變受體細(xì)胞的功能并激活不同的通路，從而促進(jìn)不同肝臟疾病的發(fā)生、進(jìn)展和發(fā)病機(jī)制，可用于肝臟疾病修飾或肝臟再生，通過(guò)EVs 將核酸和其他藥物輸送到肝臟細(xì)胞進(jìn)行相應(yīng)治療可能會(huì)得到較好療效［37-38］。Carlson 等［17］應(yīng)用了肝IRI 和動(dòng)物同種異體肝移植模型，證明了從間充質(zhì)干細(xì)胞、未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞和肝細(xì)胞中分離的EVs 可以通過(guò)增強(qiáng)線粒體自噬、抑制免疫反應(yīng)和促進(jìn)組織再生等機(jī)制減少移植物損傷。研究表明，EVs 聯(lián)合機(jī)械灌注的肝臟也可顯示出較低的肝損傷標(biāo)志物，例如血清AST、ALT 和乳酸脫氫酶等。同時(shí)標(biāo)志物缺氧誘導(dǎo)因子1和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 的表達(dá)較低。EVs 作為一種新療法，能夠緩解肝臟 IRI 和同種異體移植模型中的移植物損傷。這些表明EVs 的應(yīng)用可能有助于 NMP所需的修復(fù)過(guò)程。

Rigo 等［39］首次將NMP 與EVs 相結(jié)合起來(lái)在移植前修復(fù)受損供體肝臟。研究者使用NMP 的離體小鼠模型并植入人肝干細(xì)胞來(lái)源的細(xì)胞外囊泡（human liver stem cell derived extracellular vesicles，HLSC-EV），研究顯示灌注HLSC-EV 的治療組較僅使用NMP 的對(duì)照組而言，灌注過(guò)程中AST 和乳酸脫氫酶顯著降低，最終EV 治療顯著降低了組織損傷、細(xì)胞凋亡和缺氧誘導(dǎo)因子1-α 的RNA 過(guò)表達(dá)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1。NMP 結(jié)束時(shí)，HLSC-EV 已被肝細(xì)胞攝取。這些結(jié)果提供了證明，即EVs 可以有效地減少了缺氧NMP 期間的肝損傷。此研究在動(dòng)物模型中證明了NMP 期間輸注EVs 減少肝組織損傷的可行性，今后值得進(jìn)一步研究這種策略以提高邊緣供肝的利用率。

最近Ohara 等［40］的 一項(xiàng)研究表明，羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的細(xì)胞外囊泡（amniotic mesenchymal stem cell derived extracellular vesicles ，AMSC-EVs）可能通過(guò)抑制造血干細(xì)胞（hematopoietic stem cell，HSCs）和庫(kù)普弗細(xì)胞的活性來(lái)減輕非酒精性脂肪肝及肝纖維化的進(jìn)程。而在肝移植再灌注的過(guò)程中，庫(kù)普弗細(xì)胞的激活引起微循環(huán)障礙、缺氧和內(nèi)皮細(xì)胞損傷是導(dǎo)致移植功能障礙的關(guān)鍵機(jī)制之一［41-42］。今后是否可以通過(guò)AMSC-EVs 與NMP 相結(jié)合更好地減輕供體肝臟纖維化的進(jìn)展？這可能需要更為廣泛的實(shí)驗(yàn)研究和臨床試驗(yàn)來(lái)解決這個(gè)問(wèn)題從而造?；颊摺?/p>

3.4 MAPCs 聯(lián)合NMP 首次應(yīng)用于人類供肝：由于此前肝臟常溫機(jī)器灌注（normothermic machine perfusion-liver，NMP-L）對(duì)人體供體肝臟進(jìn)行細(xì)胞治療尚未有文獻(xiàn)報(bào)道。Laing 等［43］最近的一次研究使用NMP-L 將MAPCs 提供給人類供體肝臟，利用6 個(gè)廢棄的人類肝臟，將導(dǎo)管通過(guò)肝動(dòng)脈和門靜脈輸注MAPCs 直接注入肝右葉。證明了可以在暴露宿主免疫細(xì)胞之前將細(xì)胞直接遞送至靶器官，并且不會(huì)損害灌注。研究發(fā)現(xiàn)，MAPCs 處理過(guò)的肝臟細(xì)胞因子譜發(fā)生了變化，通過(guò)蛋白質(zhì)組學(xué)分析也發(fā)現(xiàn)MAPCs 可能分泌一些可溶性因子，這些因子在人類肝移植模型中具有抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用。這些表明了MAPCs 在肝臟機(jī)械灌注中的可行性。研究者同樣也指出了一項(xiàng)確保細(xì)胞輸注的新技術(shù)，該技術(shù)采用動(dòng)脈輸注的方法，克服了全身輸注的缺點(diǎn)，使得細(xì)胞輸注更加高效。但是研究仍存在一定的局限性，使用的肝臟數(shù)量較少且為廢棄肝臟以及治療組之間細(xì)胞輸注的時(shí)間不同，可能無(wú)法得到有效的統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)論。對(duì)整體器官“生存力”的影響以及MAPCs 對(duì)于目前認(rèn)為不可移植器官的作用是無(wú)法評(píng)估的。

3.5 其他：Cailah 等［44］創(chuàng)新性地開(kāi)發(fā)了一種基于細(xì)胞的傳感器，利用機(jī)械灌注將生物傳感器細(xì)胞移植入供體肝臟，在肝移植后早期就能夠檢測(cè)出急性或慢性排斥反應(yīng)，作為監(jiān)測(cè)和治療組織移植的廣泛方法。也正是因?yàn)榧?xì)胞的植入不會(huì)損害器官，因此細(xì)胞傳感器還可以提供一種監(jiān)測(cè)器官質(zhì)量的方法，作為移植之前用于邊緣供體器官?gòu)?fù)蘇的釋放標(biāo)準(zhǔn)。這項(xiàng)技術(shù)的開(kāi)發(fā)無(wú)疑將細(xì)胞治療在肝臟機(jī)械灌注中應(yīng)用推向新的高度，更加有利于邊緣供肝的保護(hù)。

4 未來(lái)發(fā)展方向

研究發(fā)現(xiàn)不同的機(jī)械灌注聯(lián)合更有利于供肝保存。Boteon 等［45］通過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)比發(fā)現(xiàn)將低溫氧合灌注（hypothermic oxygenated perfusion ，HOPE）和NMP 相結(jié)合，可能比NMP 更好地減輕肝臟的氧化應(yīng)激和組織炎癥反應(yīng)以及更好地改善肝臟的代謝恢復(fù)。最近的一項(xiàng)研究顯示，相較于單純肝臟機(jī)械灌注，肝腎聯(lián)合低溫機(jī)器灌注不僅顯示出更加穩(wěn)定的pH 和K+值，而且天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶的水平更低。肝腎聯(lián)合低溫機(jī)器灌注通過(guò)上調(diào)IL-6/Stat3 信號(hào)通路更好地增強(qiáng)肝臟增殖能力，然而肝腎聯(lián)合灌注的樣本量很小，需要更多的研究來(lái)確定其在肝移植中的長(zhǎng)期作用［46］。因此聯(lián)合灌注和細(xì)胞治療相結(jié)合可能為未來(lái)的研究提供一些方向。

近幾年器官生物工程發(fā)展迅速，而再細(xì)胞化肝支架由于缺乏完整的血管網(wǎng)絡(luò)可導(dǎo)致移植后出血和血栓形成，成為限制其發(fā)展的主要障礙。Watanabe 等［47］證實(shí)了4.7 ml/min 灌注培養(yǎng)可促進(jìn)竇級(jí)微血管的形成，利用灌注培養(yǎng)和表面涂層相結(jié)合，成功構(gòu)建了去細(xì)胞肝支架中的竇級(jí)微血管，解決了移植后再細(xì)胞化肝支架的局限性。Kim 等［48］使用抗 CD31 適配體來(lái)重建血管化生物工程肝臟結(jié)構(gòu)，降低移植后血管血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)，證明了在組織工程中使用抗 CD31 適配體的可行性。這些進(jìn)展可能推動(dòng)細(xì)胞治療與肝臟機(jī)械灌注的發(fā)展，由于微血管的重建可降低了一系列移植后的不良反應(yīng)，今后有望在機(jī)械灌注中提前清除邊緣供肝細(xì)胞，將再細(xì)胞化肝支架與細(xì)胞治療相結(jié)合，利用血管構(gòu)建更好地保護(hù)邊緣供肝，這需要更為廣泛的實(shí)驗(yàn)研究和臨床試驗(yàn)。

5 結(jié) 論

過(guò)去的幾年里，利用廢棄人體器官的臨床前模型和大量動(dòng)物模型進(jìn)行了大量實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞治療應(yīng)用于肝臟機(jī)械灌注來(lái)更好的保護(hù)邊緣供肝已經(jīng)進(jìn)行了深入研究， 但迄今為止還沒(méi)有在 NMP 期間進(jìn)行細(xì)胞治療的臨床移植。動(dòng)脈灌注MAPCs 這項(xiàng)新技術(shù)的開(kāi)發(fā)確保了細(xì)胞準(zhǔn)確輸注，細(xì)胞傳感器的開(kāi)發(fā)更加有助于在移植后監(jiān)測(cè)供肝，再細(xì)胞化肝支架的最新進(jìn)展有望推動(dòng)細(xì)胞治療更進(jìn)一步。MSCs/MAPCs 聯(lián)合常溫機(jī)械灌注在抗免疫、減少IRI 以及促進(jìn)供肝的再生修復(fù)等方面顯示出了希望。隨著細(xì)胞治療在肝臟機(jī)械灌注的發(fā)展，今后高危肝臟成為供肝將成為可能。研究工作者應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步挖掘細(xì)胞治療聯(lián)合機(jī)械灌注在供肝上的巨大臨床潛力，為終末期肝病患者帶來(lái)希望。